張瀚藝,張玉蕾,李長玲,朱春華,吳佳玲,盧家政,黃翔鵠
環(huán)境因子對波吉卵囊藻-沼澤紅假單胞菌藻菌體系氨氮吸收的影響
張瀚藝1,2,張玉蕾1,2,李長玲1,2,朱春華1,2,吳佳玲1,盧家政1,黃翔鵠1,2
(1. 廣東海洋大學水產(chǎn)學院,廣東 湛江 524088;2. 廣東海洋大學深圳研究院,廣東 深圳 518120)
【】研究溫度、鹽度與照度對波吉卵囊藻()-沼澤紅假單胞菌()藻菌體系氨氮吸收速率的影響。通過穩(wěn)定同位素標記技術(shù)測定不同溫度(15、20、25、30、35 ℃)、照度(0、1 500、2 500、3 500、4 500 lx)和鹽度(0、5、15、25、35)條件下藻菌體系對氨氮的吸收速率以及體系中各組分的貢獻率,采用單因素及正交實驗法分析3種環(huán)境因子對藻菌體系吸收氨氮的單一及聯(lián)合效應(yīng)。單因素實驗表明,在溫度、鹽度和照度分別為20 ~ 30 ℃、5 ~ 25、1 500 ~ 4 500 lx時,藻菌體系均可高效吸收氨氮,最高吸收速率分別為3.367、3.367、4.098 μg?ɡ-1?h-1。正交實驗表明,溫度30 ℃、鹽度15、照度3 500 lx為吸收氨氮的最高效環(huán)境條件組合,此時藻菌體系對氨氮的吸收速率為4.098 μg?ɡ-1?h-1,藻菌體系氨氮吸收速率受溫度影響最大,其次為鹽度,照度最?。辉跅l件相同時,藻菌體系對氨氮的吸收作用大于單一菌和單一藻,波吉卵囊藻在藻菌體系氨氮吸收中起主要作用。波吉卵囊藻與沼澤紅假單胞菌藻菌體系在環(huán)境變化較大時依然保持較高的氨氮吸收效率,在對蝦養(yǎng)殖水質(zhì)調(diào)控和改善中應(yīng)用前景廣闊。
藻菌聯(lián)合體;波吉卵囊藻;沼澤紅假單胞菌;氨氮吸收;環(huán)境因素
氨氮是對蝦養(yǎng)殖池重要的毒性指標之一,氨氮過高會導致養(yǎng)殖水體環(huán)境富營養(yǎng)化,產(chǎn)生藍藻水華等有害藻華[1-2],同時,氮元素過多會使病毒和有害細菌大量孳生,使對蝦持續(xù)處于亞健康狀態(tài)[3],滲透壓調(diào)節(jié)功能失常[4],不能正常排出氨氮,從而導致特異性免疫降低[5];高濃度氨氮還會進入對蝦體內(nèi),損傷其消化道免疫系統(tǒng),引發(fā)疾病[6]。養(yǎng)殖池塘中,微藻和細菌是水體氨氮的主要吸收者[7-9],同時微藻和細菌互利共生,較大微藻還為細菌提供附著生長的平臺,提高細菌對氮的轉(zhuǎn)化;因此,微藻和細菌可降低池塘中氨氮含量,維持生態(tài)環(huán)境相對穩(wěn)定。用特定的藻菌體系可有效降低養(yǎng)殖廢水的氨氮[10-12],選用合適的微藻和細菌,科學構(gòu)建藻菌體系對對蝦健康養(yǎng)殖有重大意義。
波吉卵囊藻()普遍分布于凡納濱對蝦養(yǎng)殖池,在養(yǎng)殖中后期較為常見。目前已有較多有關(guān)波吉卵囊藻氨氮吸收速率的研究。波吉卵囊藻對氨氮的吸收十分迅速[7,13],對氨氮的優(yōu)先吸收程度最高[14],構(gòu)建的氨氮吸收模型[15]對實際生產(chǎn)有重大指導意義,同時波吉卵囊藻可有效抑制弧菌和微囊藻生長[16],吸收水體重金屬離子較快[17],有較強的抗逆性和穩(wěn)定的種群增長速度[18],可在對蝦養(yǎng)殖后期較好地穩(wěn)定水環(huán)境,保障對蝦綠色、健康養(yǎng)殖。沼澤紅假單胞菌()是有代表性的不產(chǎn)氧光合細菌,在光照無氧及黑暗有氧環(huán)境中均可生存,有氨同化和反硝化機制[19],對氨氮的降解率較高[20-22],其營養(yǎng)豐富,被我國選為允許食用的飼料微生物之一[23-24],廣泛用于水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)。
目前,有關(guān)波吉卵囊藻和光合細菌的報道較多,但兩者聯(lián)用的氨氮去除效果以及光合細菌對氨氮的吸收速率尚不清楚。本研究用波吉卵囊藻和沼澤紅假單胞菌構(gòu)建藻菌體系,通過同位素標記法[13]分析該藻菌體系在不同環(huán)境條件下對氨氮的吸收速率,找出藻菌體系吸收氨氮的最適宜環(huán)境,為提高對蝦養(yǎng)殖系統(tǒng)氨氮轉(zhuǎn)化效率,實現(xiàn)對蝦生態(tài)養(yǎng)殖,減少環(huán)境污染提供基礎(chǔ)資料。
