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    豬繁殖與呼吸綜合征疫苗的發(fā)展歷程與研究現(xiàn)狀

    2022-03-29 07:54:56王芳蕊韓克元
    畜牧獸醫(yī)科技信息 2022年2期
    關(guān)鍵詞:耳病活疫苗致病性

    王芳蕊,王 鎮(zhèn),韓克元,李 潔

    (天津市動物疫病預(yù)防控制中心,天津 300402)

    豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS),俗稱豬藍(lán)耳病,是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)引起的一種嚴(yán)重危害養(yǎng)豬行業(yè)的高度接觸性傳染病。PRRSV可分為歐洲型和美洲型兩個基因型,前者主要流行于歐洲地區(qū),后者主要流行于美洲和亞太地區(qū)。PRRSV型間差異顯著,型內(nèi)各毒株變異大。分子生物學(xué)研究表明歐洲和美洲兩地區(qū)的分離株存在廣泛的基因變異,美洲型毒株之間的差異性較大,而歐洲型毒株之間則相對保守。目前,PRRSV在我國的流行特點總體上來說是以美洲型毒株為主,但是歐洲型毒株在我國也有感染個例,有學(xué)者認(rèn)為,歐洲型和美洲型毒株在我國已經(jīng)并存多年。在我國流行的美洲型毒株中,高致病性毒株占據(jù)著主要地位,其在流行范圍、臨床癥狀、病理變化及發(fā)病、死亡率上,較經(jīng)典毒株明顯增強,因此2008年我國新修訂的《一、二、三類動物疫病病種名錄》將高致病性PRRS列為一類動物疫病,經(jīng)典PRRS列為二類動物疫病。近年來,PRRS在我國以地方性流行、散發(fā)為主,類NADC30毒株將繼續(xù)傳播,同時不排除出現(xiàn)新毒株流行的可能,也有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)臨床上有經(jīng)典PRRSV與高致病性PRRSV混合感染的現(xiàn)象。

    與多數(shù)病毒性疾病的防治相同,對PRRS的防治仍以疫苗免疫預(yù)防為主。目前國內(nèi)使用的豬繁殖與呼吸綜合征商品化疫苗主要有三大類:滅活疫苗、弱毒活疫苗、基因工程嵌合疫苗。本文將對疫苗類型、毒株逐一介紹,并對2018年1月~2021年7月18日各生產(chǎn)企業(yè)的獲批次數(shù)進行匯總。

    1 經(jīng)典毒株VR-2332株

    2005年4月,作為全球第一個豬繁殖與呼吸綜合征疫苗產(chǎn)品,勃林格殷格翰豬繁殖與呼吸綜合征弱毒疫苗正式進入中國市場,成為當(dāng)時國內(nèi)市場上第一個具有正式批文的PRRS疫苗。該疫苗是以Collins等1992年在美國分離美洲型經(jīng)典毒株ATCCVR-2332為疫苗種毒株。國外學(xué)者對該疫苗的免疫效果作了較為詳盡的研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn)該疫苗接種妊娠母豬后,流產(chǎn)率和斷奶前仔豬死亡率下降,活仔數(shù)上升,且未檢測到其向環(huán)境排毒;該疫苗免疫公豬,發(fā)現(xiàn)其能明顯地減少同源或異源強毒感染所引起的病毒血癥,且在精液中檢測不到排毒。國內(nèi)學(xué)者也對該疫苗的免疫效果作了評價,發(fā)現(xiàn)免疫該疫苗后豬能夠較早的產(chǎn)生抗體,且通過攻毒保護實驗發(fā)現(xiàn)其保護率達到63.6%,表明該疫苗的免疫保護效果較好。2016年,勃林格殷格翰泰州工廠建設(shè)完成,并于2017年12月通過中國農(nóng)業(yè)部GMP認(rèn)證。2018年1月~2021年7月18日江蘇勃林格殷格翰公司生產(chǎn)的豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗獲得批簽共121批(見表1)。

    表1 豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗生產(chǎn)獲批情況

    2 經(jīng)典毒株CH-1a株

    2000年,中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所郭寶清等用國內(nèi)首例分離株CH-1a作為疫苗用毒株,制備了豬繁殖與呼吸綜合征油佐劑滅活疫苗,并對3月齡仔豬間隔20d進行了2次免疫,結(jié)果是首次免疫后5d即可檢測到病毒特異性抗體,28d達到高峰,第56天仍可以檢測到抗體。2005年商品化豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗(CH-1a株)進入市場。2018年1月~2021年7月18日各生產(chǎn)企業(yè)獲批情況(見表2)。

