北五味子品質(zhì)與果實(shí)性狀的相關(guān)性研究

李 旭，劉 瑩，孫文松*，楊正書

（1.遼寧省經(jīng)濟(jì)作物研究所，遼寧遼陽(yáng) 111000；

2.遼寧省農(nóng)業(yè)科學(xué)院藥用植物研究所，遼寧遼陽(yáng) 111000；3.中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所遼陽(yáng)研究中心，遼寧遼陽(yáng) 111000）

藥材的性狀與藥材的品質(zhì)有著密切的關(guān)系，“辨狀論質(zhì)”是中藥傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)鑒別法的經(jīng)典理論，是依據(jù)藥材外觀性狀、顏色、大小、氣味等對(duì)藥材的內(nèi)在品質(zhì)進(jìn)行鑒別，如細(xì)辛以色白者為佳，枳實(shí)以皮厚而小者為佳，赤芝以個(gè)大、肉厚、完整、表面有漆樣光澤者為佳，而五味子則以“粒大、果皮紫紅、香氣濃郁、肉厚、柔潤(rùn)者為佳”[1]。五味子（Schisandra chinensis（Turcz.）Baill.）俗稱北五味子。作為遼寧省道地藥材之一，市場(chǎng)需求量大，栽培面積高達(dá)9 000 hm2，但由于栽培品種各異，且缺乏科學(xué)合理的施肥模式和病蟲害防控技術(shù)，導(dǎo)致五味子藥材質(zhì)量不一，故該試驗(yàn)收集遼寧省不同產(chǎn)地五味子，對(duì)其果實(shí)性狀進(jìn)行調(diào)查，旨在探究五味子品質(zhì)與果實(shí)性狀的相關(guān)性，為選育優(yōu)異品系，科學(xué)指導(dǎo)栽培奠定理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器。高效液相色譜儀（K2025，山東悟空儀器有限公司），高速萬能粉碎機(jī)（FW100，天津市泰斯特儀器有限公司），分析天平（YP502N，上海菁海儀器有限公司），KQ-600DV 型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司），游標(biāo)卡尺。

1.1.2 試劑。對(duì)照品五味子醇甲（20200622），五味子醇乙（190919），五味子酯甲（191219），五味子甲素（190716），五味子乙素（20200622），所有對(duì)照品純度均在98%以上，均購(gòu)自河南奧科標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)科技有限公司。甲醇（色譜純，賽默飛世爾科技有限公司），純凈水（杭州娃哈哈集團(tuán)有限公司）。

1.1.3 樣品。五味子樣品采集信息見表1，該試驗(yàn)共收集了8 個(gè)產(chǎn)地，14 批樣品，經(jīng)鑒定為五味子[Schisandra chinensis（Turcz.）Baill]的果實(shí)，樣品陰干后粉碎，過60 目篩，備用。

表1 五味子樣品采集信息

1.2 五味子化學(xué)成分測(cè)定

供試品制備：精密稱定五味子樣品0.15 g 于10 mL具塞離心管中，加入甲醇8 mL，稱重，超聲提取（250 W，20 kHz）30 min，取出冷卻至室溫，以甲醇補(bǔ)足失重，搖勻，過0.22 μm微孔濾膜，即得。

色譜條件：采用Agilent TC-C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相為：甲醇（A）-水B），梯度洗脫（0～20 min，55%A；20～25 min，55%～75%A；25～40 min，75%～65%A；40～45 min，65%～55%A；50～65 min，35%A；65～66 min，35%～55%A；66～70 min，55%A）；檢測(cè)波長(zhǎng)217 nm，流速1.0 mL/min[2]，柱溫25℃，進(jìn)樣量10 μL。

1.3 五味子果實(shí)性狀調(diào)查

利用游標(biāo)卡尺及電子秤，對(duì)14 批五味子鮮果果穗重、果穗長(zhǎng)、粒重、縱徑、橫徑等主要果實(shí)性狀進(jìn)行測(cè)定，果實(shí)性狀測(cè)定方法如表2。

表2 五味子果實(shí)性狀測(cè)定方法

2 結(jié)果與分析

2.1 不同產(chǎn)地五味子有效成分含量統(tǒng)計(jì)

對(duì)14 批五味子樣品進(jìn)行含量統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果見表3、圖1、圖2。不同批次五味子5 種有效成分含量存在明顯的差異。

