草魚(yú)出血病的診斷及綜合防治

孫田革

近些年，草魚(yú)因肉質(zhì)緊實(shí)且鮮嫩，得到了廣大消費(fèi)者的喜愛(ài)，已成為我國(guó)目前養(yǎng)殖數(shù)量較多的淡水魚(yú)種之一。草魚(yú)在魚(yú)苗時(shí)期通常以浮游動(dòng)物為食。幼魚(yú)可以采食水中的昆蟲(chóng)，當(dāng)發(fā)育達(dá)到50厘米以上后轉(zhuǎn)為草食。成年時(shí)期的草魚(yú)身長(zhǎng)可達(dá)到100厘米。隨著草魚(yú)需求量的增加，養(yǎng)殖面積也隨之增加，草魚(yú)病害的問(wèn)題日趨嚴(yán)重，尤其是草魚(yú)出血病。草魚(yú)出血病是一類傳染性高、傳播速度快的病毒性疾病，并且已對(duì)草魚(yú)養(yǎng)殖行業(yè)造成一定的威脅。草魚(yú)出血病是于1970年首次發(fā)現(xiàn)。經(jīng)過(guò)不斷研究于1978年確定了該病是由于草魚(yú)呼腸孤病毒引起的。該病不斷危害養(yǎng)殖草魚(yú)，并帶來(lái)嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。

1.1 病原

草魚(yú)出血病，又稱之為“病毒性出血病”其病原是草魚(yú)呼腸孤病毒，該病毒屬于呼腸孤病毒科。草魚(yú)出血病病毒自1978年發(fā)現(xiàn)由草魚(yú)呼腸孤病毒引起后，經(jīng)過(guò)一系列的研究，直至1983年通過(guò)分離病毒的方法從病魚(yú)組織中獲得了濾液感染草魚(yú)，而后經(jīng)過(guò)單層細(xì)胞傳代，成功得到這一病毒，該病毒是一種直徑70納米的球狀病毒，有雙層衣殼，無(wú)囊膜，含有11個(gè)雙鏈RNA片段。同時(shí)，該病毒有較強(qiáng)的酸堿耐受能力，即使在高溫環(huán)境下也可以長(zhǎng)時(shí)間生存。此外，該病毒能夠在敏感的細(xì)胞中產(chǎn)生合胞體狀細(xì)胞病變效應(yīng)。

1.2 流行情況

寄生蟲(chóng)、水體等載體是草魚(yú)出血病主要的傳播工具，其主要危害對(duì)象是長(zhǎng)2.5～15厘米的草魚(yú)或者150～350克/尾的一齡草魚(yú)種。草魚(yú)一旦感染出血病，最先表現(xiàn)出來(lái)的特征就是存活率下降，同時(shí)該病還會(huì)感染其他魚(yú)種，例如羅漢魚(yú)、青魚(yú)、麥穗魚(yú)和稀有鯽等。草魚(yú)出血病有明顯的季節(jié)性，在6～9月高溫季節(jié)發(fā)病，此時(shí)水溫通常在25～28℃，患病后的草魚(yú)死亡率可達(dá)80%以上。根據(jù)調(diào)查顯示，該病毒主要流行于湖北省、江蘇省、河南省、廣東省、福建省、上海市、四川省、河北省、浙江省、廣西區(qū)等養(yǎng)魚(yú)區(qū)域，并且出血病發(fā)病時(shí)節(jié)較長(zhǎng)，致死率較高，嚴(yán)重影響了漁業(yè)養(yǎng)殖的發(fā)展及養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)利益，必須引起高度重視，及時(shí)做好防控。

1.3 主要表現(xiàn)癥狀

草魚(yú)出血病致死率較高，癥狀較為復(fù)雜，可在體內(nèi)外出現(xiàn)一系列明顯癥狀，其中最為基本的表現(xiàn)癥狀是草魚(yú)各大器官或組織充血、出血。從外表癥狀看，病魚(yú)體色呈現(xiàn)暗黑紅色，較小的魚(yú)種在燈光或者陽(yáng)光下透視，明顯見(jiàn)到皮下和肌肉出血，病魚(yú)的下頜、眼光四周及頭頂出現(xiàn)充血現(xiàn)象，并且魚(yú)腔也有明顯出血點(diǎn)，眼球外突。鰓蓋和鰭基都可觀察到充血現(xiàn)象，通常情況下鰓部無(wú)明顯病變，但是由于內(nèi)出血導(dǎo)致鰓部蒼白，俗稱為“白鰓”，也有的鰓瓣呈鮮紅色斑點(diǎn)狀充血。從內(nèi)部病變看，可明顯看出病魚(yú)肌肉呈點(diǎn)狀或塊狀出血，嚴(yán)重時(shí)全身呈現(xiàn)鮮紅色；解剖后發(fā)現(xiàn)腸壁充血，腸內(nèi)無(wú)食物，腸子整體有韌性，并且在內(nèi)部脂肪、膽囊、腎、脾、腸系膜、鰾發(fā)現(xiàn)明顯出血點(diǎn)。其臨床癥狀主要分為3種類型，“紅腸型”“紅鰭紅鰓蓋型”“紅肌肉型”。患病魚(yú)可能出現(xiàn)一種或者兩種以上的癥狀。

