吳聯(lián)合
(安徽省安慶市宜秀區(qū)大龍山鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站,安徽安慶 246052)
雞傳染性支氣管炎簡(jiǎn)稱(chēng)IB(Avian Infectious Bronchitis),是目前影響家禽機(jī)體健康最為明顯的一種疾病,一旦發(fā)病,常會(huì)導(dǎo)致家禽死亡,同時(shí)降低肉雞產(chǎn)蛋率,最終為養(yǎng)殖戶(hù)造成較大經(jīng)濟(jì)損失,屬于二級(jí)動(dòng)物疫病。該病由冠狀病毒引起,多會(huì)感染病雞的生殖道、呼吸道與腎臟,最終影響雞的存活率。該病除感染雞外,亦可感染鴨、孔雀、鴿子、鵪鶉等禽類(lèi)。IB自20世紀(jì)80年代起,在我國(guó)廣泛流行,大規(guī)模養(yǎng)雞場(chǎng)中尤為常見(jiàn),其病毒基因型、臨床癥狀與剖檢特征有著明顯的復(fù)雜性特點(diǎn)。文章主要介紹了雞傳染性支氣管炎的內(nèi)涵及特征,列舉了相應(yīng)的診斷治療措施,以期為相關(guān)工作者提供參考。
相關(guān)研究表明,禽類(lèi)感染IBV的死亡率僅次于感染高致病性禽流感。該病毒多由空氣傳播,但接觸病禽的排泄物、受污染物品,也可被感染。若雞圈的環(huán)境較為封閉、外界環(huán)境溫度不高、空氣流通緩慢,雞感染此病的概率會(huì)有明顯的升高,因而該病多在每年10月至4月間爆發(fā)[1]。
一般來(lái)講,IBV復(fù)制所需RNA聚合酶缺乏校對(duì)功能,因而其在復(fù)制過(guò)程中,極有可能出現(xiàn)基因突變、缺失等一系列的異常情況,進(jìn)而造成IBV的流行病學(xué)較為復(fù)雜。在我國(guó)范圍內(nèi),QX是IBV的優(yōu)勢(shì)毒株,該病發(fā)病有著明顯的地域性特征,中東部與南方地區(qū)更為高發(fā),TW、QX、4/91等基因型最為多見(jiàn)。
實(shí)踐表明,養(yǎng)雞場(chǎng)中所有日齡的雞均能夠感染IBV,潛伏期最短18 h,最長(zhǎng)36 h,1月齡以?xún)?nèi)的雞更容易染病,隨著日齡的增加,雞患此病的概率將會(huì)有明顯地減少。感染此病后,病雞常會(huì)表現(xiàn)出明顯的臨床癥狀,包括流淚、羽毛蓬亂、精神萎靡、食欲不振、飲水減少等等,依據(jù)癥狀的不同,可將此類(lèi)疾病簡(jiǎn)要?dú)w為腎型、呼吸道型與生殖型。
近年來(lái),我地區(qū)養(yǎng)雞場(chǎng)爆發(fā)腎型IBW更為常見(jiàn),病毒傳播力強(qiáng),這足以引起養(yǎng)殖戶(hù)的重視。
呼吸型雞傳染性支氣管炎在我地區(qū)養(yǎng)雞場(chǎng)中也較為常見(jiàn),患該病后,雞的呼吸道常有啰音產(chǎn)生,同時(shí)表現(xiàn)出咳嗽、打噴嚏等一系列的癥狀,對(duì)病雞實(shí)施剖檢,可觀察到有黏液、氣泡附著于病雞的氣管黏膜、支氣管黏膜等部位。
生殖型雞傳染性支氣管炎在我地區(qū)養(yǎng)雞場(chǎng)中也較為常見(jiàn),一旦爆發(fā),常會(huì)造成雞產(chǎn)蛋率下降,同時(shí)雞蛋的品質(zhì)也會(huì)變得較為惡劣,軟殼蛋、畸形蛋常見(jiàn)。為雞實(shí)施剖檢,可觀察到雞的輸卵管存在損傷,腹腔內(nèi)有大量的卵黃液聚集。
此外,IBV也會(huì)在雞的法氏囊、哈德氏腺、脾臟等部位出現(xiàn)復(fù)制,表現(xiàn)出來(lái)的癥狀是各有不同的,集中在法氏囊部位可能是腫脹,集中于脾臟部位可能是充血,在診斷中,獸醫(yī)人員應(yīng)秉持具體問(wèn)題具體分析的原則,結(jié)合實(shí)際情況,科學(xué)合理地進(jìn)行診斷。
