澤瀉的化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展

張維君，韓東衛(wèi)，李冀

(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150040)

澤瀉為澤瀉科植物東方澤瀉Alismaorientale(Sam.)Juzep．或澤瀉Alismaplantag-aquaticaLinn的干燥塊莖，《中國藥典》2020年版收載的澤瀉藥材，性寒，味甘、淡，歸腎、膀胱經(jīng)，具有利水滲濕、泄熱、化濁調(diào)脂的功效，可用于小便不利、水腫脹滿、泄瀉尿少、痰飲眩暈、熱淋澀痛、高脂血癥[1]。為了更好地開發(fā)和利用資源，國內(nèi)外許多學(xué)者對(duì)澤瀉進(jìn)行了深入研究，本文對(duì)近年來澤瀉的有效化學(xué)成分和已明確的藥理作用進(jìn)行了歸納整理，以期為臨床應(yīng)用、新產(chǎn)品研究與開發(fā)提供參考依據(jù)。

1 化學(xué)成分

澤瀉中主要的化學(xué)成分提取時(shí)主要以蒸餾水、不同體積分?jǐn)?shù)的乙醇等為溶劑。對(duì)澤瀉中化學(xué)成分的分析，多應(yīng)用高效液相色譜法(HPLC)、超高效液相色譜-飛行時(shí)間質(zhì)譜(HPLC-TOF-MS)、指紋圖譜等方法。澤瀉含有多種化學(xué)成分，其中三萜、倍半萜為主要化學(xué)成分，次要化學(xué)成分包括二萜類、揮發(fā)油、含氮化合物、苯丙素及其他類[2]。

1.1 三萜類成分

三萜類成分目前在澤瀉中研究最為深入。有多個(gè)結(jié)構(gòu)變化較大的三萜類成分在澤瀉的中被發(fā)現(xiàn)，其中包括部分原萜烷型化合物及少數(shù)其他類型三萜化合物[3-4]。原萜烷型四環(huán)三萜類為澤瀉中主要的三萜類成分，該類成分化在目前澤瀉研究中最多，藥理活性也最為明確，依照生源途徑，澤瀉醇A(alisol A)及其乙酸酯等均由23-乙酰澤瀉醇B衍生而來。澤瀉藥材中三萜類化學(xué)成分結(jié)構(gòu)骨架見圖1。

圖1 澤瀉中三萜類化合物的結(jié)構(gòu)骨架

1.2 倍半萜類成分

愈創(chuàng)木烷型為從澤瀉屬中分離得到的主要倍半萜類化合物，其次為桉葉烷型及吉瑪烷型等。朱懷昌等[5]采用凝膠色譜等方法從澤瀉水提物中獲得兩個(gè)倍半萜單體，經(jīng)鑒定分別為環(huán)氧澤瀉烯(alismoxide)和澤瀉烯醇(alismol)。ZHANG J等[6]從澤瀉根莖中分離得到2個(gè)新的倍半萜和3個(gè)新的正倍半萜，其中倍半萜具有前所未有的環(huán)戊烯和呋喃酮天然骨架。通過核磁共振(1H、13C NMR、HSQC、HMBC、NOESY)、電子圓二色譜(ECD)和HR-ESI-MS數(shù)據(jù)分析對(duì)其結(jié)構(gòu)和相對(duì)立體化學(xué)進(jìn)行了鑒定。

1.3 二萜類成分

貝殼杉烷型四環(huán)二萜類化合物屬于澤瀉藥材中的二萜類成分，近年來，科學(xué)家們已經(jīng)從澤瀉中分離出為數(shù)不多的幾種該類化合物，其中包括彭國平等[7]均從澤瀉中分離出多個(gè)二萜類成分。

1.4 其他成分

澤瀉中其他類型的化合物包括揮發(fā)油、糖類、蛋白質(zhì)、含氮化合物、苯丙素等，如MIYAZAWA M等[8]采用氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)、相對(duì)風(fēng)味活性(RFA)等方法對(duì)澤瀉揮發(fā)油中具有特征氣味及有效氣味的成分進(jìn)行了鑒定，共鑒定出50種，占總油量的94.5%。揮發(fā)油的主要成分為胡烯醇(36.2%)、δ-欖香烯(12.4%)等。孫鳳靈等[9]從澤瀉的種子中發(fā)現(xiàn)29種揮發(fā)油成分，以飽和烷烴類和萜類為主。目前發(fā)現(xiàn)的其他類成分，約占澤瀉全部已知化合物的三分之一，進(jìn)一步擴(kuò)大了澤瀉的藥用價(jià)值。

