乳腺癌患者血清CEACAM1、TM4SF1水平變化及其臨床意義

李昆，顧建偉，季峰，龔金星，陳焱

昆山市中醫(yī)醫(yī)院甲狀腺乳腺外科，江蘇昆山 215300

乳腺癌是起源于乳腺上皮組織的惡性腫瘤，是全球女性最常見的惡性腫瘤。據(jù)統(tǒng)計(jì)，2020年全球乳腺癌的發(fā)病率和病死率分別為58.5/10萬、17.7/10萬，其防治形勢(shì)十分嚴(yán)峻［1］。血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)一直是乳腺癌早期篩查的重要手段。癌胚抗原（CEA）和癌抗原15-3（CA15-3）是目前乳腺癌早期篩查應(yīng)用最廣泛的血清腫瘤標(biāo)志物。但近年研究報(bào)道，血清CEA、CA15-3 水平早期篩查乳腺癌的假陽性率高，并且易受肺病、肝硬化、結(jié)腸炎等疾病的影響［2-3］。因此，探索新的血清腫瘤標(biāo)志物對(duì)乳腺癌早期篩查意義重大。癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞黏附分子1（CEACAM1）是CEA 家族的重要成員，能夠通過介導(dǎo)細(xì)胞黏附參與腫瘤細(xì)胞分化、遷移和凋亡等生物學(xué)過程［4-5］。四跨膜蛋白超家族成員 1（TM4SF1）為跨膜四蛋白超家族中的一員，可參與腫瘤細(xì)胞新陳代謝和微環(huán)境形成，能夠調(diào)控腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲和遷移等［6-7］。以往研究發(fā)現(xiàn)，CEACAM1、TM4SF1 在乳腺癌組織中高表達(dá)［8-9］。但二者在乳腺癌患者血清中的水平變化尚不明確。本研究探討了乳腺癌患者血清CEACAM1、TM4SF1 水平變化及其臨床意義?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2015年1月—2020年12月昆山市中醫(yī)醫(yī)院收治的女性乳腺癌患者100 例（觀察組）。所有患者經(jīng)組織病理檢查明確診斷。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合乳腺癌診斷標(biāo)準(zhǔn)；②初診，入組前未接受任何抗腫瘤治療；③年齡≥18 歲；④女性；⑤臨床病理資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他部位腫瘤者；②合并心、肝、腎等重要臟器嚴(yán)重疾病者；③合并全身感染性疾病者；④合并血液系統(tǒng)疾病者。患者年齡25～65（50.87 ± 10.53）歲，其中≥50 歲36 例、＜50歲64例；腫瘤直徑：≥4 cm 47例，＜4 cm 53例；病理類型：浸潤性癌43 例，非浸潤性癌57 例；雌激素受體：陽性72例，陰性28例；孕激素受體：陽性57例，陰性43 例；組織分化程度：低分化41 例，中高分化59 例；TNM 分期［10］：Ⅰ、Ⅱ期49 例，Ⅲ、Ⅳ期51 例；轉(zhuǎn)移：無轉(zhuǎn)移53例，局部轉(zhuǎn)移29例，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移18例。同期選擇在昆山市中醫(yī)醫(yī)院體檢健康的女性志愿者50 例（對(duì)照組），年齡22～68（51.54±10.75）歲。兩組年齡具有可比性。本研究經(jīng)昆山市中醫(yī)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（審批編號(hào)：20200812），所有研究對(duì)象或其家屬知情同意并簽署書面知情同意書。

1.2 血清CEACAM1、TM4SF1、CEA、CA15-3檢測(cè) 觀察組入院次日，對(duì)照組體檢當(dāng)日，采集空腹肘靜脈血3 mL，3 000 r/min離心10 min、離心半徑8 cm，留取上層血清，-80 ℃冰箱保存，72 h 內(nèi)完成檢測(cè)。采用Multiskan?FC酶標(biāo)儀、ELISA法檢測(cè)血清CEACAM1、TM4SF1、CEA、CA15-3。CEACAM1 ELISA 試劑盒購自北京百奧萊博科技有限公司，TM4SF1 ELISA試劑盒購自上海撫生實(shí)業(yè)有限公司，CEA ELISA 試劑盒購自上海江萊生物科技有限公司，CA15-3 ELISA 試劑盒購自上海梵態(tài)生物科技有限公司。所有操作嚴(yán)格按照儀器操作規(guī)程和試劑盒說明進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS26.0 統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)。計(jì)量資料經(jīng)Shapiro-Wilk 檢驗(yàn)，符合正態(tài)分布的以表示，結(jié)果比較采用t檢驗(yàn)或F檢驗(yàn)；符合偏態(tài)分布的以M（P25，P75）表示，結(jié)果比較采用U檢驗(yàn)或H檢驗(yàn)。預(yù)測(cè)效能分析采用受試者工作特征（ROC）曲線，曲線下面積（AUC）比較采用Hanley & McNeil法。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清 CEACAM1、TM4SF1、CEA、CA15-3水平比較 見表1。

