檢測血清免疫球蛋白和補體對兒童流感患兒的臨床意義研究

楊大練，譚敏斯，李素霞

1.中山市南朗醫(yī)院兒科，廣東中山 528400；2.中山市南朗醫(yī)院耳鼻喉科，廣東中山 528400

流感是流行性感冒的簡稱， 是由流感病毒引起的急性呼吸道傳染病，一般發(fā)生在秋季與冬季，具有傳染性強、起病較急等特點，是WHO 實行的第一個全球范圍監(jiān)測的疾病，而且流感病毒可變異性強，極易出現(xiàn)大面積的感染， 其中最容易遭受病毒入侵的是免疫系統(tǒng)還不夠完善的兒童， 當(dāng)患兒發(fā)生流感癥狀時，多數(shù)伴有上呼吸道炎癥、高熱等癥狀，若未進行及時治療， 有可能會出現(xiàn)急性呼吸窘迫綜合征或多臟器衰竭而死亡[1]。免疫球蛋白是人體中一種非常重要的免疫分子，能與機體內(nèi)特異性抗原結(jié)合，以此來抑制病毒靶細胞、中和毒素、阻止細菌粘附在宿主細胞上，并調(diào)節(jié)機體免疫力及介導(dǎo)超敏反應(yīng)等，一旦機體內(nèi)部的免疫系統(tǒng)出現(xiàn)障礙， 免疫球蛋白水平就會失衡， 目前臨床上將其廣泛用于炎癥性疾病的監(jiān)測[2]。 補體系統(tǒng)也是免疫系統(tǒng)中重要組成部分之一，由30 余種可溶性蛋白、膜結(jié)合性蛋白和補體受體組成，具有抵御病原微生物入侵、清除免疫復(fù)合物和維持體內(nèi)內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的作用[3]。宗揚勇等[4]，劉桃等[5]的研究結(jié)果表明， 免疫球蛋白和補體聯(lián)合監(jiān)測可以協(xié)助臨床判斷感染性傳染病、非細胞毒性、病毒性疾病。因此， 隨機選取該院2016 年7 月—2020 年1 月收治的流感患兒60 例作為研究對象，探究血清免疫球蛋白和補體聯(lián)合監(jiān)測對兒童流感患兒的臨床意義，為臨床治療流感， 保障患兒的生命安全提供有效的參考依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

該研究隨機選取該院收治的60 例流感患兒作為觀察組，另選擇同期健康體檢兒童60 名作為對照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：觀察組符合流感診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]；兒童家屬簽署知情同意書。 排除標(biāo)準(zhǔn)：臨床資料不完整者；經(jīng)隔離、核酸檢測肺部CT 檢查確診為新冠患兒。

觀察組：男40 例、女20 例；年齡2～10 歲，平均（6.21±1.27）歲。 對照組：男41 名、女19 名；年齡2～9歲，平均（6.17±1.21）歲。兩組一般資料對比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。具有可比性。該次研究經(jīng)過中山市南朗醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 方法

收集血液標(biāo)本檢測免疫球蛋白IgG、IgA、IgM 以及TBiL、PTA、ALB 和補體C3、補體C4、CH50 水平，選擇速率散射比濁法進行檢測。 采集兩組患兒的血液，抽取空腹靜脈血3 mL，將血液標(biāo)本置入離心機內(nèi)進行離心操作，離心速度為3 000 r/min，離心時間5 min，待得到血清后，選擇美國貝克曼庫爾特Uni-Cel DxH 800 血細胞分析儀對血清免疫球蛋白水平和補體水平進行檢測， 并使用貝克曼公司所提供的配套試劑，上述操作均嚴(yán)格按照說明書進行。

1.3 觀察指標(biāo)