圖1 不同產(chǎn)地五味子木酯素類成分堆積

圖2 不同產(chǎn)地五味子有效成分含量

表3 不同產(chǎn)地五味子有效成分含量

2.2 不同產(chǎn)地五味子果實(shí)性狀統(tǒng)計(jì)

利用游標(biāo)卡尺及電子秤對(duì)14 批次五味子果實(shí)性狀進(jìn)行調(diào)查，結(jié)果見表4，不同產(chǎn)地五味子果實(shí)對(duì)比見圖3。各批次的五味子果實(shí)性狀存在一定差異。

圖3 不同產(chǎn)地五味子果實(shí)對(duì)比

表4 不同產(chǎn)地五味子果實(shí)性狀調(diào)查

2.3 果實(shí)性狀與藥材品質(zhì)相關(guān)性分析

為探究五味子果實(shí)性狀與品質(zhì)之間的相關(guān)性，利用SPSS 20.0 軟件對(duì)10 個(gè)指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性分析。

結(jié)果表明，果穗重與果穗長(zhǎng)、平均粒重、縱徑均呈極顯著（P<0.01）正相關(guān)，與五味子乙素、混合木脂素呈顯著（P<0.05）負(fù)相關(guān)；果穗長(zhǎng)與平均粒重、五味子甲素呈顯著（P<0.05）正相關(guān)，與混合木脂素呈極顯著（P<0.01）負(fù)相關(guān)；縱徑與橫徑呈極顯著（P<0.01）正相關(guān)，與五味子醇乙呈顯著（P<0.05）正相關(guān)，與五味子酯甲、五味子甲素呈極顯著（P<0.01）負(fù)相關(guān)；果實(shí)顏色與五味子醇甲、五味子酯甲呈顯著（P<0.05）正相關(guān)，與五味子醇乙、五味子乙素、混合木脂素呈極顯著（P<0.01）正相關(guān)，見表5。

表5 五味子果實(shí)性狀與藥材品質(zhì)相關(guān)性分析

2.4 果實(shí)性狀與藥材品質(zhì)的多元回歸分析

對(duì)五味子中五味子醇甲、醇乙、酯甲、甲素、乙素、混合木脂素含量與果穗重、果穗長(zhǎng)、平均粒重、縱徑、橫徑、果實(shí)顏色等性狀進(jìn)行逐步回歸分析。

以五味子醇甲（Y1）作為因變量，以果穗重（X1）、果穗長(zhǎng)（X2）、平均粒重（X3）、縱徑（X4）、橫徑（X5）、果實(shí)顏色（X6）作為自變量的最優(yōu)回歸方程如下：Y1=6.794+0.560X6（n=41，F(xiàn)=7.028）。

表明果實(shí)顏色是影響五味子醇甲的主要因子，果實(shí)顏色越深，五味子醇甲含量越高。

以五味子醇乙（Y2）作為因變量，以果穗重（X1）、果穗長(zhǎng)（X2）、平均粒重（X3）、縱徑（X4）、橫徑（X5）、果實(shí)顏色（X6）作為自變量的最優(yōu)回歸方程如下：Y2=1.487-0.071X1+0.830X6（n=41，F(xiàn)=23.234）。

表明果穗重、果實(shí)顏色是影響五味子醇乙的主要因子，當(dāng)其他性狀不變時(shí)，果穗重每增加1 g，五味子醇乙含量減少0.007 1%；果實(shí)顏色越深，五味子醇乙含量越高。

以五味子酯甲（Y3）作為因變量，以果穗重（X1）、果穗長(zhǎng)（X2）、平均粒重（X3）、縱徑（X4）、橫徑（X5）、果實(shí)顏色（X6）作為自變量的最優(yōu)回歸方程如下：Y3=0.855-0.053X4+0.117X6（n=41，F(xiàn)=14.842）。

表明縱徑、果實(shí)顏色是影響五味子酯甲的主要因子，當(dāng)其他性狀不變時(shí)，縱徑每增加1 mm，五味子酯甲的含量減少0.005 3%；果實(shí)顏色越深，五味子酯甲含量越高。

以五味子甲素（Y4）作為因變量，以果穗重（X1）、果穗長(zhǎng)（X2）、平均粒重（X3）、縱徑（X4）、橫徑（X5）、果實(shí)顏色（X6）作為自變量的最優(yōu)回歸方程如下：Y4=5.752-0.021X2+0.191X4（n=41，F(xiàn)=6.909）。

