纖維素酶和木聚糖酶對象草青貯發(fā)酵品質(zhì)及體外消化率的影響

丁 浩， 吳永杰， 邵 濤， 趙 杰， 代童童， 董 東， 尹雪敬， 賈玉山，李君風(fēng)*

(1.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)草業(yè)學(xué)院飼草調(diào)制加工與貯藏研究所， 江蘇 南京 210095； 2.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部飼草栽培加工與 高效利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 內(nèi)蒙古 呼和浩特 010018； 3.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)教育部草地資源重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 內(nèi)蒙古 呼和浩特 010018)

象草(PennisetumpurpureumSchumach)屬于禾本科狼尾草屬多年生草本植物，具有生物產(chǎn)量高、再生性強(qiáng)、生長速度快等優(yōu)點(diǎn)，廣泛種植于熱帶、亞熱帶地區(qū)，是反芻動物重要的粗飼料來源[1]。熱帶、亞熱帶地區(qū)雨熱同期、高溫高濕，牧草很難調(diào)制成干草進(jìn)行全年儲藏利用。而青貯不受氣候條件的限制，青貯飼料可全年長期有效地保存，調(diào)節(jié)飼草季節(jié)性供給不平衡[2-3]。

象草水溶性碳水化合物含量相對較低、粗纖維含量高，表現(xiàn)出多莖、多空、節(jié)間粗硬的物理特性。在青貯調(diào)制過程中難以壓實(shí)，殘余的空氣較多，造成植物呼吸作用及好氧性微生物活動時(shí)間延長[4]。好氧腐敗菌代謝易使水溶性碳水化合物大量損失，乳酸菌發(fā)酵底物不足，乳酸生成量少，pH很難快速降到4.2以下，往往導(dǎo)致青貯發(fā)酵品質(zhì)不佳[5]。

酶制劑常用于改善青貯發(fā)酵品質(zhì)[6]。添加纖維素酶能使纖維水解為葡萄糖，增加乳酸菌發(fā)酵底物；木聚糖酶能將木聚糖類半纖維素降解為低聚糖和木糖[7]。同時(shí)纖維素酶與木聚糖酶能打破青貯原料細(xì)胞壁表面結(jié)構(gòu)，使纖維素網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)變得松散，比表面積增大。因此反芻動物采食酶制劑處理后的青貯飼料，更利于瘤胃微生物的附著與分解，提高飼料的消化率[8]。Desta等人[9]在象草青貯中添加木聚糖酶，發(fā)酵30 d后，青貯過程中水溶性碳水化合物和乳酸含量增加，半纖維素含量降低。李茂[10]報(bào)道王草青貯時(shí)添加纖維素酶，顯著提高了乳酸含量、降低了pH值、酸性洗滌纖維和中性洗滌纖維含量，提高了發(fā)酵品質(zhì)。酶制劑添加劑在暖季型牧草青貯中研究較多，但在生產(chǎn)運(yùn)用時(shí)仍面臨作用不穩(wěn)定、普適性低等問題。本試驗(yàn)以象草為材料，旨在探討纖維素酶、木聚糖酶單獨(dú)以及組合添加對象草青貯發(fā)酵品質(zhì)和體外消化率的影響，為優(yōu)質(zhì)象草青貯飼料的生產(chǎn)和利用提供理論依據(jù)與技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試象草種植于南京農(nóng)業(yè)大學(xué)試驗(yàn)地(32°01′19″ N，118°51′08″ E，海拔25 m)，于2020年8月27日刈割，此時(shí)象草處于營養(yǎng)生長期，其化學(xué)成分如表1所示。試驗(yàn)所用酶為青貯專用酶制劑，購于中國南京奧德美生物技術(shù)有限公司。纖維素酶、木聚糖酶的酶活為5 400 U·g-1，添加量參考使用說明。實(shí)驗(yàn)室青貯窖采用容積為2 L有內(nèi)外蓋的聚乙烯容器。

