假喜馬拉雅塊菌化學成分分析及其抗氧化能力研究

李新愛，郭文秀，張燁，張旭，尹勝，王欣宇，郭大樂*，鄧赟*

1(成都中醫(yī)藥大學 藥學院，四川 成都，611137)2(會東高川天源農(nóng)業(yè)科技有限公司，四川 涼山彝族自治州，615000)

塊菌，又稱松露，隸屬Tuber屬塊菌科Tuberaceae，是一類著名的菌根型野生食藥用菌，研究表明塊菌含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)及生物活性物質(zhì)，主要含有17種氨基酸、8種維生素、以及多糖、蛋白質(zhì)、雄性酮、甾醇、多酚、鞘脂、脂肪酸、微量元素等。具有增強免疫力、抗氧化、抗腫瘤、益胃、清神、止血、療痔等多種生物活性，是藥物的潛在替代品[1]。研究發(fā)現(xiàn)塊菌中具有活性的多糖和次生代謝產(chǎn)物(多酚、甾醇及黃酮類成分)，能抑制或減緩其他分子氧化，能夠有效清除DPPH自由基、ABTS陽離子自由基、羥自由基等自由基，具有較好的抗氧化能力。人體進行代謝時，自由基在線粒體內(nèi)產(chǎn)生，多余的自由基可以被抗氧化劑清除進而維持其在體內(nèi)的代謝平衡。但是，一些外部因素，如吸煙、環(huán)境污染、工業(yè)溶劑、臭氧、一些藥品和農(nóng)藥等，可促進自由基的產(chǎn)生，打破體內(nèi)平衡，進而引發(fā)機體衰老以及癌癥、動脈粥樣硬化、肺氣腫等疾病[2-3]。因此，天然氧化劑的發(fā)現(xiàn)，有助于延緩人的衰老，降低這些疾病出現(xiàn)的概率。

據(jù)估計，塊菌屬在全球有180種之多，我國目前已報道有60余種。目前關(guān)于塊菌研究，多集中于物種多樣性、生態(tài)學、遺傳學、人工栽培等方面，化學成分方面多聚焦于多糖及其揮發(fā)性成分，至今尚無其系統(tǒng)化學成分分析的研究，且多集中于印度塊菌，會東塊菌等[1]。基于此，本實驗采用超高效液相色譜-四極桿-靜電場軌道阱高分辨質(zhì)譜法(ultra-performance liquid chromatography- tandem q-exactive quadrupole-electrostatic field track trap high resolution mass spectrometry，UPLC-Q-Orbitrap HRMS)借助Compound Discoverer 3.0軟件，根據(jù)化合物的精確相對分子質(zhì)量、色譜保留時間、特征離子碎片信息，并結(jié)合數(shù)據(jù)庫和相關(guān)文獻比對，對假喜馬拉雅塊菌的營養(yǎng)成分進行鑒定，根據(jù)化合物的質(zhì)譜信息，結(jié)合對照品、數(shù)據(jù)庫及文獻信息對假喜馬拉雅塊菌中的化學成分進行鑒定，以期為其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)、質(zhì)量評價及物種鑒定方面提供參考，通過對其抗氧化能力進行研究，為資源的有效利用提供幫助。充分挖掘塊菌的食藥用價值，把塊菌中的有效成分應(yīng)用于食品、藥品、保健品及化妝品中，進一步推進塊菌產(chǎn)業(yè)發(fā)展。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 藥材

假喜馬拉雅塊菌于2020年12月采集于四川省攀之花市會東縣(20200806)，將其進行測序，根據(jù)形態(tài)特征和18S rRNA基因序列比對，鑒定為T.pesudohimalayense。該菌種現(xiàn)保存于成都中醫(yī)藥大學藥學院生化制藥實驗室。

1.1.2 試劑

苯丙氨酸、亮氨酸、L-酪氨酸對照品，中國食品藥品檢定研究院；L-谷氨酸對照品，成都市科隆化學品有限公司；腺苷，英國PureChemLand公司；苯甲酸、油酰胺、沒食子酸對照品(對照品純度均>98%)，成都克洛瑪生物科技有限公司；碳酸鈉、水楊酸鈉、硫酸亞鐵、過氧化氫、鐵氰化鉀、三氯乙酸、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、氯化鐵、碳酸鈉，北京化工廠；福林酚試劑，北京索萊寶試劑公司；水為娃哈哈純凈水；乙腈、甲醇(色譜純)，成都科隆化學品有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

