手足十二針聯(lián)合加味茵陳蒿湯治療非酒精性脂肪肝及對患者腸道菌群的影響

宋 麗,石 蕊,趙香君

(1.河北醫(yī)科大學(xué)，河北 石家莊 050011；2.秦皇島軍工醫(yī)院，河北 秦皇島 066000；3.香河縣人民醫(yī)院，河北 廊坊 065400)

非酒精性脂肪肝(Nonalcoholic fatty liver，NAFLD)是較為顯而易見的損肝因素，致使肝細(xì)胞內(nèi)脂肪過度沉積的臨床綜合征[1-2]。近年來，其發(fā)病率持續(xù)遞增，且患病人群逐漸年輕化。在較為發(fā)達(dá)的國家和城市中，非酒精性脂肪肝的患病率為10%～30%，對患者的生命健康和生活造成嚴(yán)重威脅[3-4]。在臨床治療過程中，西藥治療為常用的治療方案，主要改善患者肝功能、血脂水平等。但有研究表示，進(jìn)行西藥治療的整體療效不盡理想，具有一定不良反應(yīng)。于此，多數(shù)專家采用中醫(yī)治療方案進(jìn)行研究，尋找更具療效且不良反應(yīng)小的治療手段[5-6]。肝郁脾虛證型為常見的非酒精性脂肪肝證型。本研究通過手足十二針與加味茵陳蒿湯聯(lián)合，對肝郁脾虛型非酒精性脂肪肝患者進(jìn)行治療，觀察效果。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2020年7月至2021年7月于我院接受非酒精性脂肪肝治療的患者共115例，通過完全隨機(jī)法對115例患者進(jìn)行分組，將其分為對照組57例，聯(lián)合組58例。對照組男30例，女27例；年齡42～63歲，平均(52.51±8.42)歲;病程13～19個月，平均(16.57±2.54)個月；腹脹28例,納差29例。觀察組男33例，女25例；年齡43～63歲，平均(53.02±8.52)歲;病程14～20個月，平均(17.01±2.42)個月；腹脹31例,納差27例。兩組患者一般資料比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

病例納入標(biāo)準(zhǔn)：①所有患者均符合中華醫(yī)學(xué)會肝病學(xué)分會對酒精性脂肪肝的診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]，且符合《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》對肝郁脾虛中醫(yī)證型診斷標(biāo)準(zhǔn)[8]，病例資料齊全；②患者家屬均簽署知情同意書；③無病毒性肝炎者；④無藥物性肝病史者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①妊娠哺乳期婦女；②有精神疾病史者；③治療期間依從性較差者；④有嚴(yán)重冠心病、高血壓且無法停藥者。

1.2 治療方法

1.2.1 對照組：服用加味茵陳蒿湯進(jìn)行治療，方劑組成：茵陳60 g，梔子、銀花、龍膽草、澤瀉、茯苓、雞內(nèi)金各15 g，大黃、黃柏、連翹、黃芩各10 g，板藍(lán)根30 g，生山楂20 g。加水800 ml進(jìn)行文火水煎兩次，共30 min，取藥汁400 ml，分早、晚飯后溫服。

1.2.2 聯(lián)合組：在對照組基礎(chǔ)上予手足十二針進(jìn)行聯(lián)合治療，針灸組方：合谷、曲池、足三里、陽陵泉、內(nèi)關(guān)、三陰交。依照不同患者體質(zhì)類型進(jìn)行具體施針方案調(diào)整，偏實(shí)體質(zhì)以瀉法為主，偏虛體質(zhì)以補(bǔ)法為主。氣虛體質(zhì)者進(jìn)行補(bǔ)足三里穴、瀉陽陵泉穴，其余穴位用補(bǔ)法；陽虛體質(zhì)者進(jìn)行補(bǔ)足三里穴，同時加入艾灸；濕熱體質(zhì)加瀉陰陵泉，補(bǔ)三陰交穴，其余穴位用瀉法；氣郁體質(zhì)者加瀉太沖穴，補(bǔ)三陰交穴，其余穴位用瀉法。每次留針30 min，共行針3次，3次/周。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 中醫(yī)證候評分：將患者右脅脹悶、周身困重、脘腹脹滿、倦怠乏力等中醫(yī)證候評分項(xiàng)目按照嚴(yán)重程度進(jìn)行劃分。將其分為重度、中度、輕度、正常4種標(biāo)準(zhǔn)，分別計(jì)6、4、2、0分，進(jìn)行組間比較。

