改良?xì)庀嗌V分析法分離測(cè)定11種雜醇油

□ 李 珍 楊 洋 鄂爾多斯市藥品醫(yī)療器械檢驗(yàn)研究中心

改良?xì)庀嗌V分析法分離測(cè)定11種雜醇油

□ 李 珍 楊 洋 鄂爾多斯市藥品醫(yī)療器械檢驗(yàn)研究中心

本試驗(yàn)的目的是對(duì)酒中雜醇油進(jìn)行氣相色譜測(cè)定分析，監(jiān)測(cè)白酒中雜醇油的成分及其含量。方法：采用氣相色譜（GC）法，改良國(guó)標(biāo)方法，由DB-1701毛細(xì)管柱替代GDX-102填充柱（60-80目），分流并程序升溫，直接進(jìn)樣，氫火焰離子化檢測(cè)器（FID）檢測(cè)。結(jié)果：改良后的GC法可以同時(shí)有效分離出混合標(biāo)準(zhǔn)液中11種雜醇油并能進(jìn)行定量分析。結(jié)論：本試驗(yàn)在國(guó)標(biāo)方法基礎(chǔ)上進(jìn)行改進(jìn)研究，解決了國(guó)標(biāo)方法中GC法無法實(shí)現(xiàn)酒中常見醇類各組分分離的問題，并應(yīng)用到樣品的測(cè)定當(dāng)中取得了滿意的結(jié)果。

氣相色譜（GC）法；雜醇油；白酒

“雜醇油”是來源于酒精生產(chǎn)過程中一種術(shù)語。在酒精生產(chǎn)過程最終得到的產(chǎn)品是酒精（乙醇），對(duì)乙醇而言，除了乙醇之外的醇統(tǒng)稱為雜醇，因其在液體里以油狀出現(xiàn)，故稱之“雜醇油”。雜醇油是碳原子數(shù)大于2的脂肪族醇類的統(tǒng)稱，這些醇的分子量比乙醇的分子量大，又稱為高級(jí)醇[1]。

白酒在發(fā)酵過程中，雜醇油除由糖類產(chǎn)生外，氨基酸分解也能產(chǎn)生雜醇油。原料中蛋白質(zhì)含量多時(shí)，酒中雜醇油的含量也高。雜醇油是酒的芳香成分之一，其含量多少對(duì)白酒的風(fēng)味很重要，其主要成分是異戊醇、戊醇、異丁醇、丙醇等[2]，除了異戊醇微甜以外，其他如異丁醇、正丙醇、正丁醇都是苦的，干酪醇雖香氣柔和，但也有苦味，并且苦味又重又長(zhǎng)。因此，白酒的雜醇油不能過高，否則帶有較重的苦澀味，且對(duì)人有毒害作用，能使神經(jīng)系統(tǒng)充血，使人頭痛。雜醇油的碳鏈比乙醇高，沸點(diǎn)比乙醇高，在體內(nèi)的氧化速度比乙醇慢，在機(jī)體內(nèi)停留時(shí)間較長(zhǎng)，所以對(duì)人體的毒性和麻醉作用也比乙醇高[3]，其毒性隨分子量增大而加劇，其中以異戊醇、異丁醇的毒性較大，異丁醇為乙醇的8倍，異戊醇比乙醇大19倍，因此國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《蒸餾酒與配制酒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的分析方法》（GB/T 5009.48-2003）規(guī)定了甲醇和雜醇油的限量。但是在實(shí)際工作當(dāng)中，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GC法存在常見醇類無法實(shí)現(xiàn)的各組分分離等問題，本試驗(yàn)在國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法基礎(chǔ)上進(jìn)行改良，對(duì)方法的性能指標(biāo)進(jìn)行考察，以期達(dá)到有效分離并測(cè)定酒中雜醇油的目標(biāo)。

1 儀器及試藥

配有氫火焰離子化檢測(cè)器（FID）的安捷倫G3440A型氣相色譜儀；BP211D型電子天平，異丁醇、異戊醇及乙酸乙酯（均為色譜純）；純化水（由超純水系統(tǒng)制備）；雜醇油混合標(biāo)準(zhǔn)液（由內(nèi)蒙古質(zhì)監(jiān)局提供）。

2 雜醇油的測(cè)定

2.1 制備無甲醇的乙醇溶液

取300 mL乙醇（95%），加高錳酸鉀少許，蒸餾，收集餾出液。在餾出液中加入硝酸銀（取1 g硝酸銀溶于少量水中）和氫氧化鈉溶液（取1.5 g氫氧化鈉溶于少量水中），搖勻，取上清液蒸餾，棄去最初50 mL餾出液，收集中間餾出液約200 mL，用酒精比重計(jì)測(cè)其濃度，然后加水配成無甲醇的乙醇（體積分?jǐn)?shù)為60%）。

