亞熱帶天然林轉(zhuǎn)變?yōu)槊窳趾筒鑸@對(duì)土壤胞外酶活性的影響

張海闊，張寶剛，周鐘昱，梁佳輝，吳家森，呂玉龍，解宏圖，蔡延江*

（1.浙江農(nóng)林大學(xué)省部共建亞熱帶森林培育國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，杭州 311300；2.浙江農(nóng)林大學(xué)環(huán)境與資源學(xué)院，杭州 311300；3.浙江農(nóng)林大學(xué)林業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院，杭州 311300；4.安吉縣自然資源和規(guī)劃局，浙江 安吉 313300；5.中國(guó)科學(xué)院沈陽(yáng)應(yīng)用生態(tài)研究所，沈陽(yáng) 110016）

土壤胞外酶是一種來(lái)源于土壤微生物、植物根系或死亡動(dòng)植物殘?bào)w且具有催化作用的蛋白質(zhì)，其在土壤中主要以游離態(tài)或礦物結(jié)合態(tài)等形式存在。土壤胞外酶參與土壤物質(zhì)循環(huán)的關(guān)鍵步驟，可以催化有機(jī)質(zhì)的分解和礦化，直至有機(jī)質(zhì)分解產(chǎn)物可以被微生物同化利用。土壤胞外酶活性（Extracellular enzyme activities，EEAs）對(duì)環(huán)境變化或人類活動(dòng)所引起的土壤擾動(dòng)響應(yīng)靈敏，因此，EEAs常被視為土壤生態(tài)系統(tǒng)生物地球化學(xué)過(guò)程發(fā)生改變的敏感指標(biāo)。土壤中多種胞外酶對(duì)物質(zhì)循環(huán)存在功能分化，即多種不同的酶可催化同一種物質(zhì)或同一種酶可催化土壤中多種物質(zhì)的分解。在若干種土壤胞外酶中，與碳循環(huán)相關(guān)的β-葡萄糖苷酶（β-1，4-glucosidase，BG）、纖維二糖水解酶（Cellobiohydrolase，CBH）、β-木糖苷酶（β-1，4-xylosidase，BX）、酚氧化酶（Phenol oxidase，POX）和過(guò)氧化物酶（Peroxidase，PER），與氮循環(huán)相關(guān)的N-乙酰-β-D 氨基葡萄糖苷酶（β-1，4-N-acetylglucosaminnidase，NAG）、亮氨酸氨基肽酶（Leucine aminopeptidase，LAP），以及與磷循環(huán)相關(guān)的土壤酸性磷酸酶（Acid phosphatase，ACP）得到了廣泛研究。

人類活動(dòng)的加劇正在破壞著越來(lái)越多的天然林，在1980 年至1990 年間，人們受經(jīng)濟(jì)收益和糧食需求的驅(qū)使而大規(guī)模砍伐森林，僅全世界熱帶地區(qū)就有83%的新增農(nóng)業(yè)用地是由天然林直接改造而來(lái)。將天然林轉(zhuǎn)變?yōu)槿斯ち只蚍N植園的現(xiàn)象在我國(guó)熱帶及亞熱帶地區(qū)也頻繁發(fā)生。由天然林轉(zhuǎn)變而來(lái)的人工林或種植園常伴隨著施肥、耕作、林下植被去除等集約經(jīng)營(yíng)措施，這些管理措施會(huì)通過(guò)影響pH、含水量、有機(jī)質(zhì)積累、底物有效性和微生物生物量等土壤性質(zhì)而影響土壤EEAs。例如，在中國(guó)亞熱帶的四川洪雅林場(chǎng)，將天然林轉(zhuǎn)變?yōu)樯寄救斯ち趾?，由于底物有效性的降低，土壤BG 和NAG 的活性均顯著降低；在中國(guó)亞熱帶的浙北地區(qū)，將天然常綠闊葉林轉(zhuǎn)變?yōu)榧s經(jīng)營(yíng)的毛竹人工林后，土壤ACP、脲酶和蛋白酶的活性受施肥和林下植被去除等影響均顯著降低；在印度熱帶的Hathinala 地區(qū)，將天然林轉(zhuǎn)變?yōu)槟径狗N植園等農(nóng)用地后，由于化肥的施用而降低了土壤ACP 活性。此外，土壤EEAs 還受到多種生物因素和非生物因素的調(diào)控，眾多研究者的研究結(jié)果也不盡相同。因此，深入探究由天然林轉(zhuǎn)變?yōu)椴煌斯ち只蚍N植園后土壤EEAs的變異特征及其關(guān)鍵驅(qū)動(dòng)因子，具有十分重要的意義。