波吉卵囊藻為廣東海洋大學自行分離,實驗用培養(yǎng)基為人工海水[13]配制的“湛水107-13”培養(yǎng)基(去除培養(yǎng)基的氮源、維生素及生物素)。在指數(shù)生長期時取藻液,在25℃、4500 r/min條件下離心10 min,去上清液,加入去氮人工海水,洗滌重懸,備用。沼澤紅假單胞菌DSM5859購于北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司,用范尼爾氏酵母培養(yǎng)基純化并擴大培養(yǎng),在細菌處于指數(shù)生長期時取菌液,以700 r/min離心5 min,取上清液,以25 ℃、8 000 r/min條件離心10 min,去上清液,加入去氮人工海水重懸,備用。GF/F膜處理:實驗開始前將GF/F膜放入玻璃器皿中,用馬弗爐在450 ℃條件下中煅燒4 h至恒重,稱取并記錄濾膜質(zhì)量,置于干燥廣口瓶備用。實驗藥品15N同位素氯化銨(15N、14N豐度比為49∶1),所用抗生素為放線菌酮及質(zhì)量比為1∶1的青-鏈霉素[25]。
1.2.1 單因素實驗設(shè)計 在照度4 500 lx,鹽度15時,設(shè)溫度梯度為15、20、25、30、35 ℃。在溫度30 ℃和鹽度15時,設(shè)照度梯度為0、1 500、2 500、3 500、4 500 lx。在溫度30 ℃和照度4 500 lx時,設(shè)鹽度梯度為0、5、15、25、35。實驗在250 mL錐形瓶中進行,實驗體積為100 mL,每個環(huán)境因子設(shè)3個平行組。
1.2.2 實驗方法 根據(jù)預(yù)實驗得出的波吉卵囊藻和沼澤紅假單胞菌生長曲線,將經(jīng)人工海水洗滌并重懸的藻液、菌液用紫外光分光光度計在680、660 nm處的藻、菌光密度值,并將藻、菌濃度均調(diào)為5×106個/mL,然后根據(jù)預(yù)實驗的最佳比例,向兩個250 mL錐形瓶中加入7 mL藻液和3.5 mL菌液,構(gòu)建體積比2∶1的藻菌體系,混均藻菌,在兩瓶中加入放線菌酮以及青-鏈霉素,使其濃度均達到100 mg/L,靜置1 h,使藻菌體系中的藻和菌停止對氨氮的吸收,分別測定藻和菌對氨氮吸收速率。靜置后,加入N-NH4Cl(作為氮源)至N原子質(zhì)量濃度為0.72 mg/L,并添加15N-NH4Cl至N原子質(zhì)量濃度為0.08 mg/L,立刻放入SPX-250B-G型光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4 h,每隔1 h搖瓶,防止藻菌沉降和附壁。待培養(yǎng)過程結(jié)束,將20 mL水樣加至提前煅燒至恒重的 Whatman GF/F玻璃纖維濾膜上抽濾,抽濾結(jié)束時立即添加5 mL去離子水繼續(xù)抽濾,用于去除附著的15N同位素,降低實驗誤差。
1.2.3 樣品15N測定及指標計算 將附有藻體和菌體的濾膜置于60 ℃烘箱烘干24 h至恒重。刮取1 mg左右樣品粉末,稱量質(zhì)量,用Pressed Tin Capsules 5 × 9 mm錫囊包裝,用EA Isolink元素分析儀(賽默飛世爾科技公司)測定樣品總氮的質(zhì)量分數(shù)(%),用253 Plus 同位素質(zhì)譜儀(賽默飛世爾科技公司)測定樣品的δ15N。根據(jù)下式計算樣品中15N豐度(15N)、氨氮吸收速率(μg·g-1·h-1)、藻/菌體對氨氮吸收貢獻率(%)。
(15N) = (δ15N / 1 000 + 1) ×sta, (1)
式中,δ15N為樣品中15N、14N豐度比與標準大氣壓下標準物中15N、14N豐度比的千分偏差,sta為標準大氣壓下自然環(huán)境中15N、14N豐度比(0.003 65)。
, (2)
