敲低PRMT5對卵巢癌細(xì)胞多西紫杉醇化療敏感性的影響及其機(jī)制

金男，楊洪艷，裴會，姜姍姍，李爍

中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院第五產(chǎn)科，沈陽 110004

卵巢癌是女性生殖系統(tǒng)常見的惡性腫瘤，其發(fā)病率僅次于宮頸癌和子宮內(nèi)膜癌，居第三位，而其病死率卻一直高居女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤首位［1-2］?；熓侵委熉殉舶┑闹匾侄?，而多西紫杉醇（DTX）是其一線化療用藥，但約20%患者在治療6個月內(nèi)出現(xiàn)化療耐藥。因此，化療耐藥成為卵巢癌復(fù)發(fā)和化療失敗的主要原因［3-4］。蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶5（PRMT5）屬于PRMT家族一員，通過自身表觀遺傳學(xué)活性及與多種腫瘤相關(guān)蛋白的相互作用，參與調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄、RNA 加工、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等生物學(xué)過程。有研究報(bào)道，PRMT5 對細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶4/6（CDK4/6）抑制劑非常敏感，降低PRMT5水平能夠顯著增加黑色素瘤對CDK4/6 抑制劑的敏感性［4］。IGARASHI 等［5］研究發(fā)現(xiàn)，PRMT5 與 JAK1、JAK3的結(jié)合能力較強(qiáng)，并可通過調(diào)節(jié)STAT6活化促進(jìn)STAT6 介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)錄，從而促進(jìn)細(xì)胞增殖。DTX 可通過抑制微管形成而抑制細(xì)胞周期進(jìn)展，而PRMT5 對DTX 的細(xì)胞周期阻滯作用是否有影響目前尚不清楚。2020 年 8 月—2021 年 6 月，本研究觀察了敲低PRMT5 對卵巢癌細(xì)胞DTX 化療敏感性的影響及其機(jī)制?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 材料 人正常卵巢上皮細(xì)胞株IOSE80（以下稱IOSE80 細(xì)胞），購于美國ATCC；人卵巢癌細(xì)胞株SKOV3、ES-2、A2780（以下分別稱 SKOV3、ES-2、A2780細(xì)胞），購于中國科學(xué)院典型培養(yǎng)物保藏委員會細(xì)胞庫。陰性對照質(zhì)粒、PRMT5 siRNA-1 質(zhì)粒和PRMT5 siRNA-2質(zhì)粒均由上海吉瑪制藥技術(shù)有限公司合成。Multiskan FC酶標(biāo)儀，購自賽默飛世爾科技（中國）有限公司；FACSCanto-Ⅱ流式細(xì)胞儀，購自美國 BD 公司；Amersham Imager 600 凝膠成像系統(tǒng)，購自 美 國 GE 公 司 。PrimeScript ? RT Reagent Kit、SYBR?Premix Ex Taq Ⅱ，購自寶日醫(yī)生物技術(shù)（北京）有限公司；Annexin V-FITC 細(xì)胞凋亡檢測試劑盒，購自上海碧云天生物技術(shù)有限公司；anti-RPMT5、anti-JAK1、anti-JAK3、anti-STAT6、anti-p-JAK1、anti-p-JAK3、anti-p-STAT6、anti-β-actin 及辣根過氧化物酶標(biāo)記的山羊抗兔或鼠IgG二抗，購自美國CST公司；Ki67 一抗、Alexa Fluor 555 二抗和 Hoechst 染料，購自美國Invitrogen公司。

1.2 細(xì)胞傳代培養(yǎng) 將 IOSE80、SKOV3、ES-2、A2780 細(xì)胞接種于含 10% FBS 的 DMEM 培養(yǎng)基，置于37 ℃、5% CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)。當(dāng)細(xì)胞生長融合80%左右時，0.25%胰蛋白酶消化后按1∶4 傳代。取傳4 代、對數(shù)生長期、生長狀態(tài)良好的細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