Vanquish型超高效液相色譜聯(lián)用Q-Exactive型四極桿-靜電場軌道阱高分辨質(zhì)譜儀、Varioskan LUX多功能酶標儀，美國Thermo Fisher Scientific公司；SL302 N萬分之一電子天平，上海民僑精密科學儀器有限公司；QE-50型高速粉碎機，浙江屹立工貿(mào)有限公司；SCIENTZ-10 N冷凍干燥機，寧波新芝生物科技股份有限公司；超聲波清洗機，成都雅源科技有限公司。

1.3 實驗方法

1.3.1 UPLC-Q-Orbitrap HRMS分析

1.3.1.1 供試品溶液

將新鮮假喜馬拉雅塊菌，冷凍干燥，將凍干的假喜馬拉雅塊菌粉碎，稱取適量本品粉末(過二號篩)約1 g，精密稱定，置50 mL錐形瓶中，精密加入80%甲醇25 mL，密塞，稱定質(zhì)量，浸泡1 h，超聲處理(150 W，40 kHz)30 min，放冷，稱定質(zhì)量，用80%甲醇補足減失的質(zhì)量，搖勻，過0.22 μm微孔濾膜，取續(xù)濾液[4-6]，備用。

1.3.1.2 對照品溶液

取苯丙氨酸、亮氨酸、L-谷氨酸、L-酪氨酸、腺苷、苯甲酸、油酰胺、吡嗪對照品適量，加甲醇超聲使溶解并定容至25 mL，配制成質(zhì)量濃度約0.05 g/L的混合對照品，溶液置于4 ℃冰箱中保存，使用時過0.22 μm 微孔濾膜。

1.3.1.3 檢測條件

(1)色譜條件

Waters ACQUITY UPLC BEH C18色譜柱(2.1 mm×100 mm，1.7 μm)，流動相0.1%乙酸水溶液(A相)-乙腈(B相)梯度洗脫:(0～4 min，5% B；4～7 min，5%～10% B；7～10 min，10%～16% B；10～20 min，16～32% B；20～24 min，32%～60% B；24～30 min，60% B；30～36 min，60%～70% B；36～43 min，70%～95% B；43～46 min， 95% B，流速0.3 mL/min，進樣量3 μL，柱溫30 ℃。

(2)質(zhì)譜條件

離子源：采用電噴霧離子源(ESI)，掃描方式：正、負離子監(jiān)測模式，正負離子源電壓：3 500～3 000 V，質(zhì)量掃描范圍：m/z100～1 500；裂解電壓：(ESI+)3.5 kV和(ESI-)3.0 kV，鞘氣流速：35 L/min，輔助氣流量：10 L/min，離子傳輸管溫度：300 ℃，輔助氣溫度：350 ℃。掃描模式為全掃描/數(shù)據(jù)依賴二級掃描(Full MS/dd-MS 2)，一級分辨率70 000，二級分辨率17 500。MS/MS模式時，正、負離子模式下的碰撞能量梯度為20、40、60 eV。

1.3.1.4 數(shù)據(jù)處理

將UPLC-Q-Orbitrap HRMS所采集的原始數(shù)據(jù)導入到Compound Discoverer 3.0軟件進行計算，對原始數(shù)據(jù)進行峰對齊和峰提取，利用Compound Discoverer 3.0將提取得到的分子離子色譜峰、同位素峰擬合出分子式，將所得結(jié)果與數(shù)據(jù)庫mzCloud，mzVault及本地中藥成分高分辨質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫OTCML進行匹配，對匹配結(jié)果設(shè)置過濾參數(shù)為峰面積閾值8萬，一級準分子離子及二級碎片離子質(zhì)量偏差5 ppm(1 ppm=1×106)，匹配度分值>80。對過濾后的目標化合物的質(zhì)譜信息與對照品、相關(guān)文獻信息比對，進行化合物的鑒定[7-8]。

