孔膜對(duì)秀珍菇出菇環(huán)境及黃菇病發(fā)生的影響*

陳雪鳳，吳圣進(jìn)，陳國(guó)龍，潘慶流，劉增亮，張?chǎng)?/p>

（1.廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院微生物研究所，廣西 南寧 530007；2.玉林市微生物研究所，廣西 玉林 537000；3.廣西宜州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所，廣西 宜州 546300）

黃菇病是秀珍菇（Pleurotus geesteranus）栽培中的一種常見病害，該病害在頭潮菇發(fā)生的比例較高，在反季節(jié)栽培的秀珍菇中尤為嚴(yán)重。黃菇病是由假單孢菌（Pseudomonas spp.）引起的細(xì)菌性疾病，該病菌主要存在于培養(yǎng)料、真菌子實(shí)體、土壤及生產(chǎn)用水中，可通過水霧隨空氣傳播[1]。由于菇房環(huán)境多為高溫、高濕及通風(fēng)不暢，食用菌菌蓋會(huì)長(zhǎng)時(shí)間覆有水膜。一旦環(huán)境條件適宜，子實(shí)體很快感染此病，數(shù)小時(shí)內(nèi)就可出現(xiàn)病斑。如不及時(shí)處理，1 d～2 d就能殃及健康子實(shí)體，造成嚴(yán)重?fù)p失。據(jù)調(diào)查，黃菇病輕度發(fā)病率為9.4%～20.8%，高發(fā)病率為62.6%，最嚴(yán)重的是整個(gè)菇房100%的菌包發(fā)病。病害的發(fā)生不同程度影響了產(chǎn)品的品質(zhì)和產(chǎn)量，輕者減產(chǎn)欠收，重者絕收，給秀珍菇產(chǎn)業(yè)造成巨大損失。

黃菇病的發(fā)生除了與秀珍菇自身抗性有關(guān)外，還與出菇管理及環(huán)境條件密切相關(guān)。在出菇管理期間，如何協(xié)調(diào)好溫度、濕度和二氧化碳含量的關(guān)系，是防止秀珍菇黃菇病發(fā)生的關(guān)鍵。目前，秀珍菇出菇管理常規(guī)方法是：刺激出菇前用塑料膜將菌包及培養(yǎng)架四周和頂部封閉，形成相對(duì)獨(dú)立的“冷庫(kù)（庫(kù)棚）”，再利用移動(dòng)式打冷機(jī)對(duì)庫(kù)棚進(jìn)行冷刺激。冷刺激結(jié)束后，繼續(xù)用塑料薄膜悶棚催蕾。秀珍菇催蕾期間，需要一定量的二氧化碳，才能刺激其整齊出菇，同時(shí)庫(kù)棚內(nèi)濕度要求為85%～90%。冷刺激后第3天～第4天，待幼菇菌柄長(zhǎng)度為3 cm左右時(shí)，逐步掀膜通風(fēng)。由于長(zhǎng)時(shí)間的培養(yǎng)，菌包內(nèi)本身氧氣就不足，加上冷刺激后第1天～第4天一直處于密閉狀態(tài)，使棚內(nèi)形成高溫、高濕且悶熱的環(huán)境。因此，第1潮菇出菇時(shí)的悶棚時(shí)間越長(zhǎng)越容易感染黃菇病。

為協(xié)調(diào)好秀珍菇出菇管理期間濕度與通氣量的關(guān)系，減輕黃菇病的危害，試驗(yàn)利用孔徑不同的孔膜替代全封膜進(jìn)行悶棚，同時(shí)改進(jìn)出菇管理模式，以期為實(shí)際生產(chǎn)提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試菌株

秀珍菇菌種（臺(tái)秀57），由廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院微生物研究所提供。

1.1.2 培養(yǎng)料配方

桑枝屑40%、雜木屑39%、麥麩18%、輕質(zhì)碳酸鈣1%、石灰2%，pH為7.0～8.0。新鮮、無(wú)霉變、無(wú)污染的桑枝屑等主要原料，購(gòu)自河池市當(dāng)?shù)剞r(nóng)戶及雜木屑加工場(chǎng)。

1.2 方法

1.2.1 菌包制作及菌絲培養(yǎng)

