醋延胡索飲片中延胡索乙素與其炮制溫度的相關分析

鄭鎮(zhèn)永　陳春娣　黃昌杰　黃華強　楊素明

摘要：目的：驗證HPLC法測定醋延胡索飲片中的延胡索乙素含量，探索不同炮制溫度醋延胡索飲片中延胡索乙素的相關性，以及內在差異;方法： 色譜方法為：采用以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-0.1%磷酸溶液（55：45）為流動相;檢測波長為280nm; 結果：醋炙溫度的變化會影響醋延胡索中延胡索乙素的含量。結論：本檢測方法簡單，結果準確，重現性好;能準確的指導日常醋炙溫度參數的設置，用140℃進行醋炙延胡索乙素含量最高。

關鍵詞：醋延胡索;延胡索乙素;醋炙;溫度;

【中圖分類號】R97???????????? 【文獻標識碼】A???????????? 【文章編號】2107-2306（2022）1--01

延胡索（CORYDALIS RHIZOMA）為罌粟科植物延胡索Corydalis yanhusuo W.T.Wang的干燥塊莖。夏初莖葉枯萎時采挖，除去須根，洗凈，置沸水中煮至恰無白心時，取出，曬干。延胡索辛、苦，溫。歸肝、脾經。能活血，行氣，止痛。用于胸脅、脘腹疼痛，胸痹心痛，經閉痛經，產后瘀阻，跌撲腫痛^[1]。。延胡索藥用價值高，應用范圍廣，臨床常用來鎮(zhèn)痛抗炎，抗腫瘤，治療胃腸道及心血管疾病;延胡索主要生于丘陵草地。本實驗采用HPLC法測定醋延胡索飲片中延胡索乙素含量測定，進一步分析醋炙溫度和時間與其延胡索乙素含量的相關性，為該飲片提供更全面的實驗依據，探索更合理的醋炙條件。

1儀器、設備與試藥

1.1儀器

LC-16型高效液相色譜儀（島津儀器（蘇州）有限公司）;HH-8型數顯恒溫水浴鍋（常州澳華儀器有限公司）;SHZ-D（Ⅲ）型循環(huán)水式多用真空泵（河南省予華儀器有限公司）; MSE3.6P-0CE-DM型精密分析天平（賽多利斯科學儀器（北京）有限公司）;AUW120D型分析天平（日本島津）;DZF6020MBE型真空干燥箱（上海博迅實業(yè)有限公司）;QHRO-10L型超純水儀 （東莞市謙和水處理工程有限公司）等。

1.2 設備

RY-3000潤藥機（方型）（杭州富陽康華制藥機械有限公司）、SQY-300往復式切藥機（杭州富陽康華制藥機械有限公司）、LG-KFFRS-15IIW熱泵烘干抽濕機（東莞市藍冠環(huán)保節(jié)能科技有限公司）、CY550-Ⅲ電熱炒藥機（常熟市中藥機械廠）、XY-700洗藥機（杭州富陽康華制藥機械有限公司）等。

1.3 試藥

延胡索乙素（批號：110726-202020，中國食品藥品檢定研究院）;甲醇、乙腈（色譜純，霍尼韋爾貿易（上海）有限公司），其余試劑均為分析純;延胡索樣品來自浙江，經副主任中藥師黃昌杰鑒定為罌粟科植物延胡索Corydalis yanhusuo W.T.Wang的干燥塊莖，具體信息見表1;米醋（批號：F200401，山西醯湖美食品有限公司）。

2 飲片的制備

2.1 炮制工藝

2.1.1 凈制：清除混在藥材中的雜質及霉變品、泥土及灰塵等。

2.1.2 洗潤：將凈制后的中間產品，用流動的飲用水清洗，將藥材表面的泥沙雜質清洗干凈，用潔凈的盛器接盛洗好的藥材。

2.1.3 切制：按切藥機操作規(guī)程操作，設置好刀距及切制速度，切藥時先試切，用游標卡尺檢測，調整好切制厚度，符合要求后再正式切藥，片厚3mm。

2.1.4 醋炙：設置炒藥機溫度，開啟炒藥機預熱，待升至設定溫度時，將悶潤好的藥材倒入炒藥機中;每次醋炙時，用文火^[5]（120～150℃）炒干，微有醋香氣，出料。

