獼猴桃病害防治研究進展

肖 蓉，石 浩，卜范文，王 琰，賀富胤，王仁才

（1.湖南省微生物研究院，湖南 長沙 410009；2.湖南農(nóng)業(yè)大學園藝學院，湖南 長沙 410128；3.湖南省園藝研究所，湖南 長沙 410125；4.湖南生物機電職業(yè)技術(shù)學院，湖南 長 沙 410127）

獼猴桃（Actinidia chinensis）是一種雌雄異株的多年生大型落葉藤本漿果[1]，其果肉汁水豐富，口感適宜，且含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，不僅具有保健功能，而且有多種藥用功能[2]。它的果形有橢圓狀、卵形、圓柱形等，美味獼猴桃外表皮通常都是棕褐色帶有絨毛，中華和軟棗獼猴桃體表褐色、光滑無絨毛，果肉有綠色、黃綠色等，果心有紅色、黃色、綠色。我國作為獼猴桃第一生產(chǎn)大國，擁有62 種獼猴桃品種，而目前全球獼猴桃品種僅66 種。2006 年至今，我國的獼猴桃栽培面積和年產(chǎn)量一直穩(wěn)居世界第一。而湖南省是我國獼猴桃5 大生產(chǎn)地之一[3]。獼猴桃現(xiàn)已經(jīng)成為湖南地區(qū)獨具特色的扶貧產(chǎn)業(yè)和新興產(chǎn)業(yè)，發(fā)展迅速。據(jù)調(diào)查，2019 年底，湖南省的獼猴桃栽培面積已達2 萬hm2，當年的產(chǎn)量超過31 萬t。獼猴桃產(chǎn)業(yè)是湖南地區(qū)重要的脫貧致富項目之一，在推動湖南社會經(jīng)濟發(fā)展、增加農(nóng)民收入過程中發(fā)揮了重要作用。近年來，有關(guān)湖南各地區(qū)獼猴桃患病的報道越來越多，尤其是獼猴桃潰瘍病，呈現(xiàn)出從原本罕見到大規(guī)模爆發(fā)、從原本僅紅心獼猴桃容易感病到現(xiàn)在幾乎所有獼猴桃品種都發(fā)病的趨勢。病害的發(fā)生成為限制獼猴桃產(chǎn)業(yè)發(fā)展的主要因素。筆者就目前國內(nèi)外獼猴桃病害的研究進展進行綜述，以期為獼猴桃病害的有效防控提供一定參考依據(jù)。

1 獼猴桃真菌性病害防治研究進展

1.1 獼猴桃褐斑病

獼猴桃褐斑病為一種真菌性病害，主要影響獼猴桃的葉子和枝干，5—6 月為病菌侵染高峰期，7—8月為發(fā)病高峰期，葉片出現(xiàn)干枯卷曲和褐斑，發(fā)病嚴重時可導致落果，甚至樹體死亡。果實發(fā)病時會出現(xiàn)圓形或橢圓形、淺棕色到深棕色、直徑為1～8 mm 的壞死病灶。Li 等[4]在獼猴桃褐斑病葉中分離鑒定出細極鏈格孢（Alternaria tenuissima），病原菌回接試驗結(jié)果顯示病癥相同，表明A. tenuissima是獼猴桃褐斑病的致病菌。冉飛等[5]在紅陽獼猴桃發(fā)病葉中分離鑒定出細極鏈格孢（A. tenuissima），采用6 種藥劑處理病原菌，對菌絲的生長均有一定的抑制作用，其抑菌活性由強至弱依次為咪鮮胺＞苯醚甲環(huán)唑＞戊唑醇＞異菌脲＞肟菌酯＞吡唑醚菌酯，其中咪鮮胺抑菌效果最好，EC50值僅為0.008 4 mg/L。吳曉枝[6]采用嘧菌酯、代森錳鋅、甲基硫菌靈3 種藥劑，在獼猴桃褐斑病發(fā)病初期（6 月上旬）進行防治，其防治效果分別達到了81.7%、74.6%、70.8%。