1.3.2 抗氧化活性測試

1.3.2.1 塊菌提取物的制備

將新鮮的假喜馬拉雅塊菌，冷凍干燥，后將凍干的假喜馬拉雅塊菌粉碎，稱取適量本品粉末(過二號篩)約2 g，精密稱定，置100 mL錐形瓶中，精密加入80%甲醇(純水)50 mL，密塞，稱定質(zhì)量，浸泡1 h，超聲處理(150 W，40 kHz)30 min，放冷，稱定質(zhì)量，用80%甲醇(純水)補足減失的質(zhì)量，搖勻，過濾，重復上述操作，合并2次濾液后，旋轉(zhuǎn)濃縮至10 mL。后將提取物配制成所需濃度[3]。

1.3.2.2 DPPH自由基清除活性測定

DPPH自由基清除能力測定根據(jù)文獻描述方法稍作修改[3]。將甲醇、水提取物的不同質(zhì)量濃度(1～65 mg/mL)的等分試樣80 μL與1 mL 25 μg/mL DPPH甲醇溶液混合，劇烈搖動混合物，黑暗條件下，靜置30 min，以96孔板為反應(yīng)載體，酶標儀在517 nm 處檢測其OD值。以維生素C為陽性對照，每個樣品平行測定3次，取平均值。根據(jù)公式(1)計算塊菌提取物對DPPH自由基的清除率：

(1)

式中：A0為空白對照的OD值，Ai為加入樣品或者陽性對照后的OD值。

1.3.2.3 ABTS陽離子自由基清除活性測定

ABTS陽離子自由基清除能力測定參照文獻稍作改動[3]，配制7 mmol/L ABTS陽離子和4.9 mmol/L過硫酸鉀溶液，等體積混合均勻，室溫避光貯存12 h以上，根據(jù)吸光度用無水乙醇稀釋40～60倍至吸光度為0.7±0.02，即為ABTS陽離子儲備液。將 0.2 mL ABTS陽離子儲備液與10 μL不同質(zhì)量濃度(0.0625、0.125、0.25、0.5、1、2、4 mg/mL)的塊菌提取液混合，常溫避光靜置6 min，以96孔板為反應(yīng)載體，酶標儀734 nm處測定OD值，每個樣品平行測定3次，取平均值，用等量的超純水代替樣品作為空白對照，維生素C作陽性對照，根據(jù)公式(2)計算ABTS陽離子自由基清除率。

(2)

式中：A0為空白對照的OD值，Ai為加入樣品或者陽性對照后的OD值。

1.3.2.4 羥自由基清除活性測定

羥自由基清除能力測定參照文獻的方法稍作修改[3]。分別移取20 mmol/L水楊酸鈉0.3 mL和1.5 mmol/L的硫酸亞鐵1.0 mL于各試管中，再分別加入不同質(zhì)量濃度(2～12 mg/mL)的塊菌樣品提取液1.0 mL，最后加入0.7 mL mmol/L H2O2，迅速混勻，37 ℃恒溫水浴1 h，以96孔板為反應(yīng)載體，酶標儀在510 nm下測定其OD值。每個樣品平行測定3次，取其平均值。以80%甲醇作為空白對照，維生素C作為陽性對照。根據(jù)公式(3)計算塊菌提取物對羥自由基的清除率：

(3)

1.3.2.5 還原能力測定

還原能力測定參照文獻[3]方法。將不同濃度的塊菌樣品提取液1 mL與2.5 mL磷酸緩沖液(200 mmol/L，pH 6.6)混合，加入10 g/L鐵氰化鉀溶液2.5 mL，混合物于50 ℃恒溫20 min后加入1 mL 100 g/L三氯乙酸，3 000 r/min離心分離10 min，取上層清液2.5 mL，加入去離子水2.5 mL以及1 g/L新鮮配制的三氯化鐵溶液0.5 mL，酶標儀700 nm處測定其OD值。OD值越高，說明反應(yīng)混合物的還原性越強，每個樣品平行測3次，取其平均值。用維生素C作為陽性對照，用等量的超純水代替樣品作為空白對照。

1.3.2.6 總酚含量的測定

總酚含量測定參照文獻[3]方法稍作修改。將1 mL 質(zhì)量濃度為8 mg/mL的塊菌樣品溶液與1 mL福林酚混合，靜置3 min后，加入1 mL 350 g/L碳酸鈉，然后加入去離子水使反應(yīng)體系稀釋至10 mL?；靹?，室溫下黑暗處放置90 min，酶標儀725 nm處測定其OD值。利用不同質(zhì)量濃度(0.005、0.01、0.02、0.03、0.04 mg/mL)的沒食子酸標準品(gallic acid equivalent, GAE)建立標準曲線計算塊菌樣品溶液中相應(yīng)的總酚含量。每個樣品平行測定3次，取其平均值。

