• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    替加環(huán)素對(duì)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌生物膜的清除作用

    2022-01-13 06:16:16袁春妹張能華傅躍青陳興英金燁沈曉華
    浙江臨床醫(yī)學(xué) 2021年12期
    關(guān)鍵詞:環(huán)素生物膜金黃色

    袁春妹 張能華* 傅躍青 陳興英 金燁 沈曉華

    金黃色葡萄球菌(staphylococcus aureus,SA)是一類寄居于人類呼吸道、鼻咽部及皮膚的條件致病菌,是導(dǎo)致醫(yī)院感染的主要病原體之一。耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(methicillin resistant staphylococcus aureus,MRSA)對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類、慶大霉素等常見(jiàn)抗菌素的耐藥率>80%,對(duì)目前上市的所有β-內(nèi)酰胺類藥物耐藥[1],故MRSA被稱為“超級(jí)細(xì)菌”。研究顯示,金黃色葡萄球菌感染與導(dǎo)管及其他醫(yī)療設(shè)備感染相關(guān)[2],80%的假體感染是由葡萄球菌引起[3],而且這些感染均與其形成的生物膜相關(guān),當(dāng)金黃色葡萄球菌以生物膜的形式存在,其耐藥性和致病性大大增加,治療和根除更加困難。替加環(huán)素是新一代的甘氨酰環(huán)類抗菌藥物,抗菌譜廣且安全有效,在一定程度上還能破壞鮑曼不動(dòng)桿菌的生物膜,但有關(guān)于替加環(huán)素與金黃色葡萄球菌生物膜的研究較少。本文主要探討不同濃度替加環(huán)素對(duì)MRSA生物膜的作用及其機(jī)制,為臨床治療及院感防控提供依據(jù)。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料 納入研究的30株MRSA均來(lái)自于2013年1月至2017年12月浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬嘉興市中醫(yī)院的住院患者,同一患者同一部位分離出的重復(fù)菌株不重復(fù)計(jì)入。質(zhì)控菌株:鉛黃腸球菌ATCC700327和金黃色葡萄球菌ATCC29213均購(gòu)自衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心。

    1.2 儀器與試劑 VITEK-Compact2型全自動(dòng)微生物分析儀、VITEK比濁儀(法國(guó)梅里埃公司),ST-360酶標(biāo)儀(上??迫A有限公司),小型低速離心機(jī)(Thermo公司),PCR反應(yīng)擴(kuò)增儀(BIO公司),StepOne型熒光定量PCR儀、Stepone plus型熒光定量PCR儀(ABI),96孔細(xì)胞培養(yǎng)板(NEST公司),1%結(jié)晶紫染色液(北京索萊寶),Ezup柱式細(xì)菌基因組DNA抽提試劑盒、溶葡萄球菌酶(上海生工生物工程股份有限公司),定量PCR試劑SG Fast qPCR Master Mix(加拿大ABI公司)。

    1.3 研究方法 (1)細(xì)菌的分離與鑒定:按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》及VITEK-2型號(hào)全自動(dòng)化微生物分析儀器操作手冊(cè)進(jìn)行規(guī)范化操作,對(duì)分離純化的細(xì)菌進(jìn)行鑒定。通過(guò)VITEK-2型號(hào)全自動(dòng)化微生物分析儀器鑒定,并經(jīng)過(guò)mecA 基因進(jìn)行MRSA菌種的確認(rèn)。(2)藥物敏感試驗(yàn):按照2016版美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)(CLSI)的標(biāo)準(zhǔn),應(yīng)用微量肉湯稀釋法測(cè)定30株實(shí)驗(yàn)菌株對(duì)替加環(huán)素的最低抑菌濃度(minimal inhibititory concentration,MIC)和最低生物被膜清除濃度(minimal biofilm eradication concentration,MBEC),每株菌做3個(gè)復(fù)孔。其中,替加環(huán)素對(duì)MRSA的MIC值采用歐洲藥敏試驗(yàn)委員會(huì)(EUCAST)標(biāo)準(zhǔn),替加環(huán)素≤0.12為敏感。(3)生物膜形成能力定量測(cè)定:采用96孔聚苯乙烯板結(jié)晶紫染色法測(cè)定30株MRSA菌株體外培養(yǎng)不同時(shí)間段形成生物膜的能力。全功能微孔板酶標(biāo)儀檢測(cè)各孔在570 nm處的吸光度值,即OD570值。OD570值判讀依據(jù):當(dāng)OD570≥2ODc時(shí),為強(qiáng)生物膜形成株;當(dāng)ODc≤OD570<2ODc時(shí),為弱生物膜形成株;當(dāng)OD570<ODc時(shí),為無(wú)生物膜形成株。(4)不同濃度的替加環(huán)素作用下生物膜形成定量測(cè)定:采用96孔聚苯乙烯板結(jié)晶紫染色法測(cè)定亞抑菌濃度及亞生物膜清除濃度替加環(huán)素作用下生物膜的變化。(5)不同濃度替加環(huán)素作用下生物膜相關(guān)基因的測(cè)定:按照Ezup柱式細(xì)菌基因組DNA抽提試劑盒說(shuō)明進(jìn)行操作,將提取MRSADNA保存在-20 ℃。應(yīng)用熒光定量PCR測(cè)定icaA、sar、fnbA、agrI基因的相對(duì)表達(dá)量。生物膜相關(guān)基因相對(duì)表達(dá)量差異采用比較Ct值法(2-(ΔΔCt))公式計(jì)算:ΔCt=Ct靶基因-Ct內(nèi)參基因;ΔΔCt=ΔCt(校準(zhǔn)樣品)-ΔCt(實(shí)驗(yàn)樣本),改變倍數(shù)=2-(ΔΔCt)。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用Microsoft office2007軟件和SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)數(shù)資料以(±s)表示,采用趨勢(shì)χ2檢驗(yàn),兩樣本間比較采用t檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 30株臨床分離的MRSA生物膜形成能力測(cè)定 結(jié)果顯示,30株實(shí)驗(yàn)菌株均能形成生物膜。根據(jù)結(jié)果判讀依據(jù):ODc=0.066,OD570≥4ODc,30株均為強(qiáng)生物膜形成株。所有菌株在24 h均已形成生物膜,24 h~48 h內(nèi)迅速生長(zhǎng)。每株菌每個(gè)時(shí)間段所形成的生物膜量均有差異。5株菌培養(yǎng)48 h后生物膜形成量達(dá)到高峰,而后進(jìn)入平臺(tái)期,96 h開(kāi)始下降;16株菌在48 h產(chǎn)生的生物膜量達(dá)到高峰,72 h開(kāi)始下降;另外9株菌在72 h產(chǎn)生的生物膜量達(dá)到高峰,而后開(kāi)始下降。見(jiàn)表1。

