滑鼠蛇橫紋肌肉瘤的臨床癥狀與病理學(xué)觀察

黃瀟航 陳 榕 彭佳佳 李詩藝 賀金峪 王詩晨張 龍 白云鵬 祁保民 黃志堅 殷光文*

(1.福建農(nóng)林大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院(蜂學(xué)學(xué)院)，福州，350002；2.福建省動物藥物工程實驗室，福州，350002；3.福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，福州，350013)

腫瘤病是困擾動物的一種常見疾病，誘發(fā)原因較多。腫瘤對宿主動物的危害，主要是通過血液、淋巴組織等轉(zhuǎn)移、侵襲其他器官，或直接侵襲周圍組織，對其他器官和周圍組織的血管產(chǎn)生一定的影響，造成出血、感染，甚至導(dǎo)致機體的消耗，出現(xiàn)嚴重的惡病質(zhì)、全身轉(zhuǎn)移性病變。肌肉瘤是多發(fā)生于肌肉組織間的腫瘤病，其中，骨髓轉(zhuǎn)移性橫紋肌肉瘤具有彌漫浸潤的中等大型異型細胞、胞質(zhì)量少和核不規(guī)則等臨床特征[1]。Matsuo等[2]報道了分泌瘤出現(xiàn)肌間轉(zhuǎn)移的臨床病例，Howe等[3]提出CT等手段對肌肉瘤的診斷具有重要的輔助作用，Pretell-mazzini等[4]認為骨骼肌轉(zhuǎn)移經(jīng)常表現(xiàn)為可觸及的疼痛腫塊，伴有或不伴有腫脹。軟組織肉瘤的形成是骨骼肌癌轉(zhuǎn)移的重要標志，盡管目前對于腫瘤的臨床鑒別及診斷方法已經(jīng)有了較大發(fā)展，但是病理學(xué)診斷依舊是腫瘤診斷的金標準。

國內(nèi)關(guān)于蛇類腫瘤性疾病的報道資料較少，筆者近期接診1例滑鼠蛇(Ptyasmucosus)橫紋肌肉瘤案例，是國內(nèi)首次針對滑鼠蛇自發(fā)性腫瘤病的臨床病理研究，供同行參考。

1 病例簡介

雌性滑鼠蛇，體長210 cm，體重1.33 kg，體表鱗片較為雜亂，精神沉郁，食欲廢絕，腰椎部位有2個大小較明顯的瘤狀突起，運動機能下降。飼主口述該蛇育肥期曾使用自家調(diào)制的混合飼料，平時主要飼喂脫毛雛雞和雛鵪鶉。

2 診斷方法

2.1 常規(guī)診斷

觸診瘤狀突起后，使用X光對病蛇疑似腫瘤部位進行正位和側(cè)位拍攝。

乙醚麻醉后心臟采血，采用爬行動物專業(yè)血液生化指標檢測盤檢測滑鼠蛇血液生理生化指標。采用血細胞板進行人工血液細胞計數(shù)。

2.2 病理學(xué)診斷

在滑鼠蛇救助無效死亡后，經(jīng)飼主同意，常規(guī)剖檢。對腫物外觀形態(tài)學(xué)觀察，按照組織固定、包埋、切片等步驟，采用蘇木精-伊紅染色法(HE染色)進行腫瘤病理學(xué)研究。染色主要步驟為：切片入蘇木素染液2 min，自來水清洗，分化液分化，自來水清洗，返藍液返藍，流水沖洗，伊紅染液染色3 min。切片委托福州都拜特生物公司制備。

3 結(jié)果與分析

3.1 臨床檢查

臨床觀察滑鼠蛇體表有較明顯的卵圓形瘤狀突起。觸診發(fā)現(xiàn)，突起質(zhì)地堅實，無波動感，觸診無劇烈反應(yīng)。腫物導(dǎo)致滑鼠蛇運動受到較大限制，游動緩慢。

3.2 實驗室檢查

通過穿刺采集腫脹部位的內(nèi)容物進行細胞學(xué)檢測和細胞計數(shù)。小腫物進針難度較大，阻力較強，針頭采集組織成分可見大量蛋白質(zhì)沉淀物質(zhì)，未見顯著的細胞成分。細胞計數(shù)結(jié)果表明，病蛇血象出現(xiàn)幼稚型紅細胞，異嗜細胞為33%，單核細胞為48%，淋巴細胞為19%，未見幼稚型淋巴細胞、嗜酸性粒細胞和嗜堿性粒細胞。

3.3 影像學(xué)檢查

X光影像未顯示腫物內(nèi)部有骨組織結(jié)構(gòu)，但出現(xiàn)實質(zhì)化，并存在鈣化灶，大體色澤淺于骨影(圖1)。

圖1 滑鼠蛇腫瘤生長部位X光檢查結(jié)果Fig.1 X-ray examination of tumor growth site of Ptyas mucosus

