犬乳腺腫瘤化學(xué)治療藥物的研究進(jìn)展

姜惠心，祁子泰，高修歌,2，郭大偉,2，季輝,2，彭麟,2，江善祥,2*

(1. 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，江蘇 南京 210095 2. 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)獸藥研究評價中心，江蘇 南京 210095)

犬乳腺腫瘤(canine mammary tumor，CMT)為寵物臨床中最常見的腫瘤疾病之一，約占雌性犬腫瘤疾病的25%～42%[1]。受年齡、遺傳、環(huán)境污染及飼養(yǎng)習(xí)慣等因素的影響，犬乳腺腫瘤呈現(xiàn)出年輕態(tài)、復(fù)雜化、惡性率高等特征。目前犬乳腺腫瘤的臨床治療以手術(shù)為主，結(jié)合化學(xué)治療可有效降低其復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移率。罹患乳腺腫瘤的多為老齡犬只，手術(shù)風(fēng)險高且不易完全切除，而化學(xué)治療在犬乳腺腫瘤早期及術(shù)后化療均展示出良好的前景。國外已批準(zhǔn)馬賽替尼、磷酸托格拉尼等化學(xué)小分子藥物作為寵物臨床的腫瘤藥物，而我國尚未有寵物專用抗癌藥物的批準(zhǔn)上市，在寵物臨床面臨無合法合規(guī)抗乳腺腫瘤藥物使用的境地。為加快推進(jìn)寵物臨床急需用藥的研發(fā)進(jìn)程，利用我國現(xiàn)有醫(yī)藥資源進(jìn)行技術(shù)開發(fā)，更好滿足寵物臨床治療藥物的需求，我國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部第330號公告發(fā)布了《人用化學(xué)藥品轉(zhuǎn)寵物用化學(xué)藥品注冊資料要求》，進(jìn)一步推進(jìn)現(xiàn)有藥物轉(zhuǎn)為寵物用藥的研發(fā)進(jìn)程。加快創(chuàng)制犬用抗乳腺腫瘤藥物，將為滿足寵物臨床抗癌用藥需求，提高患犬生活質(zhì)量和福利，并為促進(jìn)寵物經(jīng)濟(jì)快速發(fā)展提供支撐。

如今，我國寵物診療已進(jìn)入高質(zhì)量發(fā)展時期，創(chuàng)新性藥物是寵物產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展的急需品和必需品，如何開發(fā)出具有自主知識產(chǎn)權(quán)的寵物腫瘤藥物，還應(yīng)重視寵物腫瘤發(fā)病機(jī)制的研究，開發(fā)寵物專用藥物的篩選工具，建立寵物腫瘤疾病研究模型，制訂寵物腫瘤藥物臨床評價指南，以及完善寵物腫瘤藥物新藥注冊與評審機(jī)制。寵物腫瘤藥物的開發(fā)與應(yīng)用具有廣闊前景，為提高寵物生存質(zhì)量和促進(jìn)寵物經(jīng)濟(jì)發(fā)展提供物質(zhì)基礎(chǔ)，也將為患犬及寵主帶來新的希望。本文對國內(nèi)外報道的潛在有效抗犬乳腺癌小分子藥物的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，以期為國內(nèi)抗犬乳腺腫瘤藥物的研發(fā)提供理論參考。

1 犬乳腺腫瘤

1.1 流行病學(xué)

犬為乳腺腫瘤發(fā)病率最高的哺乳動物，未絕育雌性犬CMT發(fā)病率為71%，惡性腫瘤占比更是高達(dá)50%[1]，年齡、品種、絕育、飲食以及飼養(yǎng)環(huán)境等多種因素均會對其發(fā)病造成影響。CMT多發(fā)于中老年雌犬，其發(fā)病及惡變風(fēng)險隨年齡增長呈持續(xù)升高趨勢。該病高發(fā)于小型犬，貴賓犬、博美犬、蝴蝶犬以及我國本土的西施犬、京巴等品種發(fā)病風(fēng)險均較為突出[2]。絕育情況對CMT發(fā)病率具有巨大影響，首次發(fā)情前進(jìn)行絕育可將發(fā)病風(fēng)險降低至0.5%[3]。

