1～63日齡快速型黃羽肉雞硫胺素需要量研究

阮 棟 周桂蓮 陳 芳 林廈菁 茍鐘勇 范秋麗 鄭春田 蔣守群

(廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動(dòng)物科學(xué)研究所，畜禽育種國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部華南動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東省畜禽育種與營(yíng)養(yǎng)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣州 510640)

硫胺素(thiamine)又稱維生素B1，是維持動(dòng)物正常生理功能的一類微量有機(jī)物質(zhì)。硫胺素在動(dòng)物體內(nèi)主要以輔酶焦磷酸硫胺素(thiamine pyrophosphate，TPP)的生物活性形式存在，參與丙酮酸、α-酮戊二酸氧化脫羧反應(yīng)，產(chǎn)生的乙酰輔酶A和琥珀酰輔酶A涉及碳水化合物、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)代謝[1-2]。在肉仔雞中，硫胺素缺乏將導(dǎo)致雞食欲不振、生長(zhǎng)受阻，碳水化合物、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)代謝障礙及明顯的神經(jīng)癥狀，最終導(dǎo)致死亡[3]。硫胺素由嘧啶環(huán)和噻唑環(huán)構(gòu)成，也是一種重要的水溶性風(fēng)味前體物質(zhì)，可改善雞肉風(fēng)味[4]。目前，國(guó)內(nèi)外關(guān)于肉雞硫胺素需要量的研究報(bào)告較少，NRC(1994)給出的1～56日齡肉仔雞飼糧中的硫胺素需要量為1.8 mg/kg，已不再適用于現(xiàn)代品系肉用仔雞的生長(zhǎng)需要。黃葦?shù)萚5]研究報(bào)道，1～21日齡和22～49日齡的肉仔雞硫胺素需要量分別為4.0和1.6 mg/kg。Olkowski等[6]研究發(fā)現(xiàn)，肉仔雞硫胺素的需求存在器官特異性，心臟似乎比肝臟或大腦具有更高的需要量。此外，不同品種、家系、日齡間肉雞肌肉組織中硫胺素含量存在明顯差異，機(jī)體硫胺素含量隨日齡增加而逐漸下降，腿肌中硫胺素含量明顯高于胸肌[7-8]。近年來(lái)研究表明，硫胺素缺乏會(huì)導(dǎo)致大腦組織氧化應(yīng)激，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和自噬[9]。在幼年期劍魚和草魚中，硫胺素缺乏會(huì)抑制機(jī)體免疫系統(tǒng)，導(dǎo)致蛋白質(zhì)和脂質(zhì)氧化損傷[10-11]。適宜含量的硫胺素能降低過(guò)氧化氫(H2O2)誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞DNA氧化損傷[12]。黃羽肉雞是以我國(guó)地方品種雞為血緣培育的肉雞，按照生長(zhǎng)速度分為快速型、中速型和慢速型3種類型。目前關(guān)于硫胺素在黃羽肉雞上的需要量研究報(bào)道很少，且我國(guó)雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)中提出的黃羽肉雞硫胺素需要量也未按生長(zhǎng)速度區(qū)分[13]。有關(guān)硫胺素對(duì)黃羽肉雞抗氧化功能的影響研究也少見報(bào)道。因此，本試驗(yàn)擬以快速型嶺南黃羽肉雞為試驗(yàn)動(dòng)物，研究飼糧硫胺素水平對(duì)肉雞不同生長(zhǎng)階段生長(zhǎng)性能、抗氧化能力、肉品質(zhì)及風(fēng)味的影響，從而確定1～21日齡、22～42日齡以及43～63日齡快速型黃羽肉雞硫胺素需要量，為黃羽肉雞營(yíng)養(yǎng)研究和標(biāo)準(zhǔn)化養(yǎng)殖提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與分組