2 藥理作用

依據(jù)臨床豐富的用藥經(jīng)驗(yàn)及現(xiàn)代學(xué)者廣泛的研究結(jié)果顯示，澤瀉的主要藥理作用如下。

2.1 對(duì)泌尿系統(tǒng)的影響

大量研究證實(shí)澤瀉具有利水滲濕、促進(jìn)水代謝的藥理活性，其對(duì)泌尿系統(tǒng)的影響主要包括利尿作用、抗草酸鈣結(jié)石及抗腎炎作用。

澤瀉是許多處方的重要組成部分，通常作為利尿劑使用。TAO Y等[10]提出了一種基于定量測(cè)定和藥理評(píng)價(jià)的中藥利尿成分的生物化學(xué)計(jì)量學(xué)追蹤策略。首先，建立了高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)定量測(cè)定澤瀉粗品和鹽品中6種主要三萜的方法。其次，以小鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，研究了粗制和鹽制東方紅的利尿作用。第三，采用主成分分析和典型相關(guān)分析，揭示了不同粗鹽加工樣品中6種主要三萜的含量與利尿作用的關(guān)系。最終確定Alisol B、Alisol F、Alisol A與利尿作用密切正相關(guān)。在臨床上，腎結(jié)石病較為普遍，而草酸鈣結(jié)石約占腎結(jié)石的80%以上，在腎結(jié)石里最為常見。區(qū)淑蘊(yùn)等[11]通過研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)乙二醇及阿法骨化醇誘導(dǎo)的大鼠泌尿系CaOx結(jié)石，能夠被澤瀉總?cè)铺崛∥镉行б种疲茰y(cè)其中含有抗泌尿系結(jié)石的活性成分，為澤瀉總?cè)铺崛∥镉糜诮Y(jié)石病復(fù)發(fā)的預(yù)防治療提供了充分的理論依據(jù)。CAO Z G等[12]澤瀉活性成分可下調(diào)大鼠尿石癥模型中bikunin mRNA的表達(dá)，減少大鼠腎臟草酸鈣的形成，抑制大鼠尿石癥模型中腎結(jié)石的形成。澤瀉被廣泛用于中藥的各種利尿和腎病治療。在臨床環(huán)境中，澤瀉既可以用作降脂藥，也可以用作腎小管間質(zhì)纖維化藥。CHEN H等[13]在研究中發(fā)現(xiàn)，ABA通過重建腸道微生物群失調(diào)和調(diào)節(jié)血壓以及smad7介導(dǎo)的Smad3磷酸化抑制來減輕腎纖維化。證明ABA通過改善腸道微生物群和調(diào)節(jié)血壓，是治療CKD的一個(gè)有前途的候選藥物。

2.2 對(duì)心血管系統(tǒng)的影響

澤瀉對(duì)心血管系統(tǒng)作用的主要成分是萜類。樂智勇等[14]在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，澤瀉湯對(duì)心肌缺血再灌注大鼠心電圖的影響顯著，與模型組相比，澤瀉湯組心電圖ST段抬高的程度有效降低，同時(shí)血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)也有明顯改善，說明澤瀉湯能夠?qū)π难芟到y(tǒng)產(chǎn)生一定的保護(hù)作用。胡雪梅等[15]在實(shí)驗(yàn)中明確了澤瀉中微量元素同心血管的關(guān)系，即澤瀉中Mn離子含量較高可能同治療動(dòng)脈硬化有關(guān)。

2.3 對(duì)免疫系統(tǒng)的影響及抗炎作用

澤瀉對(duì)免疫系統(tǒng)的影響，主要表現(xiàn)為抗炎和免疫調(diào)節(jié)作用。有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，機(jī)體細(xì)胞免疫功能可在澤瀉的作用下被降低，從而引發(fā)機(jī)體的抗原抗異性(即遲發(fā)型過敏反應(yīng)抑制的抗原抗異性)[16]。KIM H G等[17]研究表明澤瀉乙醇提取物(Ac-EE)劑量依賴性地抑制了由脂多糖(LPS)激活的RAW264.7細(xì)胞和腹腔巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的一氧化氮(NO)和前列腺素E2(PGE2)，Ac-EE可改善胃炎和結(jié)腸炎引起的炎癥癥狀，Ac-EE NF-κB/ap-1靶向的抗炎潛能是通過抑制Src和Syk以及TAK1與其底物蛋白MKK4/7之間的復(fù)合物而形成。黃小強(qiáng)等[18]通過研究發(fā)現(xiàn)，脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的急性肺損傷小鼠，經(jīng)澤瀉總?cè)聘深A(yù)后，肺組織濕重/干重比值(W/D)、TNF-α含量等，肺損傷評(píng)分均明顯降低，這可能與澤瀉總?cè)埔种企w內(nèi)炎性介質(zhì)釋放有關(guān)。