1.3.2.7 數(shù)據(jù)處理

本文所用數(shù)據(jù)為3次平行測量，結(jié)果以平均值±標準偏差表示。各個數(shù)據(jù)均用Origin 9.0軟件處理作圖，采用SPSS 25.0統(tǒng)計分析軟件對數(shù)據(jù)進行分析。數(shù)據(jù)比較采用t檢驗，P<0.05時認為樣本間具有顯著性差異；采用Pearson′s相關(guān)分析抗氧化活性與活性成分含量之間相關(guān)性[3]。

2 結(jié)果與分析

2.1 假喜馬拉雅塊菌的化學成分分析

假喜馬拉雅塊菌作為一種食藥用真菌，不僅風味獨特，也具有極高的營養(yǎng)價值，采用UPLC-Q-Orbitrap HRMS分析假喜馬拉雅塊菌80%甲醇提取物的營養(yǎng)成分，根據(jù)化合物的保留時間、一級準分子離子及二級碎片離子質(zhì)量等信息，結(jié)合參考文獻和數(shù)據(jù)庫(mzCloud，mzVault)對其成分進行初步鑒定。初步鑒定出51種化合物，包括13個氨基酸、11個有機酸、8個核苷類、9個酰胺類及10個其他類。經(jīng)與對照品比對其中8個成分可準確鑒定，正負離子流圖見圖1、圖2，化合物的相關(guān)信息見表1。

圖1 假喜馬拉雅塊菌在UPLC-Q-Orbitrap HRMS 正離子模式下的總離子流Fig.1 Total ion chromatogram of Tuber pesudohimalayense by UPLC-Q-Orbitrap HRMS in positive ion mode

圖2 假喜馬拉雅塊菌在UPLC-Q-Orbitrap HRMS負離子 模式下的總離子流Fig.2 Total ion chromatogram of Tuber pesudohimalayense by UPLC-Q-Orbitrap HRMS in negative ion mode

2.2 各類化合物的裂解特征

2.2.1 氨基酸

氨基酸分子含有氨基和羧基2種官能團，保留時間主要集中在0.84～3.92 min，正離子模式下，氨基酸的準分子離子峰[M+H]+相對豐度較低，易失去H2O、CO、COOH、NH3(18、28、46、17)形成穩(wěn)定的特征碎片，通過與數(shù)據(jù)庫及參考文獻比對，在假喜馬拉雅塊菌中推斷出13個氨基酸，以DL-精氨酸為例，在ESI+模式下準分子離子峰175.119 1 [M+H]+，推測分子式為C6H14N4O2，在該化合物的二級質(zhì)譜中丟失1個NH3，形成離子碎片為158.092 2 [M+H-NH3]，丟失1個羧基，形成離子碎片130.097 3 [M+H-COOH]，繼續(xù)高能碰撞連續(xù)裂解失去1個亞甲基，形成碎片離子116.070 7 [M+H-COOH-CH2]，綜上與文獻[4-8]報道一致，因此推斷該化學成分為DL-精氨酸。

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表1 假喜馬拉雅塊菌在UPLC-Q-Orbitrap HRMS正負離子模式下的化學成分鑒定Table 1 Identification of chemical constituents in Tuber pesudohimalayense by UPLC-Q-Orbitrap HRMS in positive and negative ion mode

續(xù)表1

2.2.2 有機酸

本實驗中在正負離子模式下，通過與數(shù)據(jù)庫及參考文獻比對，共推斷出11個有機酸類化合物，有機酸類化合物易丟失H2O、HCOOH、CO2等中性分子形成穩(wěn)定的碎片離子。以化合物苯甲酸為例，在ESI+模式下準分子離子峰123.043 9[M+H]+，推測分子式為C7H6O2，正離子模式下丟失1個H2O，形成離子碎片105.045 1[M+H-H2O]，連續(xù)裂解丟失1個CO，形成碎片離子95.049 4[M+H-CO]，通過與文獻[9-11,13]比對，推斷該化合物為苯甲酸。