兩組血清免疫球蛋白水平、補體水平比較。

（1）免疫球蛋白：①免疫球蛋白M（IgM）正常水平：2～6 歲：500～1 990 mg/L，6～12 歲：500～2 600 mg/L，用于感染的早期診斷；②免疫球蛋白G（IgG）正常水平：2～6 歲：5～13 g/L (500～1 300 mg/dl)，6～12 歲：7～16.6 g/L(700～1 660 mg/dl)，升高代表肝臟病、傳染病、IgG 型多發(fā)性骨髓瘤等，降低代表各種先天性和獲得性抗體缺乏癥、免疫缺陷綜合征、病毒感染及服用免疫抑制劑等；③免疫球蛋白A（IgA）正常水平：2～6 歲：230～1 900 mg/L (23～190 mg/dl)，6～12 歲：290～2 700 mg/L(29～270 mg/dl)，升高代表免疫球蛋白A 型多發(fā)性骨髓瘤、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、某些感染性疾病等，降低代表繼發(fā)性免疫缺陷病、反復(fù)呼吸道感染、自身免疫性疾病等；④總膽紅素（TBiL）包括直接膽紅素和間接膽紅素，正常范圍3.4～17.1 μmol/L，隱性黃疸＜34 μmol/L， 輕度黃疸34～170 μmol/L，中度黃疸170～340 μmol/L， 高度黃疸＞340 μmol/L，完全阻塞性黃疸340～510 μmol/L， 不完全阻塞者為170～265 μmol/L， 肝細胞性黃疸為17～200 μmol/L，溶血性黃疸＜85 μmol/L；⑤凝血酶原活動度（PTA）正常活動度：75%～100%，正常值為12～14 s，暴發(fā)性肝炎先兆患兒體內(nèi)的急性肝炎患兒凝血酶原活動度＜40%，慢性肝炎患兒體內(nèi)的PTA 延長，說明患兒預(yù)后效果極差；⑥白蛋白（ALB）正常水平：40～55 g/L，升高代表患兒體內(nèi)嚴(yán)重失水，血漿濃度降低；降低代表患兒體內(nèi)白蛋白消耗增加、合成不足、丟失，患兒處于妊娠晚期或者是患有無白蛋白血癥。

（2）補體水平。①C3 補體的正常值：采用單向免疫擴散法檢測時為0.8～1.2 g/L，平均（1.14±0.27）g/L,采用火箭免疫電泳法檢測時0.987 9～1.455 9 g/L，采用免疫散射比濁法檢測時為0.7～1.28 g/L，增高常見于某些急性炎癥或者傳染病早期， 降低常見于補體合成能力下降、補體消耗或者丟失過多、補體合成原料不足、先天性補體缺乏等。②C4 補體的正常值：單向免疫擴散法為（0.55±0.11）g/L， 免疫散射比濁法:16～47 mg/dl，降低見于免疫復(fù)合物引起的腎炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、病毒性感染等；增高見于各種傳染病、急性炎癥、多發(fā)性骨髓瘤等。③CH50 的正常值：單擴法為75～160 kU/L， 增高見于皮肌炎、 心肌梗死、傷寒、多發(fā)性骨髓瘤等；降低見于急性腎小球腎炎、自身免疫性疾病、急慢性乙型肝炎等。

1.4 統(tǒng)計方法

采用SPSS 27.0 統(tǒng)計學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)， 符合正態(tài)分布的計量資料用（±s）表示，組間差異比較采用t檢驗；計數(shù)資料用[n(%)]表示，組間差異比較采用χ2檢驗，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清免疫球蛋白水平指標(biāo)比較

觀察組患兒IgG（30.23±3.98）g/L、IgA（16.87±2.23）g/L、IgM （14.98 ±2.83）g/L、TBiL （591.35 ±12.35）μmol/L 均高于對照組，PTA（36.87±10.24）%、ALB（20.33±1.23）g/L 均低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組血清免疫球蛋白水平指標(biāo)比較（±s)Table 1 Comparison of serum immunoglobulin levels between the two groups of patients (±s)

表1 兩組血清免疫球蛋白水平指標(biāo)比較（±s)Table 1 Comparison of serum immunoglobulin levels between the two groups of patients (±s)

?

2.2 兩組補體水平比較

觀察組補體C3（1.82±0.25）g/L、補體C4（0.68±0.02）g/L、CH50 （122.25±2.52）U/L 均高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 兩組患者補體水平比較（±s)Table 2 Comparison of complement levels between the two groups of patients(±s)

表2 兩組患者補體水平比較（±s)Table 2 Comparison of complement levels between the two groups of patients(±s)

?

