壩光濕地園野生鳥類疫源疫病監(jiān)測的研究

王 凱

(深圳市自然保護區(qū)管理中心，廣東 深圳 518000)

0 引言

深圳市地處廣東省南部，位于北回歸線之南，是我國重要的海濱城市，也是東半球國際候鳥的遷徙通道。每年冬季上萬只候鳥會到達深圳進行停歇和越冬，壩光片區(qū)位于深圳市大鵬新區(qū)的東北角，壩光濕地園鳥類資源豐富，海岸線曲折，山巒環(huán)繞，植被蔥郁，海岸線分布有古銀葉樹群落、紅樹林生態(tài)濕地園、水庫、蘆葦池塘等重要生態(tài)資源，由于鳥類分布的種類多、種群數(shù)量大，其鳥種數(shù)量的變化在某種程度上也反映了壩光濕地園生態(tài)資源的變化。野鳥可能帶的病毒中對人威脅最大的便是高致病性禽流感病毒，例如H5、H7亞型禽流感病毒。根據(jù)野生動物疫情防控辦法，需要對野生動物疫源疫病進行主動監(jiān)測，設(shè)置前哨崗，做到主動監(jiān)測，提前防范。

掌握該片區(qū)鳥類疫源疫病分布特征和及時發(fā)現(xiàn)外來疫病是監(jiān)測的主要任務(wù)。為掌握該區(qū)域鳥類種類的變化情況，從2017年開始對壩光濕地園片區(qū)進行鳥類監(jiān)測，進一步的掌握濕地園鳥類疫病狀況、數(shù)量、種群、鳥種區(qū)域信息，建立鳥類疫源疫病數(shù)據(jù)庫，調(diào)查鳥類數(shù)量、種群變化的規(guī)律，調(diào)查的結(jié)果為后續(xù)的鳥類監(jiān)測和預(yù)測鳥類疫源疫病提供重要的參考依據(jù)。

1 監(jiān)測基本情況

1.1 監(jiān)測方法

疫源疫病監(jiān)測方式分為被動監(jiān)測和主動監(jiān)測，主動監(jiān)測是在疫情發(fā)生前對監(jiān)測點進行定期監(jiān)測，有利于早發(fā)現(xiàn)疫情，制定預(yù)防措施；被動監(jiān)測是在疫情發(fā)生后，進行疫情的應(yīng)急處理，往往比較被動，只能采取補救的措施，所以主動監(jiān)測是符合國際通用慣例的，也是目前國內(nèi)野生動物疫源疫病監(jiān)測的發(fā)展趨勢。掌握野生鳥類分布特征，有助于預(yù)防措施的制定，進行高致病性禽流感監(jiān)測采樣檢測，可以提前發(fā)現(xiàn)疫病，及早采取預(yù)警措施，可以隨時掌握鳥類疫情動態(tài)，起到前哨的作用，顯著降低人和動物高致病性禽流感的發(fā)病率。

采用固定路線調(diào)查和固定地點直接計數(shù)法相結(jié)合的方式進行監(jiān)測。根據(jù)壩光濕地園野生鳥類分布、活動、遷徙及生境特點確定具體的巡查路線，沿固定路線徒步監(jiān)測，在野鳥重要棲息地、活動地點和歷史野鳥分布記錄點設(shè)置固定監(jiān)測點，收集野鳥糞便樣本，統(tǒng)計能夠觀察到范圍內(nèi)的所有鳥類。對于監(jiān)測路線上常見鳥類進行就近觀察；對灘涂，海域區(qū)域的監(jiān)測根據(jù)潮汐規(guī)律，選取最佳潮位進行觀察，盡可能利用調(diào)查設(shè)備拉近與鳥的距離，提高準確計數(shù)和鳥類的識別。根據(jù)禽流感在不同鳥類中發(fā)生的相對頻率，將樣品采集的對象偏向于水鳥。采集的主要是野鳥的糞便拭子樣本，對于野鳥糞便樣本的采集，只采集新鮮糞便樣本，一般是采集早晨新鮮糞便，并將其放入含有抗菌素的禽流感病毒采樣管里面，盡量使用非滅活型保存液，方便后續(xù)實驗室檢測。

