飼糧添加不同水平維生素E對29～63日齡江南白鵝生長性能、免疫性能和抗氧化性能的影響

孫慶雨 楊海明* 徐學安 郁 鈞 陳媛婧 王志躍,2

(1.揚州大學動物科學與技術學院，揚州 225009；2.揚州大學農業(yè)科技發(fā)展研究院，揚州 225009)

維生素E又稱為生育酚或抗不育因子，動物自身不能合成維生素E，必須從飼糧中攝取[1]。維生素E具有中和自由基和降低機體內脂質過氧化的能力，可以提高家禽抗氧化能力[2-3]。維生素E還具有抑制核因子-κB激活以及增強細胞免疫和體液免疫的功能[4-6]。Liu等[7]發(fā)現，飼糧中添加30 mg/kg的維生素E可以通過抑制蛋雞沙門氏菌感染從而改善家禽生產性能，減輕蛋雞的應激癥狀。黃路生[8]研究結果表明，蛋種鴨飼糧添加20～50 mg/kg維生素E能提高蛋種鴨抗氧化能力，并且添加200 mg/kg維生素E可以提高蛋種鴨免疫能力。還有研究表明，飼糧添加17.0～19.9 IU/kg的維生素E可以提高蛋雛鴨的生長性能、免疫性能和抗氧化功能[9]。飼糧添加100～200 IU/kg維生素E可以提高溆浦鵝體增重，降低料重比和料肝比；添加水平為200 IU/kg時可以提高血清和肝臟抗氧化酶的活性[10]。適宜的維生素E添加水平對家禽的健康與生產至關重要，國內外關于維生素E對肝用型鵝的影響已有報道，但對肉用型鵝飼糧中維生素E適宜添加水平的研究鮮有報道。為此，本試驗通過研究飼糧添加不同水平維生素E對29～63日齡江南白鵝生長性能、免疫性能和抗氧化性能的影響，確定肉鵝飼糧適宜的維生素E添加水平，豐富我國肉鵝營養(yǎng)需要量數據庫，為肉鵝飼糧的科學配制提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗動物與試驗設計

本研究以江南白鵝為研究對象。選用同一批出雛、健康且體重相近的28日齡江南白鵝公鵝240只，隨機分為6組，每組5個重復，每個重復8只，分別在玉米-豆粕型飼糧的基礎上添加0(對照組)、5、10、20、40和80 mg/kg維生素E。維生素E以DL-α-生育酚乙酸酯的形式添加，DL-α-生育酚乙酸酯從揚州某生物有限公司購得，其有效含量為50%。試驗期為35 d。

1.2 試驗飼糧

基礎飼糧以玉米和豆粕為主要原料。基礎飼糧參考《中國飼料營養(yǎng)成分及營養(yǎng)價值表》和本課題組多年的研究結果進行配制，其組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎)

1.3 飼養(yǎng)管理

仔鵝采用網上平養(yǎng)，配備乳頭飲水器和料槽。整個飼養(yǎng)期間自由采食，自由飲水，自然光照，保持舍內清潔衛(wèi)生，通風良好。

1.4 樣品采集與測定

1.4.1 飼糧中α-生育酚含量的測定

按照國標(GB/T 17812—2008)采用高效液相色譜法測定飼糧中α-生育酚的含量。

1.4.2 生長性能的測定

在63日齡，對每個重復進行空腹稱重，記錄每個重復的體重以及采食量，計算體重(BW)、平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G)。

1.4.3 血清生化指標的測定

屠宰前翅下靜脈采血7 mL，樣品在室溫中靜置30 min后，3 500 r/min離心10 min，移取血清，放于-20 ℃保存。用UniCel DXC 800 Synchron全自動生化分析儀測定血清中總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)含量以及谷丙轉氨酶(ALT)和谷草轉氨酶(AST)活性；采用酶聯免疫吸附試驗檢測皮質醇(cortisol)含量，試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.4.4 免疫指標的測定

屠宰時，取出脾臟、胸腺和法氏囊，取下后用濾紙吸去血漬，剔除脂肪，稱重，計算免疫器官指數。

免疫器官指數(g/kg)=免疫器官重(g)/

宰前活重(kg)。

采用酶聯免疫吸附試驗法測定血清中免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)、白細胞介素-6(IL-6)、干擾素-γ(IFN-γ)含量。試劑盒購自上海鈺博生物有限公司。

1.4.5 抗氧化指標的測定

采用試劑盒測定血清和肝臟中過氧化氫酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性，總抗氧化能力(T-AOC)以及丙二醛(MDA)含量，試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

1.5 統(tǒng)計分析

試驗所得數據以重復為單位進行處理，應用SPSS 17.0軟件對數據進行單因子方差分析和Duncan氏法多重比較，結果用平均值和均值標準誤(SEM)表示。P<0.05為差異顯著，P>0.05為差異不顯著。采用折線模型[11]估測29～63日齡江南白鵝飼糧中維生素E適宜添加水平。擬合方程決定系數(R2)<0.50的效應指標不進行估測。