1.3 卵巢癌細(xì)胞篩選 ①PRMT5 mRNA 表達(dá)檢測 。 取 IOSE80、SKOV3、ES-2、A2780 細(xì) 胞 ，采 用TRIzol法提取細(xì)胞總RNA，經(jīng)紫外可見分光光度計(jì)鑒定，提取的總RNA濃度和純度合格。按PrimeScript?RT Reagent Kit 說明，將總 RNA 反轉(zhuǎn)錄為 cDNA。反轉(zhuǎn)錄條件：37 ℃ 15 min，85 ℃ 5 s。以 cDNA 為模板，按照 SYBR?Premix Ex Taq Ⅱ說明進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增。引物序列：PRMT5上游引物5'-CGCAGCCTCAGAGCGACGAC-3'，下 游 引 物 5'-GCGCCGTAAATGAAGGGTC-3'；U6 上游引物 5'-AGCAGAACGTGCGACATATCATCAC-3'，下 游 引 物 5'-TGCGTCTGGCCGTTAACGTC-3'。PCR反應(yīng)體系共20 μL：cDNA模板 0.8 μL，上下游引物各 1 μL，2 × SYBR Green PCR Mix 10 μL，ddH2O 7.2 μL；反應(yīng)條件：95 ℃5 min，95 ℃ 30 s、60℃ 30 s、72 ℃ 30 s 共 42 個循環(huán)。以 U6 為內(nèi)參，采用 2-ΔΔCT法計(jì)算 PRMT5 mRNA 相對表達(dá)量。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3 次，取平均值。②PRMT5 蛋白表達(dá)檢測。取 IOSE80、SKOV3、ES-2、A2780 細(xì)胞，RIPA 裂解液冰上充分裂解，4 ℃下 12 000 r/min 離心15 min、離心半徑15 cm，留取上清，經(jīng)BCA法蛋白定量合格。加入適量Loading Buffer，100 ℃水浴5 min，使蛋白充分變性。取變性蛋白30μg，經(jīng)SDS-PAGE分離（80 V 30 min，120 V 100 min）。采用濕轉(zhuǎn)法將蛋白電泳產(chǎn)物轉(zhuǎn)印至PVDF 膜上，然后5%BSA 室溫封閉1 h，分別加入anti-PRMT5、β-actin 抗體，4 ℃孵育過夜。次日，加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的山羊抗兔或鼠IgG二抗，室溫孵育1 h。ECL化學(xué)發(fā)光，暗室內(nèi)曝光、顯影。Amersham Imager 600 凝膠成像系統(tǒng)拍照，Image J 軟件分析各蛋白電泳條帶灰度值。以β-actin 為內(nèi)參，以目的蛋白電泳條帶灰度值與內(nèi)參蛋白電泳條帶灰度值的比值作為目的蛋白相對表達(dá)量。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3 次，取平均值。選擇PRMT5 mRNA和蛋白相對表達(dá)量最高的卵巢癌細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

1.4 細(xì)胞分組與轉(zhuǎn)染 取傳4 代、對數(shù)生長期、生長狀態(tài)良好的卵巢癌細(xì)胞，按4×106個/孔密度接種于6 孔板，然后置于37 ℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)。隨機(jī)將細(xì)胞分為空白對照組、陰性對照組、siRNA-1 組、siRNA-2 組，每組設(shè) 3 個復(fù)孔。培養(yǎng)24 h，陰性對照組加入Lipofectamine2000 + 陰性對照質(zhì)粒轉(zhuǎn)染，siRNA-1 組加入Lipofectamine2000+PRMT5 siRNA-1 質(zhì) 粒 轉(zhuǎn) 染 ，siRNA-2 組 加 入 Lipofectamine2000 + PRMT5 siRNA-2 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染，空白對照組不予轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染6 h，更換含10%FBS的DMEM培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)48 h，收集細(xì)胞，按1.3 中的方法檢測各組PRMT5 mRNA和蛋白相對表達(dá)量。