1.2 監(jiān)測時間

2020年1-12月對深圳市壩光濕地園片區(qū)鳥類進行鳥類監(jiān)測，歷時12個月。根據(jù)不同季節(jié)，結(jié)合鳥類遷徙的特點將一年調(diào)查時間分為，遷徙季(11-4月)和非遷徙季(5-10月)。遷徙季每個星期調(diào)查5次，每次采集糞便樣本(3～6份)；非遷徙季每個星期調(diào)查1次，每次采集糞便樣本(1～3份)，每次調(diào)查時間持續(xù)2～4 h。需要注意的是糞便樣本的采集時間，主要是在早晨的7:00—8:00，因為這段時間是野鳥覓食的高峰期，是收集新鮮糞便的最佳時間。收集糞便時，盡量避免收集被太陽暴曬過的糞便，因為這樣會降低檢測的準確性。調(diào)查時間如表1所示。

表1 2020年壩光濕地園鳥類監(jiān)測時間表

1.3 監(jiān)測設(shè)備

使用的設(shè)備包括施華洛世奇單筒望遠鏡、雙筒望遠鏡、GPS定位儀，計數(shù)器、禽流感快速檢測試劑盒(通用性)、禽流感病毒采樣管(非滅活型)、一次性手套口罩、密封袋、保溫箱、記錄本、手機。

1.4 監(jiān)測點的選取

監(jiān)測點的選取尤為重要，監(jiān)測點的選擇，決定著能看到鳥種的數(shù)量和類別以及鳥類糞便樣本的收集度。根據(jù)歷年濕地園鳥類集中分布區(qū)域，再結(jié)合現(xiàn)場實地勘察結(jié)果，將監(jiān)測點分為5個，監(jiān)測點的生境類型包括了濱海灘涂、蘆葦水塘、林場和草地，具體表2所示。

表2 壩光濕地園鳥類資源監(jiān)測點

2 監(jiān)測采樣的工作細節(jié)

2.1 采樣原則

野鳥在確定的監(jiān)測范圍及監(jiān)測點內(nèi)，所能監(jiān)測到的鳥類90%都是國家或省級重點保護野生動物，應(yīng)保護動物，以活動區(qū)域環(huán)境樣品、糞便排泄物拭子的方式為主，這些樣本也是最容易獲得的，且不會對野生鳥類造成傷害；如出現(xiàn)鳥類意外死亡，疑似疫情情況下進行野鳥組織、咽肛拭子、臟器等采樣監(jiān)測的需嚴格按照《廣東省突發(fā)重大陸生野生動物疫情應(yīng)急預(yù)案》(2010年6月26日廣東省林業(yè)廳發(fā)布實施)LY/T 2359-2014 陸生野生動物疫源疫病監(jiān)測技術(shù)規(guī)范進行采樣。

2.2 采樣種類

野鳥糞便樣本:采集野鳥糞便樣本時，一定要掌握糞便采集的幾個要點，一個是采集的糞便一定要新鮮，沒有被太陽直射過的；二是采糞便樣本時，不可直接將整個糞便樣本放進采樣管，僅采集糞便上面的透明黏液即可。

野鳥尸體及組織樣本:當監(jiān)測發(fā)現(xiàn)死鳥，需要對野鳥尸體進行組織采樣時，可以先觀察野鳥尸體是否已經(jīng)腐爛，只對死亡時間在24 h內(nèi)的野生鳥類進行采樣，因為超過24 h的鳥類尸體腐爛嚴重會影響檢測結(jié)果，所采組織樣本盡量取典型病變部位。

動物樣本:對于一些無法進行現(xiàn)場采樣的，疑似疫病野鳥尸體，可以直接將野鳥尸體進行密封保存，凍存后，立即送實驗室進行檢查。

2.3 采集樣品的保存

樣品密封于塑料袋或病毒采樣管中。能在24 h送到實驗室的樣品在2℃～6℃環(huán)境下運輸，否則進行冷凍后再行運輸；不能及時送檢的樣品，應(yīng)冷凍-70℃或液氮長期保存，并防止反復(fù)凍融。

2.4 采集樣品的包裝

樣品應(yīng)密封包裝，采用的是非滅活型的病毒采樣管，管外標注樣品名，采樣日期，與采樣記錄本中的信息一一對應(yīng)，當樣品中含有疑似高致病性病原體時，標注警示語或提示用語。

2.5 采集樣品的檢測

現(xiàn)場采集的野鳥糞便樣本，首先需要進行現(xiàn)場快速檢測，使用的是韓國安捷Anigen禽流感抗原檢測試劑盒(通用性)，因為抗原檢測試劑檢測速度快，現(xiàn)場幾分鐘就可以出結(jié)果，能夠在疫情發(fā)生早期檢測出野鳥體內(nèi)是否含有病毒，從而給疫源疫病檢測提供前期幫助。在監(jiān)測區(qū)域內(nèi)采集的每一份樣本都會進行快速檢測，對于一些疑似疫源的樣本則委托深圳市動物疫病預(yù)防控制中心采用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)(RT-PCR)方法進行再次檢測。RT-PCR檢測對比現(xiàn)場快速檢測，準確率會更高，但缺點也會很明顯，時間也會更久，所以進行野鳥糞便樣本檢測還是以現(xiàn)場快速檢測為主。