表1 兩組血清CEACAM1、TM4SF1、CEA、CA15-3水平比較

2.2 乳腺癌患者血清CEACAM1、TM4SF1 水平與臨床病理特征的關(guān)系 見表2。

表2 乳腺癌患者血清CEACAM1、TM4SF1水平與臨床病理特征的關(guān)系（ng/mL）

2.3 血 清 CEACAM1、TM4SF1、CEA、CA15-3 水平對(duì)乳腺癌的診斷效能分析 ROC 曲線分析顯示，血清CEACAM1、TM4SF1 水平聯(lián)合診斷乳 腺 癌 的AUC高 于 血 清 CEA、CA15-3、CEACAM1、TM4SF1 水平單獨(dú)（P均＜0.01）。見 表 3、圖 1。

圖1 血清CEACAM1、TM4SF1、CEA、CA15-3水平診斷乳腺癌的ROC曲線

表3 血清CEACAM1、TM4SF1、CEA、CA15-3水平診斷乳腺癌的效能分析

3 討論

乳腺癌是由乳腺上皮細(xì)胞增殖失控進(jìn)而惡變形成的惡性腫瘤。隨著人口老齡化加劇、生活節(jié)奏加快和生活方式轉(zhuǎn)變，乳腺癌的發(fā)病率逐年升高，并且發(fā)病人群呈年輕化趨勢(shì)［11］。近年來，隨著手術(shù)、放化療、靶向治療、免疫治療等綜合治療策略不斷發(fā)展，乳腺癌患者預(yù)后得到極大改善。但乳腺癌早期癥狀不典型，等到出現(xiàn)明顯癥狀就診時(shí)大多數(shù)患者已進(jìn)展至中晚期，即使多學(xué)科綜合治療仍難以改善預(yù)后，中位生存期僅2～3 年［12］。因此，早期診斷對(duì)延長(zhǎng)乳腺癌患者生存期具有重要意義。目前，乳腺癌早期篩查主要依靠影像學(xué)檢查、血清腫瘤標(biāo)志物等，但影像學(xué)檢查的假陽性率較高，血清CEA、CA15-3 雖然是乳腺癌重要的特異性標(biāo)志物，但易受多種因素影響，靈敏度較低。因此，探索新的血清腫瘤標(biāo)志物對(duì)乳腺癌早期篩查的意義重大。

細(xì)胞黏附分子異常表達(dá)或功能喪失能夠引起細(xì)胞調(diào)控機(jī)制失?；驉盒赞D(zhuǎn)化，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞黏附能力降低，繼而從腫瘤原發(fā)灶上脫離形成游離細(xì)胞，破壞細(xì)胞外基質(zhì)，促使腫瘤細(xì)胞突破結(jié)締組織，引起腫瘤細(xì)胞浸潤和遷移［13］。因此，細(xì)胞黏附分子異常表達(dá)或功能喪失對(duì)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展至關(guān)重要。CEACAM1 基因定位于人染色體19q13.2，其編碼蛋白廣泛表達(dá)于內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等，能夠通過鄰近細(xì)胞表達(dá)的N 末端免疫球蛋白區(qū)域或p27、CEA 等中介因子調(diào)控細(xì)胞黏附。陳立新等［14］研究報(bào)道，甲狀腺癌組織CEACAM1 高表達(dá)，并且其表達(dá)與腫瘤惡性程度呈正相關(guān)關(guān)系。KANG 等［15］研究發(fā)現(xiàn)，腎細(xì)胞癌組織CEACAM1 低表達(dá)，下調(diào)CEACAM1 表達(dá)會(huì)促進(jìn)腎細(xì)胞癌血管生成。以上研究結(jié)果表明，CEACAM1 在不同腫瘤中發(fā)揮的作用不同。本研究結(jié)果顯示，觀察組血清CEACAM1 水平顯著高于對(duì)照組，與顧立學(xué)等［8］研究結(jié)果一致。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，乳腺癌患者血清CEACAM1 水平與腫瘤組織分化程度、TNM 分期、局部或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)。提示CEACAM1 在乳腺癌中可能發(fā)揮促癌作用，血清CEACAM1 水平升高與乳腺癌惡性進(jìn)展密切相關(guān)，這可能與CEACAM1 能夠介導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞黏附有關(guān)。近年研究發(fā)現(xiàn)，免疫功能紊亂與乳腺癌發(fā)生密切相關(guān)，而CEACAM1可作為T細(xì)胞活化后的協(xié)同受體，抑制T細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子，從而調(diào)控機(jī)體的 免 疫 功 能［16］。 STEIN 等［17］研 究 報(bào) 道 ，上 調(diào)CEACAM1表達(dá)能夠抑制T細(xì)胞活性，促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞免疫逃逸，進(jìn)而促進(jìn)乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展。