病毒分離鑒定是當(dāng)下診斷雞傳染性支氣管炎的一個(gè)常用手段,一般來(lái)講感染此病后,雞體內(nèi)的病毒滴度,在1周內(nèi)就會(huì)達(dá)到一個(gè)峰值,故而獸醫(yī)人員可使用氣管拭子,為雞氣管組織給予病毒分離,此外也可在雞腎臟、腺胃、輸卵管等幾個(gè)部位進(jìn)行采樣,這有利于提升診斷準(zhǔn)確率。目前臨床診斷中,常會(huì)用到“雞胚接種”這一IBV分離手段,但這一手段有著一定的缺陷,就是必須等待病毒連傳三代,才能夠在培養(yǎng)皿中觀察到明顯的特征性病變,包括胚胎卷、萎縮等,但將此類(lèi)現(xiàn)象視作確診依據(jù)來(lái)使用還是為時(shí)過(guò)早,獸醫(yī)人員應(yīng)兼用血清學(xué)、分子生物學(xué)方法,確診雞傳染性支氣管炎[2]。
此外,“器官培養(yǎng)”也是當(dāng)下較為常用的一種分離手段,獸醫(yī)人員應(yīng)優(yōu)先從雞的氣管環(huán)部位采集樣本。感染IBV后,隨著時(shí)間的推移,雞的纖毛運(yùn)動(dòng)會(huì)逐漸減弱,獸醫(yī)人員可透過(guò)顯微鏡,觀察雞的纖毛是否靜止,若靜止,則可判斷該雞患有傳染性支氣管炎,但也不排除存在假陰性的情況,這是值得獸醫(yī)人員注意的。
目前在血清學(xué)診斷中,獸醫(yī)人員多會(huì)用到酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、血凝抑制試驗(yàn)、病毒中和試驗(yàn)等多種方法。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)較為常用,該方法又稱(chēng)為ELISA,有著成本低廉、操作快捷、效率高的特點(diǎn),獸醫(yī)人員可較為方便地利用其完成對(duì)雞傳染性支氣管炎的大規(guī)模篩查。一般來(lái)講,在雞初感染此病時(shí)和感染此病1周后使用這一方法有著較高的診斷準(zhǔn)確率。
血凝抑制試驗(yàn)也是一種當(dāng)前常用的雞傳染性支氣管炎檢測(cè)手段,該方法的應(yīng)用原理是IBV缺乏血凝素,因而可使用一定的方法使其具有血凝活性,進(jìn)而高效完成雞群大規(guī)模IBV篩查。
病毒中和試驗(yàn)法,常被應(yīng)用于IBV變異鑒定與疫苗免疫效果評(píng)價(jià)中,實(shí)際操作中,獸醫(yī)人員多會(huì)用到如下兩種不同的方法:阿爾法法(用已知濃度血清與不同稀釋度血清發(fā)生反應(yīng)的檢測(cè)方法)、貝塔法(用已知病毒量與不同稀釋度血清反應(yīng)的檢測(cè)方法),一般來(lái)講前者準(zhǔn)確率更高。
該技術(shù)又稱(chēng)IHC,是一種基于抗原抗體反應(yīng),依據(jù)標(biāo)記物性質(zhì)差異,完成IBV病毒檢測(cè)的技術(shù),目前獸醫(yī)人員多會(huì)用到如下兩種方法:免疫熒光組織化學(xué)技術(shù)、免疫酶組織化學(xué)技術(shù),使用這兩種方法,均可從細(xì)胞樣品中檢測(cè)到IBV的抗原,獸醫(yī)人員可透過(guò)顯微鏡,較為明確地觀察到細(xì)胞組織的病理變化狀況,但仍無(wú)法將血清型與毒株有效分離開(kāi)來(lái)。但近年來(lái),隨著生物技術(shù)的蓬勃發(fā)展,該方法的準(zhǔn)確率相比過(guò)去已經(jīng)有了明顯的進(jìn)步,相信在不遠(yuǎn)的將來(lái),該方法在雞傳染性支氣管炎診斷中的應(yīng)用率會(huì)有明顯的上升,有著寶貴的實(shí)踐應(yīng)用價(jià)值。
目前看來(lái),雞傳染性支氣管炎診斷中常用的分子生物學(xué)診斷方法有反轉(zhuǎn)錄診斷、多重診斷、環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)、重組聚合酶等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)等幾種。
