臍帶血在早產(chǎn)兒輸血相容性試驗(yàn)中的應(yīng)用

劉建香，秦慶顏，呂孟興，高立蘭，陳蕊，周麗華，屈柯暄,5

(1.昆明市兒童醫(yī)院輸血科，昆明 650228；2.云南省兒童健康與疾病臨床醫(yī)學(xué)研究中心，昆明 650228；3.曲靖市婦幼保健院輸血科，云南曲靖 655099；4.昆明市婦幼保健院輸血科，昆明 650118；5.昆明市兒童血液疾病免疫與分子診斷技術(shù)中心，昆明 650228)

早產(chǎn)兒出生體重低，有效循環(huán)血量少，靜脈采血后易造成醫(yī)源性貧血[1]。貧血會(huì)使早產(chǎn)兒神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育停滯、自身免疫力下降，若不及時(shí)治療將危及生命[2]。臍帶血在分娩時(shí)獲得，方便、經(jīng)濟(jì)、快捷，無(wú)侵入性損傷。對(duì)于貧血的早產(chǎn)兒，輸血治療需抽取輸血相容性試驗(yàn)血標(biāo)本至少6 mL，約占早產(chǎn)兒有效循環(huán)血量的10%，會(huì)加重早產(chǎn)兒的貧血損害[3]，增加其死亡風(fēng)險(xiǎn)。輸血相容性試驗(yàn)是輸血前進(jìn)行的一系列實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，包括ABO和RhD血型鑒定、不規(guī)則抗體篩查、交叉配血共3項(xiàng)試驗(yàn)。臍帶血能否替代靜脈血進(jìn)行輸血相容性試驗(yàn)，以減少醫(yī)源性失血和侵入性損害？查閱國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)，未見(jiàn)報(bào)道。本研究收集早產(chǎn)兒配對(duì)的臍帶血和靜脈血標(biāo)本進(jìn)行輸血相容性試驗(yàn)，探討臍帶血在早產(chǎn)兒輸血相容性試驗(yàn)中的應(yīng)用價(jià)值。

1 對(duì)象與方法

1.1研究對(duì)象 選取2020年6月至2021年12月昆明市兒童醫(yī)院、昆明市婦幼保健院、曲靖市婦幼保健院收治的早產(chǎn)兒702例，排除入院后未采集靜脈血標(biāo)本的41例，血標(biāo)本量不足的66例，最終納入研究的早產(chǎn)兒595例，具體情況見(jiàn)表1。

表1 595例早產(chǎn)兒基本資料

1.2試劑與儀器 抗A、抗B血型定型試劑(單克隆抗體)、譜細(xì)胞由上海血液生物醫(yī)藥公司提供，人ABO血型反定型用紅細(xì)胞試劑、不規(guī)則抗體檢測(cè)試劑(人血紅細(xì)胞)、 ABO和RhD血型定型檢測(cè)卡(單克隆抗體)、抗人球蛋白不規(guī)則抗體篩檢卡、抗人球蛋白交叉配血檢測(cè)卡、微柱凝膠卡專(zhuān)用離心機(jī)和免疫微柱孵育器均為長(zhǎng)春博迅生物技術(shù)公司提供，9 g/L氯化鈉注射液由昆明南疆制藥公司提供。

1.3方法 分娩時(shí)采集臍帶血6 mL，EDTA-K2抗凝，作為臍帶血標(biāo)本組；根據(jù)臍帶血標(biāo)本信息，追蹤早產(chǎn)兒血常規(guī)檢測(cè)靜脈血標(biāo)本，收集早產(chǎn)兒出生3 d內(nèi)靜脈血標(biāo)本，EDTA-K2抗凝，作為靜脈血標(biāo)本組。

應(yīng)用微柱凝膠卡式法將2組血標(biāo)本平行進(jìn)行輸血相容性試驗(yàn)，嚴(yán)格按照《輸血技術(shù)操作規(guī)程》進(jìn)行操作。輸血相容性試驗(yàn)包括：ABO和RhD血型鑒定、不規(guī)則抗體篩查、交叉配血試驗(yàn)，根據(jù)不規(guī)則抗體篩檢譜和紅細(xì)胞血型抗體鑒定細(xì)胞反應(yīng)格局表來(lái)確定其抗體特性。

2 結(jié)果

2.1ABO、RhD血型鑒定試驗(yàn) ABO血型正定型中， A型占40%，B型占25%，O型占30%，AB型占5%，RhD陽(yáng)性占100%，2組血標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果符合率100%，見(jiàn)表2。

表2 臍帶血和靜脈血在ABO、Rh(D)血型鑒定正定型中的比較

ABO血型反定型中，A型中抗B抗體檢出率48%，B型中抗A抗體檢出率64%，O型中抗B抗體檢出率64%，抗A抗體檢出率71.4%，2組血標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果符合率100%，見(jiàn)表3。