    表1 30株臨床分離的MRSA生物膜形成能力測(cè)定(±s)

    表1 30株臨床分離的MRSA生物膜形成能力測(cè)定(±s)

    編號(hào) 24 h 48 h 72 h 96 h 1 0.250±0.036 0.272±0.025 0.285±0.010 0.148±0.028 2 0.261±0.038 0.360±0.027 0.357±0.018 0.143±0.011 3 0.256±0.021 0.561±0.044 0.567±0.012 0.299±0.105 4 0.343±0.025 0.449±0.009 0.301±0.009 0.184±0.006 6 0.436±0.076 1.259±0.001 1.084±0.056 0.859±0.040 7 0.536±0.032 1.645±0.037 1.473±0.056 1.104±0.086 8 0.171±0.010 0.131±0.013 0.366±0.024 0.131±0.035 9 0.250±0.014 1.557±0.026 1.302±0.104 0.971±0.061 13 0.165±0.009 0.459±0.038 0.564±0.050 0.389±0.020 14 0.529±0.089 1.573±0.159 1.431±0.125 1.099±0.117 15 0.151±0.027 0.959±0.029 0.815±0.104 0.581±0.098 19 0.257±0.041 0.540±0.063 0.540±0.029 0.338±0.093 21 0.165±0.013 0.747±0.004 0.753±0.020 0.431±0.097 22 0.200±0.010 0.785±0.030 0.749±0.007 0.528±0.065 24 0.517±0.001 1.158±0.035 1.156±0.045 0.870±0.071 25 0.183±0.011 0.344±0.012 0.470±0.040 0.340±0.091 26 0.154±0.014 0.261±0.036 0.213±0.010 0.185±0.010 27 0.215±0.015 0.553±0.019 0.523±0.009 0.401±0.013 28 0.346±0.028 0.944±0.049 0.861±0.019 0.734±0.034 30 0.413±0.017 1.689±0.155 1.492±0.078 1.342±0.068 33 0.084±0.024 0.188±0.012 0.289±0.030 0.269±0.017 34 0.186±0.036 0.676±0.062 0.651±0.017 0.560±0.015 35 0.140±0.013 0.594±0.016 0.916±0.024 0.743±0.040 36 0.086±0.011 0.311±0.018 0.314±0.002 0.291±0.006 37 0.229±0.042 1.447±0.128 1.318±0.082 1.060±0.105 46 0.112±0.009 0.453±0.018 0.723±0.046 0.667±0.011 47 0.082±0.005 0.143±0.011 0.339±0.033 0.296±0.007 48 0.234±0.021 0.732±0.030 0.643±0.049 0.583±0.028 50 0.284±0.035 1.385±0.025 1.515±0.077 1.441±0.135 57 0.155±0.014 0.285±0.005 0.218±0.015 0.187±0.013

    2.2 亞抑菌濃度替加環(huán)素對(duì)MRSA生物膜形成的作用 本實(shí)驗(yàn)替加環(huán)素對(duì)30株MRSA的MIC值均≤0.12 μg/mL,參照CLSI標(biāo)準(zhǔn)均為敏感。對(duì)30株亞抑菌濃度替加環(huán)素作用下的MRSA實(shí)驗(yàn)菌株的生物膜量進(jìn)行分析,分別測(cè)定1、1/2、1/4、1/8MIC替加環(huán)素條件下實(shí)驗(yàn)菌株的生物膜生成量。結(jié)果顯示,所有菌株在亞抑菌濃度的替加環(huán)素作用下的生物膜形成能力均有下降,表明在亞抑菌濃度的替加環(huán)素作用下可顯著抑制MRSA實(shí)驗(yàn)菌株生物膜的形成;大部分菌株隨著替加環(huán)素濃度的增加,生物膜形成量減少;只有少量MRSA實(shí)驗(yàn)菌株表現(xiàn)為1/4MIC替加環(huán)素下生成增加,其生物膜形成量不完全與替加環(huán)素濃度呈負(fù)相關(guān)。見(jiàn)表2。

    表2 亞抑菌濃度替加環(huán)素對(duì)30株MRSA生物膜的作用(±s)

    表2 亞抑菌濃度替加環(huán)素對(duì)30株MRSA生物膜的作用(±s)

