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    超高壓對海帶吸附性質(zhì)的影響及其初步機(jī)理研究

    2022-06-01 03:17:28楊融王一帆王超段翰英
    食品與發(fā)酵工業(yè) 2022年10期
    關(guān)鍵詞:吸附性海帶膳食

    楊融,王一帆,王超,段翰英*

    1(暨南大學(xué) 國際學(xué)院,廣東 廣州,510632)2(暨南大學(xué) 理工學(xué)院,廣東 廣州,510632)

    海帶,又名昆布、江白菜,福建、山東、遼寧等沿海省份是我國海帶的主要產(chǎn)地,我國海帶產(chǎn)量居全球首位[1]。海帶富含膳食纖維(dietary fiber, DF)[2]。DF雖然本身沒有營養(yǎng)價值,但其表現(xiàn)出極強(qiáng)的水合性質(zhì)和吸附性質(zhì),具有促進(jìn)腸道收縮蠕動、降低餐后血糖值、調(diào)節(jié)血脂以及降低心血管和胃腸道疾病發(fā)病機(jī)率等功效[3]。研究發(fā)現(xiàn),通過適當(dāng)?shù)母男允侄翁幚鞤F,可改變聚合物的分子結(jié)構(gòu)、形態(tài)與含量等[4],有助于提高DF功能,是當(dāng)前食品工業(yè)研究熱點(diǎn)之一[5]。

    超高壓技術(shù)(ultra-high pressure, UHP)是近年來出現(xiàn)的食品冷殺菌新技術(shù),是指用液體或氣體作為介質(zhì),對軟包裝食品等物料物理加壓到100~1 000 MPa的壓力處理技術(shù)。目前UHP在食品的應(yīng)用主要集中在食品殺菌[6]。鑒于UHP可對生物大分子立體結(jié)構(gòu)的非共價鍵(氫鍵、離子鍵和疏水鍵)產(chǎn)生影響,UHP在食品改性方面的作用也逐漸受到重視。研究發(fā)現(xiàn),改性后的大豆DF有更致密、均勻的結(jié)構(gòu)[7],小麥DF經(jīng)UHP處理后持水率和膨脹率都有較大的提高[8]。由于不同來源DF的化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)特性不同,UHP對其改性后的理化性質(zhì)也值得進(jìn)一步研究,而目前有關(guān)UHP在海帶類原料的改性應(yīng)用還未見報道。

    本文采用UHP處理海帶,研究高壓前后以及不同壓力、時間對海帶的持水力(water holding capacity, WHC)、持油力(oil holding capacity,OHC)、葡萄糖吸附能力(glucose adsorption capacity,GAC)和膽固醇吸附能力(cholesterol adsorption capacity,CAC)的影響,并初步從微觀結(jié)構(gòu)和DF含量兩方面對其機(jī)理進(jìn)行探討,從而為UHP工藝在海帶產(chǎn)品的開發(fā)以及功能性食品的生產(chǎn)研究方面提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    新鮮海帶,本地菜市場購買;堿性蛋白酶,上海阿拉丁生化科技股份有限公司;淀粉酶,西格瑪奧德里奇(上海)貿(mào)易有限公司;其他試劑均為分析純。

    1.2 儀器與設(shè)備

    SCIENTZ-18 N 冷凍干燥機(jī),寧波生物科技股份有限公司;CQC2L-600型全液相超高壓食品滅菌機(jī),北京速原中天科技股份有限公司;EVO-MA15掃描電子顯微鏡,德國ZEISS公司;ST 16R高速冷凍離心機(jī),廣州源起生物科技有限公司;HH-2恒溫水浴鍋,金壇市宏華儀器廠;LE104E/02電子天平,梅特勒-托利多(上海)儀器有限公司。

    1.3 實(shí)驗(yàn)方法

    1.3.1 海帶預(yù)處理

    新鮮片狀海帶(slice-kelp, S-K),清洗干凈,切成3 cm×8 cm長方形,等量放入塑料袋,真空密封包裝;另取新鮮海帶冷凍干燥,再打粉得到海帶粉末(powder-kelp, P-K)樣品,等量放入塑料袋,真空密封包裝。

    1.3.2 UHP處理

    將密封的S-K和P-K樣品放入UHP內(nèi)腔,分別在300、450、600 MPa下處理5、10 min,泄壓后取出置干燥器中保存待測定。

    1.3.3 WHC 測定方法

    參考CHAU等[9]的方法適當(dāng)改進(jìn)。

    精確稱取0.2 g S-K、P-K樣品置于離心管,加入10 mL純水,室溫下振蕩均勻后靜置過夜,取S-K置于濾紙上瀝干。P-K樣品于10 000 r/min條件下離心10 min,小心清除上清液,殘渣置于濾紙上瀝干。瀝干后樣品稱重,WHC計算如公式(1)所示:

