腎移植術(shù)后淋巴細(xì)胞亞群變化在評(píng)價(jià)腎功能中的臨床價(jià)值*

高云龍，郭小軍，李泉源，瞿叢新，武倫，魏澗

（1.錦州醫(yī)科大學(xué)國(guó)藥東風(fēng)總醫(yī)院 研究生培養(yǎng)基地，湖北 十堰 442000；2.湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬國(guó)藥東風(fēng)總醫(yī)院 普外科，湖北 十堰 442000）

腎移植術(shù)是目前器官移植方面最易被患者接受的，也是治療終末期腎臟病的最佳方法。術(shù)后常規(guī)使用三聯(lián)免疫抑制劑（他克莫司、嗎替麥考酚酯、激素）影響患者的免疫應(yīng)答和免疫調(diào)節(jié)，目前淋巴細(xì)胞亞群的測(cè)定是免疫狀態(tài)最為客觀的指標(biāo)。免疫抑制劑的大量使用，患者出現(xiàn)肺部細(xì)菌、病毒感染的并發(fā)癥，甚至更嚴(yán)重的后果；免疫抑制劑的劑量不足導(dǎo)致移植物宿主排斥或移植物失功，導(dǎo)致患者需要再次透析治療。有報(bào)道顯示機(jī)體出現(xiàn)感染或排斥時(shí)淋巴細(xì)胞亞群會(huì)發(fā)生相應(yīng)的變化，因此研究腎移植術(shù)后患者淋巴細(xì)胞亞群的變化與腎功能之間的相關(guān)性極其重要。收集腎移植術(shù)后淋巴細(xì)胞亞群絕對(duì)計(jì)數(shù)及比值，分析與腎功能間的相關(guān)性，為臨床醫(yī)師更進(jìn)一步明確診斷，為患者打造個(gè)體化治療方案提供有力的理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)

1.1.1 納入標(biāo)準(zhǔn) ①順利完成腎移植患者；②住院期間均明確診斷，未發(fā)生移植物功能延遲恢復(fù)、感染、排斥反應(yīng)、移植腎功能不全、術(shù)后移植腎功能喪失等；③術(shù)后群體反應(yīng)性抗體（PRA）陰性。

1.1.2 排除標(biāo)準(zhǔn) ①受者在術(shù)前出現(xiàn)明顯的肝功能不全；②病歷資料不全者；③合并傳染性疾病。

1.2 研究對(duì)象

收集2019 年7 月到2020 年11 月湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬國(guó)藥東風(fēng)總醫(yī)院收治的首次腎移植患者39 例。其中男31 例，女8 例；年齡（43.21±9.48）歲。腎移植受者淋巴細(xì)胞亞群絕對(duì)計(jì)數(shù)及比值、腎功能、他克莫司濃度均由錦州醫(yī)科大學(xué)國(guó)藥東風(fēng)總醫(yī)院測(cè)定，住院系統(tǒng)查詢獲得，腎小球?yàn)V過(guò)率為ECT 檢測(cè)獲得，淋巴細(xì)胞亞群絕對(duì)計(jì)數(shù)及百分比由流式細(xì)胞儀測(cè)得。腎移植受者術(shù)前均進(jìn)行誘導(dǎo)治療，術(shù)后口服他克莫司、嗎替麥考酚酯、激素組成主要抗排斥治療方案。本研究得到醫(yī)院倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)。

1.3 研究方法

研究腎移植受者手術(shù)前后尿素氮、肌酐、補(bǔ)體C1q、胱抑素C、腎小球?yàn)V過(guò)率（GFR）動(dòng)態(tài)變化，分析淋巴細(xì)胞亞群絕對(duì)數(shù)值及百分比與腎功能、他克莫司濃度相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 23.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。符合或近似正態(tài)分布的計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，組內(nèi)不同時(shí)間點(diǎn)相同指標(biāo)比較采用配對(duì)樣本t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以百分率（%）表示，采用Pearson 相關(guān)性分析。P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 受者住院期間腎功能動(dòng)態(tài)變化