表1 象草的化學(xué)成分Table 1 The chemical compositions of napier grass

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)采用完全隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，設(shè)對照組(CK)，添加纖維素酶組(CE)，添加木聚糖酶組(XE)，組合添加酶組(CX，纖維素酶+木聚糖酶)。添加量均以青貯原料鮮重(Fresh weight，F(xiàn)W)為基礎(chǔ)，其中纖維素酶、木聚糖酶添加量為0.3%(酶活為16.8 U·g-1FW)，組合添加酶組添加量為0.15%纖維素酶+0.15%木聚糖酶。分別在青貯7，30，60，90 d后打開實(shí)驗(yàn)室青貯窖取樣，測定相關(guān)發(fā)酵指標(biāo)。每個處理每個青貯天數(shù)設(shè)3個重復(fù)，總共48個實(shí)驗(yàn)室青貯窖。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1青貯飼料調(diào)制 象草切碎至2～3 cm，莖葉充分混合均勻后，按試驗(yàn)設(shè)計(jì)添加量將溶解于滅菌水中的纖維素酶、木聚糖酶溶液噴灑在切碎的象草上，對照組加等量滅菌水，再次充分混勻，裝入2 L實(shí)驗(yàn)室青貯窖中，每個青貯窖中裝1.36 kg，壓實(shí)后蓋上內(nèi)外蓋，用膠帶密封，置于室溫(25℃±5℃)下保存。

1.3.2樣品處理 青貯窖打開后，將全部青貯飼料取出混勻，采用四分法精準(zhǔn)稱量樣品20 g放入100 mL廣口錐形瓶中，加入60 g蒸餾水，密封后于4℃冰箱靜置24 h，然后通過4層紗布和定性濾紙過濾，得到青貯飼料的浸提液，立即測定pH后，于—20℃冰箱冷凍保存待測。浸提液用于測定氨態(tài)氮、乳酸、揮發(fā)性脂肪酸含量。將剩余青貯飼料收集，于65℃烘箱中烘60 h以上至恒重，粉碎過0.5 mm篩保存于自封袋中，用于水溶性碳水化合物、中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維和體外消化率的測定。

1.3.3測定指標(biāo)及分析方法 采用烘干恒重法測定青貯飼料干物質(zhì)含量[11]；pH值使用211型pH計(jì)(意大利哈納科技有限公司)測定[12]；氨態(tài)氮含量采用苯酚-次氯酸鈉比色法測定[13]；緩沖能采用鹽酸、氫氧化鈉滴定法測定[14]；水溶性碳水化合物采用硫酸-蒽酮比色法測定[15]；采用范氏纖維分析法測定青貯飼料中中性洗滌纖維(Neutral detergent fiber，NDF)、酸性洗滌纖維(Acid detergent fiber，ADF)和酸性洗滌木質(zhì)素(Acid detergent lignin，ADL)含量，NDF測定時(shí)加入α淀粉酶、亞硫酸鈉[16]。

采用高效液相色譜儀(1260 HPLC；德國安捷倫有限公司)測定乳酸及揮發(fā)性脂肪酸含量，色譜柱為Carbomix?H-NP5，流動相為2.5 mmol·L-1H2SO4，流速設(shè)定0.5 mL·min-1，溫度設(shè)定55℃[14]。

采用高效液相色譜儀(1260 HPLC；德國安捷倫有限公司)測定青貯飼料中葡萄糖、果糖、蔗糖含量，色譜柱為Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z，流動相0.3%的乙腈氨水溶液，流速設(shè)定0.4 mL·min-1，溫度設(shè)定35℃[12]。

1.3.4體外消化率測定方法 瘤胃液取自4只體況相近，裝有永久性瘺管的去勢波爾雜交山羊(平均體重為35 kg)。飼喂水平及日糧組成為：苜蓿干草45 g，羊草干草350 g，混合精料240 g(10%麩皮+25%豆粕+65%玉米粉)，維生素和礦物質(zhì)。于晨飼前采集瘤胃液，四層紗布過濾，置于39℃保溫瓶中，并立即帶回試驗(yàn)室，通入CO2維持厭氧條件。

