OPG、RANK、RANKL及血液學(xué)指標(biāo)水平變化與股骨頭壞死的相關(guān)性研究*

李文茜，郭永昌，田亮玉，沈彩紅，馮小艷，張大鵬，郭家巧，曹玉舉

(鄭州中醫(yī)骨傷病醫(yī)院，河南 鄭州 450000)

股骨頭壞死(ONFH)是一種致殘率高的臨床常見骨科疑難性疾病[1]。骨保護(hù)素(OPG)和核因子κB受體活化因子(RANK)是腫瘤壞死因子-α受體超家族成員[2]。OPG、核因子κB受體活化因子配體(RANKL)、RANK信號在骨重建中具有重要作用，激活后促進(jìn)破骨細(xì)胞分化，影響骨吸收[3]。RANKL與RANK結(jié)合使破骨前體細(xì)胞接收信號分子，促進(jìn)破骨細(xì)胞分化。RANKL/OPG比值是評價(jià)骨健康與調(diào)節(jié)骨吸收平衡的重要杠桿指標(biāo)[4]，其增加則增強(qiáng)骨質(zhì)吸收，促進(jìn)成骨細(xì)胞凋亡，使骨形成延遲。OPG能抑制破骨細(xì)胞分化和活性，延緩破骨前體細(xì)胞活化，維持骨代謝平衡[5]。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，激素和酒精能誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為脂肪細(xì)胞而引起血脂代謝異常[6]。本研究探討了ONFH病因、中醫(yī)證型與OPG、RANKL、RANK、血液學(xué)指標(biāo)的關(guān)系，尋找一種能判斷影響ONFH發(fā)生、發(fā)展和防治的方法，對早期診斷、治療及遠(yuǎn)期療效的評定具有重要意義。

1 資料與方法

1.1資料

1.1.1一般資料 選取2019年7-12月鄭州中醫(yī)骨傷病醫(yī)院收治的ONFH 患者84例作為ONFH組，符合ONFH治療指南診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]，通過X射線、MRI等影像檢查確診。其中男67例，女17例；年齡18～70歲，平均(43.33 ± 10.37)歲；青年(18～<40歲)32例(青年組)，中年(40～<60歲)47例(中年組)，老年(≥60歲)5例(老年組)；病因：激素性14例(激素組)，酒精性44例(酒精組)，特發(fā)性21例(特發(fā)組)，創(chuàng)傷性5例(創(chuàng)傷組)；肝腎虧虛證36例(肝腎虧虛組)，濕熱蘊(yùn)結(jié)證48例(濕熱蘊(yùn)結(jié)組)。選取同期健康體檢者81例作為對照組，其中男55例，女26例；平均年齡(41.19±11.96)歲。ONFH組患者性別、年齡等一般資料與對照組比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。見表1。本研究經(jīng)鄭州中醫(yī)骨傷病醫(yī)院倫理委員會審批(審批號：20190702)。

表1 ONFH組和對照組一般資料比較

1.1.2中醫(yī)證型標(biāo)準(zhǔn) 參照國家中醫(yī)藥管理局制定的1994年版《中醫(yī)病證診斷療效標(biāo)準(zhǔn)》[8]和國家藥品監(jiān)督管理局2002年編寫的《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則(試行)》[9]，初步擬定中醫(yī)證候診斷標(biāo)準(zhǔn)：(1)肝腎虧虛證。癥見髖部隱痛，腰膝酸軟，行走乏力，伴或不伴心煩失眠、口苦咽干、面色潮紅，關(guān)節(jié)活動受限、腹股溝區(qū)壓痛等，舌紅，苔白或黃，脈細(xì)數(shù)為腎虛血瘀之象。(2)濕熱蘊(yùn)結(jié)證。濕熱內(nèi)蘊(yùn)所致的癥候，證見脘腹脹悶、口渴少飲、嘔惡納呆、肢體困重、便溏不爽等，舌苔黃膩。

1.1.3排除標(biāo)準(zhǔn) (1)合并其他大關(guān)節(jié)病變者；(2)合并高血壓、糖尿病、冠心病等慢性疾病者；(3)妊娠或哺乳期婦女；(4)嚴(yán)重肝、腎功能損傷者。

1.1.4主要試劑及設(shè)備 OPG、RANK、RANKL試劑盒(南京卡米洛生物工程有限公司，批號：H-KMLJ37638，H-KMLJ386111，H-KMLJ36021)，全自動生化分析儀(AU680，Beckman Coulter，Japan)，酶標(biāo)儀(Multiskan FC，Thermo，USA)等。

1.2方法

1.2.1OPG、RANK、RANKL和血液學(xué)指標(biāo)檢測 血液標(biāo)本取ONFH組和對照組研究對象晨間肘靜脈血。迅速送至鄭州中醫(yī)骨傷病醫(yī)院檢驗(yàn)科分析凝血4項(xiàng)[包括凝血酶原時(shí)間(PT)、活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)、凝血酶時(shí)間(TT)、纖維蛋白原(Fg)]和血脂6項(xiàng)[包括總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、載脂蛋白A(ApoA)和載脂蛋白B(ApoB)]。采用酶聯(lián)免疫吸附測定法檢測血清OPG、RANK、RANKL等，操作均嚴(yán)格按儀器和試劑盒說明書進(jìn)行。