1.2 獼猴桃軟腐病

獼猴桃軟腐病是果實貯藏期間最常見的一種潛伏性病害，果實剛采摘時發(fā)病不明顯，但果實采后軟熟期發(fā)病率極高，可導致50%以上果實發(fā)病。果實病灶部將出現(xiàn)直徑1～3 cm、灰暗色的凹陷病斑，病斑處果肉腐化較為嚴重，果肉呈現(xiàn)乳白色，后期表皮滲出一定的組織液。軟腐病的主要致病菌是葡萄座腔菌（Botryosphaeria dothidea）和擬莖點霉菌（Diaporthesp.）。劉奎等[7]發(fā)現(xiàn)枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilisstrain）BS-1 菌液及其無菌體發(fā)酵液能夠明顯抑制上述2 種菌絲的體外生長，抑菌率可達80%左右；用枯草芽孢桿菌BS-1 菌液及其無菌體發(fā)酵液處理患病果實，可提高果實的耐貯性，延長果實貨架期。左盼盼等[8]在軟腐狀的徐香獼猴桃中除了分離鑒定出葡萄座腔菌（B.dothidea）和擬莖點霉菌（Diaporthesp.）外，還分離到灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea）、層出鐮刀菌（Fusarium proliferatum）和鏈格孢菌（Alternariasp.）；采用香芹酚對上述病原菌進行抑菌試驗，發(fā)現(xiàn)對葡萄座腔菌和擬莖點霉菌的抑制作用尤為顯著，半抑制質(zhì)量濃度（EC50值）均為8.87 μg/L；采用58 mg/L 香芹酚處理患病的果實，常溫放置第8 天時，果實發(fā)病率僅為對照的50.17%。石浩等[9]從紅陽獼猴桃中分離鑒定出2種主要病原真菌，其中擬莖點霉菌（Diaporthesp.）占總菌落數(shù)的54.8%，葡萄座腔菌（B. dothidea）占總菌落數(shù)的34.4%，2 種病原菌對葡萄糖、淀粉和蔗糖具有較高的利用率，最適生長pH 值為5～7，致死溫度為85℃。石浩等[10]采用120 種具有一定殺菌抑菌效果的中藥提取物處理葡萄座腔菌和擬莖點霉菌，發(fā)現(xiàn)丁香、肉桂、零陵香、黃芩、油茶粕、廣藿香、石菖蒲、迷迭香、黃連、鳳仙透骨草、山蒼子等植物提取物具有較好的抑菌效果，當提取物濃度為1 g/mL（生藥）時，可使2 種病原菌的抑菌圈直徑達到15 mm 以上。鄧蕾等[11]采用一系列藥劑分別在獼猴桃露白期、謝花期、著果前7 d 及套袋前1 d 處理獼猴桃，發(fā)現(xiàn)為45%代森銨150 倍液、30%琥膠肥酸銅300 倍液、86.2%銅大師1 000 倍液及47%春雷王銅500 倍液的田間防治效果較佳，防效依次為91.48%、89.10%、86.76%及85.62%。

1.3 獼猴桃灰霉病

獼猴桃灰霉病是一種真菌性病害，花蕾、葉片、枝梢、幼果、果實成熟期、果實入庫后幾乎全程感染?；ㄇ扒秩净ɡ伲ê笥坠腥韭首罡呖蛇_10%～20%；但主要危害葉片和果實，使葉片邊緣或葉尖出現(xiàn)壞死；果實感染后，形成圓形或不規(guī)則形褐色病斑，中后期果實表現(xiàn)局部腐爛，同時感染部位會出現(xiàn)大量的灰色霉層。Kai 等[12]從感染灰霉病獼猴桃的果實中分離鑒定出病原菌為灰葡萄孢（Botrytis cinerea）；采用姜黃素處理病原菌和果實，姜黃素可以提高菌絲體內(nèi)H2O2的含量、破壞菌絲細胞結(jié)構(gòu)、降低相關(guān)防御基因表達等，但可誘導果實產(chǎn)生更強的免疫反應(yīng)。Luo等[13]同樣鑒定出獼猴桃灰霉病病原菌為灰葡萄孢（B.cinerea），當在170.32 mg/m3的氣態(tài)臭氧中每天處理1 h，持續(xù)7 d（0℃）條件下，灰葡萄孢的菌絲發(fā)育和孢子的萌發(fā)受到抑制，同時獼猴桃保持了高水平的果實硬度和可滴定酸度，并且防御相關(guān)酶的活性明顯增強。胡妍月等[14]采用苯甲·嘧菌酯433 mg/kg、唑醚·氟酰胺424 mg/kg、苯醚甲環(huán)唑100 mg/kg、戊唑·嘧菌酯750 mg/kg、吡唑醚菌酯·戊唑醇300 mg/kg、吡唑醚菌酯·噻呋酰胺200 mg/kg 對灰霉病進行防治，防效可達76.09%～81.57%。