稱取1 g青貯飼料樣品(65℃烘干后粉碎，過0.5 mm篩)于濾袋中，每個處理設(shè)3個重復(fù)，密封后置于血清瓶中，再向血清瓶中加入20 mL瘤胃液和40 mL McDougal緩沖液，置于搖床中培養(yǎng)(39℃，150 r·min-1)，進(jìn)行空白校正后，使用壓力傳感器技術(shù)記錄4，8，12，24，48，72 h的產(chǎn)氣量。試驗(yàn)結(jié)束后，從血清瓶中取出濾袋，洗滌后在65℃烘箱中干燥48 h至恒重，測定DM，NDF和ADF殘留量，計(jì)算體外干物質(zhì)消化率(InvitroDM digestibility，IVDMD)，體外中性洗滌纖維消化率(InvitroNDF digestibility，IVNDFD)和體外酸性洗滌纖維消化率(InvitroADF digestibility，IVNDFD)[17]。利用GraphPad 6.01軟件，根據(jù)France產(chǎn)氣模型計(jì)算產(chǎn)氣動力學(xué)參數(shù)，模型：GPt=B×(1—exp(-c×(t—Lag)))[18]，其中GPt是在t時(shí)間的累計(jì)產(chǎn)氣量，B表示理論最大產(chǎn)氣量(mL)；c表示產(chǎn)氣速率常數(shù)(mL·h-1)，Lag表示體外發(fā)酵產(chǎn)氣延滯時(shí)間(h)，t表示產(chǎn)氣時(shí)間點(diǎn)(h)。

動力有限元模型的離散參數(shù)需要根據(jù)相應(yīng)地層的剪切波波速及激勵的頻率范圍來確定[16]。為了簡化模型，同時(shí)又能反映地層的動力特性，根據(jù)地層剪切波速的變化范圍，將復(fù)雜的真實(shí)地層簡化為5層水平構(gòu)造，每層代表一個主要的剪切波速域[17]。剪切波速cs的計(jì)算公式[18]為：

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

采用Excel 2019進(jìn)行基礎(chǔ)數(shù)據(jù)收集歸納。采用統(tǒng)計(jì)分析系統(tǒng)(SAS 8.0)GLM程序?qū)?shù)據(jù)進(jìn)行雙因素方差分析(ANVOA)，采用Tukey’s HSD方法對處理間和青貯天數(shù)間平均數(shù)進(jìn)行多重比較(P<0.05)。

2 結(jié)果與分析

2.1 添加酶制劑對象草青貯過程中pH、干物質(zhì)損失、干物質(zhì)含量和氨態(tài)氮的影響

如表2所示，酶制劑處理、青貯天數(shù)及其互作對青貯過程中pH、干物質(zhì)損失、干物質(zhì)含量和氨態(tài)氮有顯著影響(P<0.05)。整個青貯過程中，各組pH逐漸降低，30 d降至最低，隨后略有提高。CE，XE，CX組pH低于CK組；青貯30 d后CX組pH顯著低于其它三組(P<0.05)，CE與XE組無顯著差異。

青貯過程中，干物質(zhì)含量逐漸降低，青貯前7 d各組差異不顯著，之后CE，XE，CX組干物質(zhì)含量顯著高于CK組(P<0.05)；CE，XE組青貯60 d，90 d后干物質(zhì)含量顯著高于CX組(P<0.05)，CE和XE組無顯著差異。氨態(tài)氮含量隨著青貯的進(jìn)行顯著提高(P<0.05)，CE，XE，CX低于CK組；青貯30 d后CX組氨態(tài)氮含量顯著低于CE和XE組(P<0.05)，CE和XE組無顯著差異。

表2 添加酶制劑對象草青貯過程中pH、干物質(zhì)損失、干物質(zhì)和氨態(tài)氮含量的影響Table 2 Effects of enzymes addition on pH,DM loss,AN and DM content of napier grass during ensiling

2.2 添加酶制劑對象草青貯過程中有機(jī)酸含量的影響

如表3所示：酶制劑處理、青貯天數(shù)及交互作用對青貯過程中乳酸、乙酸、丙酸和丁酸含量有顯著影響(P<0.05)。青貯過程中乳酸含量逐漸提高，青貯第30 d達(dá)到峰值，之后逐漸降低。CE，XE，CX組乳酸含量在21.28～48.44 g·kg-1DM之間，顯著高于對照組(P<0.05)；CX組乳酸含量始終高于CE，XE組。CE與XE組間青貯前期乳酸含量無顯著差異，但青貯60 d，90 d后CE組乳酸含量顯著高于XE組(P<0.05)。