1.2.2觀察指標(biāo) 觀察各組研究對象OPG、RANK、RANKL及血液學(xué)指標(biāo)，并分析OPG、RANK、RANKL及血液學(xué)指標(biāo)與ONFH、中醫(yī)證型的相關(guān)性。

2 結(jié) 果

2.1ONFH組和對照組患者OPG、RANK、RANKL和血液學(xué)指標(biāo)比較 與對照組比較，ONFH組患者血清OPG水平明顯降低，RANK、RANKL水平，以及RANKL/OPG比值均明顯增加，TC、TG、LDL ApoB水平明顯升高，ApoA、HDL水平均明顯降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 ONFH組和對照組患者OPG、RANK、RANKL和血液學(xué)指標(biāo)比較

2.2不同年齡ONFH組患者OPG、RANK、RANKL和血液學(xué)指標(biāo)比較 84例ONFH患者中青年人占55.95%(32/81)，老年人占6.17%(5/81)。中年組患者RANKL/OPG比值明顯高于老年組，青年、中年組患者LDL、ApoB水平及APTT均明顯低于老年組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 不同年齡ONFH組患者OPG、RANK、RANKL和血液學(xué)指標(biāo)比較

2.3不同病因ONFH組患者OPG、RANK、RANKL和血液學(xué)指標(biāo)比較 酒精組患者RANK、RANKL、OPG水平明顯高于創(chuàng)傷組，RANK水平明顯高于激素組，激素組、酒精組和特發(fā)組患者APTT、PT、TT均明顯高于創(chuàng)傷組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表4。

表4 不同病因ONFH組患者OPG、RANK、RANKL和血液學(xué)指標(biāo)比較

2.4不同中醫(yī)證型ONFH組患者OPG、RANK、RANKL和血液學(xué)指標(biāo)比較 濕熱蘊(yùn)結(jié)組患者RANKL水平明顯高于肝腎虧虛組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；肝腎虧虛證組患者血液學(xué)指標(biāo)與溫?zé)崽N(yùn)結(jié)組比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表5。

表5 不同中醫(yī)證型ONFH組患者OPG、RANK、RANKL和血液學(xué)指標(biāo)比較

續(xù)表5 不同中醫(yī)證型ONFH組患者OPG、RANK、RANKL和血液學(xué)指標(biāo)比較

3 討 論

ONFH是一種臨床常見的骨科疾病。RANK、RANKL、OPG是控制成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞分化和活性的關(guān)鍵調(diào)節(jié)機(jī)制[10]。由于激素使用不當(dāng)、長期大量飲酒和原發(fā)性因素引起股骨頭內(nèi)血液循環(huán)障礙，最終導(dǎo)致髖關(guān)節(jié)功能受損和殘疾[11]。在此基礎(chǔ)上引起血脂代謝紊亂，使體內(nèi)脂肪分解，血液中游離脂肪酸增多，血管內(nèi)皮受損，激活血管內(nèi)凝血機(jī)制形成血栓，造成股骨頭動脈灌注不足，靜脈回流障礙，導(dǎo)致股骨頭缺血、壞死[12]。有研究表明，酒精性O(shè)NFH患者LDL、ApoB增高而HLD、ApoA較低。

本研究結(jié)果顯示，ONFH組患者RANK、RANKL、OPG水平及RANKL/OPG值，TC、TG、HDL、LDL、ApoA、ApoB水平與對照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。ONFH組的老年組患者RANKL/OPG比值最低，而LDL、ApoB、APTT較高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，表明影響了血脂和凝血功能。ONFH組的酒精組患者與創(chuàng)傷組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，表明酒精可引起RANK、RANKL、OPG改變。酒精和激素可引起凝血指標(biāo)即PT、TT、APTT、Fg改變。ONFH組的濕熱蘊(yùn)結(jié)組患者RANKL水平明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

ONFH患者血管內(nèi)脂肪栓子形成和血管外脂肪組織蓄積均有可能導(dǎo)致血流學(xué)改變，血管損傷是由于在高凝狀態(tài)下凝血障礙導(dǎo)致血管閉塞。ONFH患者脂質(zhì)代謝異常是一個重要的危險(xiǎn)因素，自身免疫性疾病或炎性疾病患者長期應(yīng)用糖皮質(zhì)激素的血脂水平與對照組存在明顯差異。本研究結(jié)果顯示，酒精對RANK、RANKL、OPG、RANKL/OPG比值影響較為顯著，激素和酒精能觸發(fā)血管內(nèi)凝血機(jī)制，導(dǎo)致ONFH，在治療過程中應(yīng)關(guān)注此項(xiàng)指標(biāo)。肝腎虧虛證和濕熱蘊(yùn)結(jié)癥患者RANK、RANKL、OPG、RANKL/OPG信號、血脂代謝過程影響不大，可不作為參考指標(biāo)。在后期的研究中將RANK、RANKL、OPG、RANKL/OPG信號及凝血4項(xiàng)異常指標(biāo)作為微觀生物標(biāo)記，為深入的臨床療效評價(jià)提供客觀依據(jù)。