表明果穗長(zhǎng)、縱徑是五味子甲素的主要因子，當(dāng)其他性狀不變時(shí)，果穗長(zhǎng)每增加1 mm，五味子甲素含量減少0.002 1%；縱徑每增加1 mm，五味子甲素含量增加0.019 1%。

以五味子乙素（Y5）作為因變量，以果穗重（X1）、果穗長(zhǎng)（X2）、平均粒重（X3）、縱徑（X4）、橫徑（X5）、果實(shí)顏色（X6）作為自變量的最優(yōu)回歸方程如下：Y5=0.401-0.012X1+0.080X6（n=41，F(xiàn)=9.211）。

表明果穗重、果實(shí)顏色是五味子乙素的主要因子，當(dāng)其他性狀不變時(shí)，果穗重每增加1 g，五味子乙素含量減少0.001 2%；果實(shí)顏色越深，五味子乙素含量越高。

以混合木脂素（Y6）作為因變量，以果穗重（X1）、果穗長(zhǎng)（X2）、平均粒重（X3）、縱徑（X4）、橫徑（X5）、果實(shí)顏色（X6）作為自變量的最優(yōu)回歸方程如下：Y6=12.405-0.150X1+1.522X6（n=41，F(xiàn)=20.097）。

表明果穗重、果實(shí)顏色是混合木脂素的主要因子，當(dāng)其他性狀不變時(shí)，果穗每增加1 g，混合木脂素含量減少0.015%；果實(shí)顏色越深，混合木脂素含量越高。

3 討論

五味子醇甲、醇乙、酯甲、甲素、乙素和混合木脂素含量是五味子藥材品質(zhì)的重要指標(biāo)之一，果實(shí)性狀和品質(zhì)之間存在一定的相關(guān)性。該研究通過對(duì)14 批次五味子的有效成分含量和果實(shí)性狀進(jìn)行相關(guān)性分析、逐步回歸分析，探究五味子品質(zhì)與果實(shí)性狀之間的相關(guān)關(guān)系。

相關(guān)性分析結(jié)果表明，五味子有效成分均與果實(shí)顏色呈顯著正相關(guān)關(guān)系，五味子乙素、混合木脂素與果穗重呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系，結(jié)合逐步回歸分析，14 批樣品中，果穗越重，有效成分含量越低，果實(shí)顏色越深，有效成分含量越高，五味子品質(zhì)越好。王志明[2]等研究表明五味子中木脂素類成分在果實(shí)不同部位中的含量差異極為顯著，種仁中的含量最高，10 種木脂素類總含量高達(dá)30.08 mg/g，種皮次之，果肉中的含量最低，木脂素類總含量?jī)H為2.24 mg/g。竇志華[4]等對(duì)五味子種子及果皮中的6 種木脂素類成分進(jìn)行研究，結(jié)果表明五味子中木脂素類成分主要存在于種子中。在栽培過程中，經(jīng)常會(huì)施用化肥等肥料來提升五味子產(chǎn)量，這就導(dǎo)致五味子果肉部分比例增大，種子部分比例相對(duì)減小，而果肉中初生代謝產(chǎn)物如多糖、有機(jī)酸等成分含量較多，次生代謝產(chǎn)物含量相對(duì)較低，五味子主要藥效成分是以木脂素類成分為代表的次生代謝產(chǎn)物，為了追求產(chǎn)量而過度施肥，只會(huì)增加果實(shí)中糖類等初生代謝產(chǎn)物，會(huì)相對(duì)降低五味子中指標(biāo)性成分的含量，不利于保證藥材的品質(zhì)。而采收期同樣會(huì)影響五味子藥材品質(zhì)[5]，在相同采收期下，五味子顏色越深，木脂素類成分含量越高，在生產(chǎn)過程中，可以通過果實(shí)顏色深淺初步確定藥材質(zhì)量的好壞。

在五味子育種過程中，可以篩選出果實(shí)顏色較深的品系，用五味子優(yōu)異品系選育。在栽培過程中，不能因?yàn)樽非螽a(chǎn)量而過度施肥，中藥材與果蔬類作物不同，果蔬類作物是作為食品進(jìn)行生產(chǎn)銷售的，主要追求品相、大小、口感和產(chǎn)量，而中藥材是作為藥品進(jìn)行生產(chǎn)銷售的，目的是治病防病，不能將果蔬類作物的栽培方式照搬到中藥材栽培過程中，探究合理施肥模式，對(duì)中藥材進(jìn)行“節(jié)肥減藥”模式的探究，是中藥材綠色栽培的重要保障。