1.3.2 肝功能、血脂水平評價：于入院次日采集所有研究對象空腹靜脈血5 ml，使用離心機(jī)離心處理10 min(離心半徑10 cm，轉(zhuǎn)速2500 r/min)，使用全自動生化分析儀(日本 Olympus公司，型號：AU400型)檢測丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(Alanine transaminase，ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(Aspartate transaminase，AST)、γ-谷氨酸轉(zhuǎn)移酶(Gamma-glutamate transferase，GGT)、總膽固醇(Total chorestrol，TC)、甘油三酯(Triglycerides，TG)、高密度脂蛋白(High density lipoprotein，HDL)、低密度脂蛋白(Low density lipoprotein，LDL)水平。

1.3.3 炎性因子水平檢測：酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢測白細(xì)胞介素-8(Interleukin-8，IL-8)、腫瘤壞死因子-α(Tumor necrosis factor-α，TNF-α)、轉(zhuǎn)化生長因子-β(Transforming growth factor-β,TGF-β)水平。標(biāo)記酶標(biāo)板、稀釋標(biāo)準(zhǔn)品，設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)、空白檢測孔，標(biāo)準(zhǔn)孔添加標(biāo)準(zhǔn)品，空白孔添加終止液、顯色劑，檢測孔添加血清標(biāo)本及抗體后封膜，封膜并晃勻，37 ℃保溫箱靜置60 min后去膜清洗，空白孔為基準(zhǔn)，使用酶標(biāo)分析儀(上海酶聯(lián)生物技科技有限公司，型號：ML-dr3518)450 nm處測吸光值，計(jì)算IL-8、TNF-α、TGF-β水平。

1.3.4 腸道菌群水平檢測：采用改良TIANamp Stool DNA Kit方法進(jìn)行糞便細(xì)菌基因組總DNA提取。取自然排出的新鮮糞便樣品2 g以上，分裝于2 ml無菌離心管中，-80 ℃保存待用。離心管中加入1.4 ml緩沖液，間歇振蕩1 min至樣品徹底混勻，滿旋15 s于高速離心機(jī)12000 r/min離心1 min，轉(zhuǎn)移上清液1.2 ml至新的滅菌離心管中。加入Inhibit EX(抑制劑吸附片),室溫孵育1 min，使吸附片與樣品充分作用，加入4 μl 100 mg/ml RNA酶，靜置5 min，收集管壁滴液，加入200 μl無水乙醇，搖勻并加入到收集管吸附柱CR2中，室溫放置5～10 min，向吸附膜中間滴加50 μl TB洗脫緩沖液，離心2 min后，棄掉吸附柱CR2，并將其溶液進(jìn)行無菌離心管收集，記錄DNA質(zhì)量和產(chǎn)率進(jìn)行檢測，計(jì)算腸道菌群水平。

1.4 療效標(biāo)準(zhǔn) 顯效為肝功能正常，主癥、次癥基本消失，中醫(yī)證候評分下降70%以上；有效為肝功能改善，主癥、次癥有效緩解，中醫(yī)證候評分下降30%～70%；無效為肝功能無改善，中醫(yī)證候評分下降30%以下?？傆行?顯效+有效。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 26.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析。計(jì)數(shù)資料以[例(%)]表示，采用卡方檢驗(yàn)；計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，用t檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組患者治療前后中醫(yī)證候評分比較 見表1。治療前，兩組右脅脹悶、周身困重、脘腹脹滿、倦怠乏力評分比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療后，與同組治療前比較，右脅脹悶、周身困重、脘腹脹滿、倦怠乏力評分均降低，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)；治療后，與對照組比較，聯(lián)合組右脅脹悶、周身困重、脘腹脹滿、倦怠乏力評分均降低，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。