四跨膜蛋白超家族是一個(gè)以四個(gè)高度保守的跨膜結(jié)構(gòu)為特征的蛋白家族，能夠通過與細(xì)胞表面多種跨膜蛋白形成復(fù)合物，從而參與調(diào)控細(xì)胞的多種生物學(xué)行為。TM4SF1 基因定位于人染色體3q25.1，其編碼蛋白通常位于細(xì)胞表面，能將細(xì)胞外信號(hào)傳送至細(xì)胞質(zhì)中，主要參與細(xì)胞生長(zhǎng)和上皮間質(zhì) 轉(zhuǎn) 化（EMT）調(diào) 控［18］。 TANG 等［19］研 究 報(bào) 道 ，TM4SF1能夠通過Wnt/β-catenin/Y染色體性別決定區(qū)-盒轉(zhuǎn)錄因子2 信號(hào)通路，促進(jìn)結(jié)直腸癌細(xì)胞EMT，進(jìn)而促進(jìn)結(jié)直腸癌細(xì)胞增殖、侵襲和遷移。FU 等［20］研究發(fā)現(xiàn)，TM4SF1 能夠通過調(diào)節(jié) Yes 相關(guān)蛋白/轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)締合域信號(hào)通路，促進(jìn)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞增殖、侵襲和遷移。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，觀察組血清TM4SF1水平顯著高于對(duì)照組，與既往高新雅等［9］報(bào)道一致。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，乳腺癌患者血清TM4SF1 水平與腫瘤組織分化程度、TNM 分期、局部或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)。提示TM4SF1 在乳腺癌中亦發(fā)揮促癌作用，血清TM4SF1 水平升高與乳腺癌惡性進(jìn)展密切相關(guān)，其機(jī)制可能與TM4SF1 能夠調(diào)控乳腺癌細(xì)胞EMT 有關(guān)。EMT 是指細(xì)胞從上皮狀態(tài)向間質(zhì)狀態(tài)轉(zhuǎn)換的過程，該過程中會(huì)修飾細(xì)胞表達(dá)的黏附分子，使細(xì)胞具備遷移和侵襲能力，從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的惡性生物學(xué)行為［21］。而TM4SF1 能夠通過Ras 同族體基因信號(hào)通路介導(dǎo)EMT［18］。近期亦有研究報(bào)道，上調(diào)TM4SF1 表達(dá)能夠促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞EMT，進(jìn)而促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞增殖、侵襲和遷移［22］。

本研究ROC 曲線分析顯示，血清CEACAM1、TM4SF1 水平診斷乳腺癌的AUC分別為0.770、0.787，稍高于傳統(tǒng)血清腫瘤標(biāo)志物CEA、CA15-3，提示CEACAM1、TM4SF1可作為乳腺癌早期診斷的新型腫瘤標(biāo)志物。血清CEACAM1、TM4SF1水平聯(lián)合診斷乳腺癌的AUC為0.872，顯著高于血清CEA、CA15-3、CEACAM1、TM4SF1 單 獨(dú) ，說 明 血 清 CEACAM1、TM4SF1水平聯(lián)合能夠提高對(duì)乳腺癌的診斷價(jià)值。

綜上所述，乳腺癌患者血清CEACAM1、TM4SF1水平升高，且其水平與組織分化程度、TNM 分期、局部或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)。CEACAM1、TM4SF1 可作為診斷乳腺癌的血清生物標(biāo)志物。但CEACAM1、TM4SF1 參與乳腺癌的具體分子機(jī)制尚不清楚，仍需進(jìn)一步研究。