孤獨癥譜系障礙患兒血清IL-5、IL-8、MIP-α、RANTES、MIG水平變化及意義

歐陽升，陳立峰，李少華

郴州市第一人民醫(yī)院北院兒童康復(fù)科，湖南郴州423000

孤獨癥譜系障礙（ASD）又稱為自閉癥，是兒童期較常見的神經(jīng)發(fā)育障礙性疾病，一般與后天的家庭教養(yǎng)無關(guān)。ASD較為典型的臨床表現(xiàn)為社交溝通障礙、興趣狹窄以及重復(fù)刻板行為，此外多數(shù)ASD患兒可共患注意缺陷多動障礙、抑郁癥、焦慮癥、睡眠障礙、胃腸功能障礙、癲癇等。目前ASD的發(fā)病機制尚未完全明確，生物學(xué)因素、神經(jīng)心理學(xué)因素及生態(tài)學(xué)因素是ASD 的主要理論機制，其中生物學(xué)因素被廣泛認可［2］。在生物學(xué)因素中免疫因素是目前的研究熱點。既往研究發(fā)現(xiàn)，免疫功能異常不會直接導(dǎo)致ASD 的發(fā)生，而是間接通過升高兒童的遺傳易感性而增加ASD的發(fā)生風險［3］。近年來多項研究發(fā)現(xiàn)，免疫功能缺陷者多在胎兒期或新生兒期發(fā)生感染，炎癥因子永久損傷中樞神經(jīng)系統(tǒng)，導(dǎo)致ASD的發(fā)生，而趨化因子在防御和清除入侵病原體過程中同樣會誘發(fā)機體免疫反應(yīng)，從而損傷中樞神經(jīng)系統(tǒng)［4-5］。本研究觀察了ASD患兒血清多個炎癥因子與趨化因子的水平變化，并分析其與ASD 病情嚴重程度的相關(guān)性及對ASD的早期診斷價值?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇 2019 年 6 月—2020 年 9 月于我院確診的ASD 患兒102 例作為觀察組，根據(jù)兒童期孤獨癥評定量表（CARS）分為輕中度（30～36 分）62 例、重度（＞36 分）40 例。納入標準：①CARS 評分≥30 分；②符合美國精神病學(xué)會制定《美國精神障礙診斷手冊（5 版）》中的ASD 診斷標準［6］；③經(jīng)過3 名以上高級職稱醫(yī)師診斷。排除標準：合并其他精神類疾病或認知障礙者；器質(zhì)性疾病引起精神行為異常者；合并其他診斷不明疾病者。按可比原則采用成組比較法，選擇同期體檢健康兒童120 例作為對照組。觀察組男80 例，女22 例，年齡（5.49 ± 1.57）歲，喂養(yǎng)方式：母乳喂養(yǎng)34 例、人工喂養(yǎng)41 例、混合喂養(yǎng) 27 例；對照組男 86 例、女 34 例，年齡（5.48 ±1.55）歲，喂養(yǎng)方式：母乳喂養(yǎng)65例、人工喂養(yǎng)35例、混合喂養(yǎng)20 例。觀察組母親孕期抑郁/焦慮、孕期睡眠差、孕期感染及孕期主動/被動吸煙的比例均高于對照組（P均＜0.05），兩組性別比、年齡及喂養(yǎng)方式比較均無統(tǒng)計學(xué)差異（P均＞0.05）。兩組母親孕期相關(guān)資料比較見表1。本研究通過醫(yī)院倫理委員會審核，受試者監(jiān)護人均簽署知情同意書。

表1 兩組母親孕期相關(guān)資料比較［例（%）］

1.2 血清炎癥因子和趨化因子水平檢測 三組入組后第2 天采集空腹靜脈血，采用ELISA 法檢測血清炎癥因子和趨化因子，炎癥因子包括白細胞介素5（IL-5）、白細胞介素8（IL-8）、巨噬細胞炎性蛋白α（MIP-α）；趨化因子包括 C-C 類趨化因子 5（RANTES）、C-X-XC類趨化因子9（MIG）。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS23.0 統(tǒng)計軟件。符合正態(tài)分布的計量資料以表示，多組間比較采用方差分析，兩組間比較采用t檢驗；計數(shù)資料以例或率表示，組間比較采用χ2檢驗或Fisher 確切概率法。ASD 患兒CARS 評分及血清 IL-5、IL-8、MIP-α、RANTES、MIG 之間的關(guān)系采用Spearman 相關(guān)分析法。影響ASD 發(fā)生的危險因素采用多因素Logistic 回歸分析法，繪制五項血清指標單獨及聯(lián)合診斷ASD 發(fā)生的受試者工作特征曲線（ROC 曲線），分析診斷效能。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清 IL-5、IL-8、MIP-α、RANTES 及 MIG水平比較 見表2。

表2 兩組血清IL-5、IL-8、MIP-α、RANTES及MIG水平比較（pg/mL，）

表2 兩組血清IL-5、IL-8、MIP-α、RANTES及MIG水平比較（pg/mL，）

注：與對照組比較，*P＜0.05；與輕中度患者比較，#P＜0.05。

組別觀察組輕中度重度對照組MIG 6 781.93±423.34*6 561.13±340.53*7 124.17±440.45*#5 041.17±342.42 n 102 62 40 120 IL-5 342.89±40.45*319.82±32.11*378.65±41.65*#269.89±32.76 IL-8 8.24±1.54*7.39±1.62*9.55±1.37*#5.85±1.12 MIP-α 192.73±23.43*235.87±24.56*125.86±23.76*#321.23±43.34 RANTES 3 388.60±356.37*3 561.13±451.53*3 121.17±330.32*#3 993.17±411.45