本試驗(yàn)采用8個(gè)硫胺素水平的單因素隨機(jī)分組設(shè)計(jì)，選用快速型嶺南黃羽肉雞公雞作為試驗(yàn)雞。試驗(yàn)1選用1 920只1日齡健康、發(fā)育良好的快速型嶺南黃羽肉雞公雛，依據(jù)體重一致原則將試驗(yàn)雞分為8個(gè)組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)40只。試驗(yàn)2選用1 440只22日齡肉雞，分為8個(gè)組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30只。試驗(yàn)3選用1 440只43日齡肉雞，分組同試驗(yàn)2。

1.2 試驗(yàn)飼糧

試驗(yàn)采用玉米淀粉-玉米-膨化豆粕型半純合基礎(chǔ)飼糧，營(yíng)養(yǎng)水平參考《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T 33—2004)[13]和《中國(guó)飼料成分及營(yíng)養(yǎng)價(jià)值表》(2018年第29版)[14]配制，基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。試驗(yàn)通過(guò)硫胺素替代預(yù)混料中的玉米芯粉，實(shí)現(xiàn)不同硫胺素水平設(shè)置。1～21日齡、22～42日齡和43～63日齡各組飼糧硫胺素添加水平為0(對(duì)照)、0.6、1.2、1.8、2.4、3.0、3.6和4.2 mg/kg。除硫胺素外，其他營(yíng)養(yǎng)水平均保持一致。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets (air-dry basis) %

續(xù)表1項(xiàng)目 Items1～21日齡1 to 21 days of age22～42日齡22 to 42 days of age43～63日齡43 to 63 days of age預(yù)混料 Premix1)1.001.001.00合計(jì) Total 100.00100.00100.00營(yíng)養(yǎng)水平 Nutrient levels2)代謝能 ME/(MJ/kg)12.1212.5412.96粗蛋白質(zhì) CP21.0019.0017.00鈣 Ca1.000.900.80有效磷 AP0.450.400.35賴氨酸 Lys1.130.990.80蛋氨酸Met0.450.400.35蛋氨酸+半胱氨酸 Met+Cys0.780.680.63蘇氨酸Thr0.900.800.70色氨酸Trp0.270.240.20硫胺素 Thiamine/(mg/kg)1.211.131.04

1.3 飼養(yǎng)管理

飼養(yǎng)試驗(yàn)分3個(gè)階段：小雞階段為1～21日齡，中雞階段為22～42日齡，大雞階段為43～63日齡。試驗(yàn)于廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動(dòng)物科學(xué)研究所試驗(yàn)場(chǎng)肉雞舍進(jìn)行，采用地面平養(yǎng)，地面鋪放干燥木屑，每組每個(gè)重復(fù)試驗(yàn)雞飼養(yǎng)于一欄，欄間用不銹鋼框架和鐵絲網(wǎng)分隔。試驗(yàn)雞自由采食、飲水，各組飼養(yǎng)管理和環(huán)境條件一致，按照常規(guī)操作程序和免疫流程進(jìn)行飼養(yǎng)和免疫。每天08:00、14:00和20:00測(cè)定雞舍溫度和相對(duì)濕度。

1.4 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.4.1 生長(zhǎng)性能

每個(gè)飼養(yǎng)階段試驗(yàn)結(jié)束前1天18:00斷料供水，次日08:00以重復(fù)為單位稱重，統(tǒng)計(jì)耗料量，計(jì)算平均日采食量、平均日增重和料重比。每天觀察雞只健康狀況，一旦出現(xiàn)死雞及時(shí)稱所在欄剩料量，以消除死雞對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響，并統(tǒng)計(jì)死亡率。

1.4.2 抗氧化能力

試驗(yàn)分別于21日齡、42日齡和63日齡，從每組每個(gè)重復(fù)選接近平均體重試雞2只，稱重后翅靜脈采集全血5 mL于加有抗凝劑(肝素鈉)的采血管，3 000 r/min離心10 min后取血漿，分裝至500 μL的EP管中，-80 ℃凍存。血漿還原型谷胱甘肽(reduced glutathione，GSH)和氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione，GSSG)含量、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性、總抗氧化能力(total antioxidant capacity，T-AOC)和丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量均采用南京建成生物工程研究所研發(fā)的試劑盒測(cè)定，以上所有指標(biāo)均在多功能酶標(biāo)儀(SYNERGY H1，BioTek，美國(guó))上讀數(shù)，具體按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。

