山羊傳染性胸膜肺炎鑒別診斷與綜合防治措施

范良志

（福建省福鼎市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局 福建寧德 355200）

山羊傳染性胸膜肺炎又稱“爛肺病”、山羊支原體肺炎，該病主要是由山羊支原體山羊肺炎亞種引起的，其臨床特征主要表現(xiàn)咳嗽、發(fā)熱、胸和胸膜出現(xiàn)漿液性和纖維素性肺炎，發(fā)病過(guò)程急性、慢性均有，臨床上病死率較高，部分養(yǎng)殖場(chǎng)死亡率及淘汰率高達(dá)50%以上，該病對(duì)山羊產(chǎn)業(yè)的發(fā)展危害大。因此，本文就山羊傳染性胸膜肺炎相關(guān)問(wèn)題進(jìn)行探討，并提出綜合防治措施，以期為廣大山羊養(yǎng)殖戶提供防治經(jīng)驗(yàn)借鑒。

1 發(fā)病情況

福鼎市某羊場(chǎng)存欄山羊730 只，其中：種公羊15 只，種母羊270 只。2020 年12 月間從外地購(gòu)入南江黃羊成年種公羊1 只，后備母羊10 只，近距離隔離在獨(dú)立羊舍，1 周內(nèi)未見(jiàn)異常。為便于管理，將新引種的山羊并入原有羊舍同群飼養(yǎng)，3d 后發(fā)現(xiàn)引種的種公羊發(fā)病，接著羊群中部分羊只發(fā)病，病初體溫在40～41.7℃之間，并伴有咳嗽、流漿液性鼻液等癥狀。按照感冒治療方案給予注射氨基比林+慶大霉素治療，不見(jiàn)好轉(zhuǎn)。1 周后，發(fā)病羊只數(shù)量猛增，對(duì)病羊進(jìn)行肺部聽(tīng)診出現(xiàn)支氣管呼吸音，叩診肺部出現(xiàn)濁音，病羊可視黏膜發(fā)紺，一些病羊出現(xiàn)腹瀉，懷孕后期母羊有流產(chǎn)現(xiàn)象，部分病羊死亡時(shí)口鼻流血。到2021 年1 月底，從發(fā)病初始20 多天，共有154 只羊發(fā)病，發(fā)病率為20.8%；死亡27 只，死亡率為3.6%。本次發(fā)病造成了較大的經(jīng)濟(jì)損失，但筆者發(fā)現(xiàn)年齡較大的山羊發(fā)病率低，治愈率也高。

2 臨床癥狀

根據(jù)病程和臨床癥狀可分為最急性、急性和慢性。

1）最急性型。在最急性期，病羊體溫最高可達(dá)40.5～41.7℃之間，厭食，呼吸急促且困難，往往會(huì)不由自主發(fā)出哀鳴，隨時(shí)間延長(zhǎng)而出現(xiàn)一系列肺炎癥狀，如咳嗽、流漿性帶血的鼻液、呼吸不利，肺泡呼吸音呈捻發(fā)音，肺部有濁音等。隨著病情不斷發(fā)展，甚至有部分病羊臥地不起，并出現(xiàn)全身顫抖、難以呼吸、可視黏膜發(fā)紺、目光呆滯等癥狀，在呻吟聲中死亡?；疾『螅罴毙孕筒〕淘?d 內(nèi)，有的短至1～2d。

2）急性型。此型最為常見(jiàn)。病初體溫升高，繼之出現(xiàn)短而濕的咳嗽，伴有膿性或漿性鼻漏，口內(nèi)角及鼻唇部出現(xiàn)帶泡沫的液體，并發(fā)出呻吟聲。4～5d 后，鼻液轉(zhuǎn)為黏液-膿性并呈鐵銹色，高熱不退，食欲銳減，呼吸困難，眼瞼腫脹，流淚，眼有黏液-膿性分泌物。有的出現(xiàn)腹瀉、口腔潰瘍現(xiàn)象，唇、乳房等部皮膚紅疹塊，部分懷孕母羊出現(xiàn)流產(chǎn)現(xiàn)象。嚴(yán)重的病羊出現(xiàn)臥地不起、器官衰竭。瀕臨死亡時(shí)，體溫異常下降，最后衰竭死亡，未死病羊轉(zhuǎn)為慢性型。

3）慢性型。一般由急性型轉(zhuǎn)化而來(lái)，同時(shí)存在腹瀉、咳嗽、流涕現(xiàn)象，體溫最高可達(dá)40℃，被毛雜亂、病羊消瘦。如果管理不善，病情會(huì)趨向嚴(yán)重或者引發(fā)其他并發(fā)癥而導(dǎo)致死亡；而加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，創(chuàng)造良好的飼養(yǎng)環(huán)境時(shí)，能夠逐漸恢復(fù)健康。