2.6 采樣防護措施

采樣之前先根據(jù)采樣的樣品種類以及周圍環(huán)境條件，提前做好預(yù)防措施。在野外對疑似禽流感疫病死亡動物采樣，采樣時應(yīng)穿戴好防護服、護目鏡、N95或醫(yī)用外科口罩、橡膠手套和膠靴等；每次取樣后，應(yīng)洗手消毒；并對采樣現(xiàn)場進行消毒處理。進行常規(guī)野鳥糞便采樣時，也需要佩戴一次性醫(yī)用外科口罩和一次性手套，建議使用一次性加厚的乳膠手套。在采樣和現(xiàn)場快速檢測完成后，需將現(xiàn)場檢測和采樣垃圾密封帶走，帶回實驗室，進行專門回收銷毀處理，不可隨意丟棄。

3 監(jiān)測結(jié)果

一年時間共計監(jiān)測鳥類67種，隸屬9目29科，其中佛法僧目鳥類2種，占鳥類種數(shù)的2.99%；鴿形目鳥類2種，占鳥類種數(shù)的2.99%；鸛形目鳥類6種，占鳥類種數(shù)的8.96%；鶴形目鳥類1種，占鳥類種數(shù)的1.49%。鸻形目鳥類4種，占鳥類種數(shù)的5.97%；鵑形目鳥類6種，占鳥類種數(shù)的8.96%；雀形目鳥類42種，占鳥類種數(shù)的62.69%；隼形目鳥類3種，占鳥類種數(shù)的4.48%；雨燕目鳥類1種，占鳥類種數(shù)的1.49%。從野鳥種類組成上看，以雀形目鳥類種數(shù)為最多，由于監(jiān)測采樣是以雁鴨類和鸻鷸類等水鳥為主，所以把采樣重點還是放在了濱海灘涂和蘆葦水塘區(qū)域，總計采集野鳥糞便樣本406份其中委托深圳市動物疫病預(yù)防控制中心采用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)(RT-PCR)方法檢測56份，自行采用禽流感抗原速測卡膠體金快速法檢測406份，野鳥H5、H7亞型禽流感病毒檢測結(jié)果均為陰性。處理野鳥死亡1例，即2020年2月7日，在壩光濕地園灘涂發(fā)現(xiàn)1只小白鷺死亡，立即對現(xiàn)場進行封鎖、勘察、消毒處理，并對死體進行禽流感快速檢測，檢測結(jié)果為陰性，后在現(xiàn)場再次對死體進行采樣保存、消毒后進行深埋作無害化處理，最終實驗室RT-PCR監(jiān)測結(jié)果也為陰性。

3.1 監(jiān)測區(qū)域內(nèi)鳥類的組成和分布狀況

2020年在壩光濕地園監(jiān)測到的67種鳥類中，有國家重點保護鳥類7種，屬于國家二級保護鳥類的有鳳頭鷹、紅隼、蛇雕、白胸翡翠、畫眉、褐翅鴉鵑、小鴉鵑。集群分布的種類有白鷺、大白鷺、蒼鷺、青腳鷸、金眶鸻、白頭鵯、紅耳鵯、黑臉噪鹛、暗綠繡眼鳥，最大統(tǒng)計數(shù)量為白鷺971只，少見和偶爾見到的鳥種有海南藍仙鹟、鳳頭鷹、白腹鳳鹛、蛇雕、赤紅山椒鳥。