3 討論

據(jù)相關(guān)研究顯示， 流感主要是由于人體自身受到流感病毒所致，具有流行速度快、傳染性較強等特點，傳播形式包括多種，比如接觸被感染物品、人和人之間的接觸、空氣中飛沫，當(dāng)患兒發(fā)生流感樣癥狀時，通常存在多種臨床表現(xiàn)，比如咽喉腫痛、咳嗽、乏力、疼痛、高熱等癥狀，若未及時對患兒實施有效治療，易增加患兒并發(fā)癥發(fā)生風(fēng)險[7-8]。 研究認(rèn)為，流感和感冒不同，流感是由流感病毒所引起，主要累及人體上呼吸道，感冒是由多種病毒所引發(fā)，例如：副流感病毒、冠狀病毒、腺病毒、鼻病毒、呼吸合胞病毒等[9]，通常情況下，流感癥狀比普通感冒嚴(yán)重，其并發(fā)癥多以及累及范圍廣，早期進行有效診斷十分重要[10]。美國感染病學(xué)會(IDSA)發(fā)布的最新季節(jié)性流感的診斷和治療指南中指出： 對流感進行診斷時要求盡早采集患兒標(biāo)本，最好在癥狀出現(xiàn)后4 d 內(nèi)，對于危重患兒需要聯(lián)合檢測多種標(biāo)本，如鼻+咽拭子標(biāo)本，但對于非呼吸道標(biāo)本或單份血清學(xué)檢測作為疾病診斷的方式并不提倡；同時還提出了快速流感診斷檢測、快速分子檢測、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)檢測、免疫熒光檢測、 病毒培養(yǎng)和血清抗體檢測等流感病毒的診斷方法，并對每種方法的優(yōu)缺點進行概述；在疾病治療部分提出年齡＜2 歲的患兒和＞65 歲與患者必須盡早進行治療， 免疫球蛋白抑制劑雖然可以快速提高患兒的免疫力，但應(yīng)該配合其他藥物聯(lián)合使用[11]。

免疫球蛋白為人體血液中一種具有抗體活性蛋白，存在于人體血漿內(nèi)，還可存在于人體分泌液、其他組織及體液內(nèi)[12]。 臨床上將免疫蛋白分為5 大類，即IgA、IgG、IgM、IgE、IgD[13]。 在該次研究中，選擇IgA、IgG、IgM 作為該次檢測指標(biāo)， 其中IgA 為人體外分泌型免疫球蛋白；IgG 為免疫球蛋白的重要組成，對血清抗體活性具有一定影響，為人體抗感染的主體，對傳染性疾病具有診斷及預(yù)防作用；IgM 則為最早出現(xiàn)的感染指標(biāo)，持續(xù)時間較長，為近期感染指標(biāo)[14]。陳繼珍[15]在對流感患兒進行治療時發(fā)現(xiàn)，患兒的并發(fā)癥中包含肝功能中度受損。 因此該次研究還選取了肝功能常用指標(biāo)總膽紅素TBiL，還有PTA 和ALB兩種物質(zhì)指標(biāo)。PTA 與凝血酶原時間的意義相同，兩者相比較而言，PTA 更加能準(zhǔn)確反映凝血因子的活性，PTA 的水平=(正常人凝血酶原時間-8.7)/(患兒凝血酶原時間-8.7)×100%， 是判斷重癥肝炎和肝硬化的主要指標(biāo)；ALB 又稱血清蛋白，主要由肝實質(zhì)細胞合成，具有維持血管內(nèi)外體液平衡，修復(fù)組織蛋白以及運輸血漿中蛋白載體的功能。

研究顯示， 補體在臨床多種免疫系統(tǒng)中具有顯著調(diào)節(jié)效果， 能夠參與自身機體防御病原體的第一道防線中，對巨噬細胞具有介導(dǎo)作用，在凋亡細胞以及循環(huán)免疫復(fù)合物的清除中也具有參與作用， 能夠?qū)ψ陨頇C體免疫耐受進行調(diào)節(jié)， 對炎性反應(yīng)進行調(diào)控[16]。 資料顯示，補體指標(biāo)能夠有效調(diào)節(jié)巨噬細胞炎性的兩極分化過程， 能夠參與動脈粥樣硬化等疾病的發(fā)生、發(fā)展。 因此，能夠?qū)⒀a體作為流感疾病的有效指標(biāo)，同時在自身免疫性疾病、心腦血管疾病中也具有重要價值[17-18]。