1.5 細(xì)胞增殖抑制率檢測 采用MTT 法。取各組上述轉(zhuǎn)染后細(xì)胞，按8 × 103個/孔密度接種于96 孔板，置于37 ℃、5% CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)。培養(yǎng)24 h，每組分別加入適量DTX，使其終濃度分別為1、5、10、15、20、25 μmol/L，同時設(shè)置空白孔（僅有培養(yǎng)基）和對照孔（僅有細(xì)胞，未經(jīng)DTX 處理），然后置于37 ℃、5% CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。培養(yǎng)48 h，每孔加入5 mg/L MTT 溶液20 μL，避光孵育4 h。吸棄上清液，加入DMSO 150 μL，置于搖床上低速振蕩5 min，使結(jié)晶物充分裂解。Multiskan FC 酶標(biāo)儀于570 nm 波長處檢測各孔的光密度（OD）值，計(jì)算細(xì)胞增殖抑制率。細(xì)胞增殖抑制率=（實(shí)驗(yàn)孔OD570值-空白孔OD570值）/（對照孔OD570值-空白孔OD570值）× 100%，利用Graphad Prism軟件繪制細(xì)胞增殖抑制曲線。選擇siRNA-1組和siRNA-2組中細(xì)胞增殖抑制率接近50%的DTX濃度進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

1.6 細(xì)胞凋亡檢測 取各組上述轉(zhuǎn)染后細(xì)胞，按4×106個/孔密度接種至培養(yǎng)皿中，置于37 ℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)。培養(yǎng)24 h，加入適量DTX，使其終濃度達(dá)到上述要求。繼續(xù)培養(yǎng)48 h，胰蛋白酶消化后收集細(xì)胞，避光轉(zhuǎn)移至EP 管中，然后加入Annexin V-FITC 結(jié)合液195μL 重懸細(xì)胞，再加入Annexin V-FITC 5μL 和PI 10μL，輕輕吹打混勻。室溫避光孵育20 min，上FACSCanto-Ⅱ流式細(xì)胞儀檢測各組細(xì)胞凋亡率。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，取平均值。

1.7 細(xì)胞增殖檢測 取各組上述轉(zhuǎn)染后細(xì)胞，按1×106個/孔密度接種至6 孔板（孔內(nèi)放有玻片），置于37 ℃、5% CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)。培養(yǎng)24 h，每孔加入適量DTX，使其終濃度達(dá)到上述要求。繼續(xù)培養(yǎng)48 h，取出玻片，4%多聚甲醛固定10 min，再放入含0.5%Tween20的PBS孵育30 min。室溫下5%脫脂奶粉封閉1 h，滴加Ki67 一抗孵育1 h，Alexa Fluoro 555 二抗染色，Hoechst 復(fù)染，顯微鏡下觀察細(xì)胞增殖情況。Ki67 陽性染色呈紅色，代表增殖細(xì)胞；Hoechst 陽性染色呈藍(lán)色，代表凋亡細(xì)胞。以Ki67 陽性細(xì)胞比例代表增殖細(xì)胞所占的比例。Ki67 陽性細(xì)胞比例=Ki67 陽性細(xì)胞數(shù)/總細(xì)胞數(shù)×100%。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，取平均值。

1.8 JAKs/STATs信號通路相關(guān)蛋白表達(dá)檢測 取各組上述轉(zhuǎn)染后細(xì)胞，按1×106個/孔密度接種至6孔板，置于37 ℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)。培養(yǎng)48 h，收集細(xì)胞，參照1.3 中的方法檢測JAK1、JAK3、STAT6 及 p-JAK1、p-JAK3、p-STAT6 蛋白表達(dá)。

1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS21.0 統(tǒng)計(jì)軟件。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以表示，多組間比較采用單因素方差分析，進(jìn)一步兩兩比較采用SNK-q檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 卵巢癌細(xì)胞篩選結(jié)果 SKOV3、ES-2、A2780細(xì)胞PRMT5 mRNA 和蛋白相對表達(dá)量均高于IOSE80 細(xì)胞（P均＜0.05），SKOV3、ES-2、A2780 細(xì)胞PRMT5 mRNA 和蛋白相對表達(dá)量兩兩比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＞0.05），見表1。以SKOV3 細(xì)胞PRMT5 mRNA 和蛋白相對表達(dá)量最高，故選擇SKOV3細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