試驗(yàn)地點(diǎn)為廣西壯族自治區(qū)河池市宜州區(qū)。所用菇棚為頂上凸起的雙層結(jié)構(gòu)，出菇架為“非”字型布局。按栽培秀珍菇的常規(guī)方法制作菌包，用規(guī)格為17 cm×39 cm×0.05 cm的高密度聚乙烯塑料袋裝料，每袋濕料質(zhì)量為1.5 kg（每袋干料質(zhì)量為0.53 kg）。菌包接種后疊放到菇棚培養(yǎng)90 d，待菌絲達(dá)到完全生理成熟后，通過冷刺激催蕾出菇。出菇期間如果菇棚內(nèi)濕度低于80%，用霧化噴霧器向地面及空中補(bǔ)充水分。菇棚溫度超過30℃時(shí)，向棚頂和棚外噴水降溫。

1.2.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

菌絲長(zhǎng)滿菌袋且達(dá)到生理成熟后催蕾出菇，打冷機(jī)一般在當(dāng)天下午17：00開機(jī)，次日上午7：00停機(jī)。以打冷機(jī)停機(jī)后作為第1天，一般在冷刺激后第5天可采收。冷刺激后第1天～第4天為悶棚催蕾出菇階段，在此階段以不同類型的膜為變量，設(shè)計(jì)5個(gè)處理，每個(gè)處理4排（4 000袋），以探究孔膜對(duì)秀珍菇出菇環(huán)境及黃菇病發(fā)生的影響。

對(duì)照組（CK）：用單層密封塑料薄膜封閉“庫(kù)棚”，棚內(nèi)菌袋噴水后密閉，低溫（8℃～12℃）刺激14 h。冷刺激結(jié)束后打開袋口，第1天～第3天繼續(xù)用薄膜密封悶棚，其間不噴水。第4天早上8：00開始，隨菇蕾菌柄長(zhǎng)度達(dá)到2 cm～3 cm時(shí)，逐步揭膜透氣。薄膜全部揭開后開始向空中和地面噴水，以促進(jìn)子實(shí)體生長(zhǎng)。

試驗(yàn)組：用雙層塑料薄膜封閉“庫(kù)棚”，其中里層為有孔薄膜，每個(gè)處理中薄膜的孔徑分別為1 cm、2 cm、3 cm、4 cm，孔距為20 cm；外層為密封薄膜。棚內(nèi)菌袋噴水后密閉，在8℃～12℃條件下低溫刺激14 h。冷刺激后第1天打開菌包，在袋口噴水，并打開雙層薄膜通風(fēng)，下午18點(diǎn)開始用雙層膜悶棚。第2天和第3天，早上8：30掀開外層膜，一直到下午18：00后蓋雙層膜悶棚。第4天早上8：00開始，隨菇蕾菌柄長(zhǎng)度達(dá)到2 cm～3 cm時(shí)逐步揭膜，直至膜全部掀開。其間可酌情向空中和地面噴水，促進(jìn)子實(shí)體生長(zhǎng)。

1.3 數(shù)據(jù)觀測(cè)方法

1.3.1 出菇棚內(nèi)的數(shù)據(jù)檢測(cè)

低溫刺激結(jié)束后，從菌包開口時(shí)起計(jì)算出菇時(shí)間。此時(shí)開始測(cè)量每個(gè)處理組菇棚內(nèi)的溫度、濕度及二氧化碳含量。測(cè)量時(shí)間為早上8：00～8：30，下午16：00～16：30；每個(gè)處理分別選取5個(gè)點(diǎn)進(jìn)行測(cè)量。試驗(yàn)組第1天～第3天上午，在外層膜未掀開前測(cè)量，下午在蓋膜前測(cè)量；第4天試驗(yàn)組和對(duì)照組均在掀膜后測(cè)量；第5天各處理均通風(fēng)噴水，各條件相近不進(jìn)行測(cè)量，僅在采菇前調(diào)查發(fā)病情況。

1.3.2 黃菇病發(fā)病情況調(diào)查和分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

第1潮菇采收前，統(tǒng)計(jì)出菇菌包數(shù)和有黃菇病的菌包數(shù)；同時(shí)每個(gè)處理隨機(jī)抽取3個(gè)點(diǎn)，每點(diǎn)取發(fā)病菌包10袋，統(tǒng)計(jì)菌蓋直徑為1.5 cm以上的全部子實(shí)體發(fā)病情況，計(jì)算子實(shí)體發(fā)病率及病情指數(shù)。