綜上可知，大量研究均證實(shí)天然林轉(zhuǎn)變?yōu)檗r(nóng)業(yè)用地可顯著影響土壤的EEAs，由于天然林轉(zhuǎn)變?yōu)檗r(nóng)業(yè)用地后大都采用了不同的經(jīng)營(yíng)管理措施，這些管理措施可直接改變土壤環(huán)境因子，土壤環(huán)境因子的改變又直接關(guān)系到土壤EEAs的變化。例如天然林轉(zhuǎn)變?yōu)榧s經(jīng)營(yíng)的毛竹人工林后的經(jīng)營(yíng)措施是通過(guò)改變土壤活性氮、磷的含量而間接改變土壤氮、磷獲取酶的活性；天然林轉(zhuǎn)變?yōu)樯寄救斯ち值拇胧﹦t是通過(guò)改變土壤微生物群落結(jié)構(gòu)間接降低土壤碳、氮獲取酶的活性。位于中國(guó)亞熱帶地區(qū)的浙江省擁有豐富的天然林資源，從20 世紀(jì)末至21 世紀(jì)初期將天然林轉(zhuǎn)變?yōu)槿斯ち只蚍N植園的現(xiàn)象時(shí)有發(fā)生。天然林轉(zhuǎn)變后的人工林或種植園多采用粗放經(jīng)營(yíng)或集約經(jīng)營(yíng)等管理措施，這極有可能顯著改變土壤的環(huán)境因子，進(jìn)而影響土壤EEAs 的活性。相比天然林，這一地區(qū)的人工林或種植園土壤EEAs發(fā)生了怎樣的變化？起關(guān)鍵驅(qū)動(dòng)作用的土壤環(huán)境因子是什么？這些問(wèn)題還亟待進(jìn)一步探究。為此，本研究選取浙江省安吉縣的天然林土壤及由天然林轉(zhuǎn)變的毛竹林和茶園土壤作為研究對(duì)象，分析探討了土壤EEAs 的變化特征及其與土壤環(huán)境因子的關(guān)系，以期為進(jìn)一步明確土壤酶學(xué)特征對(duì)天然林轉(zhuǎn)變?yōu)椴煌愋腿斯ち只蚍N植園后的響應(yīng)機(jī)制提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 研究區(qū)概況

研究區(qū)域位于浙江省安吉縣梅溪鎮(zhèn)（30°41'~30°42' N，119°46'~119°47' E），該區(qū)域?qū)賮啛釒ШＱ笮约撅L(fēng)氣候，四季分明，雨熱同期，雨季為每年的5—6月，年平均氣溫15.1 ℃，年降水量1 286 mm，無(wú)霜期228 d，土壤屬酸性紅壤，原生植被為以苦櫧（）、木荷（）、青岡（）等為優(yōu)勢(shì)種的天然常綠闊葉林（Evergreen broad-leaved forests，EBFs）。

1.2 土壤樣品采集與分析

于2019年4—6月對(duì)研究區(qū)域進(jìn)行了多次實(shí)地踏勘，在結(jié)合當(dāng)?shù)卣块T提供的相關(guān)資料后，選取相同海拔、坡向的EBFs 及其鄰近的EBFs 轉(zhuǎn)變約15~20 a 的粗放經(jīng)營(yíng)毛竹林（Moso bamboo plantations，MBPs）和轉(zhuǎn)變約20 a 的集約經(jīng)營(yíng)（每年10 月平均施用400 kg·hm的復(fù)合肥，N∶PO∶KO=15∶15∶15，且茶樹(shù)修剪枝葉還田）茶園（Tea plantations，TPs）為研究對(duì)象，各設(shè)置3 塊樣地，每塊樣地面積約20 m×20 m。于2019 年7 月在每塊樣地中根據(jù)五點(diǎn)取樣法采集0~20 cm 的土壤樣品，土樣過(guò)2 mm 篩后混合成一份樣品。將土壤樣品置于4 ℃便攜式冰箱中迅速帶回實(shí)驗(yàn)室并分成兩份，一份自然風(fēng)干用于測(cè)定土壤基本理化性質(zhì)，另一份保存在4 ℃冰箱中用于測(cè)定土壤生化指標(biāo)。