反轉(zhuǎn)錄技術(shù)又稱(chēng)RT-PCR,獸醫(yī)人員可通過(guò)快速擴(kuò)增目的片段,實(shí)現(xiàn)對(duì)病毒的有效診斷,該方法目前看來(lái)有著極高的靈敏度,但操作起來(lái)較為煩瑣,推廣難度高。
多重PCR技術(shù)是指在一個(gè)反應(yīng)體系中加入兩對(duì)以上的引物,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)病毒的有效檢測(cè)的一種方法,臨床應(yīng)用價(jià)值可觀,且耗時(shí)也較短,推廣難度低,值得應(yīng)用。實(shí)際的養(yǎng)殖管理中,養(yǎng)殖戶(hù)可使用該方法,對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)的雞展開(kāi)常規(guī)篩查,降低篩查成本,提升篩查成功率[3]。
環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)是針對(duì)多條特異性引物展開(kāi)快速擴(kuò)展的技術(shù),目前該方法在雞傳染性支氣管炎診斷中,有著極高的應(yīng)用率。但該方法具有操作煩瑣、設(shè)計(jì)復(fù)雜的特點(diǎn),因而在實(shí)際診斷中出現(xiàn)假陽(yáng)性的可能性也是較高的。
實(shí)時(shí)熒光定量技術(shù)有著較高的可靠性,同時(shí)還擁有與測(cè)序相同的特異性,因而使用起來(lái)較為簡(jiǎn)單快捷,但對(duì)應(yīng)用環(huán)境有著較高的要求。
重組聚合酶等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)是一種依賴(lài)DNA聚合酶實(shí)現(xiàn)快速診斷的技術(shù),在診斷完畢后,獸醫(yī)人員可較為簡(jiǎn)單地憑借肉眼觀察結(jié)果,因而診斷效率較高,靈敏度也較高,在養(yǎng)殖場(chǎng)日常診斷中有著較高的利用率。
蛋白芯片技術(shù)包括蛋白質(zhì)微序列、微孔板蛋白質(zhì)芯片與三維凝膠塊芯片三種,相較于商品試劑盒,此類(lèi)方法有著更高的準(zhǔn)確率與敏感度,在雞傳染性支氣管炎現(xiàn)場(chǎng)快速篩查中較為常用。但該方法仍然有著突出的缺陷,就是無(wú)法將自然感染與疫苗接種抗體區(qū)分開(kāi)來(lái),因而在開(kāi)始正式的診斷工作前,獸醫(yī)人員應(yīng)從養(yǎng)殖戶(hù)處了解養(yǎng)殖場(chǎng)的疫苗接種史。在此后的工作中,為提升這一方法的應(yīng)用便捷性,相關(guān)科研人員可結(jié)合養(yǎng)殖戶(hù)的實(shí)際需求,對(duì)該方法實(shí)施一定的優(yōu)化升級(jí)。
目前獸醫(yī)人員及養(yǎng)殖戶(hù)多會(huì)采用中西醫(yī)結(jié)合的方法治療雞傳染性支氣管炎。在雞感染此病的初期,養(yǎng)殖戶(hù)可為雞喂服具有平喘止咳、清熱解毒作用的藥物,典例有瘟疫清、清肺通喉散等,其中瘟疫清的主要成分為金銀花、黃芩、唐半夏、玄參、地黃、黃檗、梔子、枸杞等;清肺通喉散可磨為細(xì)末給雞服用。養(yǎng)殖戶(hù)可依照說(shuō)明書(shū)上的要求,按照規(guī)定好的劑量與用藥次數(shù),將此類(lèi)藥物兌入雞群的飲水中,進(jìn)而緩解雞的初期癥狀。