菌包黃菇病發(fā)病率（M1，%）計(jì)算公式為：

式中：N1為發(fā)病菌包數(shù)（包）；N為出菇菌包總數(shù)（包）。

發(fā)病菌包子實(shí)體發(fā)病率（M2，%）計(jì)算公式為：

式中：f1為菌包發(fā)病子實(shí)體數(shù)（個(gè)）；f為發(fā)病菌包子實(shí)體總數(shù)（個(gè)）。

病情指數(shù)（K）計(jì)算公式為：

式中：k1為病害級(jí)數(shù)值；n1為對(duì)應(yīng)各級(jí)發(fā)病子實(shí)體數(shù)（個(gè)）；n為調(diào)查子實(shí)體總數(shù)（個(gè)）；k2為病害最高級(jí)數(shù)值。

秀珍菇黃菇病的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)詳見表1。

表1 秀珍菇黃菇病的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)Tab.1 Grading standard for‘yellow mushroom’disease of Pleurotus geesteranus

如表1所示，根據(jù)子實(shí)體病斑面積占整個(gè)子實(shí)體面積的比例，按數(shù)值由小到大，將病害級(jí)數(shù)分為0級(jí)至4級(jí)。

1.3.3 出菇情況觀測(cè)

低溫刺激后第2天～第3天，觀察各處理的現(xiàn)蕾時(shí)間和出菇整齊度。85%以上菌包現(xiàn)蕾出菇，且菇蕾比較整齊且多，為整齊，以“+++”表示；50%～85%菌包現(xiàn)蕾，但菇蕾不整齊且少，為一般整齊，以“++”表示；30%～50%菌包現(xiàn)蕾，但菇蕾不整齊且少，為不整齊，以“+”表示；30%以下的菌包現(xiàn)蕾或不現(xiàn)蕾，且菇蕾少，為難出菇，以“0”表示。觀察子實(shí)體是否有畸形，每個(gè)處理隨機(jī)抽取30朵子實(shí)體測(cè)量比較菌柄長(zhǎng)度，統(tǒng)計(jì)第1潮菇產(chǎn)量，并計(jì)算生物學(xué)效率。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同處理對(duì)出菇環(huán)境溫度的影響

不同的處理下，出菇前4天環(huán)境溫度的變化情況見表2。

表2 不同處理下出菇環(huán)境溫度變化情況Tab.2 Temperature change of fruiting environment under different treatments

由表2可知，不同處理間棚內(nèi)的溫度比較接近，悶棚期間平均溫度在27.4℃～27.9℃，無(wú)顯著差異。說明孔膜對(duì)秀珍菇悶棚期間棚內(nèi)溫度無(wú)明顯影響。第1天上午因低溫刺激后，菌包和棚內(nèi)環(huán)境溫度未完全恢復(fù)至常溫，故溫度偏低，其他時(shí)間溫度基本在26℃～30℃，且呈現(xiàn)平緩的遞增趨勢(shì)。其原因主要是秀珍菇現(xiàn)蕾出菇時(shí)，活躍的呼吸作用會(huì)產(chǎn)生一定的熱量，因此隨著其呼吸作用的增強(qiáng)，棚內(nèi)溫度遞增。夏季秀珍菇出菇的最適溫度為25℃～28℃，不同處理棚內(nèi)溫度平均為27℃左右，在秀珍菇適宜出菇的溫度范圍內(nèi)。

2.2 不同處理對(duì)出菇環(huán)境濕度的影響

不同的處理下，出菇前4天環(huán)境濕度的變化情況見表3。

由表3可知，不同處理間菇棚濕度有差異。薄膜孔徑越小濕度越大，孔徑越大濕度則越小，其中CK平均濕度最高，達(dá)到89.2%。從第2天開始，CK和1 cm孔徑2組處理的棚內(nèi)平均濕度明顯高于其他3組處理。由于CK是采用無(wú)孔膜，與棚外空氣不流通，隨著溫度升高，大量水蒸氣蒸發(fā)到棚內(nèi)的封閉區(qū)域，故第3天～第4天棚內(nèi)濕度高于90%。3 cm孔徑和4 cm孔徑2組處理的棚內(nèi)平均濕度低于85%，在第2天濕度為80%左右。2 cm孔徑處理組菇棚內(nèi)濕度在85%左右。薄膜孔徑不同，通風(fēng)強(qiáng)度不同?？讖皆叫?，通風(fēng)強(qiáng)度越小，因此棚內(nèi)濕度越大；孔徑越大，通風(fēng)強(qiáng)度越大，因此棚內(nèi)濕度越小。濕度越高越有利于秀珍菇原基形成，因此小孔徑（1 cm和2 cm）的薄膜比大孔徑（3 cm和4 cm）的薄膜更有利于秀珍菇原基形成，從而提高產(chǎn)量。但濕度過高容易滋生病菌，更容易引起黃菇病的發(fā)生與傳播，因此適中的濕度更有利于出菇。