表1 兩組患者治療前后中醫(yī)證候評分比較(分)

2.2 兩組患者治療前后肝功能水平比較 見表2。治療前，兩組ALT、AST、GGT水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)；治療后，與同組治療前比較，ALT、AST、GGT水平均降低，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)；治療后，與對照組比較，聯(lián)合組ALT、AST、GGT水平均降低，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。

表2 兩組患者治療前后肝功能水平比較(U/L)

2.3 兩組患者治療前后炎性因子水平比較 見表3。治療前，兩組IL-8、TNF-α、TGF-β水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療后，與同組治療前比較，IL-8、TNF-α、TGF-β水平均降低，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)；治療后，與對照組比較，聯(lián)合組IL-8、TNF-α、TGF-β水平均降低，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。

表3 兩組患者治療前后炎性因子水平比較

2.4 兩組患者治療前后血脂水平比較 見表4。治療前，兩組TC、TG、HDL、LDL水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療后，與同組治療前比較，TC、TG、LDL水平降低，HDL水平升高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(均P<0.05)；治療后，與對照組比較，聯(lián)合組TC、TG、LDL水平降低，HDL水平升高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(均P<0.05)。

表4 兩組患者治療前后血脂水平比較(mmol/L)

2.5 兩組患者治療前后腸道菌群水平比較 見表5。治療前，兩組乳桿菌、腸球菌、雙歧桿菌、埃希菌水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療后，與同組治療前比較，乳桿菌、雙歧桿菌水平升高，腸球菌、埃希菌水平均降低，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)；治療后，與對照組比較，聯(lián)合組乳桿菌、雙歧桿菌水平升高，腸球菌、埃希菌水平降低，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(均P<0.05)。

表5 兩組患者治療前后腸道菌群水平比較

2.6 兩組患者臨床療效比較 見表6。與對照組比較，聯(lián)合組臨床治療總有效率高于對照組，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。

表6 兩組患者臨床療效比較[例(%)]

3 討 論

在當(dāng)下，非酒精性脂肪肝已經(jīng)成為臨床較為常見的疾病，分為原發(fā)性和繼發(fā)性兩大類，其臨床表現(xiàn)為乏力、消化不良、肝區(qū)隱痛、血脂紊亂等非特異性癥狀[9-10]。在中醫(yī)學(xué)理論中，非酒精性脂肪肝歸屬于“脅痛、痰濁”等范疇，其中醫(yī)證型為肝郁脾虛證[11-12]。在中醫(yī)治療中，手足十二針和加味茵陳蒿湯對非酒精性脂肪肝有一定療效。加味茵陳蒿湯由茵陳、梔子、黃柏、生山楂、茯苓等中藥組成[13]。方中茵陳清熱利濕；梔子、黃柏清熱燥濕；山楂消食化積、散瘀行滯；茯苓健脾和胃。諸藥合用，能夠清熱利濕，調(diào)理肝脾[14]。而手足十二針對合谷、曲池、足三里等穴位進(jìn)行刺激，這一針灸治療能夠疏通經(jīng)絡(luò)、調(diào)和氣血、刺激腸胃蠕動、降低血脂等，而且對比中藥所具有的傷及人體正氣的一面，其針灸治療則相對更為直接、安全[15-16]。于此，本文研究手足十二針聯(lián)合加味茵陳蒿湯進(jìn)行治療，通過內(nèi)服外用，以達(dá)到良好的治療效果。

通過使用以上這一聯(lián)合治療方案對非酒精性脂肪肝患者進(jìn)行治療，其治療結(jié)果顯示，患者右脅脹悶、周身困重、脘腹脹滿、倦怠乏力評分降低。據(jù)相關(guān)學(xué)者研究證實(shí)，非酒精性脂肪肝基本病機(jī)為阻滯不通，臨床常見為肝郁脾虛證，治療則需要疏通經(jīng)絡(luò)、活血化瘀[17]。據(jù)相關(guān)研究指出，使用針灸聯(lián)合中藥對非酒精性脂肪肝進(jìn)行治療，能夠使脾得健運(yùn)、肝能疏泄、通里攻下、疏肝利膽[18]。本研究結(jié)果說明，手足十二針聯(lián)合加味茵陳蒿湯，能夠有效減輕患者右脅脹悶、周身困重、脘腹脹滿、倦怠乏力等中醫(yī)證候嚴(yán)重程度，治療效果顯著。