土壤容重（BD）采用環(huán)刀法測(cè)定；pH（水土比2.5∶1）利用 METTLER TOLEDOSeven Compact 型 pH 計(jì)（METTLER TOLEDO，USA）測(cè)定；土壤有機(jī)碳（SOC）采用外加熱重鉻酸鉀氧化-容量法測(cè)定；全氮（TN）采用半微量凱氏定氮法測(cè)定；全磷（TP）采用高氯酸-硫酸-鉬銻抗比色法測(cè)定；有效磷（AP）采用鹽酸-氟化銨-鉬銻抗比色法測(cè)定；微生物生物量碳（MBC）和微生物生物量氮（MBN）采用氯仿熏蒸直接提取法測(cè)定。土壤EEAs 采用改進(jìn)后的微孔板熒光法測(cè)定。各種酶的名稱、縮寫、作用及特定底物見(jiàn)表1。分別以4-甲基傘形酮（4-methylumvelliferyl，4-MUB）和L-二羥苯丙氨酸（Levodopa，L-DOPA）作為測(cè)定水解酶（其中LAP 用7-Amino-4-methylcoumarin）和氧化酶活性的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照物質(zhì)。取1.5 g 新鮮土壤放入125 mL醋酸鈉緩沖液（pH 5.0）中，以磁力攪拌器勻質(zhì)1 min 后，用八通道移液器分別 3 次吸取 200 μL 土壤漿液注入96 孔板內(nèi)作為樣品組，樣品組的第1~3 列額外再分別加入50μL的醋酸鈉緩沖液、標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照物質(zhì)和特定底物；此外，再分別3 次吸取200μL 醋酸鈉緩沖液注入96 孔板內(nèi)作為對(duì)照組，對(duì)照組的第1~3列也額外分別加入50μL 的醋酸鈉緩沖液、標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照物質(zhì)和特定底物。加液完畢后，將96 孔板經(jīng)25 ℃恒溫培養(yǎng)后用 BiotekSynergy H1 型酶標(biāo)儀（Biotek，USA）讀取熒光值或吸光值，其中水解酶在365 nm 激發(fā)光和450 nm 發(fā)射光下讀取，氧化酶在460 nm 吸收光下讀取。

表1 土壤酶的名稱、縮寫、作用及特定底物Table 1 Names，abbreviations，functions and substrates of the soil extracellular enzymes

1.3 數(shù)據(jù)處理與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)利用Excel 2016 進(jìn)行預(yù)處理，包括計(jì)算平均值和標(biāo)準(zhǔn)誤差（SE）等，文中所有天然林、茶園和毛竹林?jǐn)?shù)據(jù)皆為3 個(gè)樣地的平均值。在檢驗(yàn)數(shù)據(jù)的正態(tài)性和方差齊性后，采用SPSS 18.0 軟件的單因素方差分析（One-way ANOVA）及最小顯著差異法（LSD）確定3種土地利用類型間測(cè)定指標(biāo)的顯著差異性（<0.05 為差異顯著），采用Spearman 相關(guān)系數(shù)對(duì)土壤環(huán)境因子和土壤EEAs 進(jìn)行相關(guān)性分析。采用R語(yǔ)言 vegan 包、rdacca.hp 包和 ggplot2 包進(jìn)行冗余分析（RDA）并繪圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 研究區(qū)土壤基礎(chǔ)理化性質(zhì)及微生物學(xué)性質(zhì)

天然常綠闊葉林轉(zhuǎn)變?yōu)椴鑸@和毛竹林后，土壤BD未發(fā)生顯著改變（表2）。與天然林土壤相比，毛竹林土壤pH 顯著升高（<0.05），而茶園土壤pH 略有降低，但未達(dá)到顯著水平。天然林轉(zhuǎn)變?yōu)槊窳趾骃OC含量略有升高但未達(dá)到顯著水平，而轉(zhuǎn)變?yōu)椴鑸@后SOC 含量顯著降低了31.6%（<0.05）。土壤TN 和TP含量在3 種土地利用類型間無(wú)顯著差異。天然林轉(zhuǎn)變?yōu)椴鑸@和毛竹林后，土壤C/N 有所下降，但未呈現(xiàn)出顯著差異；毛竹林土壤C/P未出現(xiàn)顯著變化，而茶園土壤C/P 顯著降低了41.2%（<0.05）；毛竹林和茶園土壤N/P 略有升高，但均未達(dá)到顯著水平。天然常綠闊葉林轉(zhuǎn)變?yōu)槊窳趾?，土壤MBC 和MBN 含量分別顯著增加了118.2%和90.6%（<0.05），轉(zhuǎn)變?yōu)椴鑸@后，MBC 和MBN 含量卻分別顯著降低了54.9%和51.2%（圖1，<0.05），而MBC/MBN 在3種土地利用類型間無(wú)顯著差異。

