典型牛皮中氨基多糖含量與分布及其在制革過程中的變化

鐘祥 ，羅鳳香 ，張旭 ，高蒙初 ，張春曉 ，彭必雨 ＊

（1. 四川大學(xué)輕工科學(xué)與工程學(xué)院，四川 成都 610065；2. 四川大學(xué)制革清潔技術(shù)國(guó)家工程實(shí)驗(yàn)室，四川 成都 610065；3. 湖南工程學(xué)院，湖南 湘潭 411100）

引言

制革是將畜牧業(yè)、屠宰業(yè)的副 產(chǎn)品動(dòng)物皮通過一系列的物理、化學(xué)和生物處理轉(zhuǎn)變?yōu)槊烙^和具有實(shí)用價(jià)值的皮革的過程。制革用原料皮不僅含有膠原 蛋白 、網(wǎng)狀蛋白和彈性蛋白等結(jié)構(gòu)蛋白 ，還含油脂和糖類等物質(zhì)[1]，其中糖類物質(zhì)主要包括小分子糖 、大分子糖和糖 - 蛋白復(fù)合物等 ，在制革準(zhǔn)備工段中，小分子糖容易去除，但一些大分子糖，特別是糖 - 蛋白復(fù)合物難以完全去除[2-3]。

動(dòng)物皮中的大分子糖常與蛋白質(zhì)結(jié)合形成蛋白- 多糖復(fù)合物，其 種 類繁多、結(jié)構(gòu)復(fù)雜、在動(dòng) 物 生 長(zhǎng)發(fā)育中起重要作用，也是制革重點(diǎn)關(guān)注的物質(zhì)。蛋白- 多糖復(fù)合物主要包括以蛋白質(zhì)為主要成分的糖蛋白和以多糖為主要成分的蛋白多糖。不同種類、性別、大小和產(chǎn)地的動(dòng)物皮，以及同一張皮不同部位中蛋白 - 多糖復(fù)合物的含量、種類、分布都存在差異。蛋白多糖在動(dòng)物皮中含量不高，只占皮質(zhì)量的 0.5%～1.0%[1]。研究表明，蛋白多糖的穩(wěn)定性較高，主要存在于動(dòng)物皮內(nèi)的毛囊和毛干、毛球和毛乳頭和膠原纖維各層級(jí)結(jié)構(gòu)之間[4]，它們的去除情況與纖維松散效果密切相關(guān)，在制革的準(zhǔn)備工段，對(duì)動(dòng)物皮中的蛋白多糖進(jìn)行高效去除是非常必要的[5]。

在制革準(zhǔn)備工段中，一般通過酸（浸酸）、堿（浸灰）對(duì) 蛋 白 多糖 進(jìn) 行 去 除 ，但為了考慮制革所需膠原蛋白對(duì)酸堿的耐受能力，處理?xiàng)l件并不強(qiáng)；同時(shí)，蛋白多糖與膠原纖維結(jié)合較為緊密 ，因此 ，蛋白多糖在傳統(tǒng)制革中去除率并不高。在較為溫和的條件下 ，使用糖苷酶專一性水解蛋白多糖糖苷鍵 ，有 望實(shí)現(xiàn)蛋白多糖的高效去除[6-7]。目前，從制革角度對(duì)蛋白多糖的研究較少為了獲得高質(zhì)量皮革 ，有必要了解制革原料皮中蛋白多糖的組成 、 含量和分布，建立基于酶作用的高效去除方法 ，降 低 制 革 過程中污染化學(xué)材料的使用[8]。

牛皮作為最常用的制革原料皮，在制革生產(chǎn)中占各類原料皮的比例可達(dá)65%～70%。因此，本文以黃牛皮和奶牛皮為代表，考察了蛋白多糖中的主要成分氨基多糖（GAG）在皮的不同部位及沿著縱切面不同位置處的含量與分布，以及常規(guī)制革準(zhǔn)備工段中皮內(nèi)GAG 的去除情況；并輔以組織學(xué)切片和GAG 特異性染色技術(shù)，對(duì)皮內(nèi)糖類物質(zhì)的分布進(jìn)行直觀的定性表征。通過上述研究，為理解皮內(nèi)糖的含量與分布及其對(duì)脫毛和皮纖維松散影響的機(jī)制、制革中糖苷酶的優(yōu)選和酶輔助脫毛和纖維松散技術(shù)的開發(fā)提供依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 主要材料與儀器