我國寵物犬CMT發(fā)病風(fēng)險較大，主要與我國犬只年齡分布、品種偏好及絕育普及度相關(guān)。據(jù)2019寵物白皮書統(tǒng)計，我國5歲以上寵物犬占比達(dá)40%，老齡犬?dāng)?shù)量呈增長趨勢，限于早年寵物保健意識普及度較低，老齡犬多未進(jìn)行早期絕育。同時，受法律、風(fēng)俗、居住環(huán)境等因素影響，50%的寵物主選擇飼養(yǎng)小型犬，貴賓犬更是作為最受歡迎的犬種總飼養(yǎng)量占比22.6%。據(jù)常宏建等[4]臨床調(diào)研，我國部分地區(qū)CMT發(fā)病率可達(dá)40.8%，惡性腫瘤占比接近50%，遠(yuǎn)高于絕育普及率高的發(fā)達(dá)國家。

目前獸醫(yī)臨床將外科手術(shù)作為CMT的主要治療方式。由于單純的手術(shù)療法難以根除病灶，腫瘤常發(fā)生轉(zhuǎn)移、擴(kuò)散，造成CMT術(shù)后生存期較短，復(fù)發(fā)率高達(dá)58%[5]。同時，CMT發(fā)病以老年犬為主，大量病例限于臟器機(jī)能難以進(jìn)行手術(shù)。推廣化學(xué)療法可實(shí)現(xiàn)對外科療法應(yīng)用局限性的有效補(bǔ)充，提高臨床治療的有效性與應(yīng)用性。

1.2 化學(xué)治療

化學(xué)療法(chemotherapy)簡稱化療，即對機(jī)體組織內(nèi)病原體所致疾病及腫瘤的化學(xué)藥物治療。腫瘤細(xì)胞增殖能力較強(qiáng)，利用化學(xué)藥物可以通過多種途徑干擾腫瘤細(xì)胞DNA的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯過程，從而誘導(dǎo)有絲分裂活躍的細(xì)胞凋亡，達(dá)到殺傷腫瘤的目的。臨床上可根據(jù)治療目的進(jìn)行根治性化療(radical chemotherapy, RC)、姑息性化療(palliative chemotherapy, PC)、輔助化療(adjuvant chemotherapy，AC)、節(jié)拍化療(metronomic chemotherapy，MC)等多種治療方案，以緩解癥狀、改善預(yù)后、預(yù)防復(fù)發(fā)以及增強(qiáng)其他療法的治療效果。

臨床治療中通常對具有復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移風(fēng)險或體況難以支持手術(shù)的CMT患犬采取化學(xué)療法，常用的化療藥物主要包括烷化劑、鉑類化合物、抗微管蛋白類、抗腫瘤抗生素、抗代謝類藥物、靶向治療藥物及其他藥物。目前研究顯示，寵物腫瘤最常用的烷化劑和鉑類藥物對CMT療效欠佳[6]，臨床前試驗(yàn)和臨床試驗(yàn)研究已經(jīng)發(fā)掘了諸多具有殺傷犬乳腺腫瘤細(xì)胞藥理學(xué)作用的化合物，為CMT專用藥物的開發(fā)提供了方向。

2 CMT藥物研究進(jìn)展

2.1 常規(guī)藥物

2.1.1 長春瑞濱

2.1.1.1 藥理性質(zhì)