1.4.3 丙酮酸脫氫酶(pyruvate dehydrogenase，PDH)和α-酮戊二酸脫氫酶(α-ketoglutarate dehydrogenase，KGDH)活性

試驗(yàn)于21日齡、42日齡和63日齡，每組每個(gè)重復(fù)選2只雞，頸部放血致死，剖摘整個(gè)大腦組織，取腦中線部分組織樣約5 g于凍存管中，立即放入液氮中，然后轉(zhuǎn)至-80 ℃凍存。試雞大腦組織中PDH活性參照Kohda等[15]的方法測(cè)定，大腦組織中KGDH活性參照Olkowski等[16]的方法測(cè)定。以上指標(biāo)均使用多功能酶標(biāo)儀(SYNERGY H1，BioTek，美國(guó))測(cè)定，并采用二喹啉甲酸(BCA)法測(cè)定大腦組織蛋白含量。

1.4.4 肉品質(zhì)

在第3階段試驗(yàn)結(jié)束時(shí)(63日齡)，每組每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取接近平均體重試雞2只，頸部放血屠宰后45 min，剖離2側(cè)無(wú)皮無(wú)骨的完整胸肌，去除胸肌表面的脂肪組織，測(cè)定胸肌pH、肉色、剪切力和滴水損失。以上具體方法和詳細(xì)操作步驟參照林廈菁等[17]的方法。

1.4.5 風(fēng)味品嘗評(píng)分

將63日齡的每只重復(fù)的試驗(yàn)雞胸肌切成塊狀放入1個(gè)小碗內(nèi)，用錫箔紙包實(shí)并做好數(shù)字編號(hào)，隱去樣品編號(hào)后，蒸煮20 min取出試驗(yàn)雞胸肌樣品。邀請(qǐng)畜牧專家共12位擔(dān)任評(píng)委，對(duì)雞肉風(fēng)味品嘗指標(biāo)：顏色與外形、氣味、口感風(fēng)味、咀嚼嫩度和多汁性進(jìn)行評(píng)分。各樣品品嘗間隔采用純凈水漱口。評(píng)分采用5分制，每個(gè)評(píng)委均獨(dú)立給分。最后計(jì)算每個(gè)樣品各個(gè)項(xiàng)目平均值。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SAS 9.3(SAS Institute Inc，美國(guó))軟件中GLM程序進(jìn)行方差分析，統(tǒng)計(jì)顯著性水平為P<0.05，0.05≤P<0.10為有顯著趨勢(shì)，在差異顯著的基礎(chǔ)上采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較以及線性(Linear)和二次曲線(Quadratic)趨勢(shì)分析，各表試驗(yàn)數(shù)據(jù)均以平均值和均值標(biāo)準(zhǔn)誤(SEM)表示。并采用Pearson相關(guān)性分析，計(jì)算相關(guān)系數(shù)。對(duì)評(píng)價(jià)需要量的敏感指標(biāo)應(yīng)用REG程序進(jìn)行二次曲線[18][y=Ax2+Bx+C，式中y代表對(duì)應(yīng)指標(biāo)測(cè)定值，x代表飼糧硫胺素水平，A和B分別為回歸方程二次項(xiàng)和一次項(xiàng)的系數(shù)，C為方程的常數(shù)項(xiàng)，x0=-B/(2×A)的95%為飼糧硫胺素適宜水平]回歸分析。