圖1 研究區(qū)土壤微生物生物量碳、氮含量Figure 1 Soil microbial biomass carbon and nitrogen concentrations in study area

表2 研究區(qū)土壤理化性質(zhì)Table 2 Soil physicochemical properties in study area

2.2 研究區(qū)土壤EEAs的特征

天然林和兩種人工林的土壤EEAs 結(jié)果如表3 所示。天然林轉(zhuǎn)變的毛竹林中，土壤LAP、POX 活性分別顯著增加了385%和84.4%（<0.05），土壤ACP 活性顯著降低了58.9%（<0.05），其余EEAs 均未發(fā)生顯著變化；在由天然林轉(zhuǎn)變的茶園中，除土壤BX、LAP 及PER 活性未出現(xiàn)顯著變化外，BG、CBH、NAG和ACP的活性均顯著降低（<0.05），相比天然林分別降低了29.9%、51.8%、63.9%和36.6%，而POX 活性顯著升高了82.9%（<0.05）。

表3 不同土地利用類型土壤胞外酶活性（均值±標(biāo)準(zhǔn)誤）Table 3 Soil extracellular enzymes activity in three land-use types（Mean±SE）

2.3 土壤環(huán)境因子與土壤EEAs的關(guān)系

Spearman 相關(guān)性分析結(jié)果表明（表4），土壤pH與LAP活性呈極顯著正相關(guān)（<0.01）；土壤SOC含量與BG、CBH、NAG 和LAP 活性均呈極顯著正相關(guān)（<0.01）；土壤 AP 含量與 LAP 活性、C/N 與 POX 活性均呈顯著負(fù)相關(guān)（<0.05）；土壤 C/P 與 CBH 和 NAG 活性呈顯著正相關(guān)（<0.05），與LAP活性呈極顯著正相關(guān)（<0.01）；土壤N/P 與LAP 活性呈顯著正相關(guān)（<0.05），但與 PER 活性呈顯著負(fù)相關(guān)（<0.05）；土壤MBC 和 MBN 均與 BG、CBH、NAG 和 LAP 活性呈極顯著正相關(guān)（<0.01）。

表4 土壤胞外酶活性和土壤環(huán)境因子的關(guān)系Table 4 Correlations between soil extracellular enzyme activities and the environment factors

為了進(jìn)一步篩選出影響土壤總體EEAs的關(guān)鍵環(huán)境因子，將土壤環(huán)境因子BD、pH、SOC、TN、TP、AP、C/N、C/P、N/P、MBC、MBN 和 MBC/MBN 作為解釋變量，將土壤EEAs 作為響應(yīng)變量進(jìn)行冗余分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，RDA 的前兩軸分別解釋了土壤EEAs 變化的88.03%（RDA1）和6.53%（RDA2），其中土壤pH 是影響土壤總體EEAs的關(guān)鍵驅(qū)動(dòng)因子（圖2）。

圖2 環(huán)境因子與土壤EEAs的冗余分析（RDA）Figure 2 Redundancy analysis（RDA）of relationship between soil extracellular enzyme activities with soil environment factors