式中,(15N)n為樣品中15N在標準大氣壓下的自然豐度,(15N)S為培養(yǎng)結(jié)束時藻體或菌體中的15N豐度,(15N)enr為加入同位素示蹤劑后培養(yǎng)基中15N初始豐度,(NPON)為樣品中總氮質(zhì)量分數(shù)(μg/g),為培養(yǎng)時間(h)。
(%) =x/u[13], (3)
式中,x為藻體或菌體對氨氮的吸收速率,u為藻菌體系整體對氨氮的吸收速率。
1.2.4 正交實驗 根據(jù)單因子實驗結(jié)果,選取溫度、鹽度和照度3個環(huán)境指標,構(gòu)建三因素三梯度正交實驗,共9組(表1),每組設(shè)計3個平行組。具體操作步驟同1.2.2和1.2.3。
表1 正交實驗因素水平
1.2.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計 用Excel 2019處理數(shù)據(jù),繪制圖表,用SPASS 26對藻菌體系氨氮吸收速率進行單因素方差分析及鄧肯多重比較,檢驗各組數(shù)據(jù)間的差異,0.05。
圖1(A) 表明,溫度對藻菌體系吸收氨氮有顯著影響,在30 ℃時,藻菌體系吸收速率平均為3.367 μg?ɡ-1?h-1,顯著高于其他梯度(< 0.05)。圖1(B) 表明,波吉卵囊藻受溫度影響顯著,在30 ℃時,波吉卵囊藻吸收速率平均為2.856 μg?ɡ-1?h-1,顯著高于其他梯度(< 0.05);但溫度過高或過低會抑制其對氨氮的吸收。溫度對光合細菌吸收氨氮的速率有顯著影響(< 0.05),隨溫度升高,光合細菌對氨氮吸收速率呈先升后降的變化趨勢,20 ℃時吸收速率平均0.727 μg?ɡ-1?h-1,之后有降低趨勢,35 ℃時吸收速率平均0.398 μg?ɡ-1?h-1(圖1(C)),表明較低溫度適合光合細菌對氨氮的吸收。在30 ℃時,波吉卵囊藻光合細菌藻菌體系中,波吉卵囊藻貢獻率最大,為84.8%,光合細菌貢獻率最小(15.2%),光合細菌在35 ℃時貢獻率達到最大(67.2%)(圖2)。
凡含一個相同字母則差異無統(tǒng)計學意義(P > 0.05)The data with a same letter indicate no significant difference between them(P > 0.05)
圖3(A)可見,照度對藻菌體系氨氮吸收有顯著影響,在照度為3 500 lx時平均4.098 μg?ɡ-1?h-1,顯著高于其他梯度(< 0.05)。波吉卵囊藻對氨氮吸收受照度影響較為明顯,3 500、4 500 lx組的吸收速率顯著優(yōu)于其余梯度(< 0.05),平均值分別為2.745、2.856 μg?ɡ-1?h-1,較暗環(huán)境不利于波吉卵囊藻對氨氮的吸收(圖3(B))。隨照度的增加,光合細菌吸收氨氮的速率呈先升后降變化,照度3 500 lx時吸收速率最高,為1.354 μg?ɡ-1?h-1,4 500 lx時吸收速率最低,差異均顯著(< 0.05),為0.512 μg?ɡ-1?h-1,照度過高或過低會抑制光合細菌對氨氮等吸收(圖3(C))。
圖2 不同溫度對菌、藻氨態(tài)氮吸收貢獻率的影響
凡含一個相同字母則差異無統(tǒng)計學意義(P > 0.05)The data with a same letter indicate no significant difference between them(P > 0.05)
在照度3 500 lx時,波吉卵囊藻光合細菌藻菌體系的波吉卵囊藻和光合細菌貢獻率分別為66.9%和33.1%,且波吉卵囊藻在4 500 lx時貢獻率最大(84.8%),光合細菌在2 500 lx時貢獻率最大(34.5%)(圖4)。
鹽度對藻菌體系氨氮吸收有顯著影響,鹽度15組藻菌體系吸收速率平均3.367 μg?ɡ-1?h-1,顯著高于其他組(< 0.01)(圖5(A))。鹽度對波吉卵囊藻吸收氨氮的速率有顯著影響,鹽度15組吸收速率平均為2.856 μg?ɡ-1?h-1,顯著高于其他鹽度組(< 0.05),半咸水適合波吉卵囊藻生長,鹽度過高和過低不利于波吉卵囊藻吸收氨氮(圖5(B))。光合細菌受鹽度影響較為顯著,鹽度為5時吸收速率最大,為1.417 μg?ɡ-1?h-1,鹽度為35時吸收速率最低,為0.105 μg?ɡ-1?h-1,差異均顯著(< 0.05),較低的鹽度適合光合細菌對氨氮的吸收,鹽度過高則抑制吸收(圖5(C))。鹽度為15時,波吉卵囊藻光合細菌藻菌體系中,波吉卵囊藻和光合細菌吸收氨氮的貢獻率分別為84.8%和15.2%,波吉卵囊藻為氨氮的主要吸收者,鹽度35組波吉卵囊藻貢獻率最大,為93%。鹽度0組光合細菌貢獻率最大,為85.4%(圖6)。