    (1)

    1.3.4 OHC測定方法

    按照SANGNARK等[10]的方法進(jìn)行改進(jìn)。

    精確稱取0.2 g S-K、P-K樣品置于離心管,加入5 g 玉米油,并將其混合均勻,在常溫下靜置過夜。取P-K樣品于10 000 r/min條件下離心10 min,小心除去上油層,殘渣置于濾紙上瀝干。取S-K置于濾紙上,吸干殘渣中的油,然后稱重,OHC計算如公式(2)所示:

    (2)

    1.3.5 GAC測定

    按照NSOR-ATINDANA等[11]的方法進(jìn)行改進(jìn)。

    分別稱取0.2 g樣品與20 mL 500 mmol/L葡萄糖溶液,混勻,常溫下靜置過夜,10 000 r/min條件下離心10 min取上清液,按GB 5009.7—2016《食品中還原糖的測定》方法測定葡萄糖含量。CAC計算如公式(3)所示:

    (3)

    式中:m0為樣品質(zhì)量,g;m1為吸糖前溶液的葡萄糖含量,g;m2為吸糖后溶液的葡萄糖含量,g。

    1.3.6 CAC測定

    1.3.6.1 膽固醇標(biāo)準(zhǔn)曲線

    分別取0.1、0.2、0.3、0.5、0.6 mL膽固醇乙酸標(biāo)準(zhǔn)溶液(3 mg/mL,45 mg膽固醇標(biāo)準(zhǔn)品溶于15 mL乙酸)于試管中,加入乙酸至總體積為1 mL。搖勻后加入3 mL 鄰苯二甲醛溶液(10 mg鄰苯二甲酸溶于100 mL乙酸)和2 mL硫酸(98%,體積分?jǐn)?shù)),在室溫下靜置 10 min 后,于550 nm處測定吸光值[12]。建立膽固醇質(zhì)量濃度(X,mg/mL) 與吸光值(Y) 之間線性方程:y= 0.175 7x+ 0.137 3,R2=0.990 9。

    1.3.6.2 CAC測定

    將新鮮蛋黃與水按4∶1的質(zhì)量比混合制成蛋黃液。分別取0.3 g海帶樣品于離心管中,加入15 mL蛋黃乳液,搖晃混勻并調(diào)節(jié)pH至7.0,37 ℃恒溫水浴振蕩2 h,4 000×g條件下離心4 min,取上清液,采用鄰苯二甲醛法在550 nm下測定吸光度,CAC計算如公式(4)所示[13]:

    (4)

    式中:M1,吸附前蛋黃乳液的膽固醇質(zhì)量,mg;M2,吸附后上清液中膽固醇質(zhì)量,mg;MK,海帶樣品的質(zhì)量,g。

    1.3.7 膳食纖維含量測定方法

    采用GB 5009.88—2014《食品中膳食纖維的測定》 6.3.1測定總DF含量;采用GB 5009.88—2014 《食品中膳食纖維的測定》 6.3.2測定不溶性膳食纖維(insoluble dietary fiber, IDF)含量;采用GB 5009.88—2014 《食品中膳食纖維的測定》6.3.3測定可溶性膳食纖維(soluble dietary fiber, SDF)含量。

    1.3.8 掃描電子顯微鏡觀察

    將干燥的樣品散落在金屬樣品平臺上并用雙面膠帶固定,通過陰極噴涂系統(tǒng)涂覆金屬離子層(約30 nm厚)。在高真空條件(10~40 Pa)下以5 kV的加速電壓使用掃描電鏡觀察。

    1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

    所有實(shí)驗(yàn)均進(jìn)行3次平行,結(jié)果用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。采用Excel軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計,并用Minitab 19軟件進(jìn)行ANOVA方差分析(P<0.05)。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 UHP處理對海帶吸附性質(zhì)的影響

    2.1.1 UHP對WHC的影響

    未處理的海帶WHC為22~26 g/g,經(jīng)UHP處理后S-K的WHC未見顯著差別,而P-K顯著提高為原來的1.61~2.31倍(P<0.05)(圖1),最高值達(dá)到(63.40±1.29)g/g,說明UHP能顯著提高海帶吸水性。經(jīng)UHP改性后的DF,如小麥麩皮、梨渣和沙果渣, 其WHC分別為未處理原料的1.28[14]、1.24[15]和1.17倍[16]。樣品WHC的提高可能與UHP處理后分子結(jié)構(gòu)改變帶來的親水基團(tuán)的裸露和組織疏松帶來的組織滯留水分的能力增強(qiáng)有關(guān)[8]。同時,P-K的WHC隨著UHP壓力的增加也有顯著提高,而只有在300 MPa 時處理時間會造成WHC顯著差異(P<0.05),這一結(jié)論與朱丹等[16]處理小麥麩皮的結(jié)果相似。