此外,在這一階段內(nèi),兼用青霉素、頭孢類(lèi)藥物為雞給予消炎也是較為合適的,除此之外,養(yǎng)殖戶(hù)也可在雞群的飲用水中加入電解質(zhì),這有利于增強(qiáng)雞群的體力與免疫力,補(bǔ)充病雞的葡萄糖,進(jìn)而增強(qiáng)病雞的抗病力,同樣也可在雞群的飼料中加入益生菌等物質(zhì),避免藥物影響雞群的消化系統(tǒng)功能;待病雞的病情步入末期,獸醫(yī)或養(yǎng)殖戶(hù)可使用復(fù)方咳喘康膠囊治療病雞,效果也較為可觀。
一般來(lái)講,當(dāng)養(yǎng)殖場(chǎng)有雞患此病,養(yǎng)殖戶(hù)應(yīng)針對(duì)全部雞群做好預(yù)防工作,例如可為雞群投喂病毒靈(鹽酸嗎啉胍)5~7 d,起到預(yù)防作用。若雞患此病的同時(shí)患有其他并發(fā)類(lèi)疾病,養(yǎng)殖戶(hù)可在綜合考慮各類(lèi)因素的前提下,采用抗菌藥物治療雞群,如針對(duì)腎型疾病,可使用平喘鎮(zhèn)咳、清熱解毒的中藥制劑,以及碳酸氫鈉等藥物治療患雞,采用中西醫(yī)結(jié)合的方式,完成整個(gè)治療過(guò)程。針對(duì)患此病的蛋雞,可使用樂(lè)多仙蛋白酶進(jìn)行治療,該藥物的主要成分包括硫酸鈉、高嶺土、氫化植物油、碳酸鈣、纖維素等,有利于促進(jìn)蛋雞生殖系統(tǒng)的恢復(fù),提升蛋雞的產(chǎn)蛋質(zhì)量,減少養(yǎng)殖場(chǎng)的經(jīng)濟(jì)損失。
(1)養(yǎng)殖期間,養(yǎng)殖戶(hù)應(yīng)當(dāng)針對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)做好飼養(yǎng)環(huán)境管理,盡可能為雞群營(yíng)造舒適、衛(wèi)生的飼養(yǎng)環(huán)境。為達(dá)到這一點(diǎn),日常工作中,養(yǎng)殖戶(hù)應(yīng)經(jīng)常巡視雞舍,提升雞舍的干凈程度,同時(shí)針對(duì)雞舍做好通風(fēng)管理,將雞舍的溫度與濕度控制在合理的范圍內(nèi)。在冬季,養(yǎng)殖戶(hù)可使用保暖、防寒措施,調(diào)整雞舍的溫度,在夏季亦要注意為雞舍給予防曬措施,在冬季可在雞舍內(nèi)灑水,均可起到不錯(cuò)的溫、濕度調(diào)節(jié)效果,避免疫病大規(guī)模傳染開(kāi)來(lái)[4]。
(2)科學(xué)喂養(yǎng)雞群。養(yǎng)殖戶(hù)應(yīng)結(jié)合雞的品種及月齡,因地制宜地為雞給予具體的飼料,確保雞能夠得到充足的營(yíng)養(yǎng)。同時(shí)在為雞給予飲用水時(shí),養(yǎng)殖戶(hù)也可在水中加入相應(yīng)的益生菌,增強(qiáng)雞抵抗支氣管病的能力,此外也可在飲用水中加入一定量的青霉素與土霉素,避免雞患此病的同時(shí)出現(xiàn)嚴(yán)重的并發(fā)癥狀。
(3)科學(xué)引種。在日常養(yǎng)殖過(guò)程中,養(yǎng)殖戶(hù)應(yīng)注意不要從疫區(qū)引種,若需引種,應(yīng)檢查供貨商的經(jīng)營(yíng)資質(zhì),完成引種后,應(yīng)將新雞隔離飼養(yǎng)在某一圈舍中,7 d無(wú)異常情況才可將雞放入大群中飼養(yǎng)。
(1)為雞群接種優(yōu)質(zhì)疫苗,目前該病所用疫苗多為H52、H120、28/26弱毒苗,首次使用推薦選擇H120,待雞長(zhǎng)至14日齡便可為其接種,實(shí)踐證明該弱毒苗有著較高的安全性,應(yīng)用價(jià)值突出。第二次接種疫苗時(shí),可使用H52弱毒苗,因?yàn)樵撁绲亩玖^強(qiáng),待雞長(zhǎng)至8~10周齡時(shí),便可為其接種,此外也可使用Ma5弱毒苗為雞給予接種[5]。