1.1.1 主要材料

黃牛和奶牛鹽濕皮，從四川成都本地制革廠采購(gòu)；硫酸軟骨素標(biāo)準(zhǔn)品、阿利新藍(lán) Alcian Blue 8GX、1,9- 二 甲 基 亞 甲 基 藍(lán)（1,9-dimethylmethylene blue-chloride，DMB），購(gòu)自 Sigma 公司；木瓜蛋白酶，購(gòu)自 Aladdin 公司；堿性品紅、苯酚、高碘酸、葡萄糖等均為分析純，購(gòu)自成都市科隆化學(xué)品有限公司；皮革化學(xué)品均為工業(yè)級(jí)，由四川達(dá)威科技股份有限公司和朗盛（中國(guó)）科技股份有限公司等提供；其他材料均為分析純?cè)噭?/p>

1.1.2 主要儀器

GLSD-40 型泵熱循環(huán)不銹鋼對(duì)比試驗(yàn)轉(zhuǎn)鼓，無錫市榮浩皮革機(jī)械制造有限公司 ；CM1950 型冷凍切片機(jī)，德國(guó) Leica 公司；COVER-015 型生物顯微鏡，日本 Olympus 公司；571-1 型雷磁 COD 消解儀，上海儀電科學(xué)儀器股份有限公司；SHZ-B 型恒溫水浴振蕩器，上海躍進(jìn)醫(yī)療器械有限公司；UV-1100D型可見分光光度計(jì)，上海市美譜達(dá)儀器有限公司；Cence TGL-16M 型醫(yī)用冷凍離心機(jī)，長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)有限公司；FD-113-50 型真空冷凍干燥器，北京博醫(yī)康實(shí)驗(yàn)儀器有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 牛皮樣制備

按照動(dòng)物皮取樣標(biāo)準(zhǔn)，從頸部、腹部和臀部分別取皮塊試樣，剃除皮樣上的毛，并充分水洗，除去污物。將皮樣冷凍后，用冷凍切片機(jī)切片，沿粒面每隔 0.2 mm 平切，收集切片，冷凍干燥后切成小塊，并用研磨機(jī)粉碎成皮粉，備用。

1.2.2 皮中總糖含量測(cè)定

稱取約 0.1 g 皮粉置于 COD 消解管中，加入 6 mol/L 的鹽酸溶液 4 mL，在 100 ℃條件下消解 1 h至皮粉溶解，冷卻至室溫后，用去離子水定容至 10 mL，在 12 000 r/min 速率下離心 5 min，取上清液稀釋至適當(dāng)濃度，采用硫酸苯酚法[9]測(cè)定稀釋液的總糖含量，并折算出皮粉中的總糖含量（以干皮質(zhì)量為基準(zhǔn)，即 W(總糖)/W(皮粉)100%）。

1.2.3 皮中氨基多糖含量測(cè)定

稱取 0.05 ～1 g 皮粉置于試管中，加入 1 mL 木瓜蛋白酶溶液（酶液組成為：木瓜蛋白酶 5 g/L，用含0.4 g/L 半胱氨酸和 0.9 g/L EDTA 的 pH 值為 6.8 的0.1 mol/L BR 緩沖液溶解木瓜蛋白酶），于 37 ℃條件下恒溫振蕩約 10 h，至皮粉完全溶解，用去離子水定容至 5 mL，離心除去毛與表皮等不溶物。取適量酶水解液，用去離子水稀釋至適當(dāng)濃度后，采用DMB 法[10-11]測(cè)定酶水解液的 GAG 含量。

具體操作如下：移取 100 μL 稀釋液加入到比色管中，加入 2.5 mL 的 DMB 顯色劑，混勻，立即測(cè)定 525 nm 處吸光度，以水為空白，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線（以硫酸軟骨素為標(biāo)準(zhǔn)物），計(jì)算酶水解液中的 GAG濃度，并折算出皮粉中的 GAG 含量（以干皮質(zhì)量為基準(zhǔn)，即 W(GAG)/W(皮粉) 100%）。

1.2.4 皮中氨基多糖特異性染色分析

用中性甲醛將皮樣固定 24 h 后，用冷凍切片機(jī)切成薄片，切片厚度為 12 μm，方向?yàn)闄M切和縱切兩個(gè)方 向 。 用高碘 酸 - 希夫 - 阿 利 新 藍(lán) 染 色 法[12]（PAS-AB）對(duì)皮樣切片進(jìn)行染色。