長春瑞濱(vinorelbine)為抗微管蛋白類藥物，具有細(xì)胞周期特異性。該類藥物可進(jìn)入腫瘤細(xì)胞內(nèi)與微管蛋白結(jié)合，抑制其聚合為微管，并促使微管解聚，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞周期停滯于M期，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。相關(guān)研究表明，長春瑞濱可通過抑制腫瘤細(xì)胞遷移、侵襲以及上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)換過程(epithelial-mesenchymal transition，EMT)以降低其移動性，抑制癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。在人類醫(yī)學(xué)的初步臨床研究中，長春瑞濱比長春新堿具有更廣泛的抗腫瘤作用，這可能由于細(xì)胞內(nèi)藥物蓄積量更大和細(xì)胞內(nèi)藥物濃度峰值較高所致[7]。該藥缺乏對腫瘤組織的選擇性而具有較嚴(yán)重的劑量相關(guān)毒性，臨床常見骨髓抑制和胃腸道反應(yīng)，以中性粒細(xì)胞減少癥、嘔吐等為主要表現(xiàn)。

2.1.1.2 臨床應(yīng)用

長春瑞濱是目前治療轉(zhuǎn)移性及復(fù)發(fā)性乳腺癌最有效的藥物之一，臨床研究數(shù)據(jù)證實(shí)長春瑞濱單藥治療乳腺癌的療效為30%～45%，其聯(lián)合用藥方案用于對蒽環(huán)類藥物耐藥的人晚期乳腺癌的治療有效率可達(dá)40%～70%[8]。在臨床治療中CMT轉(zhuǎn)移率與復(fù)發(fā)率較高，因而該藥在CMT治療中具有巨大潛力。目前，長春瑞濱已進(jìn)行犬的Ⅰ期與Ⅱ期臨床試驗(yàn)，建議以15 mg/m2的長春瑞濱作為治療犬乳腺腫瘤的起始劑量，中性粒細(xì)胞減少癥被確定為劑量限制的毒性作用[9]。一項長達(dá)12年的臨床研究顯示，長春瑞濱可作為安全且可耐受的化療藥物應(yīng)用，且對犬肺癌、組織細(xì)胞肉瘤、淋巴瘤、乳腺腫瘤和尿囊過渡細(xì)胞癌等具有抗腫瘤活性，其獸醫(yī)臨床價值尚未完全發(fā)揮，在CMT治療中具有廣闊應(yīng)用前景[10]。

2.1.2 紫杉醇

2.1.2.1 藥理性質(zhì)

紫杉醇(paclitaxel)為二萜類生物堿，屬于抗微管蛋白類藥物。該藥可誘導(dǎo)和促進(jìn)微管蛋白聚合，抑制其解聚，穩(wěn)定微管，使腫瘤細(xì)胞有絲分裂周期長期阻滯于G2/M期而誘導(dǎo)其裂解。該藥最早于1967年由美國科學(xué)家Wani和Wall從短葉紫杉(taxus brevifolia)中提取，并于1994年被FDA批準(zhǔn)用于治療人轉(zhuǎn)移性乳腺癌。一項體外研究表明，紫杉醇可通過抑制PI3K/AKT信號通路和激活MAPK信號通路，增加犬乳腺癌細(xì)胞內(nèi)固有凋亡，從而抑制腫瘤細(xì)胞增殖[11]。

2.1.2.2 臨床應(yīng)用

由于紫杉醇助溶劑乙醇和聚乙氧基化蓖麻油(cremophor-EL)會導(dǎo)致犬嚴(yán)重的急性過敏反應(yīng)，該藥臨床應(yīng)用受到限制。然而，經(jīng)過劑型改良，美國食品與藥品管理局(FDA)獸藥中心于2014年批準(zhǔn)了注射用紫杉醇納米制劑(paccal vet?CA-1)用于可切除和不可切除的鱗狀細(xì)胞癌和不可切除的Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ期犬乳腺癌，已在獸醫(yī)臨床治療CMT中廣泛應(yīng)用[12]。根據(jù)紫杉醇在其他物種中的安全性及其不含聚乙二醇化合物的改良配方，紫杉醇納米藥物CA-1已投入研發(fā)并進(jìn)行了Ⅰ/Ⅱ期臨床試驗(yàn)研究，其在犬體內(nèi)的最高耐受量可達(dá)150 mg/m2，快速分布于全身組織，消除半衰期為3 h。歐洲在此試驗(yàn)基礎(chǔ)上開展了單組臨床試驗(yàn)和開放性試驗(yàn)，為期14周，針對不可切除的二級或三級犬乳腺腫瘤的臨床研究表明，試驗(yàn)結(jié)束后，紫杉醇納米藥物最終有效率(7%，P值0.048)和可觀察到的生物學(xué)有效率(23%，P值0.012)均高于洛莫司汀[13]，且毒副作用為一過性的或臨床可控的反應(yīng)，證實(shí)紫杉醇納米膠束制劑可安全有效治療犬乳腺腫瘤。