    雖然未處理的S-K和P-K在WHC沒有顯著差異,但經(jīng)UHP處理后,P-K的WHC得到顯著提高,說明原料的物理性狀會對吸附性產(chǎn)生影響。經(jīng)打粉后P-K的分散性、比表面積增加,更容易受到高壓的影響,而S-K自身結(jié)構(gòu)排列致密,UHP處理對其比表面積和孔隙率影響不大,親水基團(tuán)難以暴露[16],因此,UHP未對S-K的WHC產(chǎn)生影響。

    圖1 UHP處理對海帶WHC的影響Fig.1 Effect of UHP treatment on the WHC of kelp 注:不同大寫字母表示P-K組間數(shù)據(jù)顯著差異(P<0.05) 小寫字母表示S-K組間數(shù)據(jù)顯著差異(P<0.05)(下同)

    2.1.2 UHP對OHC的影響

    未處理的P-K的OHC(4 g/g)顯著高于S-K(P<0.05)(圖2),相對于豆渣(1.5 g/g)、梨渣(1.65 g/g)、紅薯(1.6 g/g)等,其OHC也較高。與WHC結(jié)果相似,經(jīng)UHP處理后,P-K的OHC也顯著高于S-K,其中經(jīng)UHP 600 MPa處理10 min后P-K的OHC顯著提升到(9.94±2.13) g/g(P<0.05)(圖2),為未處理樣品的2.33倍,而其余UHP樣品的OHC并無明顯變化,這一結(jié)論與苗字葉等[17]采用UHP處理麥麩20 min發(fā)現(xiàn)OHC隨壓強(qiáng)增大而增加的結(jié)果不同,推測可能是由于處理時間過短,海帶內(nèi)部的親油性基團(tuán)未能完全暴露。

    2.1.3 UHP對GAC的影響

    由WHC和OHC數(shù)據(jù)可見,粉末狀P-K的吸附力都要高于S-K,且容易受到UHP處理的影響。因此,后續(xù)只選擇P-K為原料探討其他性質(zhì)。

    圖2 UHP對海帶OHC的影響Fig.2 Effect of UHP treatment on the OHC of kelp

    UHP處理后P-K的GAC都有所提高,其中450 MPa處理10 min樣品的GAC最高為(2.74±0.95) g/g,為未處理樣品的11.33倍(P<0.05)(圖3),且隨著壓力的增大呈現(xiàn)先增加再減少的趨勢。趙健等[6]采用UHP處理紅薯渣膳食纖維后GAC也有提高。UHP處理使大分子上更多的功能基團(tuán),比如側(cè)鏈上一些醛酸基等親水的基團(tuán)暴露出來,提供更多結(jié)合位點(diǎn),使葡萄糖分子與DF之間的范德華力以及氫鍵作用增大[18]。飲食中的纖維顆??赡茏鳛槠咸烟菙U(kuò)散的物理障礙,UHP處理增加了纖維網(wǎng)絡(luò)對葡萄糖分子的束縛和捕獲能力[19],在控制葡萄糖擴(kuò)散率方面起著至關(guān)重要的作用。因此,通過UHP處理的海帶粉末可以在腸道內(nèi)形成屏障捕獲葡萄糖分子,可以延緩葡萄糖的擴(kuò)散,推遲腸胃中的葡萄糖吸收,從而有效控制餐后血糖的升高[20]。

    圖3 UHP處理對P-K的GAC的影響Fig.3 Effect of UHP treatment on the GAC of P-K

    2.1.4 UHP對CAC的影響

    高膽固醇是心血管疾病的高危因素,直接影響肝腎功能及動脈粥樣硬化發(fā)展[21]。未處理的海帶CAC為133.9 mg/g,經(jīng)UHP處理未造成其顯著變化(圖4),其中經(jīng)450 MPa處理10 min后樣品的CAC增加為未處理樣品的1.22倍,這一結(jié)論與吳長玲等[22]采用空化射流處理豆渣膳食纖維所得的結(jié)果相似。隨著UHP處理壓力的增加,樣品的孔隙度增加,比表面積增大,可暴露更多的親脂基團(tuán)與膽固醇結(jié)合。但壓力過大時,其毛細(xì)管力受損致使膽固醇吸附力降低[23]。

    圖4 UHP處理對P-K的CAC的影響Fig.4 Effect of UHP treatment on the cholesterol-adsorption capacity of P-K

    2.2 UHP處理對海帶吸附性影響機(jī)理的初步探討

    以上結(jié)果表明,UHP處理后的P-K的WHC、OHC和GAC都有了顯著提高,但CAC的變化并不明顯;而S-K的各種吸附性能都較差,UHP對其影響也并不明顯。為探討UHP處理影響P-K吸附性的機(jī)理,現(xiàn)從其DF含量、表觀特征等方面來探討其相關(guān)性。