2 結果與分析

2.1 飼糧添加不同水平維生素E對29～63日齡江南白鵝生長性能的影響

由表2可知，飼糧添加不同水平維生素E對63日齡仔鵝體重、29～63日齡仔鵝平均日采食量、平均日增重、料重比無顯著影響(P>0.05)。

表2 飼糧添加不同水平維生素E對29～63日齡江南白鵝生長性能的影響

2.2 飼糧添加不同水平維生素E對63日齡江南白鵝血清生化指標的影響

由表3可知，飼糧添加不同水平維生素E對63日齡仔鵝血清中總蛋白、白蛋白、甘油三酯、總膽固醇的含量以及谷丙轉氨酶和谷草轉氨酶的活性無顯著影響(P>0.05)。與對照組相比，飼糧添加20 mg/kg維生素E顯著降低血清中皮質醇的含量(P<0.05)。

表3 飼糧添加不同水平維生素E對63日齡江南白鵝血清生化指標的影響

2.3 飼糧添加不同水平維生素E對63日齡江南白鵝血清免疫指標以及免疫器官指數的影響

由表4可知，飼糧添加不同水平維生素E對63日齡仔鵝血清中免疫球蛋白G、細胞白介素-6和干擾素-γ含量無顯著影響(P>0.05)；與對照組相比，添加20 mg/kg的維生素E顯著提高仔鵝血清中免疫球蛋白A含量(P<0.05)；添加20、40 mg/kg維生素E顯著提高仔鵝血清中免疫球蛋白M含量(P<0.05)。添加不同水平維生素E對63日齡仔鵝免疫器官指數無顯著影響(P>0.05)。

表4 飼糧添加不同水平維生素E對63日齡江南白鵝血清免疫指標以及免疫器官指數的影響

2.4 飼糧添加不同水平維生素E對63日齡江南白鵝血清和肝臟抗氧化指標的影響

由表5可知，與對照組相比，飼糧添加10、20 mg/kg維生素E顯著提高63日齡仔鵝血清中過氧化氫酶活性(P<0.05)；添加40、80 mg/kg維生素E顯著提高血清中谷胱甘肽過氧化物酶活性(P<0.05)；添加20、40、80 mg/kg維生素E顯著提高血清總抗氧化能力(P<0.05)；添加10、20、40、80 mg/kg維生素E顯著降低血清中丙二醛含量(P<0.05)。

表5 飼糧添加不同水平維生素E對63日齡江南白鵝血清抗氧化指標的影響

由表6可知，添加10、20、40、80 mg/kg維生素E顯著提高肝臟中過氧化氫酶活性(P<0.05)；添加80 mg/kg維生素E顯著提高肝臟中谷胱甘肽過氧化物酶活性(P<0.05)；添加20、40、80 mg/kg維生素E顯著提高肝臟總抗氧化能力以及降低肝臟中丙二醛含量(P<0.05)。

表6 飼糧添加不同水平維生素E對63日齡江南白鵝肝臟抗氧化指標的影響

由表7可知，以血清皮質醇含量為效應指標，通過折線模型估測29～63日齡江南白鵝飼糧中維生素E的添加水平為19.33 mg/kg。以血清和肝臟中丙二醛含量為效應指標，通過折線模型估測29～63日齡江南白鵝飼糧中維生素E的添加水平分別為12.37、21.73 mg/kg。

表7 折線模型估測29～63日齡江南白鵝飼糧中維生素E添加水平

3 討 論

3.1 飼糧添加不同水平維生素E對29～63日齡江南白鵝生長性能的影響

維生素E可以通過減少自由基對機體的傷害、提高細胞和體液免疫，改善家禽的生長性能。但關于維生素E對家禽生長性能影響的研究結果并不相同。有研究報道，飼糧中添加維生素E對肉雞的生長性能無顯著影響[12-13]，這與本試驗結果相一致。但Xie等[14]研究結果顯示，飼糧中添加10 mg/kg維生素E可以顯著提高1～21日齡北京鴨的生長性能。Pompeu等[15]研究報道，飼糧中添加維生素E與肉雞的生長性能沒有顯著相關性，造成研究結果不同的原因可能是試驗飼糧、試驗動物以及環(huán)境的不同。本試驗玉米-豆粕型基礎飼糧中的維生素E水平可能已經滿足29～63日齡江南白鵝的生長需要，所以補充維生素E對其生長性能沒有產生顯著影響。