表1 卵巢癌細(xì)胞和正常卵巢上皮細(xì)胞PRMT5 mRNA和蛋白相對表達(dá)量比較（）

表1 卵巢癌細(xì)胞和正常卵巢上皮細(xì)胞PRMT5 mRNA和蛋白相對表達(dá)量比較（）

注：與IOSE80細(xì)胞比較，*P＜0.05。

細(xì)胞類型IOSE80細(xì)胞SKOV3細(xì)胞ES-2細(xì)胞A2780細(xì)胞PRMT5蛋白0.13±0.05 0.88±0.04*0.87±0.03*0.85±0.04*PRMT5 mRNA 1.00±0.18 3.32±0.29*3.25±0.11*3.28±0.15*

2.2 各組PRMT5 mRNA和蛋白表達(dá)比較 siRNA-1組與siRNA-2 組PRMT5 mRNA 和蛋白相對表達(dá)量均低于空白對照組和陰性對照組（P均＜0.05）。見表2。

表2 各組PRMT5 mRNA和蛋白相對表達(dá)量比較（）

表2 各組PRMT5 mRNA和蛋白相對表達(dá)量比較（）

注：與空白對照組比較，*P＜0.05；與陰性對照組比較，#P＜0.05。

組別空白對照組陰性對照組siRNA-1組siRNA-2組PRMT5蛋白0.88±0.07 0.87±0.05 0.13±0.04*#0.12±0.03*#PRMT5 mRNA 1.00±0.11 0.97±0.12 0.27±0.03*#0.25±0.04*#

2.3 各組細(xì)胞增殖抑制率比較 各組不同濃度DTX 干預(yù)后細(xì)胞增殖抑制率比較見表3。siRNA-1組與siRNA-2 組在10μmol/L DTX 干預(yù)時細(xì)胞增殖抑制率接近50%，故選擇10 μmol/L DTX 進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

表3 各組不同濃度DTX干預(yù)后細(xì)胞增殖抑制率比較（%，）

表3 各組不同濃度DTX干預(yù)后細(xì)胞增殖抑制率比較（%，）

注：與空白對照組比較，*P＜0.05；與陰性對照組比較，#P＜0.05。

組別細(xì)胞增殖抑制率1μmol/L DTX 5.21±0.57 6.20±0.80 8.24±0.32*#9.50±0.47*#20μmol/L DTX 71.76±2.42 71.57±3.04 95.73±2.83*#96.10±1.84*#25μmol/L DTX 82.83±2.47 82.60±3.22 97.78±1.90*#98.12±1.42*#5μmol/L DTX 15.10±2.45 14.97±1.37 31.67±3.50*#32.23±3.46*#10μmol/L DTX 31.62±3.32 32.77±3.36 52.51±3.38*#54.17±2.75*#15μmol/L DTX 53.10±4.19 51.97±4.24 83.12±2.39*#83.97±1.76*#空白對照組陰性對照組siRNA-1組siRNA-2組

2.4 各組細(xì)胞凋亡率比較 空白對照組、陰性對照組、siRNA-1 組和siRNA-2 組細(xì)胞凋亡率分別為（21.54 ± 3.62）% 、（23.47 ± 3.17）% 、（45.20 ±3.14）%、（47.14 ± 4.25）%。siRNA-1 組與 siRNA-2組細(xì)胞凋亡率均高于空白對照組和陰性對照組（P均＜0.05），而 siRNA-1 組與 siRNA-2 組、空白對照組與陰性對照組細(xì)胞凋亡率比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＞0.05）。