3.4 血液檢查

滑鼠蛇血液生化檢測結(jié)果見表1。

表1 滑鼠蛇血液生化檢測結(jié)果

3.5 臨床剖檢

剖檢可見2個腫物位于體腔脊柱內(nèi)側(cè)，呈結(jié)節(jié)性增生(圖2A)。小腫物橫徑為6.0 cm，外觀呈白色，形狀不規(guī)則；大腫物橫徑為8.0 cm，外觀呈黑色，形狀似圓球(圖2B、C)。小腫物表面光滑，質(zhì)地較硬，內(nèi)部為實質(zhì)增生，切開后可見較典型的白色分層，質(zhì)地由外到內(nèi)逐漸變軟(圖2D、E)；大腫物為實質(zhì)，內(nèi)有少量膿液堆積，摘除后有大量的惡臭氣味，內(nèi)部呈現(xiàn)分層結(jié)構(gòu)，為肉質(zhì)增生，質(zhì)地較硬，外部層腐爛，部分伴有少量膿性增生(圖2F)。

圖2 滑鼠蛇腫物病理剖檢結(jié)果Fig.2 Pathological analysis results of Ptyas mucosus

3.6 組織病理學(xué)觀察

鏡下小腫物(圖3A-D，HE，×100)中可見大量具有嗜酸性胞漿的、組織細胞樣細胞的增生(黑色箭頭指示)，局部可見大量粉色的、具有多核的巨細胞(紅色箭頭指示)及大量鈣化灶(黃色箭頭指示)，局部結(jié)構(gòu)疏松，大量毛細血管擴張(綠色箭頭指示)。大腫物(圖4A、B，HE，×100)中可見大量具有嗜酸性胞漿的、組織細胞樣細胞的增生(黑色箭頭指示)，局部可見大量具有多核的巨細胞(紅色箭頭指示)及較多鈣化灶(黃色箭頭指示)，局部壞死(綠色箭頭指示)，可見較多毛細血管淤血擴張(藍色箭頭指示)。纖維組織大片壞死，胞核固縮深染或碎裂溶解，可見較多鈣化灶(黑色箭頭指示)，偶見少量嗜堿性粉末物質(zhì)，疑似菌團(紅色箭頭指示)(圖3C、D，HE，×100)。鈣化灶的存在與X光檢測結(jié)果一致。

圖4 滑鼠蛇大腫物的組織病理(HE，×100)Fig.4 Histopathological observation of Ptyas mucosus large tumors(HE，×100)

經(jīng)組織病理學(xué)診斷，結(jié)合生前臨床檢查分析，判斷滑鼠蛇罹患橫紋肌肉瘤，橫紋肌肉瘤導(dǎo)致機體營養(yǎng)障礙是死亡的主要原因。

4 討論

滑鼠蛇的養(yǎng)殖技術(shù)在國內(nèi)已較為成熟，而腫瘤病是困擾我國蛇類集約化養(yǎng)殖的一種較為常見的疾病，導(dǎo)致腫瘤性疾病發(fā)生的誘因有很多，如營養(yǎng)因素，細菌、病毒和寄生蟲等微生物的侵襲干擾，或改變細胞正常的基因表達等，但相關(guān)的臨床報道較少。王珊珊等[5]在國內(nèi)首度報道了烏蘇里蝮(Gloydiusussuriensis)多器官罹患軟骨肉瘤的病例，探討了軟骨組織構(gòu)成，發(fā)現(xiàn)其間有不規(guī)則的鈣化。為了提高烏蘇里蝮的健康水平，路生鑫等[6]提出，在人工繁育烏蘇里蝮的過程中，需要精選種蛇，對養(yǎng)殖種群定期篩選。Heckers等[7]在整理爬行動物的腫瘤病例時發(fā)現(xiàn)，20個黑色素瘤中，因血管內(nèi)腫瘤細胞、內(nèi)臟轉(zhuǎn)移、高度多態(tài)性和/或有絲分裂形態(tài)而惡變的腫瘤有6個。Muoz-Gutiérrez等[8]向私人診斷實驗室提交的4 663份蛇群腫瘤報告中，鑒定出42份色細胞瘤，其中最常見的是單細胞色素瘤，該類瘤在身體部位多以色素沉著的皮膚塊或斑塊形式出現(xiàn)。Dietz等[9]借助HE染色切片技術(shù)對在德國接診的5例寵物蛇病例進行骨腫瘤研究，發(fā)現(xiàn)病例的脊柱腫瘤均為惡性軟骨腫瘤，其中軟骨肉瘤和去分化軟骨肉瘤的比例約為2∶3。

在我國特種經(jīng)濟動物養(yǎng)殖盛行的情況下，對蛇類的大數(shù)量、高密度和集約化養(yǎng)殖大大改變了蛇群在野外的生活規(guī)律。隨著蛇群規(guī)?；B(yǎng)殖，腫瘤病的發(fā)生概率也在不斷增高，這可能與蛇群營養(yǎng)狀況、機體代謝和疫病在集約化空間中的流行等因素有關(guān)。在本病例小腫物的病理切片中觀察到疑似菌團(圖4D)，提示腫瘤的發(fā)生以及病程發(fā)展可能與細菌存在某種關(guān)聯(lián)，至于是細菌感染導(dǎo)致了腫瘤性疾病的發(fā)生，還是腫瘤后期病灶發(fā)展引起了細菌的繼發(fā)性感染，還需要結(jié)合病原分離等手段開展進一步研究。本病例是國內(nèi)首次對滑鼠蛇腫瘤病的報道，并進行病理組織學(xué)研究，為獸醫(yī)對蛇腫瘤病的診斷提供參考資料。