2 結(jié) 果

2.1 飼糧硫胺素水平對(duì)1～63日齡快速型黃羽肉雞生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知，1～21日齡，試雞平均日采食量隨飼糧硫胺素水平的升高呈線性增加(P<0.05)；試雞21日齡活體重和平均日增重隨飼糧硫胺素水平的升高呈線性和二次曲線增加(P<0.05)，料重比呈線性和二次曲線降低(P<0.05)。隨著飼糧硫胺素水平的提高，試雞平均日增重(r=0.779，P<0.05)和料重比(r=-0.688，P<0.05)均呈顯著的劑量效應(yīng)關(guān)系；其中，當(dāng)飼糧硫胺素添加水平為3.0 mg/kg時(shí)，試雞平均日增重最高，較對(duì)照組提高了10.94%(P<0.05)，且料重比最低，較對(duì)照組降低了5.65%(P<0.05)。

表2 飼糧硫胺素水平對(duì)1～63日齡快速型黃羽肉雞生長(zhǎng)性能的影響Table 2 Effects of dietary thiamine levels on growth performance of fast-growing type yellow-feathered chickens during 1 to 63 days of age

22～42日齡和43～63日齡，飼糧硫胺素水平對(duì)試雞平均日采食量無(wú)顯著影響(P>0.05)。而隨著飼糧硫胺素水平的提高，22～42日齡，試雞平均日增重(r=0.655，P<0.05)和料重比(r=-0.523，P<0.05)均呈顯著的劑量效應(yīng)關(guān)系；43～63日齡，試雞平均日增重(r=0.578，P<0.05)和料重比(r=-0.456，P<0.05)也均呈顯著的劑量效應(yīng)關(guān)系。

2.2 飼糧硫胺素水平對(duì)21、42和63日齡快速型黃羽肉雞血漿抗氧化指標(biāo)的影響

由表3可知，21日齡，試雞血漿GSH含量和GSH/GSSG值隨飼糧硫胺素水平的升高呈線性增加(P<0.05)，且呈顯著的劑量效應(yīng)關(guān)系(r=0.455，P<0.05；r=0.678，P<0.05)，其中以4.2 mg/kg硫胺素添加水平組GSH/GSSG值最高；而血漿GSSG含量隨飼糧硫胺素水平的升高呈線性降低(P<0.05)，且呈顯著的劑量效應(yīng)關(guān)系(r=-0.699，P<0.05)；血漿T-AOC隨飼糧硫胺素水平的升高呈線性升高(P<0.05)，且呈顯著的劑量效應(yīng)關(guān)系(r=0.496，P<0.05)；血漿MDA含量隨飼糧硫胺素水平的升高呈線性和二次曲線降低(P<0.05)，且呈顯著的劑量效應(yīng)關(guān)系(r=-0.826，P<0.05)；飼糧硫胺素水平對(duì)試雞血漿GSH-Px活性無(wú)顯著影響(P>0.05)。

表3 飼糧硫胺素水平對(duì)21、42和63日齡快速型黃羽肉雞血漿抗氧化指標(biāo)的影響Table 3 Effects of dietary thiamine levels on plasma antioxidant indices of fast-growing yellow-feathered chickens at 21, 42 and 63 days of age

42日齡，試雞血漿GSH含量和GSH/GSSG值隨飼糧硫胺素水平的升高呈線性增加(P<0.05)，且呈顯著的劑量效應(yīng)關(guān)系(r=0.418，P<0.05；r=0.655，P<0.05)，其中仍以4.2 mg/kg硫胺素添加水平組GSH/GSSG值最高；而血漿GSSG含量隨飼糧硫胺素水平的升高呈線性降低(P<0.05)，且呈顯著的劑量效應(yīng)關(guān)系(r=-0.619，P<0.05)；血漿T-AOC隨飼糧硫胺素水平的升高呈線性升高(P<0.05)，且呈顯著的劑量效應(yīng)關(guān)系(r=0.329，P<0.05)；飼糧硫胺素水平對(duì)試雞血漿GSH-Px活性和MDA含量無(wú)顯著影響(P>0.05)。

63日齡，飼糧硫胺素水平對(duì)試雞血漿GSH和GSSG含量、GSH/GSSG值、GSH-Px活性和T-AOC均無(wú)顯著影響(P>0.05)；隨著飼糧硫胺素水平的升高，試雞血漿MDA含量呈線性降低(P<0.05)。