圖4 照度對菌、藻氨態(tài)氮吸收貢獻率的影響
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圖6 鹽度對菌、藻氨態(tài)氮吸收貢獻率的影響
菌藻體系正交實驗分析結(jié)果見表2、3。圖1、圖3、圖5及表2可見,溫度、鹽度和照度水平為1時吸收速率分別為2.032、1.755和3.211 μg?ɡ-1?h-1;水平2時分別為3.367、3.367和4.098 μg?ɡ-1?h-1;水平3時分別為0.592、2.088和3.367 μg?ɡ-1?h-1;極差值分別為2.775、1.612和0.887 μg?ɡ-1?h-1。菌藻體系氨氮的吸收受溫度影響最大,其次是鹽度,照度最小。菌藻體系吸收氨態(tài)氮的最佳環(huán)境條件為溫度30 ℃,鹽度15,照度3 500 lx。在該環(huán)境條件下,藻菌體系吸收速率(4.098 μg?ɡ-1?h-1)大于單一的藻(1.822 μg?ɡ-1?h-1)和菌(0.628 μg?ɡ-1?h-1)。
表2 正交實驗L9(33)結(jié)果
表3 正交實驗方差分析
溫度影響微藻和細菌的生長與繁殖,對波吉卵囊藻和光合細菌吸收氨氮的影響顯著。在適宜溫度區(qū)間內(nèi),隨著溫度的升高,藻菌體系對氨氮的吸收速率與溫度呈正相關(guān),但當超過某個溫度時,吸收效率陡然降低[26-27],王志紅等[28]、敖靜等[29]指出,溫度主要通過影響微藻、細菌體內(nèi)的酶活性來影響物質(zhì)代謝,在適宜溫度范圍內(nèi),微藻、細菌體內(nèi)酶活性與溫度呈正相關(guān),物質(zhì)代謝相應(yīng)升高,當超出適溫范圍時,酶活性降低甚至失活,物質(zhì)代謝隨之降低,從而影響微藻和細菌對各種營養(yǎng)物質(zhì)的吸收效率。本研究中,波吉卵囊藻-光合細菌藻菌體系在20 ~ 30℃時,對氨氮的吸收速率較高,吸收速率為1.910 ~ 3.367 μg?ɡ-1?h-1,其中波吉卵囊藻超過30℃時,對氨氮的吸收效率降低,而光合細菌在溫度超過20℃時吸收效率有降低趨勢,至35 ℃時顯著降低,這與我國南方對蝦養(yǎng)殖池塘溫度變化范圍20 ~ 34℃[8]相一致,說明波吉卵囊藻與光合細菌藻菌體系在對蝦大部分養(yǎng)殖周期中可發(fā)揮良好的去除氨氮作用,適宜充當池塘中穩(wěn)定水質(zhì)的“緩沖劑”。
鹽度是影響微藻、細菌生長代謝的主要環(huán)境條件之一,隨著環(huán)境鹽度的改變,細胞內(nèi)部滲透壓隨之改變,藻、菌細胞膜對不同離子、其他營養(yǎng)物質(zhì)、代謝廢物的通透性發(fā)生變化,進而影響微藻、細菌的代謝,過高或過低的鹽度脅迫會抑制細胞正常功能,最終降低微藻和細菌對氮的吸收效率[30]。任佳佳等[31]研究表明,鹽度過高顯著降低波吉卵囊藻的光合作用效率,而在鹽度為10左右的適宜區(qū)間內(nèi)則會增強其光合作用。何義進[32]研究發(fā)現(xiàn),適宜的鹽度有利于光合細菌對氨氮吸收,較高的鹽度會顯著降低其對于氨氮的去除效率。低鹽度脅迫下,藻體細胞內(nèi)會產(chǎn)生大量的活性氧,致使光合作用相關(guān)酶活性降低,從而抑制光合效率[33],高鹽度脅迫下,淡水小球藻(sp)光合作用產(chǎn)物偏向于脂質(zhì)而非蛋白質(zhì)[34-35],從而降低其對氨氮的吸收。本研究顯示,鹽度15最適于波吉卵囊藻-光合細菌藻菌體系對氨氮的吸收轉(zhuǎn)化,并在鹽度較低和較高時對氨氮的吸收數(shù)率也較高,保持在1.197 μg?ɡ-1?h-1以上,這與目前對蝦養(yǎng)殖多以半咸水養(yǎng)殖和淡水養(yǎng)殖的模式相符。
