核酸到底是怎么檢測(cè)的

Eggy&安琪

新冠肺炎出現(xiàn)后，有多種方法可以用來(lái)檢測(cè)人是否感染了新冠病毒，其中既準(zhǔn)確又方便的一種檢測(cè)方法就是“核酸檢測(cè)”。核酸檢測(cè)結(jié)果陰性為正常，陽(yáng)性則相反。

核酸檢測(cè)是如何操作的呢？

第一步，醫(yī)護(hù)人員會(huì)采集我們的鼻拭子或咽拭子——用一根長(zhǎng)長(zhǎng)的棉簽擦拭鼻腔后壁或咽后壁及兩側(cè)咽扁桃體位置的分泌物。

采集鼻拭子會(huì)讓大部分人很難受。采集咽拭子更方便，而且給人帶來(lái)的刺激更小。但對(duì)醫(yī)護(hù)人員來(lái)說(shuō)，采集鼻拭子比采集咽拭子的暴露風(fēng)險(xiǎn)更低，安全系數(shù)更高。

第二步，迅速將拭子頭伸進(jìn)試管里的細(xì)胞保存液中，折斷棉簽后立刻擰緊管蓋。

通常情況下，如果患者感染了新冠病毒，拭子應(yīng)該能夠從鼻咽中提取到病毒。然而，有時(shí)病毒可能正在遠(yuǎn)離棉簽刮蹭位置的部位繁殖，或者采集位置周圍還沒(méi)有足夠多的病毒。所以核酸檢測(cè)結(jié)果陰性有可能意味著沒(méi)有感染新冠病毒，但也可能意味著感染了病毒，只是處于潛伏期，病毒還不能被檢測(cè)出來(lái)，或者采集時(shí)拭子刮錯(cuò)了地方。

這就是為什么我們需要進(jìn)行多次核酸檢測(cè)。如果連續(xù)多次核酸檢測(cè)結(jié)果都呈陰性，通常就說(shuō)明我們沒(méi)有感染新冠病毒。

第三步，負(fù)責(zé)采集拭子的醫(yī)護(hù)人員會(huì)將采集到的樣本先放進(jìn)密封的袋子，再裝進(jìn)帶有“病原微生物檢測(cè)樣本”“送檢專用”標(biāo)志的密封生物運(yùn)輸手提箱中，由身著防護(hù)服的專人負(fù)責(zé)，乘坐封閉隔離的專車，按照規(guī)定的路線，在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)將樣本送到檢測(cè)機(jī)構(gòu)。

這樣嚴(yán)格操作的原因是，核酸樣本具有比較復(fù)雜的分子結(jié)構(gòu)，對(duì)溫度非常敏感。假如在運(yùn)輸過(guò)程中環(huán)境條件不符合要求，就可能導(dǎo)致樣本喪失活性，那樣拭子就白采集了。

另外，核酸樣本是高風(fēng)險(xiǎn)樣本，如果在轉(zhuǎn)運(yùn)環(huán)節(jié)發(fā)生泄漏、污染等現(xiàn)象，會(huì)嚴(yán)重威脅醫(yī)護(hù)人員的生命健康。

送檢的步驟環(huán)環(huán)相扣，最后，核酸樣本會(huì)被送到特定的核酸檢測(cè)機(jī)構(gòu)。到達(dá)檢測(cè)機(jī)構(gòu)/方艙實(shí)驗(yàn)室后，醫(yī)護(hù)人員會(huì)先對(duì)轉(zhuǎn)運(yùn)箱進(jìn)行噴灑消毒，再對(duì)里面的標(biāo)本密封袋進(jìn)行終末消毒，然后拆開(kāi)密封袋，將樣本試管按順序取出，上架排好，錄入所有試管信息。

接下來(lái)，就是發(fā)生在實(shí)驗(yàn)室中的核酸檢測(cè)工作。

核酸檢測(cè)是一項(xiàng)高度靈敏且精密的實(shí)驗(yàn)，每一個(gè)方艙都是專門為核酸檢測(cè)建立的，符合特殊的環(huán)境要求。核酸樣本的檢測(cè)基本上全程都需要由檢測(cè)人員手工操作。