2.3 飼糧硫胺素水平對(duì)21、42和63日齡快速型黃羽肉雞大腦PDH和KGDH活性的影響

由表4可知，飼糧硫胺素水平對(duì)21、42和63日齡快速型黃羽肉雞大腦PDH和KGDH活性均無(wú)顯著影響(P>0.05)。

表4 飼糧硫胺素水平對(duì)21、42和63日齡快速型黃羽肉雞大腦PDH和KGDH活性的影響Table 4 Effects of dietary thiamine levels on activities of PDH and KGDH in brain of fast-growing yellow-feathered chickens at 21, 42 and 63 days of age nmol/(mg prot·min)

2.4 飼糧硫胺素水平對(duì)63日齡快速型黃羽肉雞肉品質(zhì)的影響

由表5可知，63日齡，試雞胸肌剪切力隨飼糧硫胺素水平的升高呈線性降低(P<0.05)，且呈顯著的劑量效應(yīng)關(guān)系(r=-0.267，P<0.05)。與對(duì)照組相比，4.2 mg/kg硫胺素添加水平組試雞胸肌剪切力顯著降低了25.12%(P<0.05)。此外，隨著飼糧硫胺素水平的升高，試雞胸肌24 h滴水損失有降低趨勢(shì)(P=0.052)，而飼糧硫胺素水平對(duì)試雞胸肌45 min pH和肉色均無(wú)顯著影響(P>0.05)。

表5 飼糧硫胺素水平對(duì)63日齡快速型黃羽肉雞肉品質(zhì)的影響Table 5 Effects of dietary thiamine levels on meat quality of fast-growing yellow-feathered chickens at 63 days of age

2.5 飼糧硫胺素水平對(duì)63日齡快速型黃羽肉雞胸肌風(fēng)味品嘗評(píng)分的影響

由表6可知，63日齡，試雞胸肌口感風(fēng)味評(píng)分隨飼糧硫胺素水平的升高呈線性升高(P<0.05)，且呈顯著的劑量效應(yīng)關(guān)系(r=0.503，P<0.05)；隨著飼糧硫胺素水平的升高，試雞胸肌咀嚼嫩度評(píng)分有升高趨勢(shì)(P=0.070)，而飼糧硫胺素水平對(duì)胸肌顏色與外形、氣味和多汁性均無(wú)顯著影響(P>0.05)。

表6 飼糧硫胺素水平對(duì)63日齡快速型黃羽肉雞胸肌風(fēng)味品嘗評(píng)分的影響Table 6 Effects of dietary thiamine levels on breast muscle flavor tasting score of fast-growing yellow-feathered chickens at 63 days of age

2.6 二次曲線回歸模型估測(cè)1～63日齡黃羽肉雞硫胺素需要量

由表7可知，通過(guò)二次曲線回歸方程方差分析和擬合度相關(guān)系數(shù)檢驗(yàn)，確定平均日增重和料重比的回歸方程有較高的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，二次曲線的擬合度較好，R2值在0.665～0.851。以平均日增重為效應(yīng)指標(biāo)，1～21日齡、22～42日齡和43～63日齡快速型黃羽肉雞飼糧硫胺素適宜水平分別為3.2、2.4和1.8 mg/kg；以料重比為效應(yīng)指標(biāo)，1～21日齡、22～42日齡和43～63日齡快速型黃羽肉雞飼糧硫胺素適宜水平分別為3.0、2.0和1.6 mg/kg。

表7 二次曲線回歸模型估測(cè)1～63日齡黃羽肉雞硫胺素需要量Table 7 Estimation of thiamine requirement for yellow-feathered chickens from 1 to 63 days of age by quadric regression model