    2.2.1 UHP處理對海帶DF含量的影響

    DF包括SDF和IDF,SDF在防治心血管疾病、糖尿病、動脈硬化等方面具有良好的作用且優(yōu)于IDF[4]。本文對UHP處理前后總DF、IDF和SDF含量的變化進(jìn)行了分析。結(jié)果表明,未處理樣品的總DF含量為(61.91±0.98)g/100g,經(jīng)UHP處理后的樣品總DF含量顯著增加(P<0.05),最高值達(dá)到(74.82±0.99)g/100g,為原來的1.21倍(圖5-a)。不同壓力下,處理5 min的樣品中IDF含量顯著升高為未處理樣品的1.07~1.10倍(圖5-b),而處理10 min 后的樣品SDF含量顯著增加為原來的1.47~1.63倍(圖5-c)(P<0.05)。趙健等[6]采用UHP處理紅薯渣DF后也發(fā)現(xiàn)總DF增加。UHP處理后,海帶的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,IDF的含量首先增加,使得總DF的含量增加。隨著處理時間的增長,DF的空間結(jié)構(gòu)再次發(fā)生變化,大分子組分的鏈接鍵斷裂轉(zhuǎn)變?yōu)樾》肿樱沟肐DF轉(zhuǎn)化為SDF,從而使SDF含量增加[24],這與苗字葉等[17]采用UHP處理梨渣膳食纖維結(jié)果相似。XIE等[25]認(rèn)為UHP可以降解纖維素,將IDF轉(zhuǎn)化為SDF,使得IDF和SDF再分配,有效地提高了SDF含量。

    a-總DF;b-IDF;c-SDF圖5 UHP處理對海帶DF含量的影響Fig.5 Effect of UHP treatment on the content of DF in kelp

    2.2.2 UHP對海帶微觀結(jié)構(gòu)的影響

    UHP處理后海帶經(jīng)掃描電鏡研究其微觀結(jié)構(gòu)(圖6)。未處理的P-K顆粒較大,成不規(guī)則片狀結(jié)構(gòu),表面較為光滑(圖6-g);經(jīng)UHP處理后P-K的表面開始變得粗糙,且出現(xiàn)破碎和斷裂,顆粒變小(圖6-a~圖6-f), 當(dāng)壓力為 450 MPa 時顆粒尺寸最小。文獻(xiàn)表明,隨著UHP壓力和處理時間的增加,P-K比表面積和表面孔隙率增加,可能是由于UHP處理過程中P-K的空間結(jié)構(gòu)遭到破壞而變得疏松,顆粒尺寸減小,但當(dāng)尺寸減小到一定程度,表面活性及吸附性的增加導(dǎo)致部分顆粒開始聚集??傮w而言,UHP處理改變了P-K的微觀結(jié)構(gòu),從而對其吸附性產(chǎn)生了影響,這與之前吸附性數(shù)據(jù)結(jié)果相符。

    a-300 MPa,10 min;b-450 MPa,10 min;c-600 MPa,10 min; d-300 MPa,5 min;e-450 MPa,5 min;f-600 MPa,5 min;g-對照圖6 P-K電鏡圖(600×)Fig.6 Scanning electron microscope (SEM) images of P-K(600×)

    3 結(jié)論

    本文研究了不同壓力(300、450、600 MPa)及時間(5、10 min)的UHP處理對P-K以及S-K吸附性質(zhì)的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn),UHP處理后的P-K的WHC、OHC、GAC均顯著提高(P<0.05),CAC能力雖無顯著變化但略有增加;而S-K的各種吸附性能都較差,UHP對其影響也并不明顯。P-K的WHC、OHC和GAC分別顯著提高為原來的1.61~2.31、2.33和11.33倍。隨著處理壓力和時間的增加,WHC及OHC逐漸增強(qiáng),而GAC及CAC隨處理壓強(qiáng)的增加呈現(xiàn)先增加后減小的趨勢。經(jīng)進(jìn)一步對海帶DF含量、種類和微觀結(jié)構(gòu)分析,發(fā)現(xiàn)處理5 min的樣品中IDF含量顯著增加,處理10 min后SDF含量顯著增加,所有UHP樣品總DF含量顯著增加(P<0.05)。掃描電鏡分析的結(jié)果顯示,UHP處理后P-K的比表面積和孔隙率增加,表面結(jié)構(gòu)由致密變得疏松,但顆粒尺寸減小到一定程度后會發(fā)生聚集現(xiàn)象。綜上所述,UHP處理能夠影響海帶中DF的組成和含量,改變其微觀結(jié)構(gòu),從而影響其吸附性。本研究為進(jìn)一步推動海帶資源的高效、高值化、可持續(xù)開發(fā)利用提供新思路,也為UHP工藝在生產(chǎn)功能性食品方面提供理論依據(jù)。

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