    編號(hào) 0MIC 1MIC 1/2MIC 1/4MIC 1/8MIC 1 0.271±0.015 0.063±0.020 0.104±0.006 0.157±0.007 0.218±0.017 2 0.358±0.028 0.104±0.007 0.168±0.010 0.203±0.003 0.253±0.013 3 0.543±0.040 0.067±0.007 0.110±0.010 0.188±0.011 0.257±0.007 4 0.444±0.010 0.092±0.010 0.114±0.012 0.218±0.010 0.125±0.004 6 1.168±0.079 0.124±0.006 0.220±0.003 0.308±0.009 0.413±0.012 7 1.640±0.045 0.227±0.020 0.324±0.019 0.414±0.008 0.543±0.050 8 0.357±0.009 0.048±0.010 0.084±0.005 0.111±0.009 0.120±0.009 9 1.499±0.054 0.121±0.007 0.186±0.005 0.452±0.040 0.350±0.025 13 0.556±0.044 0.158±0.213 0.117±0.009 0.087±0.003 0.108±0.008 14 1.540±0.108 0.116±0.004 0.603±0.048 0.438±0.011 0.530±0.008 15 0.959±0.014 0.071±0.007 0.090±0.002 0.130±0.008 0.163±0.012 19 0.497±0.036 0.126±0.010 0.146±0.008 0.183±0.010 0.219±0.018 21 0.731±0.032 0.043±0.008 0.081±0.004 0.105±0.004 0.138±0.005 22 0.793±0.019 0.056±0.005 0.088±0.005 0.121±0.002 0.112±0.004 24 1.154±0.043 0.117±0.008 0.180±0.006 0.247±0.011 0.342±0.005 25 0.453±0.034 0.070±0.007 0.104±0.006 0.133±0.010 0.151±0.022 26 0.261±0.024 0.029±0.003 0.060±0.007 0.089±0.004 0.116±0.014 27 0.546±0.030 0.045±0.027 0.124±0.013 0.124±0.010 0.324±0.009 28 0.891±0.016 0.131±0.016 0.277±0.029 0.425±0.024 0.541±0.030 30 1.658±0.123 0.084±0.019 0.276±0.034 0.746±0.053 0.831±0.049 33 0.295±0.016 0.042±0.009 0.066±0.011 0.098±0.011 0.121±0.008

    表2(續(xù))

    2.3 亞生物膜清除濃度替加環(huán)素下對(duì)MRSA生物膜的作用 MRSA菌株生物膜形成達(dá)高峰后加入一定濃度的替加環(huán)素,并以能消除已形成生物膜的最低濃度為最低生物膜形成濃度(MBEC),分別測(cè)定1、1/2、1/4、1/8MBEC 的替加環(huán)素作用下,30株MRSA菌株生物膜形成量的變化。結(jié)果顯示,替加環(huán)素對(duì)30株MRSA的MBEC各不相同,濃度32~128 ug/mL;1/2、1/4、1/8MBEC 替加環(huán)素對(duì)生物膜均有微弱的消除作用,組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.894)。見(jiàn)表3-4。

    表3 亞生物膜清除濃度替加環(huán)素對(duì)30株MRSA生物膜的作用(±s)

    表3 亞生物膜清除濃度替加環(huán)素對(duì)30株MRSA生物膜的作用(±s)

    編號(hào) MBEC 0MBEC 1/2MBEC 1/4MBEC 1/8MBEC 1 64 0.253±0.021 0.212±0.006 0.217±0.012 0.224±0.007 2 64 0.345±0.027 0.270±0.018 0.317±0.046 0.224±0.015 3 128 0.517±0.039 0.423±0.012 0.440±0.024 0.419±0.003 4 64 0.425±0.007 0.327±0.021 0.322±0.007 0.319±0.003 6 128 1.093±0.066 1.084±0.112 1.028±0.017 0.982±0.053 7 128 1.514±0.068 1.522±0.031 1.331±0.021 1.425±0.044 8 32 0.334±0.012 0.277±0.009 0.268±0.025 0.264±0.025 9 128 1.501±0.045 1.385±0.050 1.488±0.051 1.668±0.057 13 64 0.535±0.049 0.433±0.008 0.459±0.018 0.452±0.012 14 128 1.483±0.073 1.418±0.044 1.569±0.021 1.475±0.118 15 128 0.945±0.009 0.738±0.017 0.678±0.021 0.650±0.031 19 64 0.475±0.049 0.372±0.019 0.340±0.047 0.377±0.021 21 128 0.713±0.038 0.594±0.029 0.650±0.027 0.715±0.013 22 128 0.777±0.021 0.521±0.011 0.610±0.059 0.608±0.007 24 128 1.151±0.076 0.982±0.023 1.323±0.065 1.367±0.051 25 64 0.433±0.040 0.263±0.022 0.250±0.031 0.286±0.052 26 32 0.248±0.029 0.113±0.007 0.124±0.004 0.129±0.014 27 64 0.521±0.034 0.389±0.012 0.426±0.015 0.465±0.010 28 128 0.875±0.024 0.760±0.015 0.815±0.017 0.869±0.017 30 128 1.635±0.039 1.533±0.066 1.577±0.023 1.706±0.025 33 32 0.275±0.012 0.225±0.008 0.257±0.021 0.240±0.008 34 64 0.669±0.029 0.552±0.023 0.565±0.013 0.592±0.012 35 64 0.896±0.018 0.792±0.008 0.832±0.019 0.848±0.028 36 32 0.300±0.025 0.303±0.007 0.316±0.009 0.324±0.008 37 128 1.420±0.078 1.283±0.056 1.302±0.037 1.415±0.074 46 64 0.658±0.084 0.580±0.020 0.613±0.014 0.711±0.010 47 32 0.327±0.028 0.281±0.004 0.310±0.012 0.334±0.009 48 128 0.694±0.061 0.553±0.020 0.609±0.028 0.698±0.016 50 128 1.334±0.166 1.263±0.048 1.295±0.042 1.333±0.020 57 32 0.250±0.025 0.225±0.014 0.230±0.021 0.255±0.011