(2)使用科學(xué)的檢疫方法。實(shí)踐證明,為雞給予科學(xué)檢疫,也有利于降低雞患病率,提升傳染性支氣管炎預(yù)防效果。一般來(lái)講,在預(yù)防此病時(shí),對(duì)于養(yǎng)殖場(chǎng)中不同品種、不同月齡的雞群,養(yǎng)殖戶(hù)可使用不同的弱毒苗來(lái)接種。為提升接種準(zhǔn)確率,養(yǎng)殖戶(hù)應(yīng)做好抗體監(jiān)測(cè)工作,在最為合適的時(shí)間點(diǎn),同時(shí)還應(yīng)嚴(yán)格把關(guān)對(duì)疫苗與免疫方法的使用,確保免疫的優(yōu)質(zhì)與可靠。通常情況下,免疫接種過(guò)程中,使用氣霧、滴鼻、點(diǎn)眼等方法,有著較高的準(zhǔn)確性。
實(shí)踐證明,雞傳染性支氣管炎的傳播力是較強(qiáng)的,為避免此病在當(dāng)?shù)仞B(yǎng)殖業(yè)中出現(xiàn)大范圍擴(kuò)散,養(yǎng)殖戶(hù)有必要針對(duì)雞群養(yǎng)殖制定嚴(yán)格的消毒制度。一般來(lái)講,應(yīng)將消毒池建設(shè)在靠近養(yǎng)殖場(chǎng)正門(mén)的區(qū)域,對(duì)進(jìn)入養(yǎng)殖場(chǎng)的人員及車(chē)輛給予嚴(yán)格消毒。此外在日常的養(yǎng)殖管理中,養(yǎng)殖戶(hù)也應(yīng)針對(duì)雞舍內(nèi)外的環(huán)境做好消毒工作,尤其應(yīng)針對(duì)雞群的飲食工具做好消毒,同時(shí)對(duì)于已經(jīng)遭受污染的區(qū)域與工具也應(yīng)進(jìn)行消毒,之后還應(yīng)將這些工具空置2個(gè)月以上,確保無(wú)誤后方可再次將其應(yīng)用于養(yǎng)殖活動(dòng)之中。消毒劑推薦使用聚維酮碘、雙季銨鹽絡(luò)合碘等,避免產(chǎn)生抗性。還可應(yīng)用高錳酸鉀溶液定期消毒雞群飲用水,這也能起到良好的傳染病預(yù)防作用。
IBV是一種發(fā)病機(jī)理、臨床診斷、解剖特征較為復(fù)雜的疾病,存在多種不同的病型,一旦發(fā)病,常會(huì)在養(yǎng)殖場(chǎng)中快速蔓延開(kāi)來(lái),為養(yǎng)殖戶(hù)造成較大的經(jīng)濟(jì)損失。目前對(duì)于此病,在臨床診斷中,獸醫(yī)人員常用的診斷方法,分為病毒分離法、血清學(xué)診斷法、免疫組織化學(xué)技術(shù)、分子生物學(xué)診斷等多種,第一種方法耗時(shí)長(zhǎng),且操作工序較為煩瑣,因此近年來(lái)獸醫(yī)人員多會(huì)將該方法與基因測(cè)序分析法結(jié)合在一起來(lái)使用,這有利于提升診斷效率與準(zhǔn)確率。
常規(guī)血清學(xué)方法中,ELISA與HI在雞群大規(guī)模IBV篩查中較為常用,目前已有商品化試劑盒進(jìn)入市場(chǎng),養(yǎng)殖戶(hù)可依照實(shí)際需求,進(jìn)行有針對(duì)性的使用。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,PCR等技術(shù)在雞傳染性支氣管炎診斷中,也有著較高的利用率,能夠針對(duì)雞傳染性支氣管炎給予有針對(duì)性的定時(shí)、定量分析,目前在實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)中,有著較高的應(yīng)用率,耗時(shí)短,獸醫(yī)人員可較為簡(jiǎn)單地判斷結(jié)果,應(yīng)用價(jià)值突出。在合理使用如上手段,診斷雞傳染性支氣管炎的前提下,養(yǎng)殖工作者可兼用中、西醫(yī)方法治療患雞,同時(shí)在日常養(yǎng)殖管理中,也應(yīng)針對(duì)雞舍、雞飼料、雞飲用水做好管理,提升消毒頻率,為雞營(yíng)造良好的生長(zhǎng)環(huán)境,促進(jìn)養(yǎng)雞行業(yè)的進(jìn)一步發(fā)展。