3 剖檢變化

根據(jù)臨床癥狀，對(duì)典型癥狀的病死羊?qū)嵤┙馄拾l(fā)現(xiàn)，病變多集中在胸部，呈現(xiàn)纖維素蛋白性肺炎和胸膜炎。進(jìn)行解剖時(shí)，會(huì)發(fā)現(xiàn)腹腔中存在腐敗臭味或異樣氣味，胸腔中存在積液及一些腐敗的組織，腐敗組織的顏色以黃白或黃色為主，一旦接觸空氣，會(huì)凝結(jié)成塊，被稱作纖維素蛋白凝塊。病羊受到病菌侵害時(shí)，一般損害的部位為肺的尖葉、心葉和膈葉上，呈氣腫狀，切面出現(xiàn)大理石紋樣，其表面呈現(xiàn)紅色或灰色，有纖維蛋白液滲出，肺小葉間距較寬，支氣管和細(xì)支氣管間存有大量白色泡沫樣液體。胸膜變厚而粗糙，與心包或肋骨粘連，縱膈淋巴結(jié)與淋巴結(jié)腫大并能看到出血點(diǎn)，膽囊變大。病羊的癥狀持續(xù)一段時(shí)間后，會(huì)出現(xiàn)包囊化的壞死灶、肝變區(qū)組織增生、病例肺等。

4 實(shí)驗(yàn)室診斷

由于本病例中有流產(chǎn)和腹瀉等羊小反芻獸疫和布魯氏桿菌病臨床癥狀，特采集未發(fā)病、發(fā)病及死亡羊只口鼻棉拭子及全血樣品10 份開(kāi)展實(shí)驗(yàn)室診斷工作。如果PCR 檢測(cè)結(jié)果羊小反芻獸疫或羊布魯氏桿菌病陽(yáng)性，可判定羊小反芻獸疫（列動(dòng)物一類傳染病）或羊布魯氏桿菌?。袆?dòng)物二類傳染?。┮伤撇±?，臨床上均不得用藥治療，應(yīng)立即封鎖羊群，同時(shí)上報(bào)上級(jí)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心和同級(jí)人民政府，并按照羊小反芻獸疫或羊布魯氏桿菌病處置規(guī)范做好消毒、撲殺和無(wú)害化處理等處置工作。

4.1 主要設(shè)備

天隆NP968-C 核酸提取儀、TECAN F50 酶標(biāo)儀、電熱恒溫培養(yǎng)箱、耶拿qTOWER3g 熒光定量PCR 儀、臺(tái)式高速離心機(jī)、BRAND 微量移液器等實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備。

4.2 方法

1）直接涂片檢查。病原學(xué)鑒定：無(wú)菌操作取病死羊肺組織或胸水作涂片用瑞特氏染色，可見(jiàn)微小粒點(diǎn)，用血液瓊脂培養(yǎng)檢查僅能見(jiàn)到極小點(diǎn)狀生長(zhǎng)物，可判定為絲狀支原體。

根據(jù)臨床癥狀、剖檢變化和實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)，可診斷為羊傳染性胸膜肺炎，進(jìn)一步確診可依據(jù)《山羊傳染性胸膜肺炎診斷技術(shù)》（GB/T34720—2017）做羊血清學(xué)PCR 檢測(cè)。

2）小反芻獸疫抗體和布魯氏菌病抗體ELISA 檢測(cè)。按照北極世紀(jì)元亨、廣州悅洋生物技術(shù)有限公司使用說(shuō)明書(shū)提供方法，同時(shí)結(jié)合《動(dòng)物布魯氏菌病診斷技術(shù)》（GB/T18646—2018）及《小反芻獸疫診斷技術(shù)》（GB/T27982—2011）進(jìn)行檢測(cè)。為防止?jié)撛诟腥緮U(kuò)散風(fēng)險(xiǎn)，本實(shí)驗(yàn)需在生物安全柜中進(jìn)行，同時(shí)實(shí)驗(yàn)人員需做好生物安全防護(hù)措施。

3）小反芻獸疫病毒檢測(cè)。①核酸提取。具體方法如下：在16T每板的86 孔板的第1 列和第7 列加入20μ L 蛋白酶K、200μ L 離心后的樣品上清液，陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照；按照提取試劑盒中規(guī)定提取程序進(jìn)行自動(dòng)提?。蛔詣?dòng)提取工作完成后，第6 列及第12 列中的液體即為目標(biāo)RNA。②小反芻獸疫病毒擴(kuò)增。從試劑盒中取出相應(yīng)的PCR 反應(yīng)液、Taq 酶；在室溫下融化后，2,000rpm 離心5s。設(shè)所需PCR 管數(shù)為N（N=樣本數(shù)+1 管陰性對(duì)照+1 管陽(yáng)性對(duì)照），每管反應(yīng)體系為RT-PCR 反應(yīng)液15μ L，Taq 酶0.25μ L，10μ L 目標(biāo)RNA 液體。向各管中分別加入核酸提取步驟中所得目標(biāo)RNA 液體10μ L，并標(biāo)記好序號(hào)及陰陽(yáng)性對(duì)照，瞬間離心5s，將PCR 管按順序放入PCR 熒光檢測(cè)儀內(nèi)。設(shè)定循環(huán)程序?yàn)?2℃、30min；92℃、3min；循環(huán)92℃、3min，45℃、30s，72℃、1min，共5 次；循環(huán)92℃、10s；60℃、30s，共40 次，每次循環(huán)第二步（60℃、30s）收集熒光信號(hào)。③布魯氏菌病PCR 檢測(cè)：由于該市病原學(xué)實(shí)驗(yàn)室未配備負(fù)壓空氣凈化設(shè)備，不具備開(kāi)展布魯氏菌病PCR 檢測(cè)資質(zhì)。將樣品進(jìn)行冰封打包后委托寧德市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心病原學(xué)（負(fù)壓）實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行布魯氏菌病PCR 檢測(cè)。