    表4 1/2、1/4、1/8MBEC替加環(huán)素對(duì)MRSA生物膜的差異性比較

    2.4 RT-PCR法測(cè)定亞抑菌濃度替加環(huán)素作用下生物膜相關(guān)基因相對(duì)表達(dá)量 選取實(shí)驗(yàn)菌株中的四株菌在四個(gè)不同濃度替加環(huán)素作用24 h后進(jìn)行RT-PCR檢測(cè)icaA、sarA、fnbA、agrI基因的相對(duì)表達(dá)量,并計(jì)算生物膜形成量與其之間的相關(guān)性,內(nèi)參基因?yàn)?6sRNA。見(jiàn)表5。

    表5 icaA,sarA,fnbA和agrI基因相對(duì)表達(dá)量

    2.5 MRSA生物膜形成量與相關(guān)基因表達(dá)量的相關(guān)性分析 結(jié)果顯示,生物膜量與以下基因有相關(guān)性:icaA(PCC=0.873,P<0.01),icaA和sarA(PCC=0.817,P<0.01),icaA和fnbA(PCC=0.941,P<0.01),sarA和fnbA(PCC=0.844,P<0.01)。見(jiàn)表6。

    表6 MRSA生物膜形成量與相關(guān)基因表達(dá)量的相關(guān)性分析

    3 討論

    金黃色葡萄球菌是一種機(jī)會(huì)性人類病原體,感染的范圍從輕度皮膚感染到嚴(yán)重壞死性肺炎,同時(shí)是菌血癥、感染性心內(nèi)膜炎的主要病原菌,還可引起骨關(guān)節(jié)、皮膚、軟組織、胸膜、肺和裝置相關(guān)感染。MRSA具有多重耐藥性,生物膜的形成是MRSA毒力因子之一[4]。生物膜是一種膜性結(jié)構(gòu),MRSA由于生物膜的作用,并不引起強(qiáng)烈的炎癥反應(yīng),因?yàn)樯锬じ艚^了細(xì)菌與機(jī)體的直接接觸,使細(xì)菌得以與機(jī)體共存,即使在慢性黏附的狀態(tài)下[5]。更重要的是,生物膜能夠有效阻滯抗生素和機(jī)體防御系統(tǒng)對(duì)被膜內(nèi)細(xì)菌的殺傷,雖然部分抗生素能夠有效殺滅浮游菌,但還會(huì)不斷釋放浮游菌,從而導(dǎo)致感染遷延不愈。生物膜致病機(jī)制較為復(fù)雜,主要包括以下幾個(gè)方面[6-11]:①生物膜提供保護(hù)屏障,MRSA生物膜可通過(guò)多種機(jī)制對(duì)抗抗生素的殺菌作用,主要是表現(xiàn)在內(nèi)部微環(huán)境的改變、基質(zhì)屏障作用、群體感應(yīng)系統(tǒng)、被膜菌的表型變異以及主動(dòng)外排系統(tǒng)等,為細(xì)菌的定植和侵入提供了屏障。②生物膜介導(dǎo)的免疫損傷。中性粒細(xì)胞不能進(jìn)入生物膜內(nèi)殺傷細(xì)菌,只能圍繞在生物膜周圍,由于生物膜基質(zhì)屏障缺少特定的化學(xué)信號(hào),這些細(xì)胞被激活后能釋放蛋白酶、細(xì)胞毒素等,可引起周圍組織損傷。③葡萄球菌生物膜能夠通過(guò)降低淋巴細(xì)胞釋放γ干擾素,可減少巨噬細(xì)胞的激活,也會(huì)導(dǎo)致周圍組織損傷。④生物膜能夠?qū)姑庖呦到y(tǒng)的清除,抗體和炎性細(xì)胞只能環(huán)繞在其周圍,很難進(jìn)入生物膜內(nèi),這樣就不能發(fā)揮吞噬殺傷作用。

    本實(shí)驗(yàn)通過(guò)96孔聚苯乙烯板結(jié)晶紫染色法發(fā)現(xiàn),留取的30株MRSA均形成生物膜,并且都是強(qiáng)生物膜形成株。從30株臨床分離的MRSA生物膜形成能力測(cè)定表及生物膜生長(zhǎng)曲線圖可見(jiàn),菌株生物膜的生長(zhǎng)周期具有差異性。細(xì)菌形成生物膜的階段為黏附→聚集與增殖→生物膜的成熟→細(xì)菌脫落與播散,由表1可見(jiàn),培養(yǎng)24 h已經(jīng)完成黏附形成生物膜,24 h~48 h是聚集與增殖的快速階段,53.3%的菌株在此時(shí)間段成生物膜已經(jīng)達(dá)到高峰,72 h開(kāi)始下降;16.7%的菌株在此階段生物膜形成量達(dá)到高峰,72 h量與其持平;30%的菌株在此階段生物膜繼續(xù)增殖至72 h達(dá)到高峰形成成熟的生物膜。72 h~96 h為細(xì)菌脫落與播散期,浮游菌遇到適宜的表面繼續(xù)附著、發(fā)展、成熟,形成循環(huán)。因此,生物膜的形成是一個(gè)動(dòng)態(tài)過(guò)程,是導(dǎo)致感染遷延不愈的重要原因。