2.1.3 多柔比星

2.1.3.1 藥理性質(zhì)

多柔比星(doxorubicin, DOX)，又稱阿霉素(adriamycin, ADM)，屬于蒽環(huán)類抗生素。DOX可插入細(xì)胞DNA雙鏈、抑制DNA解超螺旋拓?fù)洚悩?gòu)酶II，通過產(chǎn)生超氧基自由基和破壞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)等機(jī)制起到殺滅腫瘤細(xì)胞的作用。DOX是人類醫(yī)學(xué)臨床中最為有效和常用的化療藥物之一，被視為治療乳腺癌的一線藥物。袁榕[14]證明DOX可通過激活caspase家族，改變凋亡因子表達(dá)等途徑誘導(dǎo)犬乳腺細(xì)胞凋亡，揭示了DOX在犬乳腺腫瘤治療中的應(yīng)用前景。該藥副作用相對較多，存在中度的胃腸道和骨髓抑制，并對犬具有心臟毒性，尤其對羅威納、大丹、杜賓和拳師有品種傾向性，臨床應(yīng)用中還需注意給予抗過敏藥物以降低急性過敏反應(yīng)風(fēng)險[15]。

2.1.3.2 臨床應(yīng)用

DOX是目前獸醫(yī)臨床應(yīng)用較多的化療藥物之一，可單獨(dú)使用或聯(lián)合其他藥物用于淋巴瘤、白血病、甲狀腺癌、肉瘤等多種犬貓腫瘤的臨床治療。由Kuntz等[16]1998年對14只犬的臨床研究，DOX與順鉑聯(lián)用治療CMT可顯著改善患犬預(yù)后情況，未接受治療的患病犬死亡率為接受化療的3.62倍。Nagamatsu等[17]利用siRNA下調(diào)犬Bcl-2基因的表達(dá)，促進(jìn)犬乳腺癌細(xì)胞凋亡而增加其對的DOX敏感性，為提高該藥臨床應(yīng)用提供了新的思路。DOX療效卓越，治療方案選擇多樣，在人乳腺腫瘤治療中應(yīng)用廣泛，在CMT治療中也同樣具有較大的推廣價值。

2.1.4 5-氟尿嘧啶

2.1.4.1 藥理性質(zhì)

5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil，5-FU)于1957年被首次合成，為5號位氫被氟取代的尿嘧啶類衍生物，在臨床中作為實(shí)體腫瘤首選藥物而廣為應(yīng)用。該藥為胸苷酸合成酶抑制劑，在體內(nèi)代謝后可同胸苷酸合成酶結(jié)合，使腫瘤細(xì)胞因胸苷酸缺陷致死，也可通過與DNA、RNA結(jié)合干擾合成代謝抑制腫瘤細(xì)胞活性。5-氟尿嘧啶有骨髓、胃腸道和神經(jīng)毒性，臨床可見其誘發(fā)犬貓癲癇，因其口服生物利用率低，通常采用靜脈給藥。

2.1.4.2 臨床應(yīng)用

Karayannopoulou等[18]以5-氟尿嘧啶和環(huán)磷酰胺聯(lián)用對8只Ⅲ期乳腺腫瘤患犬進(jìn)行術(shù)后輔助化療，其無病間期和存活時間相較于單純手術(shù)治療組有顯著提升，表明5-氟尿嘧啶在CMT治療中也具有進(jìn)一步探索的空間。

2.1.5 吡羅昔康

2.1.5.1 藥理性質(zhì)