2.2 制備無雜醇油的乙醇

取2.1中間餾出液，加0.25 g鹽酸間苯二胺，加熱回流2 h，用分餾柱控制沸點(diǎn)進(jìn)行蒸餾，收集中間餾出液100 mL。

2.3 色譜條件

色譜柱：DB-1701毛細(xì)管柱。柱長(zhǎng)：30 m。內(nèi)徑：0.25 mm。FID檢測(cè)器溫度：250 ℃。進(jìn)樣口溫度：220℃。載氣（N2）流速：20 mL/min。氫氣（H2）流速：40 mL/min?？諝饬魉伲?00 mL/min。尾吹氣或柱氣流+尾吹氣：30 mL/min，分流比為4∶1。

2.4 對(duì)照品溶液的制備

準(zhǔn)確稱取異丁醇、異戊醇各600 mg及乙酸乙酯800 mg，以少量水洗入100 mL容量瓶中，并加水稀釋至刻度，置冰箱保存。

吸取10 mL標(biāo)準(zhǔn)液于100 mL容量瓶中，加入一定量處理后的乙醇定容后，乙醇含量控制在60%，并加水稀釋至刻度。

圖1 雜醇油混標(biāo)液組分

圖2 樣品中檢測(cè)出的成分

3 結(jié)果與分析

3.1 定性分析

以各組分保留時(shí)間定性。吸取標(biāo)準(zhǔn)使用液和樣液各0.50 μL，分別測(cè)得保留時(shí)間，試樣與標(biāo)準(zhǔn)出峰時(shí)間對(duì)照而定性。

3.2 定量分析

進(jìn)0.50 μL標(biāo)準(zhǔn)使用液，制得色譜圖，分別量取各組分峰高。進(jìn)0.50 μL試樣，制得色譜圖，分別量取峰高，與標(biāo)準(zhǔn)峰比較計(jì)算。

3.3 結(jié)果計(jì)算

雜醇油混標(biāo)液組分如圖1所示。方法檢出限為異丁醇不得高于0.22 ng、異戊醇不得高于0.15 ng。

雜醇油以異丁醇、異戊醇總量計(jì)算：X=h1×A×V1×100/（h2×V2×1000）

式中：X為試樣中某組分的含量，單位為克每百毫升（g/100 mL）；A為進(jìn)樣標(biāo)準(zhǔn)中某組分的含量，單位為毫克每毫升（mg/mL）；h1為試樣中某組分的峰高，單位為毫米（mm）；h2為標(biāo)準(zhǔn)中某組分的峰高，單位為毫米（mm）；V2為試樣液進(jìn)樣量，單位為微升（μL）；V1為標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)樣量，單位為微升（μL）。

異丁醇結(jié)果為0.032 g/100mL 、異戊醇結(jié)果為0.035 g/100mL，均小于檢出限，雜醇油以異丁醇、異戊醇總量計(jì)算為0.067 g/100mL。

4 討論

測(cè)定酒中雜醇油常用的方法主要有比色法和氣相色譜（GC）法。比色法的原理是異戊醇和異丁醇在硫酸作用下生成戊烯和丁烯，再與對(duì)二甲胺基苯甲醛作用顯橙黃色，與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量，操作比較繁瑣且不能測(cè)定單一組分；采用GC法測(cè)定雜醇油的原理是利用不同醇類在氫火焰中的化學(xué)電離進(jìn)行檢測(cè)，根據(jù)峰高與標(biāo)準(zhǔn)比較定量，GC法除蒸餾酒外都需蒸餾后才能分析，在蒸餾過程中可能會(huì)造成某些易揮發(fā)成分的損失而導(dǎo)致結(jié)果偏低。國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中的GC法采用填充柱，因甲醇、雜醇油與其他組分難以分離，使定量產(chǎn)生較大誤差[4]，本試驗(yàn)在國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的方法測(cè)定基礎(chǔ)上進(jìn)行改進(jìn)研究，選用DB-1701毛細(xì)管柱，利用毛細(xì)管柱柱效高、熱穩(wěn)定性好、分離速度快的優(yōu)點(diǎn)，采用直接進(jìn)樣，用氫火焰離子化檢測(cè)器檢測(cè)，對(duì)雜醇油混合標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行分析測(cè)定，實(shí)現(xiàn)了11種組分較好的分離效果，并應(yīng)用到樣品的測(cè)定當(dāng)中取得了滿意的結(jié)果。

[1]孫慧.淺析白酒雜醇油的含量[J].釀酒,2003(30):82-83．

[2]尋思穎.關(guān)于白酒中甲醇和雜醇油的測(cè)定[J].標(biāo)準(zhǔn)化報(bào)道,2001(22):33-34．

[3]陳建文,曹愛華,匡云峰,等.如何測(cè)定酒中的雜醇油[J].預(yù)防醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)信息,2001(7):284-285．

[4]彭清濤，王力.毛細(xì)管氣相色譜法同時(shí)測(cè)定白酒中的甲醇和雜醇油[J].化學(xué)分析計(jì)量,2007(1):33-35．

李珍（1984—），女，內(nèi)蒙古鄂爾多斯人，碩士，鄂爾多斯藥品醫(yī)療器械檢驗(yàn)研究中心檢驗(yàn)一室副主任，中級(jí)工程師。研究方向：藥品、食品、化妝品檢驗(yàn)。