    本研究使用1、1/2、1/4、1/8MIC替加環(huán)素對(duì)30株MRSA實(shí)驗(yàn)菌株進(jìn)行刺激。結(jié)果表明,所有應(yīng)用替加環(huán)素作用下的MRSA實(shí)驗(yàn)菌株在亞抑菌濃度條件下其形成生物膜的能力均降低。此外,亞抑菌濃度的替加環(huán)素作用下可明顯抑制MRSA生物膜的形成。實(shí)驗(yàn)菌株形成的生物膜量各自不同,在不同的亞抑菌濃度作用下,大部分的菌株在替加環(huán)素作用下表現(xiàn)為隨著濃度增加,生物膜形成量減少,呈負(fù)相關(guān)性。有少量菌株在亞抑菌濃度的替加環(huán)素作用下,其形成的生物膜不隨替加環(huán)素的濃度變化而變化,可能是因?yàn)閬喴志鷿舛炔粌H不能破壞、減少生物膜,反而可能誘導(dǎo)刺激生物膜形成,這個(gè)問(wèn)題值得繼續(xù)研究。

    本研究檢測(cè)了替加環(huán)素對(duì)30株MRSA實(shí)驗(yàn)菌株最低生物膜清除濃度。結(jié)果顯示,30株的MBEC均顯著高于其浮游菌的MIC,表明在替加環(huán)素作用下以生物膜形態(tài)存在的細(xì)菌與浮游菌耐抗菌素的能力相比大大增加。以1/2、1/4、1/8MBEC濃度刺激30株MRSA菌株,結(jié)果表明亞生物膜清除濃度對(duì)已經(jīng)形成的生物膜有微弱的消除作用,但不同MBEC的替加環(huán)素對(duì)成熟生物膜的作用無(wú)差異。臨床上,可以根據(jù)需要聯(lián)合用藥對(duì)MRSA成熟的生物膜進(jìn)行干預(yù)。

    本研究中亞抑菌濃度替加環(huán)素作用下生物膜形成量與sarA、icaA和fnbA呈明顯相關(guān)性,提示亞抑菌濃度替加環(huán)素對(duì)MRSA生物膜影響的主要機(jī)制是對(duì)相關(guān)的生物膜基因如sarA、icaA、fnbA進(jìn)行調(diào)控進(jìn)而影響生物膜的形成。結(jié)果提示,亞抑菌濃度替加環(huán)素影響生物膜形成與agrI基因相關(guān)性不大,可能與本研究中6號(hào)菌株在亞抑菌濃度替加環(huán)素作用下的agrI未擴(kuò)增有關(guān),后期需要更多的實(shí)驗(yàn)來(lái)證明與探究。

    綜上所述,不同濃度替加環(huán)素的作用影響了相關(guān)基因的相對(duì)表達(dá)量,從而影響生物膜形成量的變化。替加環(huán)素影響生物膜形成的機(jī)制復(fù)雜,通過(guò)對(duì)毒力因子、基因的調(diào)控能否降低MRSA生物膜相關(guān)感染的發(fā)病率和病死率,還需進(jìn)行深入的研究。另外,MRSA的耐藥形勢(shì)給臨床治療及院內(nèi)感染防控帶來(lái)極大的挑戰(zhàn),提示臨床醫(yī)師必須合理選用抗菌藥物[12]。