吡羅昔康屬于非甾體類抗炎藥物(NSAID)，為非選擇性環(huán)氧合酶抑制劑(cyclooxygenase，COX)，最初用于風(fēng)濕及類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的治療。在早期流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn)長期服用NSAID可預(yù)防實(shí)體腫瘤的發(fā)生，在腫瘤患者的檢測中也發(fā)現(xiàn)NSAID的作用靶點(diǎn)環(huán)氧合酶-2 (cyclooxygenase-2，COX-2) 在結(jié)腸癌、前列腺癌、肺癌以及乳腺癌等多種腫瘤中均有穩(wěn)定表達(dá), 但在大多數(shù)正常組織中并不存在[19]。吡羅昔康抗癌活性的確切分子機(jī)制尚不明確，目前研究顯示其抗癌途徑主要在于抑制腫瘤血管的生成和腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移，以及誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡[20]。該藥口服吸收良好，不良反應(yīng)主要包括胃腸道反應(yīng)、骨髓抑制及肝毒性，一般而言毒性較小。

2.1.5.2 臨床應(yīng)用

Souza等[21]曾對傳統(tǒng)化療和吡羅昔康的犬炎性乳腺癌(canine inflammatory mammary carcinoma，CIMC)治療效果進(jìn)行比較，在此研究中所有接受吡羅昔康的患犬的臨床狀況和疾病穩(wěn)定性均得到改善，其無進(jìn)展生存期也顯著高于接受DOX治療的犬只。CIMC在臨床中較為罕見，該腫瘤局部侵襲性高，對治療反應(yīng)差，推廣吡羅昔康在CIMC中的臨床應(yīng)用可以有效改善患犬預(yù)后及生存質(zhì)量。

2.1.6 去氨加壓素

2.1.6.1 藥理性質(zhì)

去氨加壓素(desmopressin acetate，DDAVP)是一種具止血特性的加壓素肽類似物，于1966年首次合成。因其與血管加壓素化學(xué)結(jié)構(gòu)相近，能夠競爭性阻滯加壓素受體，具有降低血壓、減輕心臟負(fù)擔(dān)的作用，還可增加凝血因子Ⅷ的活性，加強(qiáng)凝血效應(yīng)。目前認(rèn)為該藥主要通過增強(qiáng)止血以及促進(jìn)腫瘤殘留組織的快速包膜而防止乳腺癌細(xì)胞聚集，并避免其在手術(shù)過程中進(jìn)入脈管系統(tǒng)而實(shí)現(xiàn)抗腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移[22]。

2.1.6.2 臨床應(yīng)用

Hermo等[23]研究表明，圍手術(shù)期給予DDAVP可最小化殘留乳腺癌細(xì)胞的擴(kuò)散和存活，尤其在二級或三級癌癥治療中可顯著延長母犬的無病生存期和總生存期。DDAVP有極大的潛力成為CMT手術(shù)輔助治療候選藥物，在手術(shù)治療作為CMT首選療法而術(shù)后轉(zhuǎn)移率居高不下的臨床背景下具有極大的應(yīng)用價值。

2.1.7 鹽霉素

鹽霉素(salinomycin)為聚醚類離子載體抗生素，可改變細(xì)胞滲透壓，使細(xì)胞獲得去極化而發(fā)生崩解。該藥于1968年首次合成，在獸醫(yī)臨床中廣泛用于雞球蟲病防治。近年研究發(fā)現(xiàn)，鹽霉素可殺滅多種耐藥腫瘤細(xì)胞以及多種腫瘤干細(xì)胞，亦可通過誘導(dǎo)腫瘤自噬抑制乳腺腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移[24]。杜宏超[25]對犬乳腺癌細(xì)胞進(jìn)行鹽霉素體內(nèi)體外試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)其可阻礙犬乳腺癌細(xì)胞的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移，對犬乳腺癌干細(xì)胞的癌干細(xì)胞特性亦具有抑制作用，其抗癌活性可能與細(xì)胞周期阻滯、細(xì)胞凋亡及Wnt-catenin信號通路下調(diào)相關(guān)。鹽霉素作為成熟應(yīng)用于家禽養(yǎng)殖業(yè)的抗生素，價格低廉，副作用較少，投入CMT治療具有重大優(yōu)勢。