3 討 論

3.1 飼糧硫胺素水平對(duì)1～63日齡快速型黃羽肉雞生長(zhǎng)性能的影響

硫胺素是B族維生素成員，主要以輔酶形式參與機(jī)體碳水化合物、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)代謝，對(duì)機(jī)體正常生理功能的維持具有重要作用[2]。家禽缺乏硫胺素會(huì)導(dǎo)致其采食量下降、心臟功能不足、精神沉郁、神經(jīng)麻痹、角弓反張和痙攣等癥狀[3]。因此，對(duì)家禽硫胺素需要量進(jìn)行科學(xué)評(píng)價(jià)是健康高效飼養(yǎng)的關(guān)鍵。黃葦?shù)萚5]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加1.0～4.0 mg/kg硫胺素可提高15～21日齡和22～49日齡肉仔雞體增重，但對(duì)采食量則無(wú)顯著影響。Xu等[19]報(bào)道，飼糧添加1.5 mg/kg硫胺素可顯著增加武昌魚生長(zhǎng)系數(shù)和代謝體重增長(zhǎng)率。有研究報(bào)道，飼糧含有1.0 mg/kg或更高水平的硫胺素并未使肉雞生長(zhǎng)性能發(fā)生明顯變化[6,20-21]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，飼糧硫胺素水平可顯著影響1～21日齡黃羽肉雞平均日采食量、平均日增重和料重比，呈劑量效應(yīng)關(guān)系，但對(duì)22～42日齡和43～63日齡黃羽肉雞平均日采食量、平均日增重和料重比則無(wú)顯著影響。相關(guān)研究結(jié)果不一致可能由于飼糧的組成、肉雞品種及飼養(yǎng)環(huán)境等因素不同引起。

3.2 飼糧硫胺素水平對(duì)1～63日齡快速型黃羽肉雞抗氧化能力的影響

硫胺素在調(diào)節(jié)能量代謝，特別是在協(xié)調(diào)線粒體和胞質(zhì)生化過(guò)程中發(fā)揮重要作用。線粒體是產(chǎn)生ATP的主要細(xì)胞器。線粒體生物合成和功能受損會(huì)導(dǎo)致氧化應(yīng)激。硫胺素作為線粒體營(yíng)養(yǎng)素，是調(diào)節(jié)線粒體呼吸鏈復(fù)合酶的重要輔助因子，可保護(hù)線粒體免于氧化應(yīng)激。硫胺素可以清除自由基，并抑制活性氧過(guò)度產(chǎn)生，增強(qiáng)線粒體功能，對(duì)機(jī)體抗氧化功能有提高作用[22-23]。硫胺素缺乏可引起氧化應(yīng)激并導(dǎo)致蛋白質(zhì)糖基化及DNA鏈斷裂升高，誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、自噬及凋亡[9]。GSH和GSH-Px具有清除活性氧簇和過(guò)氧化物以及減少羥基自由基形成的功能[24-25]。T-AOC是反映機(jī)體總抗氧化能力高低的重要指標(biāo)，MDA是機(jī)體脂質(zhì)過(guò)氧化的最終產(chǎn)物，含量升高提示機(jī)體脂質(zhì)過(guò)氧化程度增加[26]。劉秀玲等[12]在H2O2誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞EV304中添加不同水平硫胺素和核黃素預(yù)處理后，EV304拖尾細(xì)胞率顯著降低，DNA氧化損傷相關(guān)指標(biāo)也下降。Chen等[27]報(bào)道，飼糧添加1.0～5.0 mg/kg硫胺素對(duì)產(chǎn)蛋期蛋鴨血漿和肝臟總超氧化物歧化酶和GSH-Px活性無(wú)顯著影響，但血漿MDA含量有降低趨勢(shì)。在幼年劍魚中，飼料添加0.25～2.65 mg/kg硫胺素顯著提高了血漿過(guò)氧化氫酶、谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶、GSH-Px活性，增加了血漿GSH含量[10]。硫胺素缺乏會(huì)降低幼年草魚抗氧化酶以及核因子E2相關(guān)因子2的表達(dá)水平和活性[11]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，飼糧添加硫胺素線性降低了21和42日齡黃羽肉雞血漿GSSG含量，并升高了GSH/GSSG值，其中以4.2 mg/kg硫胺素添加水平組血漿GSH/GSSG值最高；21日齡，黃羽肉雞血漿MDA含量隨飼糧硫胺素水平的升高而呈先升高后降低的二次曲線變化；但飼糧硫胺素水平對(duì)63日齡血漿T-AOC、GSH-Px活性和GSH含量則無(wú)顯著影響。綜上所述，飼糧添加硫胺素可改善黃羽肉雞機(jī)體抗氧化能力，且呈劑量效應(yīng)關(guān)系，并以小雞階段較為明顯。