    猜你喜歡
    環(huán)素生物膜金黃色
    幽門螺桿菌生物膜的研究進(jìn)展
    一起金黃色葡萄球菌食物中毒的病原學(xué)分析
    生物膜胞外聚合物研究進(jìn)展
    多西環(huán)素漲至800元/kg,95%的原料暴漲,動(dòng)保企業(yè)也快扛不住了!
    那一抹金黃色
    那一抹金黃色
    金黃色
    過(guò)表達(dá)親環(huán)素J 促進(jìn)肝癌的發(fā)生
    親環(huán)素A與慢性心力衰竭相關(guān)性的研究
    光動(dòng)力對(duì)細(xì)菌生物膜的作用研究進(jìn)展
    手机成人av网站| 国产伦人伦偷精品视频| 性少妇av在线| 一级毛片女人18水好多| 天堂俺去俺来也www色官网| 午夜免费成人在线视频| 美女高潮到喷水免费观看| 大香蕉久久成人网| 亚洲欧洲日产国产| 男人爽女人下面视频在线观看| 极品少妇高潮喷水抽搐| 欧美黄色片欧美黄色片| av超薄肉色丝袜交足视频| 亚洲伊人久久精品综合| 激情视频va一区二区三区| 日韩欧美国产一区二区入口| 各种免费的搞黄视频| 国产精品一区二区免费欧美 | 丝袜人妻中文字幕| www.熟女人妻精品国产| 国产精品一二三区在线看| 久久久精品免费免费高清| 香蕉丝袜av| 久久这里只有精品19| 精品国内亚洲2022精品成人 | 欧美大码av| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 亚洲精品国产av蜜桃| 亚洲久久久国产精品| a在线观看视频网站| 一级毛片电影观看| 天堂俺去俺来也www色官网| 亚洲视频免费观看视频| 视频在线观看一区二区三区| 黑人猛操日本美女一级片| 不卡av一区二区三区| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 成在线人永久免费视频| 亚洲精品乱久久久久久| 无限看片的www在线观看| 99国产极品粉嫩在线观看| 国产在线视频一区二区| 一区二区av电影网| 真人做人爱边吃奶动态| 新久久久久国产一级毛片| 成人亚洲精品一区在线观看| 少妇人妻久久综合中文| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 下体分泌物呈黄色| 蜜桃在线观看..| 麻豆av在线久日| 多毛熟女@视频| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡 | 老司机午夜十八禁免费视频| 99九九在线精品视频| 久久人人97超碰香蕉20202| 黄色视频不卡| av片东京热男人的天堂| 在线 av 中文字幕| 久久狼人影院| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 淫妇啪啪啪对白视频 | 老鸭窝网址在线观看| 色综合欧美亚洲国产小说| 99国产精品一区二区三区| 国产一区有黄有色的免费视频| 国产有黄有色有爽视频| 大码成人一级视频| 久久久久国产精品人妻一区二区| 99精品欧美一区二区三区四区| 免费人妻精品一区二区三区视频| 精品一区二区三区av网在线观看 | 老熟女久久久| 国产免费福利视频在线观看| www.熟女人妻精品国产| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 欧美激情 高清一区二区三区| 桃红色精品国产亚洲av| 日日夜夜操网爽| 久久久久久久国产电影| 俄罗斯特黄特色一大片| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 一级,二级,三级黄色视频| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 久久久久国产精品人妻一区二区| 日韩三级视频一区二区三区| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 9191精品国产免费久久| 日本91视频免费播放| 免费观看人在逋| 亚洲综合色网址| 女性被躁到高潮视频| 精品一区二区三卡| 久久性视频一级片| 国产av国产精品国产| 亚洲专区中文字幕在线| 丝袜美腿诱惑在线| 一区在线观看完整版| 国产熟女午夜一区二区三区| 国产片内射在线| www日本在线高清视频| 精品一区二区三卡| 欧美日韩视频精品一区| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 波多野结衣av一区二区av| 国产免费福利视频在线观看| 黄片播放在线免费| 日本91视频免费播放| 满18在线观看网站| 欧美中文综合在线视频| 丰满饥渴人妻一区二区三| 99国产精品免费福利视频| 亚洲熟女精品中文字幕| 亚洲精品av麻豆狂野| 韩国精品一区二区三区| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 免费av中文字幕在线| 国产精品国产三级国产专区5o| 一二三四社区在线视频社区8| 成人黄色视频免费在线看| 99国产精品99久久久久| avwww免费| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 天堂8中文在线网| 少妇粗大呻吟视频| 国产精品av久久久久免费| 亚洲成国产人片在线观看| 男人爽女人下面视频在线观看| 蜜桃在线观看..| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 国产成人a∨麻豆精品| 91成人精品电影| 国产成人精品久久二区二区91| 欧美精品av麻豆av| 99久久人妻综合| 国产免费福利视频在线观看| 久久久久久久精品精品| 丝袜喷水一区| 午夜福利在线观看吧| 高潮久久久久久久久久久不卡| 18禁观看日本| 国产成人精品无人区| 黑人猛操日本美女一级片| 性色av一级| 五月开心婷婷网| 黑人操中国人逼视频| 99国产极品粉嫩在线观看| 男女下面插进去视频免费观看| 国产片内射在线| 悠悠久久av| 午夜福利免费观看在线| 欧美中文综合在线视频| 亚洲精品在线美女| 叶爱在线成人免费视频播放| 制服人妻中文乱码| 丁香六月天网| 日韩大码丰满熟妇| 搡老熟女国产l中国老女人| 国产淫语在线视频| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 下体分泌物呈黄色| 岛国毛片在线播放| 午夜福利视频精品| 国产成人系列免费观看| 久久九九热精品免费| 久久国产亚洲av麻豆专区| 好男人电影高清在线观看| 天堂中文最新版在线下载| 亚洲精品国产色婷婷电影| 欧美亚洲日本最大视频资源| 最近中文字幕2019免费版| 国产激情久久老熟女| 性色av一级| 老司机影院毛片| 少妇的丰满在线观看| 亚洲精品成人av观看孕妇| 欧美日本中文国产一区发布| 少妇的丰满在线观看| 久久久久国产精品人妻一区二区| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 真人做人爱边吃奶动态| 国产一卡二卡三卡精品| e午夜精品久久久久久久| 下体分泌物呈黄色| av有码第一页| 夫妻午夜视频| 免费在线观看影片大全网站| 欧美xxⅹ黑人| 91精品国产国语对白视频| 在线观看人妻少妇| 中文欧美无线码| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 精品久久久久久电影网| 一边摸一边做爽爽视频免费| 99精国产麻豆久久婷婷| 中国国产av一级| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 免费高清在线观看视频在线观看| 我要看黄色一级片免费的| 国产欧美日韩一区二区三 | 99热全是精品| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 国产免费视频播放在线视频| 亚洲,欧美精品.