外周血Treg、Th17及其比例在不同分期川崎病患兒中的變化及臨床意義

陳 飛,陳永萍

陜西省寶雞市第三醫(yī)院兒科,陜西寶雞 721004

川崎病(KD)是一種急性系統(tǒng)性血管綜合征，多發(fā)生于5歲以下兒童，患兒多表現(xiàn)為發(fā)熱、球結(jié)膜充血、皮疹等[1]。KD所致的冠狀動(dòng)脈損害(CAL)是兒童獲得性心臟病常見的病因，嚴(yán)重威脅患兒的生命健康[2-3]。相關(guān)研究表明，KD的發(fā)生和發(fā)展與免疫系統(tǒng)功能紊亂密切相關(guān)，其中調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞(Treg)、輔助性T淋巴細(xì)胞17(Th17)作為細(xì)胞免疫的重要組成部分，也參與了KD的發(fā)生和發(fā)展[4-5]。目前，外周血Treg百分比、Th17百分比及其比值在不同分期KD患兒中的變化及對(duì)CAL的預(yù)測(cè)價(jià)值尚不清楚。本研究探討外周血Treg百分比、Th17百分比及其比值在不同分期KD患兒中的變化及臨床意義,現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年9月至2020年10月本院收治的126例KD患兒作為研究組，另選取同期在本院體檢的60例健康兒童作為對(duì)照組。研究組男71例,女55例;年齡8個(gè)月至8歲，平均(3.21±1.52)歲。對(duì)照組男38例,女22例;年齡6個(gè)月至8歲，平均(3.15±1.46)歲。兩組研究對(duì)象性別、年齡等一般資料比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)同意。

1.2納入和排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1納入標(biāo)準(zhǔn) 研究組患兒符合《美國(guó)心臟病學(xué)會(huì)川崎病診斷指南》[6]中關(guān)于KD的診斷標(biāo)準(zhǔn)；對(duì)照組均為健康兒童；年齡6個(gè)月至8歲；患兒家屬或監(jiān)護(hù)人對(duì)本研究知情同意并簽署知情同意書。

1.2.2排除標(biāo)準(zhǔn) 合并先天性心臟病或其他先天性疾病患兒；合并惡性腫瘤患兒；腦膜炎或神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育畸形患兒；智力低下、廣泛性發(fā)育障礙及癲癇者；入院治療前已發(fā)生CAL；合并精神疾病者；合并呼吸系統(tǒng)疾病或感染性疾病患兒。

1.3方法

1.3.1臨床資料收集 收集可能影響KD患兒CAL發(fā)生的有關(guān)資料，主要包括性別、年齡、KD類型、KD分期、IVIG治療前發(fā)熱持續(xù)時(shí)間、是否為IVIG抵抗、C反應(yīng)蛋白(CRP)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)、血小板計(jì)數(shù)(PLT)、血紅蛋白(Hb)、清蛋白(ALB)、肌紅蛋白(Mb)、降鈣素原(PCT)、外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17。

1.3.2CAL發(fā)生情況及分組 入院治療2周后，統(tǒng)計(jì)CAL發(fā)生情況，依據(jù)《川崎病的冠狀動(dòng)脈損害》[7]中有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)CAL的發(fā)生進(jìn)行判斷，并經(jīng)超聲檢查確診。依據(jù)是否發(fā)生CAL分為CAL發(fā)生組和CAL未發(fā)生組。

1.3.3外周血Treg和Th17百分比檢測(cè)方法 抽取所有研究對(duì)象空腹外周靜脈血5 mL，肝素抗凝，采用流式細(xì)胞儀及其配套試劑盒測(cè)定，采用堿性磷酸酶-抗堿性磷酸酶法測(cè)定Treg和Th17百分比，并計(jì)算Treg/Th17。

1.3.4治療方法 本研究中所有KD患兒確診后均靜脈輸注丙種球蛋白(IVIG，國(guó)藥準(zhǔn)字：S20003024，廣東雙林生物制藥有限公司)2 g/kg，口服阿司匹林(國(guó)藥準(zhǔn)字：J20171021，拜耳醫(yī)藥保健有限公司)每次10 mg，4次/天，連續(xù)治療2周。

2 結(jié) 果

2.1兩組研究對(duì)象外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17比較 研究組外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17均高于對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 兩組研究對(duì)象外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17比較

2.2不同KD分期患兒外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17比較 急性期KD患兒外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17均高于恢復(fù)期,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 不同分期KD患兒外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17比較

2.3KD患兒CAL發(fā)生情況及CAL發(fā)生組和CAL未發(fā)生組KD患兒臨床資料比較 入院治療2周后，126例 KD患兒共有23例發(fā)生CAL，CAL發(fā)生率為18.25%。CAL發(fā)生組急性期KD占比、IVIG治療前發(fā)熱持續(xù)時(shí)間、IVIG抵抗占比、PLT、PCT、Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17均高于CAL未發(fā)生組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

表3 CAL發(fā)生組和未發(fā)生組KD患兒臨床資料比較[ n(%)或

組別nIVIG抵抗CRP(mg/L)WBC(×109/L)PLT(×109/L)Hb(g/L)CAL發(fā)生組234(17.39)87.65±12.5313.56±4.18396.75±42.18107.35±12.33CAL未發(fā)生組1034(3.88)83.26±10.7611.87±4.02351.02±32.46105.82±12.68χ2/t5.7691.7161.8103.6910.526P0.0160.0890.0730.0030.600