3 討論

3.1 土壤EEAs的變化特征

土壤碳轉(zhuǎn)化過(guò)程中有機(jī)質(zhì)的降解主要由土壤生物分泌的胞外酶催化實(shí)現(xiàn)。本研究發(fā)現(xiàn)天然林轉(zhuǎn)變?yōu)槊窳趾筒鑸@后，土壤活性碳及惰性碳獲取酶的活性分別產(chǎn)生了不同的響應(yīng)。天然林轉(zhuǎn)變?yōu)榇址沤?jīng)營(yíng)的毛竹林后，除土壤POX 活性顯著增加外，土壤活性碳獲取酶BG、BX、CBH 以及惰性碳獲取酶PER 的活性均未發(fā)生顯著變化，這與LIN 等在相鄰區(qū)域發(fā)現(xiàn)天然林轉(zhuǎn)變?yōu)榧s經(jīng)營(yíng)毛竹人工林后土壤BG、CBH活性均顯著降低的結(jié)果不同。造成這種差異的可能原因是集約經(jīng)營(yíng)毛竹林氮肥的施用會(huì)抑制土壤微生物活性，而本研究中粗放經(jīng)營(yíng)毛竹林土壤EEAs 并不會(huì)受到施肥的抑制。與毛竹人工林不同，天然林轉(zhuǎn)變?yōu)榧s經(jīng)營(yíng)的茶園后，伴隨SOC 和MBC 含量的降低，土壤BG 和CBH 活性均顯著下降，這可能是因?yàn)椴鑸@長(zhǎng)期施肥刺激了有機(jī)碳的礦化分解，進(jìn)而使活性有機(jī)碳含量降低，由于底物量的減少，微生物分泌活性碳獲取酶的量也隨之減少，此外，茶園土壤生態(tài)系統(tǒng)特殊的物質(zhì)循環(huán)模式造成了土壤酸化和鋁離子積累，這也會(huì)使土壤微生物豐度和活性下降，從而導(dǎo)致EEAs 的降低。土壤POX 與木質(zhì)素降解有關(guān)，其能將土壤腐殖質(zhì)中的芳香族化合物氧化成醌，再與土壤中的蛋白質(zhì)、氨基酸、糖類等反應(yīng)生成有機(jī)質(zhì)。在本研究中，天然林轉(zhuǎn)變?yōu)槊窳趾筒鑸@后，土壤POX 活性均顯著升高，這可能是由于天然林與毛竹林、茶園相比擁有更多的凋落物，充足的養(yǎng)分供應(yīng)使微生物為了降低制造酶的成本而減少了相關(guān)酶的生產(chǎn)，但在凋落物較少的毛竹林和茶園土壤中，微生物為了保障養(yǎng)分的供給不得不生產(chǎn)更多的POX 以從頑固性碳庫(kù)中獲取能量。

土壤氮素作為土壤肥力中比較活躍的元素，在生物地球化學(xué)循環(huán)中具有舉足輕重的地位，植物在生長(zhǎng)過(guò)程中需從土壤獲取大量的氮素養(yǎng)分，而這些氮素營(yíng)養(yǎng)的獲取也與土壤的酶促作用有關(guān)。本研究中，天然林轉(zhuǎn)變的粗放經(jīng)營(yíng)毛竹人工林相比天然林土壤，LAP活性顯著增加，NAG 活性略有增加但未達(dá)到顯著水平；而天然林轉(zhuǎn)變的集約經(jīng)營(yíng)茶園相比天然林，土壤NAG 活性和LAP 活性分別降低了63.9%和44.8%，根據(jù)資源配置理論可解釋為茶園土壤施肥增加了氮素等養(yǎng)分的輸入，充足的氮素使微生物或植物根系等不需要分泌更多的氮素獲取酶，因此降低了茶園土壤中NAG 和LAP 的活性。此外，氮獲取酶活性的降低也可能預(yù)示著茶園土壤微生物依靠有機(jī)氮礦化來(lái)獲取氮素養(yǎng)分的活動(dòng)減少，氮肥成為茶園土壤微生物的主要氮素養(yǎng)分來(lái)源。

土壤ACP是主要的磷素獲取酶，在本研究涉及到的6 種水解酶中，其活性最高，這在一定程度上反映出研究區(qū)域可能存在較強(qiáng)的磷限制。天然林轉(zhuǎn)變?yōu)槊窳趾筒鑸@后土壤ACP 的活性都出現(xiàn)了顯著降低，這可能與亞熱帶森林酸性土壤磷固定效應(yīng)強(qiáng)，存在磷限制有關(guān)。天然林土壤微生物在磷素供給不充足的情況下會(huì)增加土壤磷獲取酶的生產(chǎn)，以滿足其對(duì)磷素養(yǎng)分的需求，而施肥使茶園土壤磷素供給充足（茶園土壤AP 含量顯著高于天然林土壤），土壤微生物無(wú)需分泌更多的磷獲取酶，從而造成了與天然林相比，毛竹林和茶園土壤ACP 活性顯著降低，且土壤有機(jī)磷的礦化過(guò)程可能也不活躍。