照度是影響植物生長最常見的環(huán)境指標,由于光合細菌與波吉卵囊藻均可進行光合作用,照度可通過影響細胞內(nèi)光合作用強度和酶活性來影響物質(zhì)代謝[36],從而影響藻菌體系對氨氮的吸收效率,只有在適宜范圍內(nèi),照度才能維持或提高細胞的代謝,照度過低會使藻和光合細菌細胞得不到充足的供能,而當照度超過光飽和點,則會產(chǎn)生光氧化脅迫,破壞色素體,抑制細胞生長[37],從而抑制其對氨氮的吸收。楊敏志等[18]研究表明,不利的照度顯著影響波吉卵囊藻繁殖模式,在正常情況下,波吉卵囊藻主要以4似親孢子型進行繁殖,而在不利情況下,則以2和3似親孢子型進行繁殖,減慢了其增殖速度。文世勇等[38]研究發(fā)現(xiàn),隨著照度的增加,藻類的生長呈先升后降的趨勢,與本研究中藻菌體系的結(jié)果相符合。本研究中,波吉卵囊藻-光合細菌藻菌體系隨著照度的增加,對氨氮的吸收速率呈先升下降的趨勢,在3 500 lx時達到最大值4.098 μg?ɡ-1?h-1,而即使在沒有光照的條件下,該藻菌體系吸收速率仍有較高水平,維持在2.212 μg?ɡ-1?h-1以上。鑒于對蝦養(yǎng)殖中池塘底部難以清理,該藻菌體系適用于維持池塘底部的清潔,有利于對蝦健康養(yǎng)殖。
微藻和細菌廣泛分布于各種水體,是池塘中氨氮的主要吸收者[7-9]。運用藻菌體系可顯著降低水體氨氮含量,微藻和細菌互利共生,細菌能將大分子的有機物分解為便于微藻吸收利用的小分子物質(zhì),細菌代謝產(chǎn)生的二氧化碳是微藻光合作用的最優(yōu)碳源,微藻光合作用產(chǎn)生的氧可保障細菌呼吸所需;因此,藻菌體系的氨氮吸收速率較單一的藻、菌快,體系較單一藻、菌更易存活,且藻和菌對于環(huán)境的適應(yīng)范圍不同,擴寬了藻菌體系的使用范圍,使生產(chǎn)流程更加穩(wěn)定。本研究的預(yù)實驗結(jié)果表明,不同比例藻、菌構(gòu)建的藻菌體系對氨氮的吸收速率均大于單一藻、菌,這與曲美雪等[39]、王書亞等[40]的結(jié)果一致,且藻菌體系在溫度20 ~ 30 ℃、鹽度5 ~ 25、照度1 500 ~ 4 500 lx條件下均可高效吸收氨氮,較單一的波吉卵囊藻[24]和光合細菌[15],其對氨氮高效吸收的環(huán)境條件區(qū)間更寬,表明藻菌體系對環(huán)境的適應(yīng)能力較單一藻、菌更大,因此,在實際生產(chǎn)中運用藻菌體系進行環(huán)境調(diào)控,較單一藻或菌更有應(yīng)用潛力。
波吉卵囊藻和光合細菌均為對蝦養(yǎng)殖池塘常見的優(yōu)勢種,通過人為構(gòu)建養(yǎng)殖池的藻菌體系,可使養(yǎng)殖池生物群落保持相對穩(wěn)定,通過調(diào)節(jié)藻菌構(gòu)成比例及各種環(huán)境因子,可優(yōu)化藻菌體系對水體的凈化能力。陽龍江等[41]及劉梅等[24]指出,光合細菌與波吉卵囊藻對于氨氮去除效率均較佳。已有研究指出,在對蝦養(yǎng)殖前中期,細菌和浮游微藻對氮吸收的貢獻均不可忽視[25],自然環(huán)境中細菌對溶解態(tài)氮的吸收貢獻率在11% ~ 61%之間[42]。本研究中,波吉卵囊藻對氨氮吸收的平均貢獻率為63.3%,光合細菌為36.7%,波吉卵囊藻對氨氮吸收起主要作用,光合細菌對氨氮吸收的貢獻率為6.9% ~ 85.4%,變化范圍較大。波吉卵囊藻和光合細菌對于氨氮吸收的最適環(huán)境條件不同,當環(huán)境不利于波吉卵囊藻時,光合細菌恰處于較好的狀態(tài);當環(huán)境條件不利于光合細菌時,波吉卵囊藻對氨氮的吸收速率較高,從而造成兩者對吸收氨氮貢獻率的范圍增大。本研究的藻菌體系各組分間形成互補關(guān)系,在養(yǎng)殖池塘不同環(huán)境條件下均可對氨氮保持較高的吸收水平,有益于對蝦養(yǎng)殖的健康與穩(wěn)定。本研究表明,溫度30 ℃、鹽度15、照度3 500 lx是藻菌體系吸收氨氮效率最高的環(huán)境條件,吸收氨氮受溫度影響最大,其次為鹽度以及照度。在對蝦養(yǎng)殖中,可通過人為搭建大棚或撤下大棚來控制照度,通過抽取較低溫度的地下水降低池塘溫度,通過引進海水、添加人工海鹽或加入淡水調(diào)節(jié)鹽度,從而調(diào)節(jié)藻菌體系對氨氮的吸收效率。