組別nALB(g/L)Mb(μg/L)PCT(ng/mL)Treg百分比(%)Th17百分比(%)Treg/Th17CAL發(fā)生組2336.57±5.1323.05±5.671.16±0.564.75±1.326.41±1.470.75±0.31 CAL未發(fā)生組10335.18±4.9221.83±6.080.68±0.373.85±1.065.28±1.250.59±0.28 χ2/t1.2160.8804.1274.0545.7676.676P0.2260.3800.0010.002<0.001<0.001

2.4影響KD患兒CAL發(fā)生的多因素Logistic分析 以KD分期(急性期=1，恢復(fù)期=0)、IVIG治療前發(fā)熱持續(xù)時(shí)間(連續(xù)變量)、IVIG抵抗(是=1，否=0)、PLT(連續(xù)變量)、PCT(連續(xù)變量)、Treg百分比(連續(xù)變量)、Th17百分比(連續(xù)變量)及Treg/Th17(連續(xù)變量)作為自變量，是否發(fā)生CAL(發(fā)生=1，未發(fā)生=0)作為因變量，進(jìn)行多因素Logistic回歸分析，結(jié)果顯示,PCT、Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17均為影響KD患兒CAL發(fā)生的危險(xiǎn)因素(OR=2.740、2.724、3.340、3.235，P<0.05)，見表4。

表4 影響KD患兒CAL發(fā)生的多因素Logistic回歸分析

2.5外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17對(duì)KD患兒CAL發(fā)生的預(yù)測(cè)價(jià)值 ROC曲線分析結(jié)果顯示，外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17預(yù)測(cè)KD患兒CAL發(fā)生的最佳截?cái)嘀捣謩e為4.21%、5.74%、0.66，AUC分別為0.746、0.682、0.758，見圖1、表5。

圖1 外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17對(duì)KD患兒CAL發(fā)生預(yù)測(cè)的ROC曲線

表5 外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17對(duì)KD患兒CAL發(fā)生的預(yù)測(cè)效能

3 討 論

KD病因及發(fā)病機(jī)制目前尚不明確，其可能會(huì)導(dǎo)致系統(tǒng)、臟器損害，其中以CAL最為常見，嚴(yán)重者可引發(fā)冠狀動(dòng)脈瘤，致心肌缺血梗死，嚴(yán)重威脅患者的生命健康[8-9]。及早發(fā)現(xiàn)患兒是否發(fā)生CAL并及時(shí)進(jìn)行干預(yù)，有利于改善患兒預(yù)后[10]。探討外周血Treg百分比、Th17百分比及其比值在不同KD分期患兒中的變化及臨床意義十分重要。

本研究發(fā)現(xiàn)，研究組外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17均高于對(duì)照組，且急性期KD患兒外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17均高于恢復(fù)期，由此提示，與健康兒童比較，KD患兒外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17存在異常偏高現(xiàn)象，本研究結(jié)果與徐振宇等[11]研究結(jié)果相近。本研究結(jié)果顯示，入院治療2周后，KD患兒CAL發(fā)生率為18.25%，CAL發(fā)生組KD急性期占比、IVIG治療前發(fā)熱持續(xù)時(shí)間、IVIG抵抗占比、PLT、PCT、Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17均高于CAL未發(fā)生組。多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，PCT、Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17均為影響KD患兒CAL發(fā)生的危險(xiǎn)因素，由此提示KD患兒CAL的發(fā)生率較高，需引起患兒家屬及醫(yī)護(hù)人員的注意，臨床上需逐一控制各項(xiàng)因素對(duì)KD患兒的影響，以降低CAL的發(fā)生率。PCT是監(jiān)測(cè)機(jī)體炎性反應(yīng)的重要參數(shù)之一，可對(duì)炎癥性疾病的臨床進(jìn)程、預(yù)后進(jìn)行評(píng)價(jià)、預(yù)測(cè)[12-13]。CHEN等[14]研究指出，若機(jī)體存在嚴(yán)重感染時(shí)，PCT水平會(huì)異常升高。Treg主要來源于胸腺，主要通過分泌白細(xì)胞介素-10等炎癥因子，直接或間接對(duì)抗原特異性免疫應(yīng)答進(jìn)行調(diào)節(jié)，與KD患兒疾病的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)[15]。Th17的主要功能是促進(jìn)炎性反應(yīng)，周玉杰[16]研究表明，白細(xì)胞介素-17、白細(xì)胞介素-21等炎癥因子可能促進(jìn)KD患兒疾病的發(fā)生和發(fā)展。Treg/Th17發(fā)生變化，表明外周血Treg/Th17的平衡被打破，T細(xì)胞的免疫功能出現(xiàn)異常。ROC曲線分析結(jié)果顯示，外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17預(yù)測(cè)KD患兒CAL發(fā)生的最佳截?cái)嘀捣謩e為4.21%、5.74%、0.66，AUC分別為0.746、0.682、0.758，由此提示外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17預(yù)測(cè)KD患兒CAL發(fā)生的效能較高，可作為預(yù)測(cè)KD患兒CAL發(fā)生的重要參考指標(biāo)。

綜上所述，急性期KD患兒外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17均高于恢復(fù)期，外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17預(yù)測(cè)KD患兒CAL發(fā)生的效能較高，可作為預(yù)測(cè)KD患兒CAL發(fā)生的重要參考指標(biāo)，建議在臨床上對(duì)KD患兒進(jìn)行外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17監(jiān)測(cè)，若出現(xiàn)明顯異常，應(yīng)及時(shí)進(jìn)行調(diào)控，以降低KD患兒CAL發(fā)生率。