4.3 試驗(yàn)結(jié)果判斷

陽(yáng)性對(duì)照CT 值≤28，陰性對(duì)照無(wú)CT 判定為試驗(yàn)結(jié)果成立。被檢樣品CT 值≤30 為陽(yáng)性，無(wú)CT 值為陰性，CT 值＞30 為可疑，建議重做。

4.4 試驗(yàn)結(jié)果

羊小反芻獸疫抗體30 份，28 份陽(yáng)性；羊小反芻獸疫RT-PCR檢測(cè)30 份均為陰性；布魯氏菌病抗體30 份均為陰性；布魯氏菌病RT-PCR 檢測(cè)30 份，均為陰性。

經(jīng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)判定，該羊場(chǎng)可排除小反芻獸疫及布魯氏菌病發(fā)病可能。

5 綜合防治措施

5.1 中藥湯劑預(yù)防治療

全場(chǎng)用麻杏石甘湯口服飲水，用來(lái)解表，具有辛涼宣泄、清肺平喘的功效，方劑組成是麻黃、杏仁、石膏、甘草，用于治療風(fēng)熱之邪的外感，病邪集聚于患羊肺內(nèi)，患羊出現(xiàn)熱邪壅肺的表現(xiàn)，本方劑止咳平喘，宣肺化痰，可以抑制本病發(fā)展。

5.2 西藥對(duì)癥治療

對(duì)每只病羊每天胸腔注射一次0.1mL/kg·bw 的5%恩諾沙星注射液，還可以交替使用林可霉素、多西環(huán)素、氟苯尼考注射液，一個(gè)治療療程為5～7d。對(duì)于處于危急狀態(tài)的病羊，靜脈注射1 次/d，10%葡萄糖注射液200mL 加5%VC 注射液5mL，連用3～5d。當(dāng)肺炎初期，為促進(jìn)分泌物吸收和減輕肺部水腫，按0.1mL/kg·bw 肌內(nèi)注射呋塞米注射液，提高治療效果。

5.3 預(yù)防措施

1）接種疫苗是預(yù)防山羊感染傳染性胸膜肺炎最直接、最有效的手段。當(dāng)羊群中出現(xiàn)傳染性胸膜肺炎病例時(shí)，應(yīng)當(dāng)對(duì)未發(fā)病的山羊緊急免疫接種山羊傳染性胸膜肺炎滅活疫苗，接種后產(chǎn)生免疫抗體的時(shí)間約為兩周，產(chǎn)生抗體后可迅速阻斷病源擴(kuò)散，并達(dá)到1年的免疫效果。為確保羊群健康，應(yīng)系統(tǒng)建立免疫程序，做好口蹄疫、小反芻獸疫和山羊傳染性胸膜肺炎等病種的免疫注射。

2）重視外源輸入性疫情。盡量自繁自養(yǎng)，如果必須引種，春季和初秋是最好的引種季節(jié)。引種后，要進(jìn)行為期一個(gè)月的隔離觀察，觀察期內(nèi)做好檢疫和疫病監(jiān)測(cè)，確定健康方可并群飼養(yǎng)。當(dāng)引種羊在隔離期間出現(xiàn)疾病時(shí)，必須馬上給藥進(jìn)行治療，防止疫情傳染擴(kuò)散。

3）注意養(yǎng)殖環(huán)境。保持羊舍通風(fēng)和清潔衛(wèi)生，重視羊舍的消毒和排泄物清理工作。注意冬季和早春防寒保暖，尤其是陰冷潮濕的天氣，要對(duì)羊群的健康狀況進(jìn)行關(guān)注和全程監(jiān)測(cè)。一旦發(fā)現(xiàn)羊群出現(xiàn)發(fā)熱、咳嗽、流鼻涕等癥狀，務(wù)必要高度重視，盡快開(kāi)展檢測(cè)和治療。

6 結(jié)語(yǔ)

山羊傳染性胸膜肺炎在南方冬末早春陰冷潮濕氣候多發(fā)，尤其是養(yǎng)殖規(guī)模小或散養(yǎng)戶日常防寒保暖措施不健全的養(yǎng)殖場(chǎng)，應(yīng)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，注意科學(xué)規(guī)范地引種，做好引種隔離和防檢疫工作，加強(qiáng)疫病監(jiān)控，為羊群營(yíng)造良好的生長(zhǎng)環(huán)境。本文診斷方法和防治措施已成功治愈多起病例，均取得成效，值得推廣應(yīng)用。