該次研究結(jié)果表明， 觀察組患兒IgG （30.23±3.98）g/L、IgA（16.87±2.23）g/L、IgM（14.98±2.83）g/L、TBiL （591.35±12.35）μmol/L 均 高 于 對 照 組、PTA（36.87±10.24）%、ALB （20.33±1.23）g/L 均低于對照組（P＜0.05）；說明患兒體內(nèi)遭受流感病毒入侵后，在免疫學(xué)發(fā)病機制上血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM 起到重要作用，IgG、IgA、IgM 水平不斷升高，以此抵御流感病毒，保障兒童的健康，但患兒體內(nèi)的TBiL 水平也隨之上升，使患兒的肝功能受損嚴(yán)重。 鄭旭新等[19]在探究磷酸奧司他韋聯(lián)合藍芩口服液對兒童流感病毒的治療效果時發(fā)現(xiàn)，患兒體內(nèi)的IgG、IgA、IgM均在使用藥物治療后高于治療前， 說明藥物激發(fā)了患兒體內(nèi)的免疫應(yīng)答機制，從而起到了治療流感的療效。周文偉等[20]的研究結(jié)果表明，絳舌患兒體內(nèi)的TBiL為 （47.3±9.2）μmol/L， 青 舌 患 兒 體 內(nèi) 的TBiL 是（53.2±8.4）μmol/L，隨著患兒病情的加劇，患兒體內(nèi)的TBiL 水平逐漸升高。 李瑞[21]的研究結(jié)果表明，感染H7N9 禽流感的患兒體內(nèi)活化部分的凝血酶原時間延長， 與該次研究結(jié)果中PTA 降低的結(jié)果相類似， 原因在于活化部分凝血活酶時間主要反映內(nèi)源性凝血因子的功能， 升高說明患兒體內(nèi)內(nèi)源途徑凝血因子缺乏，患兒感染流感病毒后，病毒直接入侵機體凝血及纖溶系統(tǒng)有關(guān)， 而且流感患兒呼吸系統(tǒng)也會出現(xiàn)異常，機體會出現(xiàn)短暫的缺氧，在此過程中微血管受損，多種炎癥介質(zhì)和細胞因子釋放，使得激活凝血和纖溶系統(tǒng)失衡。王煒翔等[22]的研究結(jié)果表明，流感患兒體內(nèi)的ALB 水平是（38.45±5.89） g/L，低于健康兒童體內(nèi)的（44.56±2.57）g/L，相關(guān)研究[23]人的研究結(jié)果也表明，感染炎癥的患兒體內(nèi)ALB 水平低于正常患兒，而且隨著患兒病情的加重，ALB 水平逐漸下降，說明炎癥因子的入侵，使得患兒肝功能異常，ALB的合成速度下降，患兒此時體內(nèi)蛋白質(zhì)吸收不良。

該次研究結(jié)果表明，觀察組補體C3（1.82±0.25）g/L、補體C4（0.68±0.02）g/L、CH50（122.25±2.52）U/L 均高于對照組（P＜0.05），說明補體C3、C4 和CH50 也參與了流感病毒入侵機體后的免疫應(yīng)答過程。 李愛國等[23]人的研究結(jié)果表明，感染組患兒體內(nèi)的補體C3 水平是（1.18±0.21）g/L，補體C4 水平是（0.28±0.04）g/L，和該次研究結(jié)果類似，均高于健康人群，補體C3 和補體C4 主要存在于患兒的血漿中,可有效激發(fā)免疫細胞的吞噬作用,活化細胞分裂進程,有效防止免疫復(fù)合物沉著，因此當(dāng)患兒遭受流感病毒入侵時，體內(nèi)會釋放大量的補體C3 和補體C4。 蔣芬等[24]人的結(jié)果也表明，患兒病情好轉(zhuǎn)后，體內(nèi)的補體C3 以及補體C4 水平會降低， 說明只有在患兒體內(nèi)細胞免疫被激發(fā)時，這兩種物質(zhì)的含量才會升高。補體CH50 反映了C1～C9 成分的綜合水平， 它的變化為疾病的進程和治療效果提供了重要依據(jù)， 觀察組患兒體內(nèi)的補體CH50 升高， 說明患兒體內(nèi)的代償性補補體水平升高， 體液免疫參與了該次的免疫調(diào)節(jié)，與冉光[13]的研究結(jié)果一致。

綜上所述， 血清免疫球蛋白和補體對兒童流感患兒具有較高診斷價值， 能夠為疾病后期治療提供有利參考依據(jù)，值得在臨床中推廣。