1.4 獼猴桃黑斑病

該病害主要危害果實，于5—6 月幼果期開始發(fā)病，膨大期盛發(fā)，病果易腐爛、易落果，果面出現(xiàn)褐色圓形或不規(guī)則凹陷病斑，隨著病斑的擴大，病斑顏色逐漸加深變黑。周英[15]對獼猴桃黑斑病的病原進行了形態(tài)學和分子生物學鑒定，明確其病原菌為鏈格孢（Alternaria alternata）；該病原菌的最適生長溫度為25℃，最適pH 值為6，通過抑菌試驗發(fā)現(xiàn)，50%咪鮮胺錳鹽、25%已唑醇、10%申嗪霉素、75%肟菌·戊唑醇、10%苯醚甲環(huán)唑、25%丙環(huán)唑、75%戊唑·嘧菌酯和40%氟硅唑這8 種殺菌劑對A. alternata具有強抑制效果，EC50值介于0.182 1～0.763 3 μg/mL 之間。趙金梅等[16]對感病中華獼猴桃果實進行病原菌分離鑒定及病原菌回接試驗，發(fā)現(xiàn)病狀一致，其病原菌也被確定為鏈格孢（A. alternata），同時還篩選到氟硅唑、苯醚甲環(huán)唑、異菌脲和多抗霉素4 種藥劑對病原菌具有較強的抑制作用。周英等[17]從感染黑斑病的金艷獼猴桃中分離鑒定出鏈格孢（A. alternata），并發(fā)現(xiàn)申嗪霉素、咪鮮胺錳鹽、己唑醇、肟菌·戊唑醇、丙環(huán)唑、苯醚甲環(huán)唑、戊唑·嘧菌酯和氟硅唑這8 種殺菌劑對病原菌具有較強的抑菌活性，EC50值均小于1μg/mL。張凱東等[18]采用西姆芽孢桿菌JY-1、熒光假單胞桿菌、枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌和蠟質(zhì)芽孢桿菌處理獼猴桃黑斑病菌（A. alternata）和白紋羽病菌（Rosellinia necatrix），均具有較好的抑制效果，其中JY-1 抑菌效果較佳，對2 種病原菌的抑制率分別為62.12%和75.09%。劉欣[19]研究發(fā)現(xiàn)，0.5%小檗堿（有效成分12.5 mg/kg）水劑能有效防治獼猴桃褐斑病，防治效果達到了81.44%。錢一鑫等[20]從藥用植物牡蒿（Artemisia japonica）中分離篩選出獼猴桃黑斑病生防菌株GMH31，優(yōu)化其發(fā)酵條件后，該生防菌對獼猴桃黑斑病菌的抑制率達到了90.25%。

1.5 獼猴桃根腐病

獼猴桃根腐病是一種真菌性病害，每年2—3 月開始發(fā)生，5—8 月是發(fā)病盛期，能造成根頸部和根系皮層腐敗，初期根頸部皮層出現(xiàn)水浸狀黃褐色斑，隨后逐漸變黑腐爛，并擴展至整個根系，流出棕褐色汁液，發(fā)出酒糟味。尉瑩瑩等[21]2017 年在遼寧丹東新發(fā)現(xiàn)一種軟棗獼猴桃根腐病害，通過組織分離法和單孢分離法從感病株中獲得純化菌株HMQAU150043 和HMQAU150044，經(jīng)形態(tài)學觀察、ef-1a 序列分析、mt SSU 序列分析及柯赫氏法則驗證，確定2 株病原菌均為多見鐮孢（Fusarium commune），這是該菌所致軟棗獼猴桃根腐病的首次發(fā)現(xiàn)。庫永麗[22]從徐香獼猴桃腐敗的根中分離鑒定出病原菌茄腐皮鐮孢霉（Fusarium solani），并從正常果樹根際土壤中分離到一株枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis），通過試驗發(fā)現(xiàn)該枯草芽孢桿菌可分泌抑菌蛋白，對茄腐皮鐮孢霉具有較強的抑制作用，同時枯草芽孢桿菌還可促進獼猴桃幼苗生長、誘導幼苗抗性酶活性升高。莊啟國等[23]以甲霜靈、惡霉靈、木霉菌、亞磷酸鹽為供試藥劑在4 月和7 月通過大樹環(huán)澆法進行獼猴桃根腐病防治試驗，發(fā)現(xiàn)甲霜靈和木霉菌對根腐病具有很好的防治效果，且對獼猴桃的產(chǎn)量與生長具有一定的促進作用。