2.1 常規(guī)診斷方法

常規(guī)診斷主要分為以下幾方面：（1）對(duì)發(fā)病魚(yú)塘的生長(zhǎng)環(huán)境、日常飼養(yǎng)管理情況、魚(yú)塘水質(zhì)整體狀況、發(fā)病魚(yú)在池塘狀態(tài)等方面做好現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查。（2）仔細(xì)觀察病魚(yú)體內(nèi)外所有情況（3）通過(guò)鏡檢的方式檢查魚(yú)體內(nèi)外是否存在寄生蟲(chóng)。（4）根據(jù)病魚(yú)的品種、規(guī)格、發(fā)病率、死亡率及發(fā)病時(shí)的狀態(tài)等其他情況進(jìn)行綜合判定。

2.2 實(shí)驗(yàn)室診斷方法

通過(guò)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞學(xué)、分子生物學(xué)或者免疫學(xué)等方法可進(jìn)一步確診草魚(yú)出血病。具體操作如下：取病魚(yú)內(nèi)臟組織，在無(wú)菌操作下處理敏感細(xì)胞分離病毒，使用ELISA（酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定）或者RT-PCR法進(jìn)行鑒定，也可以用組織病料制備的病毒懸液直接接種細(xì)胞后取細(xì)胞培養(yǎng)物進(jìn)行特異性RT-PCR，通過(guò)特異性或進(jìn)一步測(cè)序結(jié)果確定病魚(yú)是否感染草魚(yú)出血病。此項(xiàng)技術(shù)方便、準(zhǔn)確、快速、安全，且只需要普通PCR儀和電泳儀就可檢測(cè)，具有較好的特異性和穩(wěn)定性。還可以直接取病魚(yú)的心、脾、腎、肝進(jìn)行病理切片，于顯微鏡下觀察是否出現(xiàn)典型、異常的巨大細(xì)胞或嗜堿性細(xì)胞腫大，進(jìn)而判斷是否患有出血病。

3.1 綜合預(yù)防措施

（1）注重草魚(yú)餌料喂養(yǎng)工作。根據(jù)草魚(yú)的采食特點(diǎn)投放適口性較強(qiáng)的優(yōu)質(zhì)餌料，不能用腐爛餌料，以次充好，餌料的投喂順序應(yīng)當(dāng)先青料后精料，青料以鵝菜、蘇丹草、浮萍等優(yōu)質(zhì)青餌料為主，精餌料應(yīng)當(dāng)為全價(jià)熟化餌料，并且要保證蛋白質(zhì)含量大于30%。與此同時(shí)，為了滿足草魚(yú)不同生長(zhǎng)階段的需求，定期對(duì)餌料進(jìn)行調(diào)整。（2）深度清掃。對(duì)老化池塘的淤泥進(jìn)行全面清除，保持淤泥深度小于20厘米。（3）定期、全面消毒?？衫蒙?、漂白粉、硫酸銅預(yù)防草魚(yú)出血病。具體操作如下：每水深1米占地面積1畝的池塘可用25公斤石灰石進(jìn)行潑灑，再用350克完全溶解的硫酸銅進(jìn)行潑灑，每18天輪換用藥一次，從6月份一直用到9月下旬。同時(shí)堅(jiān)持在食場(chǎng)懸掛硫酸亞鐵合劑和硫酸銅的布袋，并根據(jù)魚(yú)池自身的大小和水深決定掛袋的只數(shù)及用藥量。（4）人工免疫預(yù)防。目前主要分為兩種免疫方式。第一種是浸洗法，用濃度為3%的鹽水浸洗3分鐘左右，再將其放入0.5%疫苗液中浸洗5～10分鐘；第二種是注射法，該方法針對(duì)于體長(zhǎng)達(dá)10厘米以上的草魚(yú)，每尾草魚(yú)在腹腔或者背鰭基部注射0.3～0.5毫升疫苗。（5）注意季節(jié)保護(hù)。6～9月是草魚(yú)出血病流行時(shí)期，需要加強(qiáng)疾病防治工作，采用“內(nèi)外結(jié)合”的方法進(jìn)行全面防治，內(nèi)用板藍(lán)根、維生素B粉、維生素C粉、恩諾沙星等藥物拌餌飼喂，外用亞氯酸酐或聚乙烯等消毒劑殺死病毒，從而提高草魚(yú)自身的免疫力及抗病能力。