隨著青貯天數(shù)的延長，乙酸含量逐漸提高。CE，XE，CX組乙酸含量始終低于CK組。青貯過程中乳酸/乙酸下降，但CE，XE，CX組均高于CK組(P<0.05)；除青貯第7 d以外，CX組乳酸/乙酸均顯著高于CE，XE組(P<0.05)。青貯過程中各組丙酸含量逐漸提高，除對照組青貯30 d后檢測到少量丙酸(3.49～4.85 g·kg-1DM)外，其余處理組均僅檢測出微量丙酸(0.38～1.86 g·kg-1DM)。

整個青貯過程中，各組丁酸含量有所提高，但含量均較低。青貯30 d后CE，XE，CX組檢測到少量的丁酸(2.95～6.17 g·kg-1DM)，顯著低于CK組(7.11～13.02 g·kg-1DM，P<0.05)。

表3 添加酶制劑對象草青貯過程中有機(jī)酸含量的影響Table 3 Effects of enzymes addition on organic acid content of napier grass during ensiling

2.3 添加酶制劑對象草青貯過程中結(jié)構(gòu)性碳水化合物組分含量的影響

如表4所示，酶制劑處理、青貯天數(shù)及交互作用顯著影響青貯過程中除ADL以外所有結(jié)構(gòu)性碳水化合物組分含量(P<0.05)。青貯過程中各組NDF含量逐漸降低，CE，XE，CX顯著低于CK組(P<0.05)；CX組NDF含量最低，在青貯第30 d與90 d顯著低于CE，XE組(P<0.05)；CE與XE組除青貯第30 d外無顯著差異。

青貯過程中添加酶處理組ADF含量逐漸降低，且均低于CK組。從青貯第30 d起，CE與CX組ADF含量顯著低于XE組(P<0.05)，CE與CX組無顯著差異。整個青貯過程中，各組ADL含量呈略有提高的趨勢，CE，XE，CX組ADL含量始終高于CK組，但各酶添加組差異均不顯著。

隨著青貯天數(shù)的延長,纖維素、半纖維素含量逐漸降低。CE，XE，CX組纖維素含量低于CK組，青貯30 d后CE，CX組顯著低于XE組(P<0.05)，CE，CX組無顯著差異。CE，XE，CX組半纖維素含量低于CK組，CX組半纖維素含量最低，在青貯30 d與60 d時(shí)顯著低于CE，XE組(P<0.05)，XE組半纖維素含量低于CE組。

2.4 添加酶制劑對象草青貯過程中水溶性碳水化合物、葡萄糖、果糖和蔗糖含量的影響

如圖1所示，整個青貯過程中，水溶性碳水化合物含量持續(xù)降低，CE，XE，CX水溶性碳水化合物含量高于CK組，其中CX組最高，CE與XE無顯著差異。青貯過程中，各組葡萄糖含量逐漸降低，CE，XE，CX組葡萄糖含量高于CK組，CX組含量最高，且在青貯第7 d，30 d顯著高于CE，XE組(P<0.05)。隨著青貯時(shí)間的延長，蔗糖、果糖含量逐漸降低，添加酶處理組始終顯著高于CK組(P<0.05)，CX組蔗糖、果糖含量最高，CE與XE組無顯著差異。

2.5 添加酶制劑對象草青貯飼料體外消化率、體外產(chǎn)氣量的影響

如表5所示，整個體外發(fā)酵過程中，CE，XE，CX組48，72 h累計(jì)產(chǎn)氣量均高于CK組，CX組48，72 h累計(jì)產(chǎn)氣量顯著高于CE，XE組(P<0.05)，CE，XE組無顯著差異。添加酶制劑處理后的象草青貯飼料IVDMD在57.09%～61.30%之間，顯著高于對照組(48.03%，P<0.05)，CX組IVDMD顯著高于CE，XE組(P<0.05)，CE和XE組無顯著差異。添加酶制劑象草青貯IVNDFD提高了4.33%～8.98%，IVADFD提高了7.83%～12.46%，均顯著高于對照組(P<0.05)。

表4 添加酶制劑對象草青貯過程中結(jié)構(gòu)性碳水化合物組分含量的影響Table 4 Effects of enzymes addition on structural carbohydrate components of napier grass during ensiling