| 国产成人av教育| 色老头精品视频在线观看| 午夜福利,免费看| 欧美黄色淫秽网站| 99热全是精品| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 正在播放国产对白刺激| 精品人妻1区二区| 久久精品成人免费网站| 一本综合久久免费| 亚洲国产日韩一区二区| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 制服诱惑二区| 午夜激情av网站| 视频区欧美日本亚洲| √禁漫天堂资源中文www| 欧美+亚洲+日韩+国产| 美女大奶头黄色视频| 91精品国产国语对白视频| 午夜福利一区二区在线看| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 9热在线视频观看99| 美女高潮到喷水免费观看| 国产精品免费大片| 久久精品国产a三级三级三级| 欧美在线一区亚洲| 一本大道久久a久久精品| 国产精品二区激情视频| 午夜久久久在线观看| 少妇粗大呻吟视频| 国产精品偷伦视频观看了| 一本久久精品| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 多毛熟女@视频| 亚洲精品一区蜜桃| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频 | 亚洲熟女精品中文字幕| 一级a爱视频在线免费观看| 黄色视频不卡| 91老司机精品| 国产免费av片在线观看野外av| 国产成人免费观看mmmm| 韩国精品一区二区三区| 麻豆国产av国片精品| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 视频区欧美日本亚洲| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 男女午夜视频在线观看| 欧美日韩成人在线一区二区| www日本在线高清视频| 五月开心婷婷网| 国产高清国产精品国产三级| 久久狼人影院| 精品久久蜜臀av无| 日韩欧美国产一区二区入口| 中文字幕人妻熟女乱码| 国产精品久久久久久精品古装| 69av精品久久久久久 | 999久久久国产精品视频| 一级片免费观看大全| 99久久99久久久精品蜜桃| 99精品欧美一区二区三区四区| 大片电影免费在线观看免费| 日本91视频免费播放| 69精品国产乱码久久久| 亚洲成人免费电影在线观看| 午夜福利在线观看吧| 我要看黄色一级片免费的| 国产一区二区激情短视频 | 亚洲中文av在线| 91大片在线观看| 国产在线观看jvid| 操美女的视频在线观看| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 不卡av一区二区三区| 午夜福利免费观看在线| 国产99久久九九免费精品| 午夜福利一区二区在线看| 狂野欧美激情性xxxx| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 亚洲黑人精品在线| 一本综合久久免费| 叶爱在线成人免费视频播放| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 色94色欧美一区二区| 我的亚洲天堂| 国产淫语在线视频| av网站在线播放免费| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 三级毛片av免费| 亚洲精品国产区一区二| 亚洲人成电影观看| 欧美成人午夜精品| av国产精品久久久久影院| h视频一区二区三区| 久久这里只有精品19| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 亚洲天堂av无毛| 久久久久国产精品人妻一区二区| 亚洲精华国产精华精| 一本综合久久免费| 叶爱在线成人免费视频播放| 91九色精品人成在线观看| 国产欧美亚洲国产| 午夜免费鲁丝| 高清视频免费观看一区二区| 青春草亚洲视频在线观看| 青春草视频在线免费观看| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 999久久久国产精品视频| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 水蜜桃什么品种好| 久久免费观看电影| 丝袜脚勾引网站| 亚洲性夜色夜夜综合| 一级毛片精品| 国产欧美亚洲国产| 久久 成人 亚洲| 亚洲男人天堂网一区| 一级毛片电影观看| 国产又色又爽无遮挡免| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 国产97色在线日韩免费| 丝袜喷水一区| 老司机午夜福利在线观看视频 | 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 首页视频小说图片口味搜索| 久久久国产欧美日韩av| 国产97色在线日韩免费| 波多野结衣av一区二区av| av片东京热男人的天堂| 免费黄频网站在线观看国产| 日韩中文字幕视频在线看片| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 欧美黄色淫秽网站| 亚洲欧美色中文字幕在线| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 爱豆传媒免费全集在线观看| 国产日韩欧美在线精品| 色综合欧美亚洲国产小说| 国产精品久久久av美女十八| 老司机午夜福利在线观看视频 | 91麻豆精品激情在线观看国产 | 19禁男女啪啪无遮挡网站| 午夜免费鲁丝| 国产精品九九99| 国精品久久久久久国模美| 99re6热这里在线精品视频| 制服人妻中文乱码| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 9色porny在线观看| 深夜精品福利| 精品国产乱子伦一区二区三区 | 一区二区三区乱码不卡18| 久久国产精品大桥未久av| 亚洲国产欧美网| 90打野战视频偷拍视频| 国产亚洲精品一区二区www | 国产亚洲欧美在线一区二区| 亚洲av成人一区二区三| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 热99国产精品久久久久久7| 性色av乱码一区二区三区2| 亚洲欧美清纯卡通| 大型av网站在线播放| 色老头精品视频在线观看| 男女下面插进去视频免费观看| 男人爽女人下面视频在线观看| cao死你这个sao货| av免费在线观看网站| 国产精品 国内视频| 狂野欧美激情性bbbbbb| 又大又爽又粗| 蜜桃国产av成人99| 操出白浆在线播放| 97在线人人人人妻| 亚洲国产欧美在线一区| 国产又爽黄色视频| 欧美另类一区| 国产精品国产av在线观看| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 国产精品久久久人人做人人爽| 法律面前人人平等表现在哪些方面 | 国产成人一区二区三区免费视频网站| 99久久人妻综合| 亚洲av男天堂| 亚洲国产看品久久| 男女高潮啪啪啪动态图| 亚洲av美国av| 亚洲精品av麻豆狂野| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 91精品伊人久久大香线蕉| 国产免费现黄频在线看| 亚洲精品国产av成人精品| 亚洲欧美精品自产自拍| 九色亚洲精品在线播放| 