表3 臍帶血和靜脈血在ABO血型鑒定反定型中的比較

2.2不規(guī)則抗體篩查試驗(yàn) 在不規(guī)則抗體篩查試驗(yàn)中，不規(guī)則抗體陽(yáng)性檢出15例，其中排除冷凝集素干擾導(dǎo)致假陽(yáng)性的6例，最終不規(guī)則抗體陽(yáng)性的9例，陽(yáng)性檢出率1.5%(9/595)，2組血標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果符合率100%，見(jiàn)表4。

表4 臍帶血和靜脈血在不規(guī)則抗體篩查試驗(yàn)中的比較

參照不規(guī)則抗體篩檢譜和紅細(xì)胞血型抗體鑒定細(xì)胞反應(yīng)格局，不規(guī)則抗體陽(yáng)性血標(biāo)本血型抗體特異性分布為：抗D抗體占22.2%(2/9)，抗E抗體占22.2%(2/9)，抗E合并抗c抗體占22.2%(2/9)，抗c抗體占11.2%(1/9)，抗M抗體占22.2%(2/9)，2組血標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果符合率100%。

2.3交叉配血試驗(yàn) 在交叉配血試驗(yàn)中，交叉配血不相合120例，不相合檢出率20.2%(120/595)，其中，主側(cè)不相合檢出率10.6%(63/595)，次側(cè)不相合檢出率9.6%(57/595)，2組血標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果完全符合，符合率100%，見(jiàn)表5。

表5 臍帶血和靜脈血在交叉配血試驗(yàn)中的比較

3 討論

文獻(xiàn)報(bào)道，有51.6%的早產(chǎn)兒在住院期間接受輸血治療[1]。本次納入研究的早產(chǎn)兒胎齡26～36周，體重817～3 210 g，血容量約65～260 mL，能較好地代表早產(chǎn)兒群體特征。本研究共收集到595對(duì)臍帶血和靜脈血標(biāo)本進(jìn)行輸血相容性試驗(yàn)。ABO血型抗原產(chǎn)生較早，在妊娠第5～6周即可在胚胎紅細(xì)胞上檢出，RhD抗原在妊娠30 d作為紅細(xì)胞膜的一部分表達(dá)于紅細(xì)胞上，即可被檢出。在ABO血型鑒定正定型中，靜脈血組 ABO、RhD血型抗原檢出率100%，與文獻(xiàn)報(bào)道新生兒正定型檢出率100%結(jié)果一致[4]。臍帶血組 ABO、RhD血型抗原檢出率100%與靜脈血組完全相符。

ABO血型抗體在新生兒出生時(shí)血清中無(wú)抗A或抗B抗體，檢出的抗體主要來(lái)自于母親，是導(dǎo)致ABO血型抗體檢出率低于ABO血型抗原的主要原因。在ABO血型反定型中，靜脈血組抗A抗體檢出率64%、抗B抗體檢出率48%，與文獻(xiàn)報(bào)道新生兒IgM抗A抗體檢出率64%、IgM抗B抗體檢出率49.2%結(jié)果一致[5]。臍帶血組抗A抗體檢出率64%、抗B抗體檢出率48%，與靜脈血組結(jié)果完全相符。

在不規(guī)則抗體篩查試驗(yàn)中，靜脈血組不規(guī)則抗體陽(yáng)性檢出率1.5%，與文獻(xiàn)報(bào)道不規(guī)則抗體陽(yáng)性檢出率2.1%相當(dāng)[6]。臍帶血組不規(guī)則抗體陽(yáng)性檢出率1.5%與靜脈血組結(jié)果完全相符。

在交叉配血試驗(yàn)結(jié)果中，靜脈血組交叉配血不相合率20.2%，主側(cè)不相合檢出率10.6%，與文獻(xiàn)報(bào)道新生兒交叉配血不相合率16.1%接近[7]。臍帶血組交叉配血不相合率20.2%，與靜脈血組檢測(cè)結(jié)果完全相符。

綜上，595例早產(chǎn)兒臍帶血和靜脈血標(biāo)本在輸血相容性三項(xiàng)試驗(yàn)中凝集強(qiáng)度沒(méi)有差別，檢測(cè)結(jié)果完全相符，符合率100%。臍帶血可替代靜脈血進(jìn)行輸血相容性試驗(yàn)，可減少靜脈采血量6 mL，避免靜脈穿刺損傷，減少醫(yī)源性失血，減輕早產(chǎn)兒痛苦，對(duì)早產(chǎn)兒疾病的恢復(fù)和生長(zhǎng)發(fā)育非常有益，有良好的臨床應(yīng)用價(jià)值和社會(huì)效益，值得在臨床中推廣和應(yīng)用。