綜上,本研究選用的波吉卵囊藻-光合細菌藻菌體系對于氨氮的吸收效率較高,在溫度20 ~ 30 ℃、鹽度5~25、照度1 500 ~ 4 500 lx的條件下均可高效吸收氨氮,環(huán)境條件與對蝦養(yǎng)殖生產(chǎn)中的自然條件基本一致,可適用于對蝦養(yǎng)殖的整個流程,因此該菌藻體系可用來調(diào)控和改善對蝦養(yǎng)殖生產(chǎn)的水質(zhì)環(huán)境。
[1] 彭建, 周凡, 貝亦江, 等. 南美白對蝦養(yǎng)殖尾水生態(tài)處理技術(shù)研究進展[J]. 河北漁業(yè), 2019(11): 53-56.
[2] 郭志文. 南美白對蝦養(yǎng)殖池塘藍藻水華處理舉措[J]. 漁業(yè)致富指南, 2019(22): 56-57.
[3] 彭聰聰, 李卓佳, 曹煜成, 等. 蝦池浮游微藻與養(yǎng)殖水環(huán)境調(diào)控的研究概況[J]. 南方水產(chǎn), 2010, 6(5): 74-80.
[4] 熊大林, 段亞飛, 徐敬明, 等. 凡納濱對蝦鰓組織對高溫和氨氮脅迫的生理響應(yīng)[J]. 南方農(nóng)業(yè)學報, 2020, 51(9): 2296-2303.
[5] 傅純潔, 尼倩, 葛溧, 等. 氨氮對對蝦毒性的風險評估[J]. 水產(chǎn)養(yǎng)殖, 2019, 40(2): 40-43.
[6] 袁瑞鵬, 劉建勇, 張嘉晨, 等. 凡納濱對蝦群體雜交與自交F1低溶氧與高氨氮耐受性比較[J]. 中國水產(chǎn)科學, 2015, 22(3): 410-417.
[7] LIU M, HUANG X H, ZHANG R, et al. Uptake of urea nitrogen byborgei in prawn () aquaculture ponds[J]. Bulletin of Environmental Contamination and Toxicology, 2018, 101(5): 586-591.
[8] 黃翔鵠. 對蝦高位池水環(huán)境養(yǎng)殖污染和浮游微藻生態(tài)調(diào)控機制研究[D]. 上海: 東華大學, 2013.
[9] 宋彩風, 張晏菘, 李福威, 等. 增強型PVA包埋硝化細菌及降解氨氮廢水的研究[J]. 應(yīng)用化工, 2021, 50(3): 610-614.
[10] 孫珮銘, 邱萌萌, 吳玉斌, 等. 小球藻與硝化細菌對食品廠污水中氨氮和總氮的去除研究[J]. 山東科技大學學報(自然科學版), 2021, 40(1): 43-49.
[11] RIA?O B, MOLINUEVO B, GARCíA-GONZáLEZ M C. Treatment of fish processing wastewater with microalgae-containing microbiota[J]. Bioresource Technology, 2011, 102(23): 10829-10833.
[12] 劉冉, 王琛, 吳雪, 等. 菌藻聯(lián)合處理對不同底質(zhì)刺參養(yǎng)殖池塘的改良[J]. 煙臺大學學報(自然科學與工程版), 2016, 29(1): 40-46.
[13] 劉梅, 黃翔鵠, 李長玲, 等. 不同條件下波吉卵囊藻對氨氮的吸收速率[J]. 廣東海洋大學學報, 2012, 32(1): 29-34.
[14] 黃翔鵠, 劉梅, 周美華, 等. 波吉卵囊藻對養(yǎng)殖水體溶解態(tài)氮吸收規(guī)律的研究[J]. 漁業(yè)現(xiàn)代化, 2012, 39(3): 34-39.
[15] LIU M, HUANG X H, LI C L, et al. Study on the uptake of dissolved nitrogen byborgei in prawn () aquaculture ponds and establishment of uptake model[J]. Aquaculture International, 2020, 28(4): 1445-1458.