圖1 酶制劑對象草青貯過程中水溶性碳水化合物、葡萄糖、果糖、蔗糖含量的影響Fig.1 Effects of enzymes addition on water soluble carbohydrate,glucose,fructose,sucrose contents of napier grass during ensiling注：不同小寫字母表示同一時(shí)間內(nèi)不同處理差異顯著(P<0.05)Note:Different lowcase letter indiacte significant differences at the 0.05 level

表5 酶制劑對青貯90 d象草青貯飼料體外消化率和體外產(chǎn)氣量的影響Table 5 In vitro digestibility coefficient and gas production of napier grass silage treated with enzymes after 90 days of ensiling

3 討論

3.1 添加酶制劑對象草青貯過程中發(fā)酵品質(zhì)的影響

青貯過程中CE，XE及CX組干物質(zhì)損失在18.11～56.34 g·kg-1DM之間，低于對照組22.11～79.03 g·kg-1DM，表明添加酶制劑組減少了干物質(zhì)的損失。干物質(zhì)損失主要是青貯早期的植物呼吸作用及青貯中、后期的微生物代謝所致[19]。青貯7 d后，酶制劑組乳酸含量顯著高于對照組，表明在象草青貯中添加酶制劑促進(jìn)了粗纖維的降解，釋放水溶性碳水化合物，為乳酸菌提供了額外的發(fā)酵底物，快速產(chǎn)生乳酸，降低pH，抑制了不良微生物的活性，這與酶制劑組WSC含量顯著高于對照組相呼應(yīng)[20]。CE，XE及CX組在青貯30 d后pH值顯著低于對照，CX組pH降至4.21，乳酸含量達(dá)48.84 g·kg-1DM，高于CE，XE組，說明在青貯中組合添加酶發(fā)酵品質(zhì)優(yōu)于單一添加。本研究與Smerjai等[21]研究結(jié)果一致。

通常青貯飼料中乳酸/乙酸大于2時(shí)，以同型乳酸發(fā)酵為主[22]。本試驗(yàn)中青貯前期乳酸含量提高，pH下降，以同型乳酸發(fā)酵為主，隨著青貯的進(jìn)行耐酸的異型發(fā)酵乳酸菌逐漸替代同型發(fā)酵乳酸菌成為優(yōu)勢菌群，既能產(chǎn)生乙酸，也能利用乳酸異化產(chǎn)生乙酸，導(dǎo)致乙酸含量提高，乳酸/乙酸下降[23-25]。

Tao等人[26]報(bào)道優(yōu)質(zhì)青貯飼料氨態(tài)氮含量應(yīng)小于100 g·kg-1TN，本試驗(yàn)氨態(tài)氮含量最高為80 g·kg-1TN(< 100 g·kg-1TN)，整個青貯過程中酶制劑組氨態(tài)氮含量低于對照組，青貯60 d顯著低于對照組，這是由于酶添加組乳酸含量高、pH低，抑制了不良微生物的活性，減少了對蛋白質(zhì)的降解，使氨態(tài)氮含量降低。Li等[27]在狼尾草(Pennisetumsinese)青貯中添加纖維素酶檢測出微量的丙酸、丁酸，與本試驗(yàn)結(jié)果一致，表明在象草青貯中添加酶制劑能有效抑制有害微生物活性，減少了丁酸和丙酸的產(chǎn)生[3,14]。

3.2 添加酶制劑對象草青貯過程中碳水化合物的影響

青貯過程中添加酶制劑，有助于植物細(xì)胞壁成分的降解，使纖維素、半纖維素含量降低，水溶性碳水化合物含量提高[18]。本試驗(yàn)添加酶制劑、青貯天數(shù)及兩者的交互作用顯著降低了象草青貯過程中除ADL以外所有結(jié)構(gòu)性碳水化合物組分的含量。青貯過程中CE，XE及CX組的纖維素、半纖維素含量均低于對照組，葡萄糖、果糖、蔗糖及水溶性碳水化合物含量高于對照組，認(rèn)為酶解作用直接引起了纖維素、半纖維素的降解，導(dǎo)致水溶性碳水化合物含量的提高[9]?？芙瓭萚28]報(bào)道在皇竹草中添加木聚糖酶，顯著降低了ADF含量。不同種類的酶制劑之間具有協(xié)同降解粗纖維的作用，組合添加更有利于青貯早期將結(jié)構(gòu)性碳水化合物降解為水溶性碳水化合物，本試驗(yàn)組合添加酶制劑組中纖維素酶與木聚糖酶協(xié)同作用導(dǎo)致纖維素、半纖維素含量顯著低于單獨(dú)添加纖維素酶、木聚糖酶[12]，這與組合添加酶組具有較高的WSC含量相呼應(yīng)。