2.2.3 核苷類

核苷類物質(zhì)是生命活動過程中的重要代謝產(chǎn)物，具有多樣生理活性，在抗腫瘤、保護心肌損傷等生命調(diào)節(jié)過程中起著重要作用。根據(jù)堿基不同，將核苷類物質(zhì)分為嘧啶核苷及嘌呤核苷。本實驗中核苷類成分保留時間在1.1～3.75 min，在正離子模式下根據(jù)文獻及數(shù)據(jù)庫比對推斷出8種核苷類成分，以腺苷為例，在ESI+模式下準分子離子峰268.104 3[M+H]+，根據(jù)數(shù)據(jù)庫匹配出分子式為C10H13N5O4，二級質(zhì)譜出現(xiàn)136.060 6、119.034 1質(zhì)譜峰，推測該化合物為腺苷，二級碎片離子為[M+H-C5H8O4]+、[M+H-C5H8O4-NH3]+，與文獻[12-13]報道一致，因此推斷該化學成分為腺苷。

2.2.4 其他類

根據(jù)數(shù)據(jù)庫mzCloud，mzVault及本地中藥成分高分辨質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫OTCML與文獻進行比對，從假喜馬拉雅塊菌中還推斷出芳香醛類、甾醇類、油脂類等一些化合物[13]。

2.3 假喜馬拉雅塊菌的抗氧化活性測試結(jié)果

2.3.1 DPPH自由基清除活性測定

由圖3可知，假喜馬拉雅塊菌醇提水提的提取液對DPPH自由基均有一定的清除能力，且隨著樣品質(zhì)量濃度的增大自由基清除率也隨之增加，在一定范圍內(nèi)存在量效關(guān)系。但與維生素C相比，維生素C的抗氧化能力要明顯強于塊菌提取物。由圖3可以看出，塊菌水提的DPPH自由基清除率的平均值要高于塊菌80%甲醇提取的平均值。表1列出了各不同溶劑提取物的EC50值(mg/mL)，塊菌水提液的EC50值平均為14.97 mg/mL，80%甲醇提取液的EC50值平均為20.90 mg/mL(表2)，對2組數(shù)據(jù)進行t檢驗，P<0.05，結(jié)果表明，塊菌水提DPPH抗氧化活性與80%甲醇提取抗氧化活性有統(tǒng)計學差異。

圖3 甲醇提取物、水提物、維生素C的DPPH自由基清除能力Fig.3 DPPH radical scavenging activities of methanolic extracts, aqueous extracts and vitamin C

2.3.2 ABTS陽離子自由基清除活性測定

由圖4可知，假喜馬拉雅塊菌80%甲醇和水提的提取液對ABTS陽離子自由基清除能力隨著樣品濃度的增大自由基清除率也隨之增加，在一定范圍內(nèi)存在量效關(guān)系。維生素C在0.062 5～4 mg/mL的質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，自由基清除率無較大波動，維持在90%附近，說明維生素C具有較強的抗氧化活性。假喜馬拉雅塊菌醇提水提后提取液雖然具有一定自由基清除效果，但是清除效果低于維生素C。由圖4可以看出，塊菌水提醇提的ABTS陽離子自由基清除率相近，但是塊菌水提ABTS陽離子自由基清除率的平均值要略高于塊菌80%甲醇提取的平均值。表2列出了各不同溶劑提取物的EC50值(mg/mL)，塊菌水提液的EC50值平均為0.19 mg/mL，80%甲醇提取液的EC50值平均為0.26 mg/mL，對2組數(shù)據(jù)進行t檢驗，P>0.05，結(jié)果表明，塊菌水提ABTS抗氧化活性與80%甲醇提取抗氧化活性無統(tǒng)計學差異。

圖4 甲醇提取物、水提物、維生素C的ABTS陽離子 自由基清除能力Fig.4 ABTS radical scavenging activities of methanolic extracts, aqueous extracts and vitamin C

2.3.3 羥自由基清除活性測定

由圖5可知，假喜馬拉雅塊菌羥自由基清除能力：維生素C>塊菌水提物>塊菌80%甲醇提取物,且隨著塊菌樣品濃度的增大自由基清除率也增加，存在量效關(guān)系。維生素C在2～12 mg/mL，自由基清除率穩(wěn)定維持在90%附近，說明維生素C具有較強的抗氧化活性。假喜馬拉雅塊菌醇提水提后提取液雖然具有一定自由基清除效果，但是清除效果低于維生素C。表2列出了各不同溶劑提取物的EC50值(mg/mL)，塊菌水提液的EC50值平均為3.21 mg/mL，80%甲醇提取液的EC50值平均為4.71 mg/mL，對2組數(shù)據(jù)進行t檢驗，P<0.05，結(jié)果表明，塊菌水提抗氧化活性與80%甲醇提取抗氧化活性具有統(tǒng)計學差異。