2.5 各組細(xì)胞增殖比較 10 μmol/L DTX 干預(yù)48 h，空白對照組、陰性對照組、siRNA-1組、siRNA-2組 Ki67 陽性細(xì)胞比例分別為（80.72 ± 6.5）%、（81.47 ± 5.3）% 、（47.21 ± 5.6）% 、（45.30 ±4.6）%。siRNA-1 組與 siRNA-2 組 Ki67 陽性細(xì)胞比例均低于空白對照組和陰性對照組（P均＜0.05），而siRNA-1組與siRNA-2組、空白對照組與陰性對照組Ki67陽性細(xì)胞比例比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＞0.05）。

2.6 各組JAK/STAT 信號通路相關(guān)蛋白表達(dá)比較 見表4。

表4 各組JAKs/STATs信號通路相關(guān)蛋白相對表達(dá)量比較（）

表4 各組JAKs/STATs信號通路相關(guān)蛋白相對表達(dá)量比較（）

注：與空白對照組比較，*P＜0.05；與陰性對照組比較，#P＜0.05。

組別空白對照組陰性對照組siRNA-1組siRNA-2組p-STAT6 0.69±0.06 0.74±0.09 0.10±0.03*#0.09±0.02*#JAK1 0.78±0.05 0.72±0.07 0.69±0.06 0.73±0.08 p-JAK1 0.65±0.03 0.60±0.05 0.12±0.03*#0.10±0.02*#JAK3 0.87±0.10 0.82±0.09 0.84±0.07 0.85±0.10 p-JAK3 0.45±0.08 0.43±0.04 0.12±0.02*#0.15±0.03*#STAT6 1.24±0.14 1.30±0.15 1.26±0.15 1.19±0.12

3 討論

卵巢癌是女性生殖系統(tǒng)常見的惡性腫瘤之一，由于其早期癥狀隱匿，約75%患者確診時已處于中晚期，預(yù)后較差［6］。對于初診卵巢癌患者，標(biāo)準(zhǔn)治療方案為腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)，術(shù)后輔以化療［7］。隨著外科手術(shù)技術(shù)不斷進(jìn)步及化療藥物不斷更新，在過去的幾十年里卵巢癌患者整體生存率已有所提高。有研究報(bào)道，化療耐藥不可避免，是腫瘤復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移以及病死率居高不下的重要原因［8-9］。DTX 是第二代紫杉烷類半合成抗腫瘤藥，其抗腫瘤特性與紫杉醇相似，主要靶點(diǎn)為微管蛋白及微管系統(tǒng)。DTX 通過促進(jìn)微管聚合并抑制微管降解，阻斷G2/M期細(xì)胞分裂，從而抑制腫瘤細(xì)胞有絲分裂和增殖。由于DTX是一種半合成紫杉烷類藥物，其溶解度和生物利用大于紫杉醇，故其抗腫瘤效果優(yōu)于紫杉醇。臨床藥理研究證實(shí)，DTX 比紫杉醇具有更強(qiáng)的抗腫瘤活性，在鉑類或紫杉醇耐藥的卵巢癌中具有更好的治療效果。目前，DTX 已獲得美國FDA 批準(zhǔn)用于治療乳腺癌、非小細(xì)胞肺癌、前列腺癌、胃癌等惡性腫瘤。然而，DTX 化療耐藥仍然不可避免，故分析其耐藥機(jī)制具有重要意義。