    表2 豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗(CH-1a株)生產(chǎn)獲批情況

    3 高致病性毒株NVDC-JXA1株

    2007年,中國動物疫病預(yù)防控制中心田克恭等采用PRRSV高致病性毒株NVDC-JXA1成功研制高致病性豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗,該疫苗對高致病性豬繁殖與呼吸綜合征的免疫保護率達80%,仔豬與妊娠母豬接種后無明顯不良反應(yīng)。農(nóng)業(yè)部為滿足高致病性PRRS防疫急需,批準(zhǔn)豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗(NVDC-JXA1株)用于緊急防控,對相關(guān)企業(yè)核發(fā)了臨時生產(chǎn)文號。但是,該疫苗2018年底前未完成新獸藥注冊工作,農(nóng)業(yè)農(nóng)村部畜牧獸醫(yī)局2019年1月發(fā)布《關(guān)于停止生產(chǎn)豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗(NVDC-JXA1株)的函》,要求自2019年2月1日起,各豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗(NVDC-JXA1株)生產(chǎn)企業(yè)全部停止生產(chǎn)該疫苗,2007年核發(fā)的臨時生產(chǎn)文號同時廢止。2018年1月~2019年各生產(chǎn)企業(yè)獲批情況(見表3)。

    4 經(jīng)典毒株CH-1R株

    2007年,中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所蔡雪輝等由美洲型PRRSV CH-1a株體外連續(xù)傳代研制出豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗(Ch-1R株),并獲得新獸藥注冊證書。該活疫苗安全性和免疫原性皆很好。試驗證明,該疫苗免疫保護率為96.1%,高于國外同類疫苗(80~87%),對高致病性藍(lán)耳病的保護率超過78%。通過對高致病性PRRSV變異株與疫苗株的序列分析發(fā)現(xiàn),高致病性PRRSV變異處均位于同一個相對獨立的分支中,與CH-1a株親緣關(guān)系較近,與國外疫苗株VR2332親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。經(jīng)多次實驗表明,CH-1R株疫苗對變異株有明顯的保護作用,目前該疫苗是保護率相對較高的疫苗。2018年1月~2021年7月18日各生產(chǎn)企業(yè)獲批情況(見表4)。

    5 經(jīng)典毒株R98株

    豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗(R98株)由南京農(nóng)業(yè)大學(xué)和瑞普保定生物藥業(yè)有限公司利用自行分離的PRRSV弱毒株R98研制而成,通過累計80代細(xì)胞連續(xù)傳代和豬體連續(xù)回歸,毒力不返強,基因序列未見變異,免疫豬只后無不良臨床反應(yīng),仔豬的發(fā)病率降到18.3%以下,成活率達到90%以上,能夠較好的預(yù)防控制PRRSV,提高豬群生產(chǎn)性能。R98株是自然弱毒株,分離自藍(lán)耳病病毒抗體陽性而臨床健康的豬群,為美洲型自然弱毒株,高度安全穩(wěn)定,對普通藍(lán)耳病病毒臨床保護95.4%以上。2018年1月~2021年7月18日各生產(chǎn)企業(yè)獲批情況(見表5)。

    表5 豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗(R98株)生產(chǎn)獲批情況

    目前經(jīng)典株P(guān)RRS疫苗在國內(nèi)規(guī)?;i場的使用較多,種豬群以使用經(jīng)典毒株VR2332株和R98株疫苗為主,肉豬群使用Ch-1R株或R98株疫苗。

    6 高致病性毒株JXA1-R株

    2008年,中國動物疫病預(yù)防控制中心田克恭研究員等成功研制了高致病性PRRSV的JXA1-R株活疫苗,徹底打破了中國高致病性PRRS的防控局面。這種活疫苗對不同類型的PRRS綜合征均有較好的免疫效果,免疫期長達4個月。2017年以前,國內(nèi)政府招標(biāo)采購疫苗以JXA1-R株為主,隨后高致病性豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗HuN4-F112株、TJM-F112株、GDr180株上市,為我國有效防控高致病性豬繁殖與呼吸綜合征發(fā)揮了重要作用。變異株P(guān)RRS活疫苗JXA1-R株2018年1月~2021年7月18日各生產(chǎn)企業(yè)獲批情況(見表6)。