2.2 樣品的準備? 取延胡索藥材，除去雜質后清洗干凈瀝干水，加入米醋拌勻，放入潤藥機中潤15h至無干心米醋吸盡，切3mm片的;炒藥機分別設置120℃、125℃、130℃、135℃、140℃、145℃、150℃進行醋炙。

3 方法與結果

3.1 測定方法

對照品溶液的制備? 取延胡索乙素對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含46μg的溶液，即得。

供試品溶液的制備? 取經2.2處理過的粉末（過三號篩）約0.5g，精密稱定，置平底燒瓶中，精密加入濃氨試液-甲醇（1：20）混合溶液50ml，稱定重量，冷浸1小時后加熱回流1小時，放冷，再稱定重量，用濃氨試液-甲醇（1：20）混合溶液補足減失的重量，搖勻，濾過。精密量取續(xù)濾液25ml，蒸干，殘渣加甲醇溶解，轉移至5ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

色譜條件? 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-0.1%磷酸溶液（三乙胺調pH值至6.0）（55：45）為流動相;檢測波長為280nm。理論板數按延胡索乙素峰計算應不低于3000。

測定法? 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。

3.2線性關系考察

分別制成濃度為9.32μg/ml、23.30μg/ml、46.35μg/ml、74.56μg/ml、93.20μg/ml的對照品溶液，按3.1項下色譜條件測定，以對照品濃度x為橫坐標，峰面積y為縱坐標，計算回歸方程：y= 8274.8x+40890，r=0.9996，表明延胡索乙素在0.093ug～0.932ug范圍內有較好的線性關系。

3.3精密度試驗

精密吸取46.35μg/ml對照品溶液10uL，連續(xù)進樣6次，按3.1項下色譜條件測定，結果：峰面積RSD：0.4%，出峰時間RSD：0.04%（n=6），表明儀器精密度良好。

3.4重復性試驗

按照3.1項下供試品溶液的制備方法平行制備6份供試品溶液，按3.1項下色譜條件進行測定延胡索乙素的含量，延胡索乙素的平均含量：0.103%，RSD：0.5%（n=6），說明該方法重現性良好。

3.5 加樣回收率試驗

取醋延胡索粉末9份，按照3.1項下供試品溶液的制備9份供試品溶液，分別加入46.35μg/ml對照品溶液5ml、10 ml、15 ml各3份，按3.1項下色譜條件測定含量。結果平均加樣回收率：99.8%，RSD：1.1%。結果見表2。

3.6 測定

分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得，見表3

4討論

4.1? 從表3數據可得出，溫度升高會影響醋延胡索中延胡索乙素含量。

4.2 本研究進行了延胡索不同醋炙溫度的比較，溫度達到140℃時，延胡索乙素到達一個最高值，隨后溫度的升高延胡索乙素的含量也會相應的下降;實驗表明延胡索乙素會隨著溫度升高到一個頂點后，隨著溫度再次升高會趨于下降狀態(tài)。

4.3 通過對醋炙延胡索溫度的研究，結合HPLC指標成分分析，建立中藥有效成分含量與醋炙溫度的技術研究，有利于規(guī)范法定標準炮制條件的設定，更客觀的對中藥飲片進行質量控制。根據不同的溫度對含量影響探究，才能更好地把控飲片的質量，促使中藥飲片行業(yè)向著更好的方向發(fā)展。

參考文獻：

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[M].一部.北京： 中國醫(yī)藥科技出版社，2020： 145.

[2] 尚坤，李敬文，常美月，等.延胡索藥理作用研究 [J].吉林中醫(yī)藥，2019，39（1）：108-110.

[3] 廣東省食品藥品監(jiān)督管理局.廣東省中藥飲片炮制規(guī)范.第一冊.廣州： 廣東科技出版社，2011.5： 154.