2.2 靶向治療藥物

近年來酪氨酸激酶抑制劑(tyrosine kinase inhibitors，TKI) 因在惡性腫瘤靶向治療中成效卓越、耐受性良好而受到人醫(yī)臨床研究的廣泛關(guān)注，獸醫(yī)領(lǐng)域也開始酪氨酸激酶靶向療法也被用于犬貓惡性腫瘤治療。該類藥物在細(xì)胞水平上與致癌位點(diǎn)特異性結(jié)合，抑制酪氨酸激酶受體家族，可避免損傷正常組織細(xì)胞，具有療效顯著，復(fù)發(fā)率低，副作用小等諸多優(yōu)勢。

2.2.1 磷酸妥拉尼布

磷酸妥拉尼布(toceranib phosphate)為受體酪氨酸激酶抑制劑(receptor tyrosine kinases inhibitor, RTKI)，商品名為帕拉丁，是目前獸醫(yī)臨床中應(yīng)用最廣泛的TKI藥物。該藥可作用于細(xì)胞表面的血管內(nèi)皮生長因子受體(vascular endothelial growth factor, VEGFR)、血小板衍生生長因子受體 (platelet-derived growth factor receptors, PDGFR)、干細(xì)胞因子受體(stem cell factor receptor, SCFR)、集落刺激因子-1(colony stimulating factor-1 receptor, CSF-1)、FMS樣酪氨酸激酶3(FMS like tyrosinekinase 3, Flt-3)等一系列酪氨酸激酶，通過殺滅腫瘤細(xì)胞及切斷腫瘤血液供應(yīng)實(shí)現(xiàn)抗腫瘤活性[26]。磷酸妥拉尼布的安全性與有效性經(jīng)過了臨床驗(yàn)證，在接受觀察的16只癌癥患犬的總有效率達(dá)到28%。后續(xù)試驗(yàn)中該藥相較于安慰劑極大縮短了腫瘤進(jìn)展時間(time to tumor progression，TTP)，其副作用主要包括腹瀉、食欲減退、跛行、體重減輕及便血[27]。磷酸妥拉尼布口服制劑(palladia?; Zoetis, Madison, NJ)于2009年被FDA批準(zhǔn)用于治療復(fù)發(fā)性、不可重復(fù)的二級和三級犬肥大細(xì)胞瘤(canine mast cell tumor，CMCT)，成為世界上第一種專門用于治療犬類癌癥的藥物。該藥的療效與耐受性經(jīng)長期臨床使用得到驗(yàn)證，在犬乳脈癌治療中具有潛在的應(yīng)用價值。

2.2.2 伊馬替尼

伊馬替尼(imatinib)為目前獸醫(yī)臨床應(yīng)用最為成功的TKI藥物，其作用靶點(diǎn)包括Kit、Abl和PDGFR。最初該藥被設(shè)計用于阻斷慢性髓系白血病患者體內(nèi)的酪氨酸激酶BCR-ABL融合基因，臨床實(shí)驗(yàn)中對慢性髓系白血病患者緩解率接近95%[28]。在一項21只MCT患犬的臨床試驗(yàn)中，48%的患犬(10只)在接受兩周治療后出現(xiàn)了完全緩解(completeresponse, CR)或部分緩解(partialresponse, PR)，使用該藥可能誘發(fā)部分犬的肝毒性。甲磺酸伊馬替尼口服制劑Gleevec(imatinib mesylate, Novartis, Basel, Switzerland)已被批準(zhǔn)用于犬貓肥大細(xì)胞瘤(MCT)及肉瘤的治療，在犬貓腫瘤化療中得到廣泛應(yīng)用。張苑瓏等[29]將多烯紫杉醇與甲磺酸伊馬替尼聯(lián)合應(yīng)用人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7裸鼠皮下移植瘤模型，提高了多烯紫杉醇抑瘤活性。表明其有潛力作為乳腺癌輔助治療藥物，在CMT治療中具有潛在價值。