表3 不同處理下出菇環(huán)境濕度變化情況Tab.3 Change of environmental humidity of fruiting under different treatments

2.3 不同處理對(duì)出菇環(huán)境二氧化碳含量的影響

不同的處理下，出菇前4天環(huán)境中二氧化碳含量的變化情況見表4。

表4 不同處理下出菇環(huán)境中二氧化碳含量變化情況Tab.4 Change of carbon dioxide content of fruiting environment under different treatments

由表4可知，不同處理下棚內(nèi)二氧化碳的含量變化都有一個(gè)明顯的高峰期，最高值在第3天出現(xiàn)，到第4天由于開始掀膜，含量迅速降低。棚內(nèi)二氧化碳含量最高是CK組，第3天時(shí)達(dá)到1.067 9%，高濃度二氧化碳的維持時(shí)間也最長(zhǎng)，平均含量為0.440 7%；其次是1 cm孔徑處理組，二氧化碳含量最高為1.036 7%，平均含量為0.345 3%。孔徑越大二氧化碳含量越低，2 cm孔徑、3 cm孔徑和4 cm孔徑3組處理的二氧化碳平均含量差異不大，在0.268 3%～0.295 2%之間。秀珍菇現(xiàn)蕾一般在冷刺激后的第2天～第3天，此時(shí)由于菌絲呼吸代謝活躍，加上晚上悶棚，因此菇棚內(nèi)二氧化碳含量急劇上升；到白天掀外膜留孔膜通風(fēng)，孔膜直徑越大，通風(fēng)作用越強(qiáng)，則二氧化碳含量越低。

2.4 孔膜對(duì)黃菇病發(fā)病的影響

不同的處理下，黃菇病的發(fā)病情況詳見表5。

由表5可知，菌包發(fā)病率、發(fā)病菌包子實(shí)體發(fā)病率和子實(shí)體發(fā)病指數(shù)最高均為CK組，按數(shù)值大小排列順序?yàn)镃K>1 cm孔徑>2 cm孔徑>3 cm孔徑>4 cm孔徑。CK、1 cm孔徑和2 cm孔徑3個(gè)處理間的發(fā)病情況差異顯著，2 cm孔徑、3 cm孔徑和4 cm孔徑3個(gè)處理之間的發(fā)病情況差異不顯著。空氣相對(duì)濕度的大小與原基數(shù)目、病蟲害等有密切關(guān)系，空氣相對(duì)濕度升高可使原基數(shù)目增多，同時(shí)使病蟲害發(fā)生幾率升高[2]。結(jié)合表3和表4可知，各處理中秀珍菇黃菇病發(fā)病情況不同，其原因主要是濕度和二氧化碳含量，2 cm孔徑、3 cm孔徑和4 cm孔徑3個(gè)處理均能減少黃菇病的發(fā)生。

表5 不同處理黃菇病發(fā)病情況Tab.5 Occurrence of‘yellow mushroom’disease under different treatments