具體操作如下：阿利新藍(lán)染液染 40 min，隨后用去離子水充分洗滌；于高碘酸溶液氧化 8 min 后，用去離子水洗滌；在希夫染液中避光染色 8 min，隨后用 10% 亞硫酸氫鹽溶液漂洗 2 次，每次 2 min，分別采用 70%、95%、100%酒精各脫水 3 min 用 50%二甲苯 -50%乙醇，3min；純二甲苯 3 次，每次 3 min，最后用中性樹膠封固。待切片干燥固定后，用生物顯微鏡觀察皮樣，并拍照。

1.2.5 制革準(zhǔn)備工段中皮內(nèi)氨基多糖的去除效果

奶牛皮按常規(guī)制革準(zhǔn)備工段操作，分別在原料皮、浸水、脫毛 - 浸灰和軟化工序處理后的牛皮鄰近部位取樣，測(cè)定皮內(nèi)氨基多糖的含量和分布。

2 結(jié)果與討論

2.1 典型牛皮中的氨基多糖的含量與分布

動(dòng)物皮中的糖類物質(zhì)主要包括存在于組織細(xì)胞中的葡萄糖等小分子糖，以及細(xì)胞中和細(xì)胞外基質(zhì)中的糖原、糖蛋白和蛋白多糖等大分子糖。而制革中主要被關(guān)注的是與脫毛和膠原纖維松散有關(guān)且難以去除的蛋白多糖。蛋白多糖是由氨基多糖鏈（GAG）和核心蛋白組成，其中的氨基多糖鏈?zhǔn)怯杉喝┧岷桶被禾切纬傻亩菃卧貜?fù)連接構(gòu)成的。核心蛋白與膠原纖維結(jié)合，多糖鏈與兩個(gè)核心蛋白相連將兩條膠原纖維粘結(jié)在一起[13]，因此，皮內(nèi)蛋白多糖的含量是影響膠原纖維松散的主要因素之一。

一般來說，動(dòng)物皮的腹部厚度較薄，膠原纖維編織較疏松，為了保證腹部具 有足夠的強(qiáng)度，其彈性纖維和糖類物質(zhì)，特別是蛋白多糖的含量往往高于其它部位。黃牛皮和奶牛皮是制革常用原料皮，首先對(duì)這兩種牛皮腹部的氨基多糖含量及分布進(jìn)行了定量分析。用木瓜蛋白酶將蛋白多糖中的核心蛋白破壞，使氨基多糖溶于溶液中，再用 DMB 法測(cè)定其含量。奶牛和黃牛皮腹部各層的 GAG 含量及分布情況見圖 1。

由圖1可以看出，兩種牛皮腹部的GAG 含量約0.2%～0.5%，奶牛皮GAG 含量比黃牛皮高。GAG沿兩種牛皮縱切面的分布趨勢(shì)基本一致，即粒面層的GAG 含量較高，網(wǎng)狀層的含量相對(duì)較低。動(dòng)物皮內(nèi)的GAG 主要存在于表皮、基底膜、毛囊和皮脂腺周圍、纖維間質(zhì)以及膠原纖維各層級(jí)結(jié)構(gòu)中，因此，在距離皮粒面約0.3～0.4 mm 處，毛球和毛乳頭上含有較多的蛋白多糖物質(zhì)將毛干固定在真皮上；同時(shí)，由于粒面層纖維束較小，并且編織緊密，因此，該部位GAG 含量更高。在距離粒面1.2 mm 以上，為皮的網(wǎng)狀層（通常為皮革的二層和三層），主要為較粗大的膠原纖維束編織的結(jié)構(gòu)，幾乎沒有毛囊和腺體，因此，GAG 含量相對(duì)較低。但不同層級(jí)的膠原纖維及纖維束的組裝和形成需要蛋白多糖等的參與，因此，該層中也含有一定量的糖。

圖1 黃牛和奶牛皮中的 GAG 含量及分布（腹部）Fig. 1 GAG content and distribution in cattle and cow hides (belly)