本研究結(jié)果顯示，對非酒精性脂肪肝患者使用本聯(lián)合方案進(jìn)行臨床治療，能夠降低ALT、AST、GGT水平。據(jù)臨床研究指出，非酒精性脂肪肝癥狀的發(fā)生發(fā)展伴隨而來的就是肝功能出現(xiàn)異常。改善機(jī)體肝功能是臨床治療非酒精性脂肪肝的關(guān)鍵[19]。ALT、AST、GGT為常用評價肝功能變化情況的指標(biāo)，ALT、AST、GGT水平能夠?qū)Ω黝惛尾〉膰?yán)重程度以及療效進(jìn)行有效反映。于此，通過本研究結(jié)果得知，對非酒精性脂肪肝患者運(yùn)用這一聯(lián)合方案進(jìn)行治療，能夠有效改善肝功能，加快患者病情恢復(fù)。

由研究結(jié)果顯示可知，對非酒精性脂肪肝患者使用聯(lián)合方案進(jìn)行臨床治療，能夠降低IL-8、TNF-α、TGF-β水平。經(jīng)相關(guān)研究指出，IL-8、TNF-α、TGF-β指標(biāo)參與炎癥反應(yīng)，自身的變化與非酒精性脂肪肝的發(fā)生發(fā)展具有相關(guān)性。IL-8、TNF-α、TGF-β作為評價炎癥反應(yīng)的重要相關(guān)指標(biāo)，其水平變化與非酒精性脂肪肝的病情嚴(yán)重程度密切相關(guān)[20]。本研究結(jié)果說明，應(yīng)用手足十二針聯(lián)合加味茵陳蒿湯進(jìn)行非酒精性脂肪肝治療，能夠顯著抑制炎性因子活性，減輕機(jī)體內(nèi)炎癥反應(yīng)，對非酒精性脂肪肝治療具有顯著作用。

本研究結(jié)果顯示，對非酒精性脂肪肝患者使用聯(lián)合方案進(jìn)行治療，能夠降低TC、TG、LDL水平，升高HDL水平。在非酒精性脂肪肝臨床治療上，TC、TG、HDL、LDL為常用檢測血脂水平異常的指標(biāo)，其水平變化與非酒精性脂肪肝病情嚴(yán)重程度具有相關(guān)性[21]。本研究結(jié)果說明，使用該聯(lián)合方案能夠改善血脂水平，發(fā)揮治療效果。

透過本次研究結(jié)果顯示，通過進(jìn)行手足十二針與加味茵陳蒿湯的聯(lián)合治療，使非酒精性脂肪肝患者的乳桿菌、雙歧桿菌水平升高，腸球菌、埃希菌水平降低。相關(guān)研究指出，乳桿菌、腸球菌、雙歧桿菌、埃希菌為臨床常用評價腸道菌群水平的指標(biāo)[22]。非酒精性脂肪肝患者普遍存在腸道菌群紊亂，導(dǎo)致腸球菌、埃希菌水平上升，乳桿菌、雙歧桿菌水平下調(diào)。由此得出，腸道菌群各細(xì)菌屬的上下波動變化，能夠有效反映病情嚴(yán)重程度[23]。本研究結(jié)果表明，使用該聯(lián)合方案進(jìn)行非酒精性脂肪肝治療，能夠調(diào)節(jié)腸道菌群水平，有效控制病情發(fā)展。

綜上所述，通過對非酒精性脂肪肝患者實(shí)施手足十二針與加味茵陳蒿湯的聯(lián)合治療方案，能夠有效降低中醫(yī)證候評分，使患者肝功能、血脂水平得到有效改善，減輕炎癥反應(yīng)，調(diào)節(jié)腸道菌群，為非酒精性脂肪肝的臨床治療提供切實(shí)可行的參考依據(jù)。