Shao等[29]研究表明葡萄糖和果糖是乳酸菌優(yōu)先利用的底物，青貯開始后乳酸菌增殖，利用葡萄糖和果糖，產(chǎn)生乳酸，乳酸含量逐漸提高，葡萄糖和果糖含量逐漸降低，青貯后期趨于穩(wěn)定。本試驗(yàn)整個青貯過程中，CE，XE及CX組水溶性碳水化合物、葡萄糖、果糖和蔗糖含量均高于對照組，表明纖維素酶和木聚糖酶降解了部分纖維素和半纖維素，釋放了葡萄糖、果糖和蔗糖，提高了水溶性碳水化物含量；其次添加纖維素酶和木聚糖酶加速了青貯過程中乳酸的生成，抑制了有害微生物對水溶性碳水化合物的消耗，使更多的WSC得以保留。黃秋連[30]和趙金鵬等[6]在羊草和水稻秸稈青貯中也得到相似結(jié)果。CX組WSC含量始終高于CE，XE組，纖維素和半纖維素含量顯著低于CE，XE組，說明纖維素酶和木聚糖酶組合添加更有利于提高象草青貯發(fā)酵品質(zhì)。

3.3 酶制劑對象草青貯飼料體外消化率的影響

體外模擬瘤胃發(fā)酵在一定程度上可以反映反芻動物對青貯飼料的消化率，IVDMD，IVNDFD，IVADFD和體外產(chǎn)氣量是重要的衡量指標(biāo)[31]。研究表明青貯飼料IVDMD與粗纖維含量負(fù)相關(guān)[20]。與對照組相比，酶制劑組青貯90 d后的青貯飼料IVDMD顯著高于對照組，這與Chen等[32]研究結(jié)果一致。Li等[27]報(bào)道酶降解作用可以改變青貯飼料表面結(jié)構(gòu)，增加纖維間的孔隙度、表面積和可及性，增加反芻動物瘤胃微生物酶與青貯飼料的接觸面積，提高IVNDFD和IVADFD。本試驗(yàn)添加酶制劑組與對照相比IVNDFD提高了4.33%～8.98%，IVADFD提高了7.83%～12.46%，說明添加酶制劑組較低的ADF，NDF有利于瘤胃微生物對粗纖維的降解。CX組IVNDFD，IVADFD高于CE，XE組，這是由于纖維素酶與木聚糖酶之間的協(xié)同作用，不僅提高了青貯飼料的WSC、乳酸含量為瘤胃微生物提供了發(fā)酵底物，也裂解了象草中纖維素與半纖維素之間的連接鍵，使纖維素結(jié)晶度降低，比表面積增大，利于瘤胃微生物附著及降解[9]。

青貯飼料的發(fā)酵產(chǎn)物、碳水化合物和含氮物質(zhì)是體外產(chǎn)氣的主要底物[33-34]。體外產(chǎn)氣速率越快，累計(jì)產(chǎn)氣量越多，飼料消化率越高。本試驗(yàn)添加酶制劑組72 h累計(jì)產(chǎn)氣量、產(chǎn)氣速率常數(shù)和理論最大產(chǎn)氣量均顯著高于對照組，表明添加酶制劑可提高青貯飼料的消化率。IVNDFD，IVADFD的提高增加了飼料比表面積，利于瘤胃微生物的附著與增殖[35]。CX組72 h累計(jì)產(chǎn)氣量顯著高于CE，XE組，也證明了組合添加酶組青貯飼料消化率更高。

4 結(jié)論

綜上所述，添加纖維素酶、木聚糖酶降低了纖維素、半纖維素含量，提高了葡萄糖、果糖、蔗糖及總水溶性碳水化合物含量，促進(jìn)了青貯過程中乳酸發(fā)酵，快速產(chǎn)生乳酸、降低pH、氨態(tài)氮含量，提高了發(fā)酵品質(zhì)、體外消化率和體外產(chǎn)氣量。但纖維素酶和木聚糖酶組合添加效果最好。