炔草酯·唑草酮·氯氟吡氧乙酸異辛酯·解毒喹的氣相色譜分析

許艷秋，安萬霞，王廣成，高立明，李 婷，吳春先，陳丙坤

（1.四川省農(nóng)藥檢定所，成都 610041；2.成都楠光先業(yè)科技有限公司，成都 610041）

炔草酯（Clodinafop-propargyl）是一種苯氧羧酸類高效低毒除草劑，對惡性禾本科雜草的防除有顯著效果[1]。唑草酮（Carfentrazone-ethyl）是三唑啉酮類內(nèi)吸性除草劑，主要用于防除闊葉雜草和莎草，對磺酰脲類除草劑產(chǎn)生抗性的雜草具有很好的活性[2]。氯氟吡氧乙酸（Fluroxypyr），又稱氟草煙，在制劑中常以氯氟吡氧乙酸異辛酯的形式存在，是一種內(nèi)吸傳導(dǎo)型苗后除草劑，廣泛應(yīng)用于小麥田、玉米田、果園、林地等地闊葉雜草的防除[3]。解毒喹（Cloquintocet-mexyl）是一種常用保護(hù)劑，用于增強(qiáng)炔草酯的選擇性，加強(qiáng)炔草酯在谷類作物中的解毒作用[4]。研究表明，唑草酮與炔草酯桶混對麥田闊葉雜草及一年生禾本科雜草均有很好的防效，可以減少麥田雜草對小麥苗期生長及產(chǎn)量的影響，提高除草效率[5]。唑草酮、炔草酯與氯氟吡氧乙酸異辛酯混配，能增加對闊葉雜草的內(nèi)吸性除草效果，是一種對禾本科雜草和闊葉雜草均有很好防效的混配制劑。炔草酯通常與安全劑以一定比例混合[1]，用來保護(hù)作物免受除草劑的藥害，從而增加作物的安全性和改進(jìn)雜草防除效果。

目前，炔草酯、唑草酮、氯氟吡氧乙酸異辛酯的檢測方法雖已有報(bào)道[6-8]，但同時(shí)檢測該混配制劑中各組分及安全劑解毒喹的方法還未見報(bào)道。本文建立了一種氣相色譜法同時(shí)用于炔草酯、唑草酮、氯氟吡氧乙酸異辛酯及解毒喹的定量分析，試驗(yàn)結(jié)果表明，該方法操作簡便、快速，精密度高，準(zhǔn)確度好，可以為企業(yè)生產(chǎn)過程質(zhì)量控制和質(zhì)檢機(jī)構(gòu)檢測提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試材料

炔草酯標(biāo)樣（質(zhì)量分?jǐn)?shù)98.0%）、氯氟吡氧乙酸異辛酯標(biāo)樣（質(zhì)量分?jǐn)?shù)98.0%）、唑草酮標(biāo)樣（質(zhì)量分?jǐn)?shù)98.0%）、解毒喹標(biāo)樣（質(zhì)量分?jǐn)?shù)98.0%），上海市農(nóng)藥研究所有限公司；40%炔草酯·唑草酮·氯氟吡氧乙酸可濕性粉劑，市售。

1.2 試劑與儀器

三氯甲烷（分析純），賽默飛公司；內(nèi)標(biāo)物：鄰苯二甲酸二辛酯，天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所。

Agilent 6890N氣相色譜儀，安捷倫科技（中國）有限公司；AB204-S電子天平（精確到0.000 1g），梅特勒-托利多國際貿(mào)易（上海）有限公司；過濾器（濾膜孔徑0.45μm），天津津騰實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司。

1.3 氣相色譜操作條件

溫度：柱室235℃，氣化室260℃，檢測室260℃；流速：載氣（N2）1.0 mL/min，氫氣30 mL/min，空氣300 mL/min，尾吹氣（N2）30 mL/min；分流比：50∶1；進(jìn)樣體積：1.0μL；保留時(shí)間：唑草酮約7.9 min，炔草酯約8.3 min，氯氟吡氧乙酸異辛酯約9.1 min，解毒喹約11.1 min，鄰苯二甲酸二辛酯約12.6 min。