2.2.3 馬賽替尼

馬賽替尼(masitinib)可影響肥大細(xì)胞的增殖、分化和脫顆粒以及其相關(guān)介質(zhì)的釋放，并通過抑制MCs c-KitR抗血管生成途徑而抑制腫瘤生長。獸用馬賽替尼(masivet?)是首個獲歐盟批準(zhǔn)用于治療無法切除的CMCT的抗癌藥物，Hahn等[30]曾對肥大細(xì)胞瘤患犬進(jìn)行馬賽替尼臨床Ⅲ期試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)該藥可顯著提高患犬生存率，且具有可靠安全性。馬賽替尼曾被證明可作為化學(xué)增敏劑增強(qiáng)吉西他濱在人胰腺癌中的抗增殖作用[31]。Thamm[32]對犬乳腺癌細(xì)胞系進(jìn)行馬賽替尼與其他化療藥物的聯(lián)合試驗(yàn)，亦發(fā)現(xiàn)該藥可誘導(dǎo)長春堿和吉西他濱產(chǎn)生強(qiáng)致敏作用，增強(qiáng)其抑制犬乳腺癌細(xì)胞的能力。馬賽替尼還可同其他化療藥物產(chǎn)生協(xié)同作用，以減弱不良反應(yīng)，增強(qiáng)藥效，極其適用于犬乳腺癌治療。馬賽替尼在犬乳腺癌中的推廣可有效促進(jìn)寵物腫瘤靶向治療的發(fā)展。

2.2.4 CDK4/6抑制劑

細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶4和6(cyclin-dependent kinase 4/6，CDK4/6)抑制劑是目前最受關(guān)注的針對人激素受體陽性(HR+)轉(zhuǎn)移性乳腺癌的藥物。CDK4/6抑制劑為細(xì)胞周期機(jī)制以及細(xì)胞增殖的關(guān)鍵調(diào)節(jié)劑，由于細(xì)胞周期失調(diào)導(dǎo)致的細(xì)胞增殖失控是癌癥的標(biāo)志， CDK抑制劑被測試為潛在的治療劑。CDK4/6抑制劑可通過選擇性抑制CDK4/6，恢復(fù)細(xì)胞周期控制，阻斷腫瘤細(xì)胞增殖[33]。在人醫(yī)臨床中CDK4/6抑制劑palbociclib、ribociclib和abemaciclib被作為突破性的乳腺癌治療藥物投入了臨床試驗(yàn)，結(jié)果顯示其可顯著改善HR+轉(zhuǎn)移性乳腺癌的無進(jìn)展生存期。目前已有palbociclib(PD0332991，ibrance)、ribociclib(LEE011，KISQALI)以及abemaciclib(LY2835219，Verzenio)3個CDK4/6抑制劑獲得FDA批準(zhǔn)先后上市，中國FDA也已批準(zhǔn)了abemaciclib聯(lián)合芳香化酶抑制劑用于絕經(jīng)后HR+/HER2-局部晚期或轉(zhuǎn)移性乳腺癌患者的一線治療。但CDK4/6抑制劑在研究中存在腫瘤耐藥問題，其耐藥機(jī)制復(fù)雜多樣，主要包括細(xì)胞周期特異性機(jī)制及細(xì)胞周期非特異性機(jī)制[34]。

不論組織類型或等級，在CMT細(xì)胞中均可檢測到CDK6，提示CDK4/6抑制劑具有潛在CMT治療價值。Schoos等[35]采用palbociclib處理具有內(nèi)源性CDK4/6共表達(dá)的兩種CMT細(xì)胞系P114和CF41細(xì)胞，可誘導(dǎo)細(xì)胞周期停滯，并抑制細(xì)胞遷移活性，進(jìn)一步揭示了該類藥物在CMT治療中的應(yīng)用前景。針對CDK4/6抑制劑的臨床試驗(yàn)有待開展，如體內(nèi)試驗(yàn)取得良好結(jié)果，該藥將為CMT靶向療法開辟新的方向。