2.4 降血脂作用

澤瀉的醇提物、水提物均有良好的降血脂作用。侯少偉等[19]通過實(shí)驗(yàn)證明，高脂血癥大鼠的血脂水平在澤瀉的作用下會(huì)明顯降低，同時(shí)隨著血脂水平持續(xù)升高，其降脂作用在峰值后逐漸下降。XU X等[20]在研究中采用高脂高糖飲食聯(lián)合低劑量鏈脲佐菌素(HFS)注射的方法建立糖尿病大鼠模型，然后分別用澤瀉水提物(AOW)、澤瀉乙醇提物(AOE)或二甲醚(MET)處理大鼠。結(jié)果顯示，AOE組大鼠血清總膽固醇(TC)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平顯著低于HFS組。此外，與HFS組相比，AOE組調(diào)節(jié)參與脂質(zhì)代謝的腸道微生物菌群的相對(duì)豐度發(fā)生改變，同時(shí)AOE給藥后Fam13a、Insig1等表達(dá)水平均上調(diào)，推斷澤瀉的降血脂作用主要是通過改變腸道微生態(tài)和調(diào)節(jié)膽固醇代謝相關(guān)基因，特別是Insig1。QI C A等[21]在觀察Alisol B 23-acetate(AB23A)對(duì)絕經(jīng)后動(dòng)脈粥樣硬化(AS)的預(yù)防作用時(shí)發(fā)現(xiàn)其可以減少游離脂肪酸誘導(dǎo)的肝細(xì)胞中總膽固醇和甘油三酯的積累，不僅減少了原蛋白轉(zhuǎn)化酶subtilisin/kexin type 9(PCSK9)的合成，而且抑制了PCSK9的分泌。AB23A能夠顯著促進(jìn)ERα的表達(dá)。AB23A可通過ERα抑制PCSK9的合成和分泌，降低甘油三酯和膽固醇的積累，預(yù)防絕經(jīng)后AS。

2.5 保肝作用

澤瀉在臨床上常用來治療脂肪肝，酒精性肝損傷等肝臟疾病。HUR J M等[22]在實(shí)驗(yàn)中以溴苯(BB)中毒大鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，研究澤瀉根莖甲醇提取物(ME)及其主要成分澤瀉醇B 23-醋酸酯(ALB)對(duì)肝脂質(zhì)過氧化和藥物代謝酶的影響，發(fā)現(xiàn)代謝能和白蛋白預(yù)處理對(duì)肝臟抗氧化酶如谷胱甘肽還原酶和a-谷氨酰半胱氨酸合成酶無影響。ME和ALB對(duì)BB引起的谷胱甘肽含量降低也無影響。相比之下，ME恢復(fù)了BB誘導(dǎo)的環(huán)氧化物水解酶和谷胱甘肽s-轉(zhuǎn)移酶的下降，這兩種酶可以將有毒的環(huán)氧化物去除。ME還減弱了BB誘導(dǎo)的氨基比林n-去甲基化酶及苯胺羥化酶的增加，從而減少這兩種酶產(chǎn)生有毒中間產(chǎn)物。這種效果比作為陽性對(duì)照的抗壞血酸更明顯。白蛋白對(duì)代謝能的抗氧化酶活性有相似的影響，可能與代謝能的影響有關(guān)。杜金梁等[23]在研究中發(fā)現(xiàn)，經(jīng)澤瀉提取物處理后，肝臟中的轉(zhuǎn)氨酶指標(biāo)、總膽固醇、甘油三酯以及細(xì)胞色素酶P450含量及蛋白表達(dá)均出現(xiàn)不同程度變化，包括升高或降低，據(jù)此推測(cè)澤瀉提取物對(duì)油酸誘導(dǎo)的魚類脂肪肝細(xì)胞損傷具有保護(hù)作用。