從鳥類的生境分布來看，濱海灘涂區(qū)分布的鳥類主要有青腳鷸、金眶鸻、蒼鷺、白鷺、大白鷺等，該區(qū)是水鳥主要覓食地，也是觀察水鳥最佳的監(jiān)測點，總計監(jiān)測到蒼鷺473只、大白鷺442只、金眶鸻288只，該區(qū)域受潮汐的影響，漲潮為水，退潮為灘，因此該區(qū)的鳥類活動與潮汐有關(guān)。漲潮后，鳥類多到高處灘涂或者周邊的紅樹林區(qū)域棲息，也有部分鳥類到池塘區(qū)域休息；退潮后，則前往該區(qū)域進行覓食活動。蘆葦池塘區(qū)域也分為淺水區(qū)和深水區(qū)，這里是大部分水鳥類的覓食地，也是多種涉禽的棲息地，主要分布的鳥類有普通翠鳥、白胸翡翠、黑水雞、黃尾鳽、暗綠繡眼鳥、長尾縫葉鶯等，深水區(qū)主要是白胸翡翠、黑水雞的主要要棲息地，其中黑水雞有112只、白胸翡翠有134只。林場和草地則是雀形目鳥類的重要覓食地，棲息的鳥種多達42種，主要有白鹡鸰、黑臉噪鹛、褐翅鴉鵑、紅耳鵯、鵲鴝、喜鵲、珠頸斑鳩、烏鶇、黑領(lǐng)椋鳥、灰椋鳥、山斑鳩、大嘴烏鴉、白頭鵯等。鳥類監(jiān)測種類分布統(tǒng)計如表3所示。

表3 2020年壩光濕地園鳥類監(jiān)測種類統(tǒng)計表

續(xù)表3

3.2 鳥類種類和數(shù)量的動態(tài)變化

鳥類種類和數(shù)量的變化，在鳥類遷徙季不管是鳥類種類和數(shù)量都會達到監(jiān)測的最高峰，整個監(jiān)測期間，在壩光監(jiān)測次數(shù)達到了144次，統(tǒng)計鳥種數(shù)量最多為59種，出現(xiàn)在4月，統(tǒng)計到最少鳥種為35種，出現(xiàn)在7月份。詳細鳥類種類和數(shù)量變化如圖1所示。

圖1 2020年壩光濕地園鳥類監(jiān)測種類和數(shù)量變化圖

從圖1能夠看出，整年度除了4月份，其他月份鳥種變化幅度很小，最多47種，最少35種，但鳥種數(shù)量上的變化就比較大了，其實主要變化階段，就是遷徙季和非遷徙季的相差較大，最多1 184只，最少264只，表明在遷徙季，鳥類不管是數(shù)量還是種類都是高于非遷徙季的，那么監(jiān)測的重點放在鳥類遷徙季也是非常正確的。

4 結(jié)語

通過監(jiān)測，掌握了壩光濕地園區(qū)域鳥類種類、種群數(shù)量動態(tài)變化情況，也明確知道鳥種的區(qū)域分布，知道了監(jiān)測采樣的具體地點，可以很明確在哪可以很快地采集到水鳥、林鳥糞便。通過監(jiān)測也能看到，遷徙季和非遷徙季其實鳥種數(shù)量變化并不大，所以這一項數(shù)據(jù)可以看出，遷徙季大部分鳥類并不會到壩光濕地園進行停歇和覓食，絕大部分都是常住鳥類。而且通過2020年監(jiān)測信息與往年歷史記錄相比較監(jiān)測到鳥種較少，可能與人為活動相關(guān)，對鳥種數(shù)量變化應(yīng)予以重視和長期監(jiān)測。鳥類資源調(diào)查對壩光濕地園生態(tài)系統(tǒng)的完整性，對候鳥和留鳥的保護，尤其對保護海岸線古銀葉樹群落、紅樹林生態(tài)濕地園等重要生態(tài)資源十分重要，應(yīng)予以長期重點監(jiān)測。并且所有的監(jiān)測信息和數(shù)據(jù)的收集，預(yù)示著鳥類疫源疫病數(shù)據(jù)庫的初步建立，監(jiān)測的結(jié)果也能為后續(xù)的監(jiān)測和預(yù)測鳥類疫源疫病提供重要的參考依據(jù)。

從一年的監(jiān)測工作的實踐來看，也確實存在著一些問題，一是監(jiān)測的時間段比較單一，只集中在早晨，這樣會影響鳥類監(jiān)測和統(tǒng)計的結(jié)果，統(tǒng)計到的鳥類種數(shù)和數(shù)量少于實踐分布的數(shù)量，后面會增加傍晚的監(jiān)測時間段，這樣就含括了鳥類活動和覓食的主要時間段，減少統(tǒng)計誤差。二是鳥類糞便樣本采集數(shù)量較少，且糞便種類分辨較難，按照監(jiān)測到的鳥種數(shù)量來對比，樣本采集數(shù)量相對較少，并沒有含括到監(jiān)測區(qū)域內(nèi)的全部鳥種。因此在今后的監(jiān)測工作中，需要積累采樣經(jīng)驗，通過糞便辨別出野鳥的種類加大采樣數(shù)量和種類。