兩種牛皮的表皮層和粒面層 （0.0～0.6 mm 處）中的 GAG 含量差異較大，而在網(wǎng)狀層和肉面層中接近，這可能是由兩種不同種類牛皮毛囊的發(fā)育程度不同導(dǎo)致的。此外，GAG 沿著皮縱切面的分布差異，奶牛皮比黃牛皮更明顯。

2.2 奶牛皮不同部位的總糖含量和分布比較

為了了解糖在同一張動(dòng)物皮上不 同 部 位 處的分布情況，以部位差較大、糖含量較高的奶牛皮為例，研究了其腹部、頸部和臀部這三個(gè)典型部位的總糖含量和分布。

從圖 2 可以看出，奶牛皮不同部位的總糖含量存在明顯差異，總體表現(xiàn)為 ：腹部最多，頸部其次，臀部最少。腹肷部的纖維束細(xì)小，纖維的比表面積大，纖維編織比較疏松，纖維間質(zhì)多，且腹肷部纖維間質(zhì)中所含的糖比纖維束粗大且編織緊密的頸部和臀部所含的糖更高[14]。另外，不同部位的糖含量沿縱切面的分布情況類似，總體表現(xiàn)為，纖維編織細(xì)小的粒面層比編織粗大的網(wǎng)狀層糖含量更高。

圖2 奶牛皮不同部位的總糖含量和分布Fig. 2 Content and distribution of total sugar in different parts of cow hide

2.3 皮內(nèi)氨基多糖的特異性染色分析

皮中蛋白 - 多糖復(fù)合物上的氨基多糖帶 有 的大量酸性基團(tuán)（如羧基和磺酸基）能與陽離子染料阿利新藍(lán)（Alcian Blue，AB）結(jié)合，顯示藍(lán)色；而高碘酸(Periodic Acid)能夠把糖基上相鄰的乙二醇基斷裂開，使其氧化轉(zhuǎn)變?yōu)殡p醛，這種雙醛結(jié)構(gòu)與希夫試劑（Schiff）結(jié)合后產(chǎn)生紅色的絡(luò)合物。因此，高碘酸- 希夫 - 阿利新藍(lán)染色法（Periodic Acid-Schiff-Alcian Blue，PAS-AB） 能夠?qū)?dòng)物皮上的糖染色[15-16]。顯藍(lán)色表示有酸性 GAG 的存在，顯紅色表示有其它糖的存在，顯紫色表示既有 GAG 又有其它糖的存在[17-18]。兩種牛皮的腹部和臀部縱切和橫 切 面PAS-AB 組織學(xué)染色結(jié)果如圖3 所示。

圖3 奶牛和黃牛皮中糖的組織學(xué)分布（40 ×）Fig. 3 Distribution of saccharide in cow and cattle hides (40 ×)

從圖 3 的縱切染色結(jié)果可以看出，以圖中黑實(shí)線為界，上下兩部分 GAG 的分布（藍(lán)色）有明顯的差異。兩種牛皮的表皮層和粒面層的顏色較深（黑實(shí)線上部），表明含有大量的 GAG；而網(wǎng)狀層（黑實(shí)線下部）的 GAG 含量相對(duì)較低，這與圖 1 中的定量分布圖中 GAG 在距離粒面 0.0～0.6 mm 范圍內(nèi)含量較高的結(jié)果比較一致。從粒面層的橫切染色圖可以看出，粒面層（距表面 0.4 mm 處）有較多的酸性GAG， 特別是毛囊和腺體的周圍都含有大量 的GAG；距表面 1.2 mm 處，雖然沒有毛囊和腺體，但膠原纖維上仍有 GAG 分布，而該部分呈現(xiàn)明顯紫紅色，說明酸性氨基多糖減少，有其他糖存在。網(wǎng)狀層的 GAG 則 主 要 存在于各膠原 纖 維層 級(jí) 結(jié)構(gòu) 的 表面，它們不僅能夠影響膠原纖維的間距，還能夠束縛膠原纖維，因此，膠原纖維的輪廓?jiǎng)t被染成藍(lán)色。從顏色深淺度可以看出，同樣是腹部，奶牛皮比黃牛皮含有的 GAG 高，與上文定量測(cè)定奶牛皮和黃牛皮中 GAG 含量結(jié)果一致。奶牛皮和黃牛皮的臀部與腹部相比，臀部膠原纖維粗大，編織緊密，纖維間質(zhì)中糖含量相對(duì)較低。