2.5 孔膜對(duì)子實(shí)體農(nóng)藝性狀及第1潮菇生物學(xué)效率的影響

不同處理下，孔膜對(duì)子實(shí)體農(nóng)藝性狀及第1潮菇生物學(xué)效率的影響情況見表6。

表6 不同處理的出菇情況Tab.6 The fruiting condition of different treatments

由表6可知，1 cm孔徑及2 cm孔徑2個(gè)處理組出菇最快，出菇時(shí)間為2.5 d～3.0 d。CK組由于低溫刺激后掀開膜的時(shí)間較短，菌包溫度升至常溫的時(shí)間稍微延長(zhǎng)，所以現(xiàn)蕾時(shí)間也延遲半天。CK、1 cm孔徑和2 cm孔徑3個(gè)處理的菇蕾都比較多且整齊，3 cm孔徑和4 cm孔徑2個(gè)處理出菇均不整齊且菇蕾少。CK、1 cm孔徑及2 cm孔徑3個(gè)處理的菌柄商品性較好，3 cm孔徑和4 cm孔徑2個(gè)處理的菌柄偏短。CK組有少量畸形菇，其余處理組均為正常菇。第1潮菇生物學(xué)效率最高的為2 cm孔徑處理組，按生物學(xué)效率高低排列順序?yàn)? cm孔徑（21.35%）>1 cm孔徑（18.61%）>4 cm孔徑（16.26%）>3 cm孔徑（16.09%）>CK（13.46%）。據(jù)研究，秀珍菇不同生長(zhǎng)發(fā)育階段對(duì)二氧化碳濃度的敏感性有很大差異，其順序是子實(shí)體發(fā)育階段＞子實(shí)體原基形成階段＞菌絲體生長(zhǎng)階段[3]。二氧化碳濃度控制子實(shí)體菌蓋擴(kuò)展和菌柄伸長(zhǎng)的相對(duì)比例，過高的二氧化碳濃度會(huì)抑制子實(shí)體的正常發(fā)育，引起菌柄過長(zhǎng)，菌蕾退化[3]。結(jié)合表3和表4分析，1 cm孔徑、2 cm孔徑的薄膜由于孔徑小，掀外膜通風(fēng)后，通風(fēng)量不會(huì)很大，棚內(nèi)濕度仍能保持在84%以上，這樣有利于原基形成，故出菇快而且整齊菇蕾多。3 cm孔徑、4 cm孔徑的薄膜由于孔徑大，掀外膜通風(fēng)后，通風(fēng)量大，容易造成棚內(nèi)濕度快速降低，不利于原基形成，故出菇慢而且不整齊，菇蕾相對(duì)少，產(chǎn)量相對(duì)低。CK組在菇蕾形成期（第2天～第3天），棚內(nèi)濕度大，二氧化碳含量高，使得少量菇的菌蓋上翹形成畸形菇，且黃菇病發(fā)生嚴(yán)重，因此整體的生物學(xué)效率比使用孔膜的4個(gè)組低。

3 結(jié)論與討論

通風(fēng)量是秀珍菇栽培中一個(gè)重要的控制參數(shù)，通過影響局部環(huán)境內(nèi)的溫度、濕度、二氧化碳濃度等因子來(lái)影響秀珍菇的生長(zhǎng)發(fā)育[4]。秀珍菇屬中溫型菌類，是一種對(duì)二氧化碳極為敏感的菌類，當(dāng)環(huán)境中二氧化碳含量高、空氣悶熱且環(huán)境濕度超過90%以上時(shí)極易感染黃菇病。在生產(chǎn)中可通過調(diào)節(jié)環(huán)境中二氧化碳的含量，進(jìn)而控制食用菌的菇蕾形成、產(chǎn)量、子實(shí)體品質(zhì)等[5]。秀珍菇生長(zhǎng)中所需的水分主要從培養(yǎng)料中獲得，空氣相對(duì)濕度是通過影響原基形成、菇體表面蒸騰速率、病蟲害發(fā)生、二氧化碳和氧氣的分壓等，間接影響食用菌的生長(zhǎng)發(fā)育[6]。試驗(yàn)結(jié)果表明，與常規(guī)薄膜組相比，2 cm孔膜處理組效果最好，菌包發(fā)病率下降7.23%，發(fā)病菌包病情指數(shù)降低9.23，第1潮菇生物學(xué)效率提高7.89%。綜上所述，在秀珍菇冷刺激后悶棚催蕾的過程中，用雙層塑料薄膜覆蓋菌包和出菇架，其中里層為有孔薄膜（孔徑為2 cm，孔距為20 cm），外層為密封薄膜時(shí)效果最佳。此時(shí)既能保證出菇環(huán)境的濕度達(dá)到85%左右，又能利用孔膜的透氣性，避免菇棚內(nèi)長(zhǎng)時(shí)間處于高二氧化碳的悶熱環(huán)境。不僅能減少子實(shí)體黃菇病的發(fā)生，還能促進(jìn)菌蓋正常分化，避免畸形菇的形成。