幽門螺旋桿菌感染患者血清miR-155表達(dá)與IL-6表達(dá)的相關(guān)性

王晶晶

黑龍江省佳木斯市中心醫(yī)院檢驗科 154002

慢性萎縮性胃炎(Chronic atrophic gastritis，CAG)為臨床上比較常見的消化道疾病，也是胃炎的主要類型，同時是胃黏膜炎性反應(yīng)向癌變轉(zhuǎn)化的重要節(jié)點[1]。慢性萎縮性胃炎具有一定的可逆性，為此進行早期診治與發(fā)病機制分析具有重要價值。幽門螺旋桿菌(Helicobacter pylori，Hp)是胃黏膜病變的重要致病因素，Hp感染能通過多種途徑誘導(dǎo)胃黏膜上皮細(xì)胞損傷，誘發(fā)慢性萎縮性胃炎的發(fā)生[2]。微小RNA(micro RNA，miRNA)是大量存在于機體內(nèi)的短小單鏈RNA，具有高度的保守性和非編碼性[3]。在與特異性靶位結(jié)合后可通過影響基因的表達(dá)從而在多種生理病理過程中發(fā)揮重要作用，miR-155是miRNA的重要類型，與機體炎性反應(yīng)、固有免疫應(yīng)答、細(xì)菌感染等存在相關(guān)性，其表達(dá)上調(diào)與胃黏膜病變及胃癌發(fā)生發(fā)展具相關(guān)性[4]。胃腸道黏膜作為人體免疫系統(tǒng)的重要部分，主要由巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、樹突細(xì)胞等免疫細(xì)胞構(gòu)成，從而參與調(diào)節(jié)自身免疫反應(yīng)[5]。巨噬細(xì)胞表面抗原受刺激之后，輔助性T細(xì)胞可大量產(chǎn)生炎癥因子，比如白介素-6(IL-6)，從而調(diào)節(jié)Th17細(xì)胞的分化，誘導(dǎo)自身免疫反應(yīng)加快[6]。本文具體探討了慢性萎縮性胃炎幽門螺旋桿菌感染患者血清miR-155表達(dá)與IL-6表達(dá)的相關(guān)性，以明確慢性萎縮性胃炎的發(fā)病機制?，F(xiàn)總結(jié)報道如下。

1 對象與方法

1.1 觀察對象 選擇2019年3月—2021年3月本院消化內(nèi)科診治的64例慢性萎縮性胃炎患者為觀察對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合慢性萎縮性胃炎診斷標(biāo)準(zhǔn)；臨床表現(xiàn)為腹痛腹脹、嘔血、惡心嘔吐、反酸等癥狀；本院倫理委員會批準(zhǔn)了此次研究；采樣檢測前未經(jīng)任何治療；入院前1個月無抗生素、質(zhì)子泵抑制劑、激素使用史；患者簽署了知情同意書；年齡20～75歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：心、肝、腎等重要臟器嚴(yán)重功能障礙者；合并血液、免疫系統(tǒng)性疾病者；妊娠與哺乳期婦女；合并惡性腫瘤者。

1.2 方法

1.2.1 Hp檢測：所有患者檢查前空腹6h，口服13C尿素膠囊，30min后采用紅外線能譜儀檢測口服13C尿素膠囊前后氣體標(biāo)本的13C原子峰值，呼出氣13C原子峰超出基線5%即為Hp感染陽性。

1.2.2 血清miR-155表達(dá)檢測：取所有患者的空腹6h靜脈血3～4ml，不抗凝放置30min后，3 000r/min 離心15min后，取上層血清。提取總RNA，使用紫外分光光度計測定并計算RNA濃度與純度。采用SYBR Green real-time PCR法測定miR-155相對表達(dá)水平，將U6 sRNA 作為內(nèi)參，總反應(yīng)體系為20.0μl，表達(dá)水平進行2-△△Ct計算并進行對數(shù)轉(zhuǎn)換。miR-155逆轉(zhuǎn)錄引物、miR-155PCR引物引物均由上海生工公司合成；Trizol、逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)試劑盒購自大連寶生物工程有限公司。

1.2.3 血清IL-6表達(dá)檢測：取1.2.2中血清樣本，利用ELISA 檢測血清IL-6水平，所有操作均在標(biāo)準(zhǔn)條件下按試劑盒(廣州銳博生物科技有限公司)說明完成。

2 結(jié)果

2.1 Hp感染情況 在64例患者中，Hp感染陽性44例(陽性組)，陽性率為68.8%。

2.2 一般資料 兩組性別、年齡、病程、體重指數(shù)、心率、血壓等一般資料對比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 兩組一般資料對比

2.3 血清miR-155表達(dá)水平及IL-6水平 陽性組的血清miR-155相對表達(dá)水平及IL-6水平高于陰性組(P<0.05)。見表2。

表2 兩組血清miR-155相對表達(dá)水平及IL-6水平對比

2.4 相關(guān)性分析 在Hp陽性組中，Pearson分析顯示血清miR-155表達(dá)與IL-6表達(dá)存在正相關(guān)性(r=0.762，P=0.000)。在64例患者中，Logistic回歸分析顯示Hp陽性是影響血清miR-155表達(dá)與IL-6表達(dá)水平的重要危險因素(P<0.05)。見表3。