2.6 降血糖作用

CHEN J X等[24]在研究中發(fā)現(xiàn)Alisol A-24-acetate(AA-24-a)顯著促進(jìn)了C2C12肌管中的葡萄糖攝取和GLUT4易位。AA-24-a增加了AMPK的磷酸化，使下游的兩種蛋白p38絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)和AKT 160 kDa底物(AS160)的磷酸化水平均上調(diào)。同時(shí)AA-24-a還可以通過AMPK通路體外促進(jìn)糖代謝。STO-609既能減弱AA-24-a誘導(dǎo)的葡萄糖攝取和GLUT4易位，又能削弱AA-24-a誘導(dǎo)的AMPK、p38 MAPK和AS160的磷酸化。JIA X K等[25]用澤瀉三萜類(ART)和澤瀉三萜混合物(ARTC)分別對(duì)高脂飲食誘導(dǎo)的IR小鼠和血小板處理的IR C2C12細(xì)胞進(jìn)行干預(yù)后，檢測(cè)IR小鼠的IPGTT、IPITT、體質(zhì)量、Hb1AC、FFA、TNF-α、MCP-1和IR相關(guān)基因表達(dá)(p-AMPK、p-IRS-1等)。結(jié)果顯示，ART減輕了高脂飲食誘導(dǎo)的小鼠骨骼肌IR，這一發(fā)現(xiàn)被ARTC進(jìn)一步證實(shí)。說明ART通過調(diào)控IR相關(guān)基因的表達(dá)，具有顯著的IR緩解作用，而三萜是澤瀉緩解IR活性的物質(zhì)基礎(chǔ)。DING C Y等[26]在比較澤瀉與格列齊特治療后藤崎(GK)大鼠糖尿病的作用時(shí)發(fā)現(xiàn)，澤瀉與格列齊特單藥治療均能有效降低空腹血糖。格列齊特作為一種單靶點(diǎn)藥物，具有較強(qiáng)的降血糖作用。然而，澤瀉作為一種混合物，也可以控制體重，改善葡萄糖耐受不良。

2.7 抗腫瘤作用

LOU C等[27]在研究中檢測(cè)了alisol A對(duì)人乳腺癌細(xì)胞的抑制作用，發(fā)現(xiàn)alisol A對(duì)MDA-MB-231細(xì)胞具有顯著的抗增殖作用，且該作用與自噬誘導(dǎo)有關(guān)。自噬抑制劑3-MA顯著逆轉(zhuǎn)了alisol a誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用。同時(shí)，3-MA顯著抑制了alisol a誘導(dǎo)的MDA-MB-231細(xì)胞的自噬。此外，alisol A通過抑制MMP-2和MMP-9的表達(dá)水平，顯著抑制MDA-MB-231細(xì)胞的遷移和侵襲。由此可見，alisol A可能是一種很有前途的乳腺癌治療藥物。ZHU H C等[28]在研究澤瀉中的Alisol B-23-acetate(AB23A)對(duì)偶氮甲烷(azoxymethane,AOM)和葡聚糖硫酸鈉(dextran sulfate sodium, DSS)誘導(dǎo)結(jié)腸炎相關(guān)結(jié)腸癌(CAC)的潛在預(yù)防作用時(shí)發(fā)現(xiàn)，AB23A干預(yù)可顯著降低TLR、NF-κB和MAPK的活化。同時(shí)降低p38、ERK、JNK的磷酸化水平，上調(diào)了黏蛋白-2和緊密連接蛋白的表達(dá)。AB23A干預(yù)后的小鼠腸道菌群多樣性提高，致病菌增殖量明顯減少，以上實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，AB23A在未來有可能用于治療CAC。陸彩等[29]在研究澤瀉醇類化合物與抑癌基因p53DNA的作用機(jī)理時(shí)發(fā)現(xiàn)，該類澤瀉醇發(fā)揮抗腫瘤作用的活性中心為p53DNA f鏈的DA4中磷酸上的氧原子，為抗癌藥物設(shè)計(jì)方面提供了中藥的依據(jù)。KWON M J等[30]在研究澤瀉提取物(ACE)對(duì)人胃癌細(xì)胞(AGS)的作用時(shí)發(fā)現(xiàn)，ACE抑制AGS細(xì)胞的生長，增加G1期以下細(xì)胞的比例，并使線粒體膜電位去極化。ACE誘導(dǎo)的胃癌細(xì)胞死亡與Bcl-2、survivin和Bax水平變化相關(guān)，并激活caspase-3和aspase-9。此外，它還參與了MAPKs的激活，增加了活性氧(ROS)。提示ACE可誘導(dǎo)AGS胃癌細(xì)胞凋亡，因此ACE可能具有治療胃癌的潛力。

3 展望

澤瀉是一味常用中藥，《神農(nóng)本草經(jīng)》將澤瀉列為上品，文獻(xiàn)記載有“養(yǎng)五臟，益氣力”之功，其化學(xué)成分多樣，藥理作用廣泛，在泌尿系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)及免疫系統(tǒng)均表現(xiàn)出良好的藥效。隨著高效、高靈敏的檢測(cè)技術(shù)和方法學(xué)的進(jìn)步，會(huì)有更多的課題對(duì)澤瀉進(jìn)行更加深入的研究，為其在臨床應(yīng)用上的推廣，提供更加堅(jiān)實(shí)的理論依據(jù)。