分析受者手術(shù)前后不同時(shí)間點(diǎn)腎功能變化，尿素氮、肌酐、胱抑素C 及補(bǔ)體C1q 水平均逐漸降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；GFR 逐漸升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表1。

表1 受者手術(shù)前后腎功相關(guān)指標(biāo)變化（）

表1 受者手術(shù)前后腎功相關(guān)指標(biāo)變化（）

2.2 受者住院期間淋巴細(xì)胞亞群動(dòng)態(tài)變化

受者住院期間125 次淋巴細(xì)胞亞群絕對(duì)計(jì)數(shù)及比值淋巴細(xì)胞亞群動(dòng)態(tài)變化數(shù)值見(jiàn)表2。

表2 受者住院期間淋巴細(xì)胞亞群動(dòng)態(tài)變化（）

表2 受者住院期間淋巴細(xì)胞亞群動(dòng)態(tài)變化（）

2.3 淋巴細(xì)胞亞群絕對(duì)值計(jì)數(shù)與腎功能的相關(guān)分析

分析我院淋巴細(xì)胞亞群絕對(duì)值計(jì)數(shù)與肌酐、尿素、胱抑素C、GFR、補(bǔ)體C1q 之間的相關(guān)性，具體情況見(jiàn)表3。淋巴細(xì)胞亞群絕對(duì)計(jì)數(shù)腎功能相關(guān)性分析如圖1。

圖1 淋巴細(xì)胞數(shù)、總T 淋巴細(xì)胞數(shù)與胱抑素C 相關(guān)性

表3 淋巴細(xì)胞亞群絕對(duì)值計(jì)數(shù)與腎功能的相關(guān)分析

2.4 淋巴細(xì)胞亞群百分比與腎功能的相關(guān)分析

分析我院淋巴細(xì)胞亞群百分比與肌酐、尿素、胱抑素C、GFR、補(bǔ)體C1q 之間的相關(guān)性，具體情況見(jiàn)表4。淋巴細(xì)胞亞群百分比與腎功能相關(guān)性分析如圖2。

圖2 淋巴細(xì)胞百分比、總T 淋巴細(xì)胞百分比與胱抑素C 相關(guān)性

表4 淋巴細(xì)胞亞群百分比與腎功能的相關(guān)分析

2.5 淋巴細(xì)胞亞群與他克莫司濃度相關(guān)分析

研究發(fā)現(xiàn)淋巴細(xì)胞數(shù)百分比與他克莫司濃度成負(fù)相關(guān)（r=-0.20,P=0.029），B 淋巴細(xì)胞百分比與他克莫司濃度正相關(guān)（r=0.24,P=0.007），其余淋巴細(xì)胞亞群與他克莫司濃度沒(méi)有發(fā)現(xiàn)相關(guān)性。

3 討論

腎移植術(shù)后免疫抑制劑的治療導(dǎo)致腎功能及機(jī)體免疫狀態(tài)發(fā)生動(dòng)態(tài)變化，用藥劑量過(guò)大易導(dǎo)致患者出現(xiàn)感染、長(zhǎng)期移植失敗、惡性腫瘤［1］，甚至死亡［2-3］，不足易致腎功能喪失［4］。相關(guān)報(bào)道［5］顯示患者術(shù)后感染或排斥反應(yīng)T 淋巴細(xì)胞亞群表現(xiàn)不同，甚至有報(bào)道淋巴細(xì)胞亞群的數(shù)量可能與移植開(kāi)始人類(lèi)白細(xì)胞抗原（HLA）抗體的發(fā)生和同種異體移植腎發(fā)生排斥相關(guān)［6-7］。因此，迫切需要找到一個(gè)平衡點(diǎn)對(duì)腎功能進(jìn)行早期的評(píng)估及干預(yù)。目前淋巴細(xì)胞表現(xiàn)是反映免疫功能的重要策略之一。

