食管癌中p63的表達(dá)及其與預(yù)后的關(guān)系

陳 瑤，趙學(xué)科，宋 昕，羅 宏，徐瑞華，魏夢霞，王 苒，陳亞杰,3，韓雪娜，吉佳佳，李留玉,3，楊媛嘖，高社干，4，王立東

食管癌作為世界上最常見的惡性腫瘤之一，預(yù)后極差，5 a生存率僅10% 左右[1]。TNM分期是評估惡性腫瘤預(yù)后的金標(biāo)準(zhǔn)[1]，但也有其局限性，因此有必要尋找補(bǔ)充性的預(yù)后標(biāo)志。雖然p53功能的喪失是食管癌發(fā)生的關(guān)鍵致癌步驟之一，但其突變通常被視為晚期事件，與p53表現(xiàn)出密切同源性的基因—p63的異常改變則被認(rèn)為是食管癌發(fā)生的早期事件[2-4]。鑒于樣本量小、隨訪時(shí)間不足等原因，鮮有研究提及p63表達(dá)在食管癌中的臨床意義及對患者預(yù)后的影響。本研究初步探討了p63與食管癌患者臨床病理特征的相關(guān)性及其在預(yù)后評估中的價(jià)值,現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象

回顧性分析了2006年至2016年鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院食管癌防治國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室食管癌和賁門癌臨床診療、病理和隨訪信息數(shù)據(jù)庫(1973年至2020年)中232例食管癌患者的資料。其中男195例，年齡(60.5 ± 9.1)歲；女37例，年齡(65.3 ± 6.4)歲。參考第6版UICC/AJCC制定的食管癌TNM分期標(biāo)準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①病理診斷為食管癌；②有明確的p63陰、陽性的記錄；③有明確的生存狀態(tài)。

1.2 隨訪

從確診日期開始，通過電話、村醫(yī)和入戶調(diào)查等方式進(jìn)行隨訪?；颊叱鲈汉蟮谝荒昝?個(gè)月隨訪1次，之后每年隨訪1次。末次隨訪日期為2020年9月24日，其生存期是指確診日期至末次隨訪日期或死亡(終點(diǎn)事件)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 25.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。采用卡方檢驗(yàn)分析不同p63表達(dá)食管癌患者的臨床病理特征分布差異；采用Kaplan-Meier法繪制生存曲線并進(jìn)行l(wèi)og-rank檢驗(yàn)；采用Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型進(jìn)行單變量和多變量分析，以評估p63表達(dá)在食管癌患者預(yù)后中的意義。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05，以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 p63表達(dá)在食管癌患者中的臨床分布特征

表1示，232例患者中182例(78.45%)p63免疫反應(yīng)陽性，只有50例(22.55%)為陰性。p63在飲酒的分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，飲酒的患者中p63陽性所占比例高于陰性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.006)。而p63在性別、年齡、吸煙、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和臨床分期上差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表1 食管癌患者p63表達(dá)的臨床特征分布 例 (%)

2.2 p63表達(dá)與食管癌預(yù)后的關(guān)系

圖1示，p63陽性組中位生存期為3.977 a，p63陰性組為2.426 a，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示p63陽性與食管癌患者較好的預(yù)后有關(guān)(P=0.023)。

圖1 食管癌患者p63陽性與陰性的總生存率比較

2.3 食管癌患者預(yù)后影響因素分析

為了確定影響食管癌生存的相關(guān)因素，本研究采用Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型進(jìn)行了單因素和多因素分析(表2)。單因素分析確定淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(HR：1.591，95%CI：1.066～2.374)、臨床分期(HR：2.024，95%CI：1.322～3.096)和p63 (HR：0.626，95%CI：0.416～0.941)與食管癌患者預(yù)后相關(guān)。在多因素分析中，臨床分期(HR：2.024，95%CI：1.322～3.096)被保留為食管癌的獨(dú)立預(yù)后因素。盡管單因素分析發(fā)現(xiàn)p63是影響食管癌患者生存的重要因素，但多因素分析結(jié)果不支持p63是一個(gè)獨(dú)立的預(yù)測因子(P=0.240)。

表2 影響食管癌患者生存的單因素及多因素回歸分析

3 討論

p63基因位于3q27-3q29，包含15個(gè)外顯子和兩個(gè)啟動(dòng)子，編碼多種不同亞型的p63蛋白，如TAp63α、TAp63β、TAp63γ等。p63是p53家族的成員，參與調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、分化、凋亡和其他關(guān)鍵細(xì)胞過程[5-6]。作為一種重要的轉(zhuǎn)錄因子，p63是表皮發(fā)育和上皮細(xì)胞分化的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子[6-7]。已有研究證實(shí)，p63在食管上皮的分化和形態(tài)發(fā)生中起重要作用[6]。Yang等[8]發(fā)現(xiàn)p63基因敲除小鼠表現(xiàn)出顯著的發(fā)育缺陷，包括上皮分層異常等，表明p63對于食管等上皮干細(xì)胞的增生和生存具有重要的意義。多項(xiàng)研究報(bào)道，p63在多種人類癌癥中過度表達(dá)，包括頭頸癌、口腔癌、肺癌、宮頸癌和食管癌[9-12]。顯然，p63在腫瘤發(fā)生中，尤其是鱗癌的發(fā)生中起著重要的作用。

近年來，越來越多的研究證明p63蛋白在食管癌的進(jìn)展中起重要作用。Ye S等[13]的結(jié)果表明p63可能通過Akt信號通路調(diào)節(jié)細(xì)胞周期，在食管鱗癌的進(jìn)展中發(fā)揮關(guān)鍵作用。Lee等[14]的研究表明p63通過激活β-catenin/c-Myc通路來調(diào)節(jié)食管鱗癌細(xì)胞的遷移和侵襲，因此，靶向p63可能成為食管鱗癌潛在的治療策略。Xu等[15]發(fā)現(xiàn)食管基底樣鱗狀細(xì)胞癌中，p63高表達(dá)患者的生存預(yù)后明顯優(yōu)于p63低表達(dá)患者，從而提出p63可能是食管基底樣鱗狀細(xì)胞癌的重要預(yù)后標(biāo)志物。

針對以往研究樣本量小、隨訪時(shí)間短的不足，本研究對歷時(shí)10 a之久的大樣本食管癌病例展開了回顧性研究。盡管在多因素分析中，p63不是預(yù)后的獨(dú)立影響因素，但通過單因素分析確定p63與食管癌患者預(yù)后相關(guān)，并結(jié)合生存曲線發(fā)現(xiàn)p63陽性組的預(yù)后明顯優(yōu)于陰性組。結(jié)果與相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道一致[16]。

綜上所述，雖然p63 的表達(dá)降低并不常見，但它對食管癌患者的預(yù)后有影響，且p63表達(dá)缺失提示預(yù)后不良，反映了其在生物學(xué)上的惡性潛能。p63有望成為判斷食管癌預(yù)后的指標(biāo)和潛在的治療靶點(diǎn)。