表3 影響血清miR-155表達(dá)與IL-6表達(dá)水平的多因素分析(n=64)

3 討論

慢性萎縮性胃炎作為消化系統(tǒng)常見疾病，近年來發(fā)病率不斷升高，可嚴(yán)重影響患者的身心健康。該病的病程比較長，難以徹底治愈且易惡變，多數(shù)患者無癥狀，為此進行早期檢測具有重要價值。Hp作為一種在消化道黏膜中寄生的需氧細(xì)菌，與慢性萎縮性胃炎的發(fā)病密切相關(guān)[7]。本文結(jié)果顯示，在64例患者中，Hp感染陽性44例，陽性率為68.8%。從機制上分析，Hp感染作為環(huán)境因素之一，已有多個研究報道其與慢性萎縮性胃炎癌發(fā)生、發(fā)展聯(lián)系密切，也在胃癌發(fā)生及進展中發(fā)揮重要作用。Hp易定植于胃黏膜上皮細(xì)胞表面和胃黏液底層，可引起胃黏膜細(xì)胞發(fā)生變性、壞死，導(dǎo)致黏膜屏障受損。同時Hp感染可刺激產(chǎn)生多種細(xì)胞因子和炎癥介質(zhì)，激活人體免疫系統(tǒng)，引起炎性細(xì)胞大量聚集，從而導(dǎo)致胃腺體破壞，形成慢性萎縮性胃炎甚至是胃出血等。有學(xué)者的研究觀察到胃癌中Hp感染可導(dǎo)致信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子3(STAT3)磷酸化，激活STAT3炎性信號通路激活，從而影響到消化道疾病的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后[8]。

慢性萎縮性胃炎起源于胃黏膜上皮，早期進行診治可根治，若不及時處理可發(fā)展為胃癌，對患者的生命健康有重大威脅。但慢性萎縮性胃炎的發(fā)生是由遺傳因素、環(huán)境因素等多種病因相互作用的結(jié)果，也是一個相對比較長的過程。本文結(jié)果顯示陽性組的血清miR-155相對表達(dá)水平高于陰性組(P<0.05)。miRNA是種長度17～25nt的非編碼RNA，能通過與靶mRNA 結(jié)合來調(diào)控下游基因的表達(dá)。miRNA能通過轉(zhuǎn)錄后調(diào)控對消化道疾病相關(guān)基因表達(dá)起調(diào)控作用，某些miRNA發(fā)揮抑癌作用，某些miRNA發(fā)揮促癌作用。

miR-155是重要的固有免疫信號調(diào)節(jié)分子，在固有免疫應(yīng)答中發(fā)揮重要作用，可調(diào)控Toll樣受體(TLR)2 和TLR4通路，進而可誘導(dǎo)NF-κB信號通路活化，參與細(xì)菌脂多糖誘導(dǎo)神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞炎性反應(yīng)，有利于炎癥因子的釋放[9]。IL-6作為一種多細(xì)胞產(chǎn)生的多效性細(xì)胞因子，具有調(diào)節(jié)輔助性T細(xì)胞功能，可控制自身免疫應(yīng)答，其表達(dá)在炎性反應(yīng)和癌癥兩者之間具有重要關(guān)聯(lián)性。同時IL-6可以促進中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞在炎癥發(fā)生部位聚集，防止組織的過度損傷，從而產(chǎn)生保護效應(yīng)。本文結(jié)果顯示，陽性組的血清IL-6水平高于陰性組(P<0.05)，表明Hp感染可促進機體釋放大量IL-6。

miR-155、IL-6在Hp感染陽性的慢性萎縮性胃炎患者的血清中出現(xiàn)了較為明顯的變化，檢測患者血清中miR-155、IL-6水平可能對慢性萎縮性胃炎的診斷有重要意義。本文Pearson分析顯示，Hp感染的慢性萎縮性胃炎患者血清miR-155表達(dá)與IL-6表達(dá)存在正相關(guān)性(r=0.762，P=0.000)；Logistic回歸分析顯示Hp陽性是影響慢性萎縮性胃炎患者血清miR-155表達(dá)與IL-6表達(dá)水平的重要危險因素(P<0.05)。從機制上分析，miR-155的高表達(dá)可調(diào)控機體炎性反應(yīng)的重要通路，在多種炎癥因子釋放調(diào)控中發(fā)揮重要作用，從而促進IL-6的釋放。Hp也能通過不同途徑誘發(fā)炎癥反應(yīng)損傷胃黏膜上皮組織，進一步刺激胃黏膜組織加劇炎癥反應(yīng)、激活免疫系統(tǒng)，從而導(dǎo)致血清miR-155表達(dá)與IL-6表達(dá)水平水平進一步升高[10]。本研究也存在一定的不足，納入患者的數(shù)量比較少，沒有檢測其他miRNAs分子與炎癥因子，也沒有納入胃癌患者與正常健康人群，將在后續(xù)研究中進行分析。

綜上所述，Hp感染可使得慢性萎縮性胃炎患者血清miR-155表達(dá)與IL-6表達(dá)水平上升，兩者存在相關(guān)性，檢測患者血清中miR-155、IL-6水平可能對慢性萎縮性胃炎的診斷有重要意義。