[16] WANG X Q, ZHANG Y L, LI C L, et al. Allelopathic effect ofborgei culture on[J]. Environmental Technology, 2020, 26: 1-10.
[17] 江東, 李長玲, 黃翔鵠, 等. 波吉卵囊藻()對Cu2+、Zn2+吸附研究[J]. 廣東海洋大學學報, 2011, 31(6): 50-54.
[18] 楊敏志, 李長玲, 黃翔鵠, 等. 氮濃度、溫度和照度對波吉卵囊藻繁殖模式的影響[J]. 廣東海洋大學學報, 2019, 39(5): 44-49.
[19] 金春英, 朱筆通, 趙春貴. 沼澤紅假單胞菌CQV97對養(yǎng)殖水體無機三態(tài)氮的去除機制[J]. 華僑大學學報(自然科學版), 2019, 40(6): 779-785.
[20] 張曉波, 朱筆通, 熊慧, 等. 沼澤紅假單胞菌()CQV97對無機三態(tài)氮共存水體中氮素的去除效率及其影響因素[J]. 氨基酸和生物資源, 2015, 37(4): 38-45.
[21] 信艷杰, 胡曉娟, 曹煜成, 等. 光合細菌菌劑和沼澤紅假單胞菌對實驗水體氮磷營養(yǎng)鹽和微生物群落的影響[J]. 南方水產(chǎn)科學, 2019, 15(1): 31-41.
[22] 文剛, 汪彬, 劉標, 等. 沼澤紅假單胞菌R-3去除水體中氨氮的特性研究[J]. 湖南農(nóng)業(yè)科學, 2017(6): 49-51.
[23] XU Q Q, YAN H, LIU X L, et al. Growth performance and meat quality of broiler chickens supplemented within drinking water[J]. British Poultry Science, 2014, 55(3): 360-366.
[24] 趙玥, 趙春貴, 陳龑, 等. 沼澤紅假單胞菌CQV97菌株對污染水體三氮去除特性研究[J]. 山西大學學報(自然科學版), 2012, 35(3): 557-562.
[25] 劉新宇. 浮游微藻和細菌代謝抑制劑的篩選及其對蝦池溶解態(tài)氮吸收的研究[D]. 湛江: 廣東海洋大學, 2014.
[26] ANTONIOU P, HAMILTON J, KOOPMAN B, et al. Effect of temperature and pH on the effective maximum specific growth rate of nitrifying bacteria[J]. Water Research, 1990, 24(1): 97-101.
[27] 王培明, 李長玲, 黃翔鵠, 等. 溫度、鹽度和照度對菌藻聯(lián)合體氨氮吸收的影響[J]. 廣東海洋大學學報, 2020, 40(3): 40-47.
[28] 王志紅, 崔福義, 安全. 水溫與營養(yǎng)值對水庫藻華態(tài)勢的影響[J]. 生態(tài)環(huán)境, 2005, 14(1): 10-15.
[29] 敖靜, 李楊, 劉曉輝, 等. 雞糞堆肥發(fā)酵過程微生物數(shù)量與溫度及酶變化的相關(guān)性研究[J]. 微生物學雜志, 2020, 40(5): 67-72.
[30] SAUM S H, PFEIFFER F, PALM P, et al. Chloride and organic osmolytes: a hybrid strategy to cope with elevated salinities by the moderately halophilic, chloride-dependent bacteriumhalophilus[J]. Environmental Microbiology, 2013, 15(5): 1619-1633.
[31] 任佳佳, 洪廷, 張寧, 等. 鹽度對波吉卵囊藻葉綠素熒光參數(shù)的影響及PsbA基因的克隆與表達分析[J]. 廣東海洋大學學報, 2020, 40(3): 30-39.
[32] 何義進. 微生態(tài)制劑降解養(yǎng)殖水體氨氮及亞硝酸鹽的研究[D]. 南京: 南京農(nóng)業(yè)大學, 2007.
[33] LIU W H, MING Y, LI P, et al. Inhibitory effects of hypo-osmotic stress on extracellular carbonic anhydrase and photosynthetic efficiency of green algapossibly through reactive oxygen species formation[J]. Plant Physiology and Biochemistry, 2012, 54: 43-48.
[34] SRIVASTAVA G, NISHCHAL, GOUD V V. Salinity induced lipid production in microalgae and cluster analysis (ICCB 16-BR_047)[J]. Bioresource Technology, 2017, 242: 244-252.
[35] LI X Y, YUAN Y Z, CHENG D J, et al. Exploring stress tolerance mechanism of evolved freshwater strainsp. S30 under 30?g/L salt[J]. Bioresource Technology, 2018, 250: 495-504.