有報(bào)道［8］發(fā)生感染的患者CD4+，CD8+T 細(xì)胞或NK 細(xì)胞數(shù)量和功能不同程度降低，經(jīng)抗感染治療后CD4+、CD8+T 細(xì)胞和NK 細(xì)胞的數(shù)量和功能恢復(fù)到感染前水平。在沒(méi)有發(fā)現(xiàn)其他更好的腎功能評(píng)估方法之前，淋巴細(xì)胞亞群在免疫檢測(cè)中仍有著重要的作用。免疫抑制劑的應(yīng)用對(duì)自然殺傷細(xì)胞具有明顯的抑制作用，他克莫司主要是抑制T細(xì)胞的活化和增殖［9］。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)CD8+T 細(xì)胞亞群可能對(duì)檢測(cè)急性同種異體移植排斥有用［10］。上述研究認(rèn)為腎移植術(shù)后淋巴細(xì)胞亞群在移植中有著重要作用。

目前移植中心考慮腎功能時(shí)主要觀察血尿素氮、肌酐及GFR，胱抑素C 與補(bǔ)體C1 的報(bào)道較少，本研究發(fā)現(xiàn)淋巴細(xì)胞亞群不僅與血尿素、肌酐及GFR 有相關(guān)性，也發(fā)現(xiàn)與胱抑素C、補(bǔ)體C1q 也有相關(guān)性。補(bǔ)體C1q 促進(jìn)免疫耐受、清除凋亡細(xì)胞有重要地位［11］。有兩個(gè)方面解釋?zhuān)孩傺a(bǔ)體C1q 與其受體結(jié)合促進(jìn)影響樹(shù)突狀細(xì)胞的吞噬作用；②通過(guò)特異性細(xì)胞因子誘導(dǎo)TH1 細(xì)胞應(yīng)答［12］。

胱抑素C 有核細(xì)胞產(chǎn)生，是近端腎小管損傷的標(biāo)志物，通過(guò)腎小球過(guò)濾［13］，在腎小管代謝不被重復(fù)吸收，產(chǎn)生相對(duì)恒定，比腎小球壞死的肌酐水平接近腎小球?yàn)V過(guò)率［13-17］。肌酐是一種常見(jiàn)的腎功標(biāo)志物，不僅反映腎功能［18］，還反映肌肉質(zhì)量。而腎GFR 胱抑素C 比肌酐的評(píng)估能力更可靠［19-21］，并且不受性別年齡或肌肉質(zhì)量的影響［22-23］，相關(guān)研究表明胱抑素C 比肌酐更能體現(xiàn)腎功能［24］。以上研究認(rèn)為，腎功能的評(píng)估中血清胱抑素C 好于血清肌酐值。筆者的研究也發(fā)現(xiàn)淋巴細(xì)胞亞群與胱抑素C 的相關(guān)性明顯優(yōu)于肌酐，這可能與胱抑素C 更好的代表了腎功能相關(guān)。

在淋巴細(xì)胞亞群與他克莫司濃度研究發(fā)現(xiàn)，只有淋巴細(xì)胞數(shù)百分比、B 淋巴細(xì)胞百分比與他克莫司濃度發(fā)現(xiàn)了相關(guān)性，這一點(diǎn)另筆者感到意外，但在肝移植發(fā)現(xiàn)類(lèi)似的結(jié)果，他克莫司濃度確實(shí)影響淋巴細(xì)胞亞群的變化，但藥物濃度并不反映淋巴細(xì)胞亞群受影響的程度［25］。

綜上所述，淋巴細(xì)胞亞群在腎移植術(shù)后呈動(dòng)態(tài)變化，與腎功能有相關(guān)性。意外發(fā)現(xiàn)了胱抑素C與淋巴細(xì)胞亞群的相關(guān)性較好，這可能在更早地預(yù)測(cè)腎功與淋巴細(xì)胞亞群的平衡起著重要的作用。當(dāng)然，由于本中心開(kāi)展淋巴細(xì)胞測(cè)定及收集到資料有限，隨訪時(shí)間較短，其結(jié)論仍然需要更大樣本及多中心進(jìn)行研究論證。本研究論證了淋巴細(xì)胞亞群與腎功能、他克莫司濃度的關(guān)系。因此，淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)可以為術(shù)后腎移植患者管理及治療提供理論依據(jù)。