蛋白精氨酸甲基化是哺乳動物細(xì)胞中廣泛存在的翻譯后修飾過程，能夠調(diào)節(jié)細(xì)胞的多種生物學(xué)過程［10-11］。PRMT5 是一種Ⅱ型精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶，能夠催化精氨酸對稱二甲基化于多種靶標(biāo)上，如組蛋白、轉(zhuǎn)錄因子、剪接因子、翻譯因子和信號調(diào)節(jié)因子等［12］。PRMT5 在胚胎干細(xì)胞中高表達(dá)，對細(xì)胞增殖和自我更新至關(guān)重要。PRMT5 在有絲分裂后組織中表達(dá)較低，但在多種腫瘤組織中表達(dá)上調(diào)［13］。有研究報(bào)道，PRMT5 在胃癌中過表達(dá)，敲低PRMT5 后可抑制胃癌細(xì)胞生長和遷移［14］。YANG 等［15］研究發(fā)現(xiàn)，PRMT5 是鼻咽癌患者預(yù)后不良的生物標(biāo)志物，并與患者放射抵抗密切相關(guān)。BAO 等［16］研究發(fā)現(xiàn)，PRMT5在卵巢癌組織中表達(dá)上調(diào)，并與患者預(yù)后不良有關(guān)，而敲低PRMT5后可顯著抑制卵巢癌細(xì)胞增殖。腫瘤細(xì)胞生長依賴于PRMT5活性，其原因是PRMT5的遺傳抑制或催化抑制會阻止腫瘤細(xì)胞增殖并促進(jìn)其凋亡［17］。研究顯示，獲得性PRMT5抑制劑抗性的細(xì)胞對紫杉醇的敏感性發(fā)生變化，提示PRMT5表達(dá)可能與DTX 化療耐藥有一定關(guān)系。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，SKOV3、ES-2、A2780細(xì)胞PRMT5 mRNA和蛋白相對表達(dá)量均高于IOSE80 細(xì)胞，提示PRMT5 可能參與卵巢癌的惡性進(jìn)展。本研究敲低卵巢癌細(xì)胞PRMT5表達(dá)，進(jìn)一步觀察了卵巢癌細(xì)胞對DTX 化療敏感性的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，siRNA-1 組與siRNA-2 組細(xì)胞凋亡率均高于空白對照組和陰性對照組，Ki67陽性細(xì)胞比例均低于空白對照組和陰性對照組，而siRNA-1組與siRNA-2組、空白對照組與陰性對照組細(xì)胞凋亡率和Ki67 陽性細(xì)胞比例比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示敲低PRMT5 可增加卵巢癌細(xì)胞對DTX 的化療敏感性。王哲［18］研究報(bào)道，上調(diào)PRMT5表達(dá)可促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞對阿霉素的化療耐藥，而下調(diào)PRMT5 表達(dá)則可降低乳腺癌細(xì)胞對阿霉素的化療耐藥并促進(jìn)其凋亡。因此，在化療方案中加入PRMT5 抑制劑可能會提高乳腺癌患者的化療敏感性。本研究結(jié)論與王哲［18］報(bào)道有相似之處。

本研究敲低PRMT5 可顯著提高卵巢癌細(xì)胞對DTX 的化療敏感性，但其具體作用機(jī)制尚不清楚。JAK/STAT 信號通路可參與促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲和遷移等生物學(xué)過程。STAT3的反饋激活能夠恢復(fù)細(xì)胞增殖能力，從而引起腫瘤細(xì)胞抵抗各種靶向藥物或化療藥物。三陰性乳腺癌細(xì)胞對熱休克蛋白90 抑制劑耐受后，JAK/STAT 信號通路轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)，而JAK/STAT 信號通路抑制劑則可增強(qiáng)熱休克蛋白90抑制劑的細(xì)胞毒性。以上研究表明，JAK/STAT 信號通路傳導(dǎo)可能與腫瘤細(xì)胞的化療耐藥機(jī)制有關(guān)。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，siRNA-1 組與 siRNA-2 組 p-JAK1、p-JAK3、p-STAT6 蛋白相對表達(dá)量均低于空白對照組和陰性對照組，JAK1、JAK3、STAT6蛋白相對表達(dá)量與空白對照組和陰性對照組比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，并且siRNA-1 組與siRNA-2 組、空白對照組與陰性對照組各蛋白相對表達(dá)量比較差異亦無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示敲低PRMT5 可能通過抑制JAK/STAT信號通路傳導(dǎo)而增強(qiáng)卵巢癌細(xì)胞對DTX 的化療敏感性。

綜上所述，敲低PRMT5 可增強(qiáng)卵巢癌細(xì)胞對DTX 的化療敏感性，其機(jī)制可能與抑制JAK/STAT信號通路傳導(dǎo)有關(guān)。