1.6 獼猴桃炭疽病

獼猴桃炭疽病是一種真菌性病害，主要危害獼猴桃的莖葉和果實，造成葉斑和穿孔，莖稈褐變壞死，果實呈水漬狀。目前國內(nèi)外對于獼猴桃炭疽病的研究不多，日本的Ushiyama 等[24]從感染炭疽病菌的獼猴桃葉中分離出尖頭炭疽菌（Colletotrichum acutatum）和圍小叢殼（Glomerella cingulata），被證實為獼猴桃炭疽病原菌。韓國的Jeong 等[25]發(fā)現(xiàn)采用避雨栽培可降低20%以上的炭疽病發(fā)病率，同時通過對病原菌的分離鑒定，認為猴桃炭疽病的主要病原菌為圍小叢殼菌（G. cingulata）。胡容平等[26]采用50%多菌靈、65%代森鋅、50%乙烯菌核利、70%甲基托布津可濕性粉劑4 種殺菌劑對炭疽病原菌進行抑菌試驗，發(fā)現(xiàn)抑制炭疽病菌分生孢子效果最好的是65%代森鋅1 000 倍液，EC50值為2.9 μg/mL。趙豐[27]以獼猴桃炭疽病發(fā)病果梗為材料進行病原菌分離鑒定，確定其病原菌為隔孢叢殼菌（Glomerella septospora），同時采用8 種殺菌劑進行抑菌試驗，發(fā)現(xiàn)各藥劑的防效由高到低排列依次為凱潤（250 g/L 吡唑醚菌酯）＞拿敵穩(wěn)（75%肟菌·戊唑醇）＞好力克（430 g/L 戊唑醇）＞福星（400 g/L 氟硅唑）＞世高（10%苯醚甲環(huán)唑）＞保倍（50%福美雙）＞抑快凈（52.5%噁唑菌酮·霜脲氰）＞阿克白（50%烯酰嗎啉），當凱潤濃度為15.63 μg/mL 時，抑菌率達到了91.78%。

1.7 獼猴桃葉斑病

獼猴桃葉斑病是一種真菌性病害，主要危害獼猴桃的葉片，一般在7—9 月發(fā)病，感菌后葉片正面會出現(xiàn)褐色圓點，直徑大約1 mm，四周有綠色暈圈，可擴展至3～5 mm。秦雙林等[28]對獼猴桃一種新的葉斑病進行病原菌分離鑒定，共分離得到32 個真菌菌株，通過病原菌回接試驗發(fā)現(xiàn)這些菌株均具有致病性，隨機抽取3 個優(yōu)勢菌株進行ITS 測序，發(fā)現(xiàn)3 個菌株的序列相同，進行GenBank 比對發(fā)現(xiàn)3 個菌株均為半知菌類棒孢屬中的多主棒孢（Corynespora cassiicola）。石金巧等[29]對發(fā)病葉片組織中病原菌進行分離鑒定，確定引起獼猴桃葉斑病的病原為可可毛色二孢菌（Lasiodiplodia theobromae），病原菌回接試驗與病原葉病癥一致，該病原菌最適生長溫度為28℃、最適pH 值為5。石金巧等[30]對獼猴桃葉斑病防治進行藥劑篩選試驗，發(fā)現(xiàn)29%吡萘·嘧菌酯和36%喹啉·戊唑醇對該菌具有較強的抑制效果，半抑制濃度EC50值分別僅為0.182 6 和0.633 8 mg/L，田間防效分別為78.88%和77.94%，獼猴桃經(jīng)2 種藥劑處理后，果實外觀品質(zhì)和產(chǎn)量均有所提高。