3.2 飼糧添加不同水平維生素E對63日齡江南白鵝血清生化指標的影響

血液生化指標能反映家畜代謝和生長發(fā)育狀況的變化，對評估動物健康具有重要意義[16-17]。在飼糧中添加高劑量的維生素E可以顯著提高動物血清中總蛋白含量[18-19]。而胡志萍等[20]和武江利等[21]在肉雞和蛋鴨飼糧中分別添加20和50 IU/kg維生素E，結果其對血清中總蛋白含量沒有顯著影響，這與本試驗結果一致。維生素E對血清中總蛋白含量影響結果不同的原因可能是試驗中維生素E的添加水平不同。飼糧中維生素E水平為14.91 IU/kg組與4.38 IU/kg組相比，肉雞血清中甘油三酯和總膽固醇的含量無顯著差異[22]。趙丹陽等[23]和Ismail等[12]研究報道，在飼糧中添加維生素E對雞血清中膽固醇的含量無顯著影響。本試驗的結果與前人研究結果一致。皮質醇是在動物身體或者生理應激后機體分泌的一種腎上腺皮質激素，可以調節(jié)機體生理狀態(tài)以適應應激環(huán)境[24]。本試驗結果顯示，在飼糧中添加維生素E可以顯著降低血清中皮質醇的含量。武江利等[21]研究發(fā)現，飼糧中添加維生素E有降低籠養(yǎng)蛋鴨血清中皮質醇含量的趨勢。另有研究報道，在飼糧中添加RRR-α-生育酚琥珀酸酯可以顯著降低肉雞血清中皮質醇的含量[25]。維生素E作為抗氧化劑可以清除家禽體內的自由基，維持家禽應激時機體內氧化與抗氧化水平的平衡，繼而可以緩解應激降低家禽血清中皮質醇的含量。本試驗結果顯示，飼糧中添加維生素E對血清中谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶的活性沒有顯著影響，與胡志萍等[20]研究結果相一致。血清中谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶的活性變化可以反映肝臟器官健康狀態(tài)，肝臟器官未發(fā)生細胞變性或損傷時，血清中谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶的活性處于穩(wěn)定范圍[26]?？梢?，維生素E可以降低血清中皮質醇含量，具有緩解仔鵝應激的作用。

3.3 飼糧添加不同水平維生素E對63日齡江南白鵝血清免疫指標以及免疫器官指數的影響

維生素E可以通過影響淋巴細胞中細胞因子的表達和免疫細胞增殖來調節(jié)家禽免疫[27-28]。免疫球蛋白和細胞因子是體液免疫重要的組成部分。而胸腺、脾臟和法氏囊是家禽重要的免疫器官[29]。Liu等[30]研究報道，在飼糧中添加維生素E可以增加蛋雞血清中免疫球蛋白的含量，但對血清中白細胞介素、干擾素的含量沒有顯著影響。Niu等[31]研究發(fā)現，與不添加維生素E的飼糧相比，飼喂含有200 mg/kg維生素E的飼糧可以提高肉雞血清中免疫球蛋白的含量，但對免疫器官沒有顯著影響。本試驗的結果與上述結果相一致，但維生素E對免疫球蛋白調節(jié)的機制尚不清楚。另有研究發(fā)現，在不進行脂多糖炎癥誘導反應時，添加RRR-α-生育酚琥珀酸酯對肉雞血清中白細胞介素-6以及干擾素-γ含量無顯著影響；在進行脂多糖炎癥誘導反應時，添加RRR-α-生育酚琥珀酸酯可以降低肉雞血清中白細胞介素-6以及干擾素-γ含量[32]。這可能是因為在發(fā)生炎癥反應時α-生育酚可以減少活化巨噬細胞以及單核細胞合成促炎細胞因子[33-34]。由本試驗結果可知，在飼糧中添加20 mg/kg維生素E可以提高仔鵝的免疫能力，有利于維持仔鵝的健康狀態(tài)。

3.4 飼糧添加不同水平維生素E對63日齡江南白鵝血清和肝臟中抗氧化指標的影響

動物機體內的抗氧化防御網由內源性的酶性和非酶性抗氧化劑組成。超氧化物歧化酶是第一級抗氧化防御的主要適應性酶，可以把過氧化物分解為過氧化氫和氧；谷胱甘肽過氧化物酶和過氧化氫酶可以將過氧化氫轉化為水；總抗氧化能力反映了細胞中的氧化還原(抗氧化劑-氧化劑)平衡[35]。脂質過氧化水平升高會對動物健康造成影響甚至導致疾病的發(fā)生，而丙二醛是監(jiān)測機體脂質過氧化情況的重要指標之一[36]。本試驗結果顯示，在飼糧中添加維生素E可以提高仔鵝血清和肝臟抗氧化酶活性、總抗氧化能力以及降低脂質過氧化。有研究報道，添加維生素E可以提高肉雞血清中抗氧化酶的活性、總抗氧化能力以及降低血清中丙二醛的含量[22,25,37]。另有研究表明，在飼糧中添加維生素E可以提高肉雞肝臟中抗氧化酶的活性、總抗氧化能力以及降低肝臟中的丙二醛含量[38]。維生素E作為機體內重要的脂溶性抗氧化劑存在于身體組織的所有細胞，通過清除自由基來減少脂質過氧化[2]，繼而提高機內抗氧化酶的活性以及減少丙二醛的生成。

4 結 論

在本試驗條件下，玉米-豆粕型飼糧中添加不同水平維生素E對29～63日齡江南白鵝的生長性能無顯著影響；綜合各指標，29～63日齡江南白鵝飼糧中適宜的維生素E添加水平為20 mg/kg。