為了更清楚展示牛皮中 GAG 的含量和分布情況，選擇了糖含量較高的奶牛皮腹部單獨(dú)進(jìn)行 Alcian Blue 染色，結(jié)果如圖 4 所示。

從圖4的縱切圖 A 中可以看出，GAG 主要分布在表皮層和粒面層，網(wǎng)狀層的膠原纖維周圍也比較多。圖 B 表明，表皮（EP）以及表皮和真皮交界的基底膜（BM）中具有一條完整連續(xù)分布的深藍(lán)色帶，表明 GAG 是基底膜的主要成分，是連接表皮和真皮的關(guān)鍵物質(zhì)。圖 C 和 E 分別為毛囊的縱切和橫切圖 ，可以看出 ，毛囊周圍如內(nèi)毛根鞘（IRS）、外 毛 根鞘（ORS）、結(jié)締 組 織 鞘（CTS）和 毛 乳 頭（HP）上 藍(lán) 色明 顯 ，說 明 GAG 在 毛 囊 、毛 干 、毛球和毛乳頭連接處含量較高，蛋白多糖是毛干與皮連接部位的主要成分。因此，在酶脫毛過程中，可通過酶的作用去除GAG 來破壞毛球與毛乳頭的連接，以及毛囊和毛根的聯(lián)系來實(shí)現(xiàn)脫毛。此外，由圖 D 可以看出，膠原纖維各層級(jí)結(jié)構(gòu)的輪廓被染成藍(lán)色，表明膠原 纖維表面被 GAG 包裹，形成鞘狀結(jié)構(gòu)。動(dòng)物皮結(jié)構(gòu)類似于“ 鋼 筋 ”和“水 泥 ”，其中 纖 維 狀 物 質(zhì) 如 膠 原 纖 維 、網(wǎng)狀纖維和彈性纖維作為骨架，纖維間質(zhì)作為其 中 的“水泥”，在干態(tài)時(shí)其將纖維“粘接”在一起[19]。蛋白多糖就是纖維間質(zhì)中的主要成分，蛋白多糖的 核心蛋白與膠 原 纖 維 結(jié)合 ，GAG 與 兩 個(gè)核 心 蛋 白相 連 ，核心蛋白上可能連接多條 GAG 糖鏈，將膠原纖 維 束縛在一起。膠原纖維松散主要表現(xiàn)為膠原纖維束的分離和分散，因此，破壞 GAG 是將捆扎在一起的膠原纖維各層級(jí)結(jié)構(gòu)分散的一種有效方式。綜上，從去除糖的角度來考慮纖維松散和脫毛效果，將為開發(fā)高效的酶脫毛和酶纖維松散技術(shù)提供新思路。

圖4 奶牛皮腹部表皮和毛囊處酸性 GAG 組織學(xué)分布（A 放大 40×，B-E 放大 200×）Fig. 4 Distribution of acidic GAG in the belly of cow hide (A 40×,B-E 200×)

2.4 制革工序?qū)ζ?nèi) GAG 的去除情況

原料皮中蛋白多糖物質(zhì) 與 脫 毛和纖維分散緊密相關(guān)，因此，進(jìn)一步考察了常規(guī)制革準(zhǔn)備工段處理過程中皮內(nèi)糖含量的變化。由于奶牛皮中腹部的含糖量最高，因此，以其腹部為例，皮內(nèi) GAG 隨主要處理工序的變化情況如圖 5 所示。

在常規(guī)浸水過程中，動(dòng)物皮內(nèi)的透明質(zhì)酸等非硫酸化的氨基多糖能夠完全被除去，而硫酸皮膚素等硫酸化的氨基多糖則仍然牢固結(jié)合于動(dòng)物皮內(nèi)，去除率僅約 4%[2]。通過對(duì)圖 5 曲線峰面積的積分計(jì)算，可以看出，主浸水后皮內(nèi) GAG 含量降 低 6%左右，與文獻(xiàn)報(bào)道的結(jié)果近似。此外，浸灰和軟化對(duì)GAG 的去除更有效。其中，浸灰后皮內(nèi) GAG 的含量降低約 36%，特別是皮基底膜、粒面層和毛囊中（0.4 mm 峰值處）GAG 的含量明顯下降。有文獻(xiàn)報(bào)道，硫酸皮膚素（動(dòng)物皮內(nèi)典型的 GAG）經(jīng)浸灰的強(qiáng)堿性、長(zhǎng)時(shí)間處理，能夠去除 48%左右[2]。軟化工序中酶處理使皮內(nèi) GAG 含量降低約 30%。由圖 5 的檢測(cè)數(shù)據(jù)計(jì)算可知，準(zhǔn)備工段中 GAG 總?cè)コ始s 72%，不能完全去除。然而，GAG 的存在是干燥后皮纖維間粘連的主要原因之一，將導(dǎo)致皮纖維的松散不足[20]。