第一步，就是將核酸樣本中的病毒遺傳物質(zhì)（核糖核酸）提取出來(lái)。檢驗(yàn)人員需要戴著雙層乳膠手套，從生物安全柜上謹(jǐn)慎地吸取樣本，然后將其加入核酸提取板孔中，再將核酸樣本安全地放回原處。

在這一過(guò)程中，檢驗(yàn)人員與新冠病毒可能只隔著兩層手套的距離——2毫米。

第二步就到了標(biāo)本擴(kuò)增環(huán)節(jié)。簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)，擴(kuò)增的原理就是讓病毒中的遺傳物質(zhì)快速以指數(shù)倍增長(zhǎng)，一個(gè)變兩個(gè)，兩個(gè)變四個(gè)，四個(gè)變八個(gè)……直到百萬(wàn)甚至百億倍。

這樣做的目的是讓標(biāo)本中可能存在的病毒含量增多，從而可以更容易地檢測(cè)到新冠病毒。

擴(kuò)增過(guò)程需要通過(guò)PCR（polymerase chain reaction，聚合酶鏈反應(yīng)）完成。PCR是20世紀(jì)80年代中期發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)體外核酸擴(kuò)增技術(shù)，其發(fā)明者因此項(xiàng)技術(shù)在1993年被授予諾貝爾獎(jiǎng)。

第三步就是將擴(kuò)增后的PCR產(chǎn)物，即DNA片段放入專門的儀器中開(kāi)始檢測(cè)。這里有一個(gè)關(guān)鍵指標(biāo)是Ct值。Ct值指的是擴(kuò)增循環(huán)次數(shù)。

因?yàn)椴《緮U(kuò)增時(shí)是以2的指數(shù)倍增長(zhǎng)，在PCR循環(huán)中，隨著循環(huán)數(shù)增大，病毒數(shù)量也不斷增多，當(dāng)Ct值達(dá)到檢測(cè)所需的最低值，并且反應(yīng)體系中的RNA病毒數(shù)引發(fā)了熒光反應(yīng)時(shí)，就可以判定為陽(yáng)性。

簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)，Ct值越低，說(shuō)明陽(yáng)性越強(qiáng)；Ct值越高，說(shuō)明陽(yáng)性越弱。

根據(jù)國(guó)家衛(wèi)健委最新發(fā)布的《新型冠狀病毒肺炎診療方案（試行第九版）》，新冠病毒感染陽(yáng)性的判定標(biāo)準(zhǔn)是Ct值<35時(shí)熒光反應(yīng)為陽(yáng)性。

一般來(lái)說(shuō)，核酸檢測(cè)的準(zhǔn)確率可以達(dá)到95%以上。但是由于各種原因，檢測(cè)結(jié)果還是會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性的情況，所以初篩實(shí)驗(yàn)室會(huì)向疾控中心報(bào)告“疑似陽(yáng)性”，然后根據(jù)疾控中心的要求轉(zhuǎn)運(yùn)原管標(biāo)本以供復(fù)核。

核酸檢測(cè)過(guò)程到這里還沒(méi)有結(jié)束，檢測(cè)人員還需要對(duì)所有的擴(kuò)增結(jié)果進(jìn)行分析，例如同樣本檢測(cè)的陰陽(yáng)性質(zhì)控結(jié)果是否在控、基線設(shè)置及樣本結(jié)果是否正常等。

當(dāng)陰陽(yáng)性質(zhì)控全部符合檢測(cè)要求時(shí)，檢測(cè)人員還需要排除樣本假陰性、假陽(yáng)性的可能，同時(shí)對(duì)異常結(jié)果樣本及時(shí)進(jìn)行復(fù)核，在所有結(jié)果都核對(duì)無(wú)誤后，最終報(bào)告才能上傳。