上述氣相色譜操作條件系典型操作參數(shù)，可根據(jù)不同儀器特點(diǎn)，對給定的操作參數(shù)作適當(dāng)調(diào)整，以期獲得最佳效果。炔草酯、唑草酮、氯氟吡氧乙酸異辛酯、解毒喹混合標(biāo)樣及40%炔草酯·唑草酮·氯氟吡氧乙酸可濕性粉劑樣品的氣相色譜圖分別見圖1和圖2。

圖1 炔草酯＋唑草酮＋氯氟吡氧乙酸異辛酯＋解毒喹標(biāo)樣＋內(nèi)標(biāo)氣相色譜圖

圖2 40%炔草酯·唑草酮·氯氟吡氧乙酸可濕性粉劑＋內(nèi)標(biāo)氣相色譜圖

1.4 測定步驟

1.4.1 內(nèi)標(biāo)溶液的配制

稱取鄰苯二甲酸二辛酯0.45 g，置于500 mL容量瓶中，用三氯甲烷溶解并稀釋至刻度，搖均備用。

1.4.2 標(biāo)樣溶液的配制

稱取唑草酮標(biāo)樣、解毒喹標(biāo)樣、炔草酯標(biāo)樣、氯氟吡氧乙酸異辛酯標(biāo)樣分別約為0.02、0.02、0.07、0.07 g（精確至0.000 2 g），置于10 mL容量瓶中，用移液管準(zhǔn)確加入5 mL內(nèi)標(biāo)溶液，用三氯甲烷溶解并稀釋至刻度，超聲10 min，冷卻至室溫，搖勻備用。

1.4.3 試樣溶液的配制

稱取40%炔草酯·唑草酮·氯氟吡氧乙酸可濕性粉劑試樣約0.35 g（精確至0.000 2 g），置于10 mL具塞試管中，用移液管準(zhǔn)確加入5 mL內(nèi)標(biāo)溶液，再用5 mL移液管準(zhǔn)確加入5 mL三氯甲烷溶解，蓋上塞子超聲10 min，冷卻至室溫，經(jīng)濾膜過濾，濾液備用。

1.4.4 樣品測定

在上述操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰2針標(biāo)樣溶液（炔草酯、唑草酮、解毒喹、氯氟吡氧乙酸異辛酯）與內(nèi)標(biāo)物峰面積比值的相對變化小于1.5%后，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測定。

1.4.5 數(shù)據(jù)分析

將測得的2針試樣溶液以及試樣前后2針標(biāo)樣溶液（炔草酯、唑草酮、解毒喹、氯氟吡氧乙酸異辛酯）峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積比分別進(jìn)行平均。采用EXCEL對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，分別按（1）～（5）計(jì)算質(zhì)量分?jǐn)?shù)、標(biāo)準(zhǔn)偏差、變異系數(shù)、理論變異系數(shù)、回收率。

式中：w為質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%；r1、r2分別為標(biāo)樣、試樣溶液中有效成分峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積比的平均值；m1、m2分別為有效成分標(biāo)樣及試樣的質(zhì)量，g；wi為標(biāo)樣中有效成分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

式中：S為方法的標(biāo)準(zhǔn)偏差，%；wi、分別為試樣中有效成分第i次檢測的質(zhì)量分?jǐn)?shù)和質(zhì)量分?jǐn)?shù)平均值，%；n為試樣平行檢測次數(shù)。

式中：CV為變異系數(shù)，%。

式中：CV理論為有效成分的理論變異系數(shù)。

式中：P為回收率，%；m實(shí)測為加標(biāo)樣品有效成分質(zhì)量的實(shí)測值，mg；m樣品為試樣中有效成分的理論質(zhì)量，mg；m添加為試樣中添加有效成分的質(zhì)量，mg。

2 結(jié)果與分析

2.1 色譜條件的選擇

根據(jù)樣品有效成分的物化性質(zhì)，使用三氯甲烷作為溶劑溶解樣品。色譜柱對比選擇分析色譜柱。結(jié)果表明，使用DB-5毛細(xì)管色譜柱時(shí)，各個(gè)樣品峰對稱性更好，出峰時(shí)間適中，故最后確定本實(shí)驗(yàn)選用DB-5毛細(xì)管色譜柱作為分析色譜柱。