圖5 不同工序處理后奶牛皮內(nèi) GAG 的含量及分布Fig. 5 Content and distribution of GAG in cow hide after treated by different processes

進(jìn)一步對(duì)不同工序處理后皮內(nèi)的 GAG 進(jìn)行染色定性分析，結(jié)果如圖 6 所示。

圖6 經(jīng)不同工序處理后牛皮中糖的組織學(xué)分布Fig.6 Distribution of saccharide in cattle hide

由圖 6 可以看出，原料皮的表皮層及其與真皮層連接處、毛囊和脂腺周圍含有較多的 GA G。浸水后，表皮層 完 整 ，其中易溶于水的 GA G，如透明質(zhì)酸等被除去。經(jīng)過脫毛和浸灰工序的強(qiáng)堿性條件下處理，表皮層和基底膜被破壞，毛囊和皮脂腺周圍的GAG 也被部分破壞，粒面層和網(wǎng)狀層的膠原纖維束間的糖含量明顯減少。軟化使用的是胰酶，并采用了較強(qiáng)的軟化工藝，即軟化酶的用量和軟化時(shí)間較長(zhǎng)，皮內(nèi)纖維間質(zhì)中的蛋白多糖成分被進(jìn)一步去除。

雖然，浸灰和軟化工序?qū)ζ?nèi) 糖的除去有較大的作用，但常規(guī)制革準(zhǔn)備工段不能完全去除糖類物質(zhì)，特別是纖維間的蛋白多糖。這些物質(zhì)的 不完全去除可能影響后續(xù)工序中鞣劑、染料和加脂劑 的 滲透以 及 與膠 原 分 子 上 活 性 基 團(tuán) 的 結(jié) 合 ；因 此 ，從 提高成革性能（尤其是柔軟度）的角度，有必要采取 進(jìn)一步的措施來提高動(dòng)物皮內(nèi)糖的去除效果?？紤]到膠原蛋白對(duì)強(qiáng)堿和蛋白酶作用的耐受性，通過進(jìn)一步 加 強(qiáng) 堿 處 理 和 蛋 白 酶 軟 化 強(qiáng) 度 來 達(dá) 到 更 高 的 糖去除率容易造成皮基質(zhì)的損傷，是不可行的；因此，有必要研究溫和條件下的皮內(nèi)糖的去除方法，在實(shí)現(xiàn)糖高效去除的同時(shí)，確保膠原不被過度破壞 。 用糖 苷 酶 對(duì) 皮 內(nèi) 蛋 白 多 糖 鏈 進(jìn) 行 專 一 性 水 解 是 值 得嘗試的方法。

3 結(jié)論

研究了黃牛皮和奶牛皮中氨基多糖 （GAG）的含量、分布及其隨制革處理工序的變化。發(fā)現(xiàn)奶牛皮中 GAG 的含量高于黃牛皮，纖維結(jié)構(gòu)編織疏松的腹部中的 GAG 含量比頸部和臀部高，含量約為0.2%～0.5%；在牛皮縱切面上，GAG 含量沿表面層到粒面層逐漸遞減，表皮、基底膜和毛囊及膠原纖維細(xì)小的粒面 層 的 GAG 含量較 高 ，網(wǎng) 狀 層中 的GAG 含量相對(duì)較低。此外，在常規(guī)制革準(zhǔn)備工段中，動(dòng)物皮內(nèi)的 GAG 含量隨制革處 理 工序 呈 遞減 趨勢(shì)；動(dòng)物皮內(nèi) GAG 的主要去除工序是浸灰和酶軟化，而常規(guī)制革方法不能完全除去 GAG，其去除率約為 72%。皮中的 GAG 的去除與脫毛和纖維分散的效果緊密相關(guān)，因此，需要開發(fā)對(duì)膠原蛋白作用溫和的基于糖苷酶作用的高效 GAG 去除的方法。