2 獼猴桃細菌性病害防治研究進展

2.1 獼猴桃花腐病

獼猴桃花腐病是一種細菌性病害，主要危害獼猴桃花蕾以及盛花期各花器官，其次危害幼果和葉片，可引起大量落花、落果，還可造成小果和畸形果。有關(guān)花腐病的研究不多。意大利的Balestra 等[31]在枯萎的獼猴桃花蕾上分離鑒定出綠黃假單胞菌（Pseudomonas viridiflava）。陳聽聽等[32]從貴長獼猴桃發(fā)病花蕾中分離獲得的病原菌為綠黃假單胞菌（P.viridiflava），同時采用中生菌素、氯溴異氰尿酸、乙蒜素、戊唑醇、噻霉酮、氫氧化銅、氟啶胺、多抗霉素、甲基硫菌靈等藥劑進行抑菌試驗，發(fā)現(xiàn)中生菌素對其具有最高抑菌活性，半抑制濃度（EC50值）僅為1.24 mg/kg。孟軍政[33]在防治獼猴桃花腐病時發(fā)現(xiàn)，花蕾期噴施600～800 倍液的2%中生菌素、600～800 倍液的2%雷春霉素、800～1 000 倍液的2%葉枯唑可有效防治果園中的花腐病。張勝菊等[34]認為在獼猴桃休眠芽鱗片形成期（11 月上旬）噴施77%可濕性粉劑800 倍液，萌芽期噴施波爾多液，花蕾期噴施土霉素、春霉雷素、鏈霉素的800～1 000 倍液，可有效防治獼猴桃花腐病。

2.2 獼猴桃根癌病

獼猴桃根癌病是一種細菌性病害，主要危害獼猴桃的根部，發(fā)病后根際癥狀為根瘤，根瘤初生為乳白色，表面凹凸不平，后轉(zhuǎn)為褐色至深褐色，組織木質(zhì)化。目前，國內(nèi)外對根腐病的研究不多，僅宋曉斌等[35]對獼猴桃根癌病原菌進行了分離鑒定，明確了其病原菌為根癌土壤桿菌（Agrobacterium tumefaciens），并發(fā)現(xiàn)該病害在堿性和黏重土壤中發(fā)病率高，酸性土壤不發(fā)病。張相文等[36]認為，病發(fā)嚴重時可剪除病灶處，并用5%菌毒清100 倍液+碧護5 000 倍液泡根30 min，再采用石硫合劑或50%甲基硫菌靈可濕性粉劑500 倍液，澆灌根部土壤進行殺菌消毒。該方法可有效抑制獼猴桃根癌病的發(fā)生。