    表6 高致病性豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗(JXA1-R株)生產(chǎn)獲批情況

    7 高致病性毒株HuN4-F112株

    高致病性豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗(HuN4-F112株)是由中國農(nóng)科院哈爾濱獸醫(yī)研究所田志軍等研究人員將本研究室分離獲得的高致病性PRRSV毒株HuN4在Marc-145細(xì)胞上進行連續(xù)性傳代致弱研制而成,通過動物攻毒保護試驗證明,該疫苗免疫仔豬后能夠迅速產(chǎn)生抗體保護仔豬抵御高致病性PRRSV的感染,并且能有效緩解PRRSV所導(dǎo)致的各種臨床癥狀。2018年1月~2021年7月18日各生產(chǎn)企業(yè)獲批情況(見表7)。

    表7 高致病性豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗(HuN4-F112株)生產(chǎn)獲批情況

    8 高致病性毒株TJM-F92株

    2013年,高致病性豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗(TJM-F92株)上市,TJM-F92弱毒株是由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所武華研究室在高致病性PRRSV的傳代時分離出的一株自然基因缺失株。TJM-F92疫苗株缺失了Nsp2基因上360核苷酸,缺失的這段基因是免疫抑制相關(guān)基因,使病毒致病力下降,同時宿主對病毒的免疫力提升,提高了疫苗安全性。

    由于PRRS免疫抑制的特性決定了傳統(tǒng)的PRRS疫苗毒株也存在免疫抑制的問題,所以一直在疫苗免疫過程中,PRRS疫苗與豬瘟疫苗是不可以同時免疫的,臨床應(yīng)用中,兩種疫苗的免疫最少間隔2周以上。事實上即使間隔免疫也不可避免PRRS疫苗對豬瘟抗體產(chǎn)生的抑制,因為傳統(tǒng)PRRS疫苗的病毒血癥大多在28d以上,必然對豬瘟疫苗的效果產(chǎn)生影響。正是因為TJM-F92株缺失免疫抑制相關(guān)基因,疫苗沒有免疫干擾性,可以和豬瘟等其他疫苗同時使用,杜絕了傳統(tǒng)PRRS弱毒苗在使用時對豬瘟等疫苗的干擾。TJM-F92株不干擾豬瘟免疫應(yīng)答已得到長期的實驗檢驗,也在廣大地區(qū)的

    生產(chǎn)應(yīng)用中得到證實。2016年,高致病性豬繁殖與呼吸綜合征、豬瘟二聯(lián)活疫苗(TJM-F92株+C株)獲得獸藥批準(zhǔn)文號,首次實現(xiàn)豬瘟與藍(lán)耳同步聯(lián)合預(yù)防,效力疊加,應(yīng)用簡便。

    上述兩種疫苗2018年1月~2021年7月18日各生產(chǎn)企業(yè)獲批情況分別(見表8、表9)。

    表8 高致病性豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗(TJM-F92株)生產(chǎn)獲批情況

    表9 高致病性豬繁殖與呼吸綜合征、豬瘟二聯(lián)活疫苗(TJM-F92株+C株)生產(chǎn)獲批情況

    9 高致病性毒株GDr180株

    2015年,在中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所寧宜寶研究員的主持下,由廣東永順和中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所聯(lián)合研制的高致病性豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗(GDr180株)上市,該毒株經(jīng)過180代的傳代致弱,對不同階段的豬只都很安全。大量的檢測證明,疫苗毒僅局限于免疫豬的扁桃體內(nèi),在免疫豬體內(nèi)存留時間非常短,在豬群之間不會水平傳播;其免疫原性良好,免疫保護期長,交叉保護效果好;毒力回歸試驗,毒株遺傳穩(wěn)定,安全不返強。該疫苗2018年1月至2021年7月18日各生產(chǎn)企業(yè)獲批情況(見表10)。

    表10 高致病性豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗(DGr180株)生產(chǎn)獲批情況