3.3 飼糧硫胺素水平對(duì)1～63日齡快速型黃羽肉雞輔酶功能的影響

硫胺素在動(dòng)物體內(nèi)以主要以TPP的生物活性形式存在，游離的硫胺素含量很低。轉(zhuǎn)酮醇酶、PDH和KGDH是以TPP為輔酶的酶，是調(diào)節(jié)機(jī)體碳水化合物、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)代謝的重要物質(zhì)[2]。PDH和KGDH是線粒體能量代謝的關(guān)鍵酶，直接參與能量合成、抗氧化應(yīng)激等過(guò)程。硫胺素缺乏會(huì)使PDH和KGDH活性下降，導(dǎo)致機(jī)體能量代謝和生物合成障礙、產(chǎn)生大量自由基導(dǎo)致機(jī)體氧化損傷和膽堿能神經(jīng)元變性[28]。由于大腦嚴(yán)重依賴線粒體ATP的產(chǎn)生，因此它極易受到硫胺素缺乏的影響。趙艷玲等[29]研究了硫胺素缺乏時(shí)小鼠韋尼克腦區(qū)轉(zhuǎn)酮醇酶及其他硫胺素相關(guān)酶活性的影響，結(jié)果表明，硫胺素缺乏顯著降低小鼠腦轉(zhuǎn)酮醇酶活性，但對(duì)PDH和KGDH活性未產(chǎn)生顯著影響。Olkowski等[6,16]研究了母體飼糧硫胺素水平對(duì)后代肉仔雞生長(zhǎng)發(fā)育的影響，結(jié)果表明，母體飼糧中添加2.0～32.0 mg/kg硫胺素可顯著增加出生后1～21日齡肉仔雞心臟硫胺素含量，并且提高心臟中KGDH活性；同時(shí)，肉仔雞在生長(zhǎng)過(guò)程中心臟組織硫胺素沉積明顯高于肝臟和大腦等組織。本試驗(yàn)結(jié)果也顯示，飼糧添加硫胺素對(duì)1～63日齡黃羽肉雞大腦PDH和KGDH活性也無(wú)顯著影響，這與前人研究結(jié)果基本相符，說(shuō)明不同酶對(duì)硫胺素缺乏敏感性不一致，其中轉(zhuǎn)酮醇酶相對(duì)于PDH和KGDH對(duì)硫胺素缺乏更敏感。

3.4 飼糧硫胺素水平對(duì)63日齡快速型黃羽肉雞肉品質(zhì)和風(fēng)味品嘗評(píng)分的影響

肉品質(zhì)是肉雞十分重要的經(jīng)濟(jì)性狀，適宜的營(yíng)養(yǎng)水平能夠改善肌肉品質(zhì)。pH、肉色、剪切力和滴水損失等指標(biāo)能直接反映肉品質(zhì)。剪切力越小，肉質(zhì)越嫩；滴水損失越小，系水力越高；肉色亮度(L*)值越低，肉色越暗；肉色紅度(a*)值越高，紅度越高；肉色黃度(b*)值越高，黃度越高；而當(dāng)L*值超過(guò)60說(shuō)明肉色蒼白[30]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，飼糧添加3.0和4.2 mg/kg硫胺素顯著降低了肉雞胸肌剪切力，24 h滴水損失有降低趨勢(shì)，提示硫胺素可有效改善黃羽肉雞胸肌肉品質(zhì)。研究表明，當(dāng)動(dòng)物機(jī)體處于氧化應(yīng)激狀態(tài)時(shí)，其產(chǎn)生的活性氧和活性氮等自由基會(huì)損傷蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和DNA結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致肌肉品質(zhì)下降[31-32]。因此，我們推測(cè)這可能與硫胺素緩解肌肉氧化應(yīng)激狀態(tài)有關(guān)，但相關(guān)作用機(jī)制仍需進(jìn)一步研究。