2.3 獼猴桃潰瘍病

獼猴桃潰瘍病是目前無法根治的一種病害，只能預(yù)防，一旦植株患病至末期只能進行銷毀。病菌主要侵染植株的莖稈和葉，植株感病后木質(zhì)部造成局部潰瘍、腐爛，嚴重時可環(huán)繞莖稈引起樹體死亡。病菌對溫度的影響較為敏感，15℃左右時，病原菌最適宜生長，當溫度上升至25℃以上，該病害便受到抑制。該病的主要病原菌為丁香假單胞菌丁香致病 變 種（Pseudomonas syringaepv.syringae）[37]、 丁香假單胞菌死李致病變種（Pseudomonas syringaepv.morsprunorum）[38]和丁香假單胞菌獼猴桃致病變種（P.syringaepv.antinidiae，Psa）[39-40]。高蓬明等[41]發(fā)現(xiàn)20%溴硝醇、30%乙蒜素、80%代森錳鋅等11 種農(nóng)藥殺菌劑對獼猴桃潰瘍病具有不錯的防治效果，其中20%溴硝醇1 000 倍液的病斑治愈率超過了90%。黃露等[42]發(fā)現(xiàn)0.3%四霉素水劑、72%硫酸鏈霉素、78%波爾·錳鋅等6 種農(nóng)藥殺菌劑對Psa有不錯的抑制效果，田間試驗發(fā)現(xiàn)0.3%四霉素水劑的防效最高，為71.06%。歐志升等[43]采用噴霧法將20%細寶葉枯唑、20%噻唑鋅和農(nóng)用有機硅的混合液噴施于獼猴桃葉片、枝蔓、樹干，一個月噴施4 次，對獼猴桃潰瘍病的防效可達75.2%。燕金宜[44]從獼猴桃植株中分離得到了一種內(nèi)生真菌Nigrosporasp.，其對Psa也有很好的抑制效果，抑菌圈直徑達15 mm。崔麗紅等[45]從根系內(nèi)生菌中分離得到了3 種對Psa有拮抗作用的菌株，抑菌圈直徑最高的可達14.5 mm。申哲等[46]發(fā)現(xiàn)gCLA4 菌株的粗提活性物質(zhì)的抑菌效果非常顯著；田間試驗顯示，在近一個月的時間里，它的100 倍稀釋液對潰瘍病的防治率高達64.9%。李曉蓮等[47]發(fā)現(xiàn)砂藍刺頭提取物、沙打旺提取物、苦馬豆提取物對潰瘍病菌具有較好的抑制效果，且與葉枯唑復(fù)配后抑菌效果更佳，最小殺菌濃度（MBC 值）均為31.25 mg/mL，較單一的葉枯唑處理抑菌效果提高了50%。Ratanapo 等[48]發(fā)現(xiàn)桑葉提取物中的2 種有效物質(zhì)N-羥乙酰神經(jīng)氨酸MLL1 和MLL2 對丁香假單胞菌有明顯抑制作用，其有效殺菌濃度為12.5 mmol/L。翟晨風[49]發(fā)現(xiàn)噻菌銅、春雷霉素、潰腐靈、大蒜油、禾奇正中藥肥對獼猴桃潰瘍病具有一定防治效果，其中效果最好是潰腐靈，防效達到了70%，春雷霉素和噻菌銅防治效果也較好，平均防效為59.5%，而大蒜油和禾奇正中藥肥防治效果較弱，平均防效為48.3%。

3 展 望

3.1 大力發(fā)展中草藥、生物制劑

化學農(nóng)藥的使用會影響植物的生長發(fā)育，并且容易造成環(huán)境的污染，消費者也擔心殘留的農(nóng)藥影響身體健康，但是目前化學農(nóng)藥仍舊是防治植物病蟲害的主要手段。雖然近年來，人們越來越重視環(huán)境的保護和生物藥劑、植物源藥劑的研究，但確實存在著諸多問題有待解決。（1）增加對中草藥植物的抑菌研究，最好建立明確的防治體系，探明哪些中草藥對哪種病原菌有什么作用。（2）加強對中草藥提取液中抑菌活性物質(zhì)的研究，了解其抑菌機理，并通過結(jié)構(gòu)化研究和分析等開發(fā)防治藥劑。（3）加強對抑菌活性物質(zhì)分離和提純的研究，優(yōu)化工藝條件，以便大規(guī)模生產(chǎn)。（4）加強活性物質(zhì)的抑菌機理研究，從基因?qū)哟紊蠟橐志鷦┑难邪l(fā)提供充分的理論依據(jù)。（5）加強中藥復(fù)配抑菌劑的研究與開發(fā)，擴大抑菌譜，以代替化學農(nóng)藥。

3.2 完善獼猴桃病害防治體系

（1）提高獼猴桃的種植管理水平。栽種抗病品種來降低患病風險，建立防風林或采用大棚栽培以控制病原菌傳播。冬季及時清園、加強病蟲害防控、清除果園殘枝敗葉、破壞病原菌的生長環(huán)境；加強肥水與修剪管理，多施有機肥、少打農(nóng)藥，改善果樹生長環(huán)境，提高果樹和果實的自身抗性等。（2）加強對獼猴桃潰瘍病的監(jiān)測。一旦發(fā)現(xiàn)獼猴桃潰瘍病病株，需馬上采取有效措施，控制病情傳播。（3）系統(tǒng)研究病菌入侵和傳播過程以及獼猴桃樹體內(nèi)的生理代謝變化，以便及時采取應(yīng)對措施。（4）深入研究各種藥劑防治獼猴桃潰瘍病的作用機理。（5）研究抗病基因，利用基因拼接技術(shù)、基因克隆技術(shù)等培育新的抗病品種。