    10 高致病性毒株+經(jīng)典毒株P(guān)C株

    基因工程嵌合疫苗是近年才研發(fā)出的一種新型豬藍(lán)耳病活疫苗,目前僅有一種毒株,即PC株。它通過反向遺傳操作和基因重組技術(shù),將經(jīng)典PRRSV毒株的sp株的部分基因(ORF3~ORF7基因及其間隔序列和3’端非編碼區(qū)的所有核苷酸序列)剪切,替換成高致病性PRRSV毒株的GD株相對應(yīng)的部分基因,整合成一個同時含有PRRSV經(jīng)典株和變異株的嵌合毒株。基因工程嵌合病毒活疫苗(PC株)結(jié)合了經(jīng)典株和高致病性毒株的部分基因,連續(xù)傳代遺傳穩(wěn)定;可同時預(yù)防經(jīng)典藍(lán)耳病和高致病性藍(lán)耳?。辉诎踩矫婷黠@優(yōu)于傳統(tǒng)活疫苗,該疫苗具有無體溫反應(yīng)、無毒力返強、不與其他毒株發(fā)生重組,免疫豬不排毒,無水平傳播風(fēng)險等優(yōu)點;由于該疫苗毒株在構(gòu)建時人工插入了一段特異性的DNA序列,所以它能夠?qū)σ呙缰旰鸵岸局赀M行鑒別,可用于豬藍(lán)耳病的凈化。該疫苗2018年9月正式上市,到2021年7月18日各生產(chǎn)企業(yè)獲批情況(見表11)。

    表11 豬繁殖與呼吸綜合征嵌合病毒活疫苗(PC株)生產(chǎn)獲批情況

    目前,PRRS仍然是我國豬場最主要的疾病之一,商品豬場普遍陽性,陰性種豬場屈指可數(shù)。RRSV毒株在我國呈現(xiàn)多樣性和復(fù)雜性,除了豬場中多數(shù)流行的毒株之外,還有一些是演化于疫苗毒株的返強毒株。各種研究結(jié)果表明PRRSV不同毒株的交叉保護有限,疫苗防控作用力度并不能完全有效阻止PRRSV的發(fā)生和散播,但疫苗接種計劃對預(yù)防或限制與感染相關(guān)的臨床癥狀的嚴(yán)重性是有用且必要的,新型疫苗的研發(fā)仍是解決問題的關(guān)鍵。大多數(shù)情況下,疫苗接種有助于減少病毒排毒和減少傳播,但如果長時間、盲目、普遍、高頻率的免疫藍(lán)耳弱毒疫苗,將增加豬場PRRSV的本底和感染豬的數(shù)量,疫苗免疫豬將會呈現(xiàn)長時間病毒血癥、排毒,疫苗病毒可在豬場循環(huán)與傳播,并可能返強、演化成野毒。因此,疫苗接種計劃必須與其他有助于限制病毒傳播的管理措施結(jié)合使用。就豬場的生產(chǎn)實踐來看,加強環(huán)境防控、生物安全防控和細(xì)菌性疾病的防控,運用合適的免疫策略,關(guān)注新毒株的出現(xiàn),了解所使用的疫苗的保護力和加強管理措施,才能更加有效控制PRRS。

    豬場防控藍(lán)耳病還需建立從內(nèi)到外的生物安全體系:(1)豬場外部生物安全主要致力于切斷傳播途徑,防止新毒株傳入。(2)豬場必須進行引種控制,確保不引抗體陽性種豬。(3)豬場內(nèi)部則要降低或清除場內(nèi)PRRSV的污染與病毒載量,阻斷病毒在豬群中的循環(huán)與傳播,建議豬群全進全出、批次生產(chǎn);多點飼養(yǎng);豬舍內(nèi)環(huán)境的清潔消毒;飼養(yǎng)員嚴(yán)禁串舍;凈道與污道分開;采用空氣過濾系統(tǒng);及時淘汰發(fā)病豬并進行無害化處理。

    當(dāng)前,非洲豬瘟防控的常態(tài)化加速了國內(nèi)養(yǎng)豬場生物安全防控的進度、大幅提高了生物安全水平,隔離、消毒、免疫、硬件改善等使得豬場細(xì)菌性感染的概率大幅度下降,我國控制豬藍(lán)耳病可利用這個時機積極走凈化道路,首先推動種豬場凈化,進而實現(xiàn)區(qū)域凈化。

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