圖5 甲醇提取物、水提物、維生素C的羥自由基清除能力Fig.5 Hydroxyl radical scavenging activities of methanolic extracts, aqueous extracts and vitamin C

2.3.4 還原能力測定

由圖6可知，在所測質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，塊菌各提取物與維生素C，隨著質(zhì)量濃度的增加，還原能力都逐漸增強，并呈現(xiàn)出較好的量效關(guān)系。塊菌還原能力大小關(guān)系為：維生素C>塊菌水提物>塊菌80%甲醇提取物，對塊菌水提醇提2組數(shù)據(jù)進行t檢驗，P<0.05，結(jié)果表明，塊菌水提抗氧化活性與80%甲醇提取抗氧化活性具有統(tǒng)計學差異。

圖6 甲醇提取物、水提物、維生素C的還原能力Fig.6 Reducing power of methanolic extracts, aqueous extracts and vitamin C

2.3.5 總酚含量的測定

通過2種不同的提取溶劑對假喜馬拉雅塊菌的總酚進行提取，塊菌水提總酚含量3.99 mg/g，塊菌80%甲醇提取總酚含量為1.87 mg/g(表2)，將不同提取物的總酚含量進行t檢驗，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，塊菌水提物總酚的含量與80%甲醇提取物存在顯著性差異，水提物的總酚含量明顯高于甲醇提取，水提物的DPPH自由基、ABTS陽離子自由基、羥自由基清除能力與還原能力也高于甲醇提取物，采用Pearson′s分析對抗氧化活性與總酚含量之間相關(guān)性進行分析。結(jié)果表明酚類物質(zhì)含量與抗氧化活性存在一定相關(guān)性，總酚含量越高，抗氧化能力會越強。

3 結(jié)論

通過UPLC-Q-Orbitrap HRMS分析了假喜馬拉雅塊菌的化學成分，假喜馬拉雅塊菌中共鑒定出51種成分，其中氨基酸和有機酸含量較高，近年來，谷氨酸、精氨酸、天門冬氨酸、胱氨酸等氨基酸也單獨作用治療一些疾病，主要用于治療肝病疾病、消化道疾病、腦病、心血管病、呼吸道疾病以及用于提高肌肉活力、兒科營養(yǎng)和解毒等[1,4,6]。有機酸一般無特殊生物活性，但是有些天然有機酸，則具有抑菌、降血糖、抗氧化以及調(diào)節(jié)機體免疫等作用，能夠增加冠狀動脈血流量、抑制腦組織脂質(zhì)過氧化物生成、軟化血管、還有預防疾病和促進新陳代謝等作用[10]。

表2 假喜馬拉雅塊菌提取物抗氧化能力的EC50值和總酚含量Table 2 EC50 values obtained in the antioxidant activity assays and contents of total phenolics of different extracts from Tuber pesudohimalayense

抗氧化實驗結(jié)果顯示，同種塊菌選擇不同提取溶劑，可能會影響獲得的抗氧化代謝產(chǎn)物含量，進而影響其抗氧化活性，假喜馬拉雅塊菌具有顯著的清除ABTS陽離子自由基、DPPH自由基、羥自由基的能力，且水提物的自由基清除能力強于甲醇提取物，水提物的還原能力也強于甲醇提取物。通過對水提物和甲醇提取物的總酚含量測定發(fā)現(xiàn)，水提物的總酚含量明顯高于甲醇提取物，這也說明塊菌的抗氧化活性與總酚含量成正相關(guān)。

綜上，通過對假喜馬拉雅塊菌的化學成分和抗氧化活性研究，發(fā)現(xiàn)塊菌可以作為天然抗氧化劑的來源，未來應(yīng)加快塊菌化學成分和藥理性質(zhì)的研究，充分挖掘塊菌的食藥用價值，把塊菌中的有效成分應(yīng)用于藥品、食品、保健品、化妝品中，推進塊菌產(chǎn)業(yè)發(fā)展。