[36] 高靜思, 朱佳, 董文藝. 光照對我國常見藻類的影響機制及其應(yīng)用[J]. 環(huán)境工程, 2019, 37(5): 111-116.
[37] 賈虎森, 李德全, 韓亞琴. 高等植物光合作用的光抑制研究進展[J]. 植物學通報, 2000, 35(3): 218-224.
[38] 文世勇, 劉希真, 王紫竹, 等. 不同光照條件下米氏凱倫藻和東海原甲藻生長的溫度生態(tài)幅[J]. 生態(tài)學報, 2018, 38(14): 5187-5194.
[39] 曲美雪. 探究藻-菌聯(lián)合體系去除生活污水中的營養(yǎng)物質(zhì)[D]. 大連: 大連理工大學, 2019.
[40] 王書亞. 小球藻–細菌共培養(yǎng)體系的構(gòu)建及用于沼液廢水處理的研究[D]. 煙臺: 煙臺大學, 2019.
[41] 陽龍江, 韓璐璐, 楊成年, 等. 一株內(nèi)循環(huán)流水養(yǎng)殖池塘光合細菌的分離鑒定及氮磷去除能力的研究[J]. 漁業(yè)現(xiàn)代化, 2021, 48(1): 33-40.
[42] KORTH F, DEUTSCH B, LISKOW I, et al. Uptake of dissolved organic nitrogen by size-fractionated plankton along a salinity gradient from the North Sea to the Baltic Sea[J]. Biogeochemistry, 2012, 111(1/2/3): 347-360.
Effects of Environmental Factors on Ammonia Nitrogen Absorption in Microalgal-Bacteria Consortia ofand
ZHANG Han-yi1,2, ZHANG Yu-lei1,2, LI Chang-ling1,2, ZHU Chun-hua1,2, WU Jia-ling1, LU Jia-zheng1, HUANG Xiang-hu1,2
(1.,,524088,; 2.,,518120,)
【】To study the effects of temperature, salinity and illuminance on the ammonia nitrogen absorption characteristics in the consortia ofand. 【】The ammonia nitrogen uptake rates and respective contribution rates of the microalgal-bacterial consortia were measured under different temperatures (15, 20, 25, 30, 35 ℃), illuminance (0, 1 500, 2 500, 3 500, 4 500 lx) and salinity(0, 5, 15, 25, 35) using the stable isotope labeling technique, and the effects of environmental factors on algae-bacteria system absorbing ammonia nitrogen were analyzed by single factor and orthogonal test. 【】The single factor tests showed that temperature, salinity and illuminance had significant effects on the ammonia nitrogen uptake rate of the bacteria-algal complex (< 0.05),and the absorption rate of ammonia nitrogen was higher under 20 – 30 ℃, salinity 5 – 25, and 1 500 – 4 500 lx, the highest absorption rate were 3.367, 3.367, and 4.098 μg?ɡ-1?h-1. The orthogonal tests showed that the optimal combination of environmental conditions was 30 ℃, salinity 15, and 3 500 lx, with the ammonia nitrogen absorption rate of the consortia, reached 4.098 μg?ɡ-1?h-1. Temperature was the main factor affecting the ammonia nitrogen absorption rate of the consortia, followed by salinity and illuminance. The uptake of ammonia nitrogen in the algal system was greater than that of single bacteria and single algae, andplayed a major role in the uptake of ammonia nitrogen in the system. 【】The microalgal-bacteria consortia in this study can maintain high efficiency of ammonia nitrogen absorption under greater environmental changes, which would have a broad application prospect in the control and improvement of water quality in shrimp culture.
microalgal-bacteria consortia;;; ammonia nitrogen absorption; environmental factor
S968.22;X52
A
1673-9159(2021)06-0001-08
10.3969/j.issn.1673-9159.2021.06.001
張瀚藝,張玉蕾,李長玲,等. 環(huán)境因子對波吉卵囊藻-沼澤紅假單胞菌藻菌體系氨氮吸收的影響[J]. 廣東海洋大學學報, 2021, 41(6): 1-8.
2021-08-02
廣東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系創(chuàng)新團隊建設(shè)專項資金(2019KJ149);廣東省重點領(lǐng)域研發(fā)計劃項目(2020B0202010009);國家重點研發(fā)計劃“藍色糧倉科技創(chuàng)新”重點專項(SQ2020YFD090053-05);廣東省普通高校青年創(chuàng)新人才項目(2018KQNCX110)
張瀚藝(1997―),男,碩士研究生,研究方向為藻類資源開發(fā)與養(yǎng)殖環(huán)境生態(tài)修復。E-mail:zhanghanyi07120708@163.com
黃翔鵠(1962―),男,博士,教授。E-mail:huangxh@gdou.edu.cn
(責任編輯:劉慶穎)