雞肉風(fēng)味的感官指標(biāo)包括顏色、氣味、鮮味、咀嚼嫩度和多汁性等。一般根據(jù)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)及規(guī)則，分?jǐn)?shù)越高說(shuō)明雞肉風(fēng)味越好。硫胺素是水溶性風(fēng)味前體物質(zhì)，可改善雞肉風(fēng)味[5]。王克華等[7]、聶曉慶等[8]、謝愷舟等[33]發(fā)現(xiàn)不同品種黃羽肉雞(如皋雞、文昌雞、瀘寧雞和京海黃雞等)及組織中硫胺素含量存在差異，均隨周齡增加而下降，腿肌硫胺素含量明顯高于胸肌。孟春玲[34]研究報(bào)道，胸肌硫胺素含量與肉雞體重間表現(xiàn)較高的遺傳相關(guān)性，呈顯著負(fù)相關(guān)。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，飼糧添加硫胺素可改善63日齡快速型黃羽肉雞胸肌口感風(fēng)味，且呈劑量效應(yīng)關(guān)系。因此，以上研究說(shuō)明，黃羽肉雞的肉質(zhì)風(fēng)味與品種、日齡及飼糧硫胺素水平有關(guān)。

3.5 黃羽肉雞飼糧硫胺素需要量

本試驗(yàn)條件下，通過(guò)劑量-效應(yīng)二次曲線回歸方程擬合進(jìn)行估測(cè)，以平均日增重為效應(yīng)指標(biāo)，1～21日齡、22～42日齡和43～63日齡快速型黃羽肉雞飼糧硫胺素適宜水平分別為3.2、2.4和1.8 mg/kg；以料重比為效應(yīng)指標(biāo)，1～21日齡、22～42日齡和43～63日齡快速型黃羽肉雞飼糧硫胺素適宜水平分別為3.0、2.0和1.6 mg/kg。而NRC(1994)[35]中，1～56日齡肉仔雞硫胺素需要量為1.8 mg/kg。我國(guó)《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T 33—2004)[13]中，1～63日齡黃羽肉雞硫胺素需要量同樣為1.8 mg/kg。本試驗(yàn)結(jié)果中，1～21日齡和22～42日齡階段硫胺素需要量比NRC(1994)和《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(2004)要偏高。這可能與黃羽肉雞營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(能量、蛋白質(zhì)等)攝入量及消化代謝差異有關(guān)。有研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中糖類物質(zhì)含量的增加會(huì)顯著提高動(dòng)物對(duì)硫胺素的需要量[36]。此外，黃羽肉雞生長(zhǎng)性能、抗氧化能力和消化代謝等指標(biāo)對(duì)飼糧硫胺素水平反應(yīng)較敏感，使其對(duì)硫胺素的需要量存在較明顯差異，這可能也是本試驗(yàn)所得黃羽肉雞硫胺素需要量高于NRC(1994)的主要原因。

4 結(jié) 論

本試驗(yàn)條件下，飼糧添加硫胺素可改善快速型黃羽肉雞生長(zhǎng)性能、抗氧化能力和肉品質(zhì)。通過(guò)二次曲線回歸方程估測(cè)，以平均日增重為效應(yīng)指標(biāo)，1～21日齡、22～42日齡和43～63日齡快速型黃羽肉雞飼糧硫胺素適宜水平分別為3.2、2.4和1.8 mg/kg；以料重比為效應(yīng)指標(biāo)，1～21日齡、22～42日齡和43～63日齡快速型黃羽肉雞飼糧硫胺素適宜水平分別為3.0、2.0和1.6 mg/kg。