用內(nèi)標(biāo)法對樣品進(jìn)行定量分析，需要選擇一個(gè)合適的內(nèi)標(biāo)物，本實(shí)驗(yàn)試用了鄰苯二甲酸二己酯、癸二酸二丁酯、磷酸三苯酯和鄰苯二甲酸二辛酯等常見的內(nèi)標(biāo)物。結(jié)果表明，在上述色譜操作條件下，以鄰苯二甲酸二辛酯為內(nèi)標(biāo)時(shí)，所有有效成分與內(nèi)標(biāo)物能很好地分離，不受雜質(zhì)干擾，且出峰時(shí)間適中，故最后確定本實(shí)驗(yàn)選用鄰苯二甲酸二辛酯作為內(nèi)標(biāo)物。

2.2 線性相關(guān)性

按照1.4.2分別配制5個(gè)不同質(zhì)量濃度的炔草酯、唑草酮、解毒喹、氯氟吡氧乙酸異辛酯標(biāo)準(zhǔn)溶液，在上述色譜操作條件下進(jìn)行分析。以標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)量分?jǐn)?shù)為橫坐標(biāo)，以標(biāo)樣峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積的比值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到4種成分均具有較好的線性關(guān)系，線性方程分別為y炔草酯=0.582 4x＋0.037 1（R2=0.999 0）；y唑草酮=0.028 8x＋0.000 2（R2=0.999 9）；y氯氟吡氧乙酸異辛酯=0.140 6x＋0.009 3（R2=0.999 8）；y解毒喹=0.184 7x＋0.004 8（R2=0.999 5）。

2.3 精密度

從同一40%炔草酯·唑草酮·氯氟吡氧乙酸可濕性粉劑產(chǎn)品中準(zhǔn)確稱取5份試樣，在1.3所述的色譜操作條件下進(jìn)行5次平行測定（表1）。由表1可知，炔草酯、唑草酮、解毒喹、氯氟吡氧乙酸異辛酯的標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.029 9%、0.014 9%、0.012 7%和0.048 3%，應(yīng)用公式（3）計(jì)算得到炔草酯、唑草酮、解毒喹、氯氟吡氧乙酸異辛酯變異系數(shù)分別為0.145%、0.287%、0.239%和0.218%。通過修改的Horwits公式［公式（4）］計(jì)算各有效成分的理論變異系數(shù)值，發(fā)現(xiàn)實(shí)測變異數(shù)均小于理論變異系數(shù)，證明該方法精密度好，能夠滿足檢測的精密度要求。

表1 40%炔草酯·唑草酮·氯氟吡氧乙酸可濕性粉劑試樣的精密度試驗(yàn)結(jié)果

2.4 準(zhǔn)確度和回收率

從已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)的40%炔草酯·唑草酮·氯氟吡氧乙酸可濕性粉劑樣品中稱取6份試樣，分別準(zhǔn)確加入不同體積的1.4.2中配制的標(biāo)樣溶液，在上述色譜操作條件下進(jìn)行分析，用以考察方法的準(zhǔn)確度。用式（5）計(jì)算方法的回收率，結(jié)果見表2。從表2可知，炔草酯、唑草酮、解毒喹、氯氟吡氧乙酸異辛酯的平均回收率分別為99.98%、98.92%、99.07%和100.44%。結(jié)果表明，該方法的準(zhǔn)確度和回收率均較好，滿足分析要求。

表2 試樣回收率試驗(yàn)結(jié)果

3 結(jié) 論

本文通過色譜分析條件的選擇與優(yōu)化，建立了炔草酯·唑草酮·氯氟吡氧乙酸異辛酯·解毒喹的氣相色譜分析方法。試驗(yàn)結(jié)果表明，本方法準(zhǔn)確度好，精密度高，線性關(guān)系良好，具有簡便、快速、準(zhǔn)確及分離效果好等優(yōu)點(diǎn)，是炔草酯、唑草酮、氯氟吡氧乙酸酯混配制劑或單制劑的一種可行的分析方法，同時(shí)可實(shí)現(xiàn)樣品中安全劑解毒喹的檢測。