国产黄频视频在线观看| 999久久久国产精品视频| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 亚洲精品一区蜜桃| 亚洲国产欧美在线一区| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 91国产中文字幕| 热re99久久精品国产66热6| 国产av又大| 欧美日韩亚洲高清精品| 日韩制服骚丝袜av| 国产亚洲精品第一综合不卡| 亚洲精品国产一区二区精华液| av视频免费观看在线观看| 欧美精品av麻豆av| 国产欧美亚洲国产| 午夜福利影视在线免费观看| 伊人亚洲综合成人网| 又紧又爽又黄一区二区| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 操美女的视频在线观看| 男人添女人高潮全过程视频| 中文字幕最新亚洲高清| 欧美激情极品国产一区二区三区| 国产亚洲精品一区二区www | 精品国产乱码久久久久久男人| 中文字幕精品免费在线观看视频| 色精品久久人妻99蜜桃| 欧美亚洲日本最大视频资源| 少妇人妻久久综合中文| 日韩精品免费视频一区二区三区| 久久影院123| 欧美日本中文国产一区发布| 精品久久久精品久久久| 亚洲黑人精品在线| 欧美日韩黄片免| 日本一区二区免费在线视频| 亚洲欧美色中文字幕在线| 国产成人啪精品午夜网站| 国产不卡av网站在线观看| 99精品欧美一区二区三区四区| 久久综合国产亚洲精品| 90打野战视频偷拍视频| 成年人午夜在线观看视频| 日韩大码丰满熟妇| 久久人人97超碰香蕉20202| 首页视频小说图片口味搜索| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 久久久国产成人免费| 国产精品影院久久| 欧美中文综合在线视频| 十八禁网站免费在线| 午夜日韩欧美国产| 69av精品久久久久久 | 午夜福利,免费看| 久久国产亚洲av麻豆专区| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 一级黄色大片毛片| 日本一区二区免费在线视频| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 久久久精品94久久精品| 大香蕉久久网| 老司机影院成人| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 午夜精品国产一区二区电影| 国产精品亚洲av一区麻豆| 久热这里只有精品99| 日本av手机在线免费观看| 免费高清在线观看日韩| 成年人午夜在线观看视频| 免费人妻精品一区二区三区视频| av线在线观看网站| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 久久亚洲国产成人精品v| 午夜福利视频精品| 欧美精品一区二区大全| 悠悠久久av| 亚洲情色 制服丝袜| 欧美激情极品国产一区二区三区| 免费日韩欧美在线观看| 91国产中文字幕| 乱人伦中国视频| 国产精品免费大片| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 国产精品久久久久成人av| 一级,二级,三级黄色视频| 午夜视频精品福利| 777米奇影视久久| 欧美黄色片欧美黄色片| 精品久久久精品久久久| 18在线观看网站| www.自偷自拍.com| 久久久国产一区二区| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 伊人亚洲综合成人网| 悠悠久久av| 精品久久蜜臀av无| 99精品欧美一区二区三区四区| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 日韩人妻精品一区2区三区| 国产一级毛片在线| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 他把我摸到了高潮在线观看 | 男人舔女人的私密视频| 国产精品免费大片| 国产精品九九99| 欧美激情久久久久久爽电影 | 日本av手机在线免费观看| 香蕉丝袜av| 亚洲熟女毛片儿| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 午夜免费观看性视频| xxxhd国产人妻xxx| 久久99一区二区三区| 亚洲精品中文字幕在线视频| 老司机午夜福利在线观看视频 | 99精国产麻豆久久婷婷| 麻豆乱淫一区二区| e午夜精品久久久久久久| 国产欧美日韩一区二区三 | 中文字幕人妻丝袜一区二区| 在线观看舔阴道视频| 这个男人来自地球电影免费观看| 乱人伦中国视频| 男女国产视频网站| 日韩视频一区二区在线观看| 少妇 在线观看| 日韩制服骚丝袜av| 久久天堂一区二区三区四区| netflix在线观看网站| 久久免费观看电影| 国产在线一区二区三区精| 国产片内射在线| 国产男女超爽视频在线观看| av免费在线观看网站| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 两个人免费观看高清视频| 美女福利国产在线| 亚洲一区二区三区欧美精品| av天堂在线播放| 国产精品一区二区在线不卡| 国产有黄有色有爽视频| 超碰97精品在线观看| 大码成人一级视频| 亚洲精品粉嫩美女一区| 成年人午夜在线观看视频| 欧美日韩福利视频一区二区| 午夜福利乱码中文字幕| 午夜日韩欧美国产| 欧美日韩成人在线一区二区| 无遮挡黄片免费观看| 亚洲情色 制服丝袜| 精品免费久久久久久久清纯 | 国产精品免费视频内射| 国产成人av教育| 国产又色又爽无遮挡免| 午夜福利影视在线免费观看| 日本av免费视频播放| 精品国产一区二区三区四区第35| 一级毛片精品| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 久久精品国产a三级三级三级| 搡老乐熟女国产| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 亚洲熟女毛片儿| 久久久久视频综合| 成年人免费黄色播放视频| 久久久久网色| 三级毛片av免费| 18禁国产床啪视频网站| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 欧美国产精品va在线观看不卡| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 国产主播在线观看一区二区| 中文字幕高清在线视频| 国产成人影院久久av| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 国产99久久九九免费精品| 电影成人av| 国产日韩欧美亚洲二区| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 精品免费久久久久久久清纯 | 午夜两性在线视频| 国产精品亚洲av一区麻豆| 欧美日本中文国产一区发布| av免费在线观看网站| 女人精品久久久久毛片| 亚洲精品美女久久av网站| av免费在线观看网站| 亚洲免费av在线视频| 日本黄色日本黄色录像| 国产精品免费视频内射| 在线av久久热| 久久久水蜜桃国产精品网| 欧美日韩精品网址| 夜夜夜夜夜久久久久| www.999成人在线观看| 黄色视频在线播放观看不卡| 性少妇av在线| 精品少妇黑人巨大在线播放| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 人人妻人人澡人人看| 久热这里只有精品99| 亚洲精品国产av成人精品| 最黄视频免费看| 欧美午夜高清在线| 高清欧美精品videossex| 女警被强在线播放|