對以上抗犬乳腺腫瘤藥物進(jìn)行歸納，詳見表1。

表1 潛在抗犬乳腺腫瘤藥物

2.3 其他藥物

目前在常規(guī)化療藥物之外，仍有大量其他類型藥物有望用于CMT的輔助治療。卵巢激素的暴露為CMT發(fā)病的重要風(fēng)險因素之一，孕激素誘導(dǎo)犬乳腺合成生長激素(GH)與生長激素受體(GHR)表達(dá)的過程可能會促使CMT發(fā)生，利用激素調(diào)控類藥物可降低雌性激素對犬乳腺癌細(xì)胞的刺激，有助于增強(qiáng)其他藥物的治療效果。他莫昔芬(tamoxifen，TAM)為雌二醇受體拮抗劑，可同乳腺細(xì)胞雌激素受體(ER)競爭性結(jié)合，作為最常用的選擇性ER調(diào)節(jié)劑用于人類乳腺癌患者內(nèi)分泌治療，目前已投入CMT臨床前試驗(yàn)，同類藥物的研發(fā)為今后犬乳腺腫瘤的激素輔助治療開拓了更多可能[36]。血糖調(diào)節(jié)藥物二甲雙胍[37]和解熱鎮(zhèn)痛藥物阿司匹林[38]在體外增殖試驗(yàn)中對犬乳腺癌細(xì)胞有一定抑制作用，亦為CMT的治療提供了新的方向。

3 展望

相較于美國等發(fā)達(dá)國家，我國犬只絕育率較低導(dǎo)致我國犬乳腺腫瘤發(fā)病率較高，當(dāng)前國內(nèi)寵物的老齡化趨向也促使發(fā)病率、惡變率呈上升態(tài)勢。臨床數(shù)據(jù)顯示，歐美國家成年犬的首要死亡原因?yàn)槟[瘤疾病[39]。因此，寵物犬的腫瘤疾病的防治是當(dāng)今寵物臨床醫(yī)學(xué)發(fā)展中的重要方向之一，發(fā)掘潛在抗腫瘤化合物并將其開發(fā)為臨床有效的抗腫瘤藥物是當(dāng)下寵物藥物研發(fā)的熱點(diǎn)和難點(diǎn)。隨著我國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部相繼出臺諸多促進(jìn)寵物經(jīng)濟(jì)發(fā)展的利好政策，加之寵物臨床醫(yī)學(xué)的快速高質(zhì)量發(fā)展，開發(fā)出寵物專用抗腫瘤藥物是解決寵物臨床診療藥物短缺的重要途徑。

為解決寵物乳腺腫瘤藥物研發(fā)中的難點(diǎn)，需注意以下幾個方面。首先，利用現(xiàn)有人類抗乳腺腫瘤藥物資源，篩選具有潛在抗犬乳腺腫瘤活性的小分子化合物，利用化學(xué)結(jié)構(gòu)改造、劑型改良等技術(shù)手段加快其獸醫(yī)臨床轉(zhuǎn)化；第二，基于犬乳腺腫瘤發(fā)病機(jī)制，設(shè)計篩選新型抗腫瘤活性分子，進(jìn)而推動犬乳腺腫瘤專用靶向藥物的研發(fā)；第三，免疫治療在人類腫瘤疾病中顯示出較大優(yōu)勢，基于腫瘤免疫學(xué)研究進(jìn)展，開發(fā)犬乳腺腫瘤的免疫治療藥物，可提升治療效果降低毒副作用；第四，犬乳腺腫瘤的治療仍需要開發(fā)輔助藥物，如免疫增強(qiáng)劑、激素調(diào)控劑等有助于患犬快速康復(fù)的藥物同樣值得研發(fā)機(jī)構(gòu)重視。