3.2 土壤EEAs變化的關(guān)鍵驅(qū)動(dòng)因子分析

土壤EEAs 特征受環(huán)境因子的驅(qū)動(dòng)。BG 和CBH調(diào)節(jié)土壤纖維素的降解，尤其是BG 參與纖維素解聚的最后一步，其被認(rèn)為是最重要的碳獲取酶。本研究中土壤SOC 與BG 活性顯著相關(guān)，這與前人研究結(jié)果一致，同時(shí)也說(shuō)明了研究區(qū)內(nèi)纖維素在土壤有機(jī)質(zhì)輸入中有較大的貢獻(xiàn)。NAG 與LAP 是重要的氮獲取酶，其分別影響甲殼素和蛋白質(zhì)的降解，土壤NAG 活性會(huì)因?yàn)镾OC 含量及土壤微生物量的降低而受到抑制，在本研究中，NAG 與 SOC、MBC 和 MBN有顯著的相關(guān)性；此外，土壤LAP 活性與pH、SOC、AP、C/P、N/P、MBC 和 MBN 均具有顯著的相關(guān)性，這說(shuō)明LAP 活性相較其他土壤胞外酶更容易受到環(huán)境變化的影響。土壤C/N 與EEAs 關(guān)系密切，土壤EEAs受制于養(yǎng)分有效性及其化學(xué)計(jì)量比，本研究發(fā)現(xiàn)土壤C/N是POX活性的主要驅(qū)動(dòng)因子（表4），且ZHANG等的研究也進(jìn)一步支持了這一結(jié)果，即較低的C/N會(huì)使土壤氧化酶的活性增加。

本研究還通過(guò)將所有土壤環(huán)境因子作為解釋變量，所有EEAs 作為響應(yīng)變量進(jìn)行RDA，以篩選出土地利用變化后造成土壤總體EEAs變異的關(guān)鍵環(huán)境驅(qū)動(dòng)因子。RDA 結(jié)果表明（圖2），土壤pH 是造成總體EEAs 變異的唯一顯著影響因子。值得注意的是，與RDA 結(jié)果不同，Spearman 相關(guān)性分析顯示pH 僅與LAP 活性顯著相關(guān)，這是由于RDA 與經(jīng)典相關(guān)性分析的原理和目的均不相同，從RDA 可得知土地利用變化后土壤pH 對(duì)整體EEAs 變異的解釋度，而從Spearman 相關(guān)性分析得到的卻是pH 與單個(gè)土壤EEAs 的相關(guān)性，所以兩種分析可能會(huì)出現(xiàn)不同的結(jié)果。此外，以往研究也發(fā)現(xiàn)，土壤pH 是影響EEAs 的重要因素，例如ZHANG 等采用RDA 發(fā)現(xiàn)中國(guó)亞熱帶地區(qū)林地轉(zhuǎn)變?yōu)檗r(nóng)田后，土壤pH 顯著解釋了6 種碳獲取酶的總變異；TURNER等采集了29個(gè)英國(guó)低地牧場(chǎng)土壤樣品，發(fā)現(xiàn)土壤pH 可能通過(guò)影響土壤中占優(yōu)勢(shì)的生物類群來(lái)對(duì)磷酸酶活性造成影響。土壤pH 與胞外酶在土壤溶液中的穩(wěn)定性緊密相關(guān)，其可通過(guò)改變土壤微生物群落結(jié)構(gòu)和酶的空間結(jié)構(gòu)而改變土壤胞外酶的催化活性。土壤pH 對(duì)EEAs 的影響機(jī)制較為復(fù)雜，本研究中土壤EEAs總變異對(duì)pH的響應(yīng)機(jī)制還需在未來(lái)采用擴(kuò)增子測(cè)序、功能基因定量或代謝組學(xué)等方法做更深入地探究。

4 結(jié)論

（1）相比天然林，粗放經(jīng)營(yíng)的毛竹人工林土壤活性碳獲取酶、NAG 和PER 活性均無(wú)顯著差異；此外，毛竹林土壤的LAP和POX活性顯著高于天然林，ACP活性顯著低于天然林。

（2）相比天然林，集約經(jīng)營(yíng)茶園土壤BX、LAP 和PER 活性均無(wú)顯著差異；此外，茶園土壤的POX 活性顯著高于天然林，BG、CBH、NAG 和ACP 活性顯著低于天然林。

（3）冗余分析發(fā)現(xiàn)，粗放經(jīng)營(yíng)毛竹林、集約經(jīng)營(yíng)茶園和天然林間土壤總體EEAs 存在明顯差異，在影響土壤總體EEAs的一系列環(huán)境因子中，土壤pH的貢獻(xiàn)最大。因此，在土地利用變化背景下，土壤pH可在一定程度上解釋亞熱帶地區(qū)由天然林轉(zhuǎn)變的粗放經(jīng)營(yíng)毛竹人工林和集約經(jīng)營(yíng)茶園中土壤總體EEAs的變異規(guī)律。