2.2 ASD 患兒CARS 評分及血清IL-5、IL-8、MIP-α、RANTES、MIG之間的相關(guān)性 見表3。

表 3 ASD 患兒 CARS 評分及血清IL-5、IL-8、MIP-α、RANTES、MIG的相關(guān)性（r值）

2.3 血清 IL-5、IL-8、MIP-α、RANTES、MIG 對兒童發(fā)生ASD的影響 見表4。

表4 兒童發(fā)生ASD的多因素Logistic回歸分析結(jié)果

2.4 血清 IL-5、IL-8、MIP-α、RANTES、MIG 單獨及聯(lián)合檢測對兒童ASD 的診斷價值 見表5 和OSID碼圖1。

表5 五項血清指標單獨及聯(lián)合檢測對兒童ASD的診斷價值

3 討論

目前全球 ASD 發(fā)病率約為 1.0%［7］，我國目前尚無全國性的流行病學(xué)數(shù)據(jù)，但有地域性研究報道ASD 發(fā)病率為 2.55‰［8］。雖然我國 ASD 發(fā)病率較低，但有研究對2000～2016年多個ASD 流行病學(xué)研究分析發(fā)現(xiàn)，ASD 發(fā)病率是呈逐年上升趨勢的［9-10］。由于ASD 存在社交、言語等方面的障礙，因此患兒的成長、健康、教育已成為涉及家庭、學(xué)校及社會的公共衛(wèi)生問題。為及早診斷ASD，尋找客觀的標志物是目前研究熱點之一。

本研究發(fā)現(xiàn)，觀察組孕期抑郁/焦慮、孕期睡眠差、孕期感染及孕期主動/被動吸煙比例均高于對照組，且多因素分析顯示孕期抑郁/焦慮，孕期感染史是兒童ASD 的獨立危險因素；提示孕產(chǎn)婦孕期因素、免疫因素均參與了ASD 的發(fā)生。分析原因，可能是孕期抑郁/焦慮會增加孕期母體促腎上腺皮質(zhì)素釋放及腎上腺素分泌，不僅可以直接收縮胎盤血管影響供血，導(dǎo)致胎兒大腦對缺氧更為敏感，而且可通過胎盤造成胎兒激素分泌異常。本研究未發(fā)現(xiàn)孕期主動或被動吸煙是ASD 發(fā)生的危險因素，可能與本研究納入的吸煙孕婦樣本量少或本地區(qū)女性吸煙量少有關(guān)。王晨冉等［11］的Meta 分析亦建議開展高質(zhì)量的大樣本的前瞻性研究進行孕婦吸煙與ASD的相關(guān)性研究。

近年來，免疫學(xué)機制在ASD 發(fā)生、發(fā)展中的作用越來越得到認可。本研究結(jié)果顯示，觀察組重度、輕中度患者及對照組血清IL-5、IL-8 及MIG 水平均依次降低，血清MIP-α、RANTES 水平均依次升高，提示上述炎癥因子及趨化因子不僅參與了ASD 的發(fā)生，且與患兒的疾病嚴重程度密切相關(guān)；本研究結(jié)果顯示，血清 IL-5、IL-8、MIG 水平升高及 MIP-α、RANTES 水平降低均是兒童ASD 的獨立危險因素。肖鴿飛等［12］分析ASD 與炎癥因子相關(guān)性發(fā)現(xiàn)，ASD組血清IL-5、MIG 水平均高于健康對照組，MIP-α、RANTES 水平均低于健康對照組。王天道等［13］同樣發(fā)現(xiàn)，ASD 患兒血清IL-8 明顯高于健康兒童。與本研究結(jié)果一致。本研究ROC 曲線分析結(jié)果顯示，血清 IL-5、IL-8、MIP-α、RANTES 及 MIG 單獨診斷 ASD有一定價值（AUC 均＞0.7），但五項聯(lián)合檢測診斷ASD 的AUC 為0.860，提示有較高的診斷價值，因此建議多個指標聯(lián)合診斷。

研究顯示，新生兒期炎癥反應(yīng)可通過損傷小膠質(zhì)細胞而影響海馬的依賴性行為［14-15］。IL-5、IL-8 是機體炎癥細胞因子，過高水平可以加重炎癥刺激，增加損傷程度及功能障礙［16-17］。RANTES 作為趨化因子可以反映機體對入侵病原體的清除及防御能力，因此水平越低表明機體防御能力越低，組織炎癥損傷越重［18-19］。本研究Spearman 相關(guān)分析結(jié)果顯示，CARS 評分與 IL-5、IL-8 呈正相關(guān)關(guān)系，與 RANTES呈負相關(guān)關(guān)系；MIP-α、MIG 分別與IL-5、IL-8、RANTES 呈負相關(guān)關(guān)系，但與CARS 評分并不相關(guān)，可能MIP-α、MIG 在 CARS 評分與 IL-5、IL-8、RANTES 相關(guān)性過程中發(fā)揮中介作用。

綜上所述，ASD 患兒血清 IL-5、IL-8、MIG 水平升高，MIP-α、RANTES 水平降低，其中IL-5、IL-8、RANTES改變與患兒病情相關(guān)，上述指標是ASD發(fā)生的危險因素，同時對ASD的早期診斷有重要意義。但本研究為回顧性研究，且樣本量較小，因此研究結(jié)果可能存在偏倚，臨床上可通過聯(lián)合患兒的行為癥狀進行篩查。