3.2 中藥防治措施

中草藥防治是目前使用率較高的方法之一，其優(yōu)點(diǎn)頗多，例如無(wú)毒副作用、抗藥性較小、資源豐富、使用到的藥材容易獲取、性能多樣化等。在有效控制草魚(yú)出血病中，研究、開(kāi)發(fā)和利用中草藥不僅可以解決抗生素及替代品無(wú)法解決的抗藥性及藥物殘留問(wèn)題，而且還可以提高我國(guó)漁業(yè)產(chǎn)品整體質(zhì)量。因此人們?cè)趯?duì)中草藥防治草魚(yú)出血病方面的研究越來(lái)越多，并總結(jié)篩選出較多的應(yīng)用方案?！吨袊?guó)漁業(yè)》報(bào)道稱，研究人員發(fā)現(xiàn)每100公斤草魚(yú)，用洗凈的鮮地榆根1公斤、稻谷10公斤，加水煮至稻谷裂口，待冷卻后喂魚(yú)，經(jīng)過(guò)一段時(shí)間發(fā)現(xiàn)效果顯著。每畝池塘用40公斤粉碎的水花生擠汁后伴入豆餅粉制成藥餌，每天喂2次，連續(xù)用15天，效果明顯。每畝水深1米的池塘用0.6公斤大黃及1.75公斤菜籽油并在水中煮沸30分鐘，待冷卻后二者充分混勻，全池潑灑，可有效防治草魚(yú)出血病。蔣德山和李炳文等用清瘟敗毒飲治療草魚(yú)出血病，按照草魚(yú)體重0.3%做成餌料進(jìn)行飼喂，一星期后觀察未見(jiàn)死魚(yú)，至出塘也沒(méi)有復(fù)發(fā)。

3.3 西藥防治措施

江西省奉新縣畜牧水產(chǎn)局通過(guò)對(duì)草魚(yú)出血病的分析，研究出如下治療方法。先將適量面粉調(diào)制成糊狀，冷卻后加入4克左右腸特靈，然后將面糊均勻曬干投喂到50公斤魚(yú)的日常餌料中，連用3天，效果顯著。每50公斤魚(yú)用0.3～0.6克鹽酸嗎啉胍，同時(shí)加50克食鹽，與餌料拌勻后投喂4～5天。每100公斤魚(yú)用2.5～5克魚(yú)血寧拌餌投喂，連用5天，可預(yù)防草魚(yú)出血病。

3.4 干擾素防治措施

干擾素是一種細(xì)胞因子，主要用來(lái)調(diào)節(jié)細(xì)胞功能，具有抗病毒、抗腫瘤、抑制細(xì)胞增值及調(diào)節(jié)免疫功能等效果，是當(dāng)代醫(yī)學(xué)、生物學(xué)等領(lǐng)域中較為活躍的研究方向。但是目前僅在人類和高等脊椎等領(lǐng)域涉及了干擾素的研究，而在低等動(dòng)物中的研究很少，僅處于開(kāi)始階段。蘇建明等通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，在草魚(yú)受精卵中可用顯微注射法將A-干擾素基因轉(zhuǎn)移進(jìn)去，同時(shí)獲得轉(zhuǎn)基因群體，并通過(guò)PCR技術(shù)對(duì)轉(zhuǎn)基因草魚(yú)進(jìn)行分子水平測(cè)定，檢測(cè)結(jié)果表明，外源人A-干擾素抗病基因可以整合入草魚(yú)基因組中。采用腹腔注射法，對(duì)轉(zhuǎn)基因魚(yú)進(jìn)行草魚(yú)出血病病毒接種攻毒實(shí)驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比轉(zhuǎn)基因草魚(yú)的抗病能力明顯增強(qiáng)。此類藥物是目前為止發(fā)現(xiàn)的最為理想的一種抗病毒生物活性物質(zhì)，但是因成本頗高，在魚(yú)類研究較少，所以還未得到廣泛使用。

綜上所述，草魚(yú)出血病為病毒性疾病，危害性較大，死亡率較高，所以我們應(yīng)秉承著“有效預(yù)防，積極治療”的基本原則，加強(qiáng)養(yǎng)殖過(guò)程中日常管理及預(yù)防工作，并且在用藥過(guò)程中使用安全、有效、科學(xué)的配藥比例，避免產(chǎn)生不必要的損失，這樣才能有效抑制該病的發(fā)生。