卵內(nèi)注射亮氨酸對慢性熱應(yīng)激雌性肉雞生長性能、腸道組織形態(tài)和抗氧化能力的影響

崔洋洋 韓國鋒 李延森 李春梅

(南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，家畜環(huán)境控制與智慧生產(chǎn)研究中心，南京 210095)

近年來，全球變暖已造成許多地區(qū)高溫季節(jié)時間延長，對人類健康和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成負面影響?，F(xiàn)代肉雞養(yǎng)殖企業(yè)多采用自動化和高密度的飼養(yǎng)模式，同時肉雞具有代謝率高、無汗腺、對熱敏感等特點，這就使得肉雞很容易受到高溫影響而產(chǎn)生熱應(yīng)激[1-2]。熱應(yīng)激根據(jù)應(yīng)激時間分為“急性熱應(yīng)激”和“慢性熱應(yīng)激”。急性熱應(yīng)激是指環(huán)境溫度的短暫而快速的升高，慢性熱應(yīng)激是指長時間(≥3 d)內(nèi)環(huán)境溫度升高。此外，慢性熱應(yīng)激根據(jù)是否存在間歇性又分為周期慢性熱應(yīng)激和連續(xù)熱應(yīng)激。周期性慢性熱應(yīng)激指動物在一段時間內(nèi)暴露于熱環(huán)境中，其他時間則處于舒適溫度，而連續(xù)性熱應(yīng)激是指動物持續(xù)面臨高溫環(huán)境[3]。目前動物養(yǎng)殖生產(chǎn)中最常發(fā)生的是周期性慢性熱應(yīng)激[4]。據(jù)報道，每年因高溫引起的熱應(yīng)激造成的家禽產(chǎn)業(yè)經(jīng)濟損失達12 800萬美元[5]。近年來，世界肉類消費結(jié)構(gòu)逐漸從牛、羊肉向禽肉轉(zhuǎn)移，雞肉生產(chǎn)增長遠高于牛肉、豬肉，2020年商品代白羽肉雞出欄總量51.55億只，漲幅高達13.25%[6]。同時，由于非洲豬瘟導(dǎo)致豬肉產(chǎn)量下降，豬肉價格升高，雞肉消費需求進一步升高[7]。因此，尋找有效緩解家禽生產(chǎn)中熱應(yīng)激問題的策略日益引起研究人員關(guān)注。目前主要是利用飼料添加劑和控制環(huán)境溫度來緩解熱應(yīng)激對家禽造成的損傷[8]，但這些方法都是被動的來緩解熱應(yīng)激造成的損傷，具有效率低和成本高等缺點[9]。

前人研究表明，胚胎期熱操縱(thermal manipulation,TM)技術(shù)可使孵化后的雛雞具有耐熱性[10-11]。我們先前研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)TM可改變?nèi)怆u胚胎期肝臟和大腦中的亮氨酸濃度[12]。根據(jù)Ohta等[13]試驗研究和本試驗先前研究結(jié)果，我們選擇在胚胎期第7天于卵黃囊內(nèi)注射亮氨酸，結(jié)果發(fā)現(xiàn)卵內(nèi)注射亮氨酸能提高熱應(yīng)激條件下雄性肉雞的耐熱性[14]和生長性能[15]；此外，Erwan等[16]報道，飼糧中添加亮氨酸對肉雞的采食量、體增重和飼料轉(zhuǎn)化率并無顯著影響。這就說明在提高肉雞耐熱性方面，卵內(nèi)注射亮氨酸顯著優(yōu)于飼糧添加。

卵內(nèi)注射技術(shù)具有安全性高、接種速度快、劑量準確、便于機械化操作和節(jié)省人力等優(yōu)點，并且該技術(shù)在家禽早期免疫調(diào)控的應(yīng)用方面取得了較大成功[17]。目前已經(jīng)報道的卵內(nèi)注射的物質(zhì)主要有氨基酸及其代謝物類、維生素、電解質(zhì)、益生菌、碳水化合物以及一些小肽類物質(zhì)等[18]，這些外源性物質(zhì)具有改善胚胎期營養(yǎng)狀況，促進胚胎發(fā)育，提高雛雞出殼后免疫功能、生長性能、抗熱應(yīng)激能力、肉品質(zhì)等功能[12,19]。卵內(nèi)注射技術(shù)作為一項新技術(shù)，目前仍面臨許多挑戰(zhàn)，如禽蛋品種，注射液的種類、濃度、劑量等都會影響卵內(nèi)注射的效果，以及卵內(nèi)注射對后代影響持續(xù)時間等都需要進一步研究。我們相信在未來會有更多的新型營養(yǎng)物質(zhì)或其他補充劑應(yīng)用于卵內(nèi)注射技術(shù)的研究中，從而挖掘出更多高效的卵內(nèi)注射補充劑進一步促進禽類產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展。

熱應(yīng)激引起肉雞體溫升高、采食量降低，最終降低肉雞的生產(chǎn)性能[20]。熱應(yīng)激還會破壞腸道組織形態(tài)，造成腸道上皮細胞壞死、脫落，降低肉雞的生長性能和抗氧化能力[21]。此外，熱應(yīng)激也會影響法氏囊、脾臟等免疫器官的發(fā)育，降低肉雞的免疫功能[22]。亮氨酸是一種必需氨基酸，參與蛋白質(zhì)的從頭合成，還參與維持和調(diào)控動物多種生理功能[23-24]。本課題組前期研究已經(jīng)證實，肉雞胚胎期亮氨酸營養(yǎng)干預(yù)可以通過激活脂代謝和氨基酸代謝提高肉雞對熱應(yīng)激的耐受[14,25]。胚胎期注射亮氨酸水溶液(0.5 mL/枚，含4.03 mgL-亮氨酸)可以降低急性熱應(yīng)激肉雞間腦中熱休克蛋白基因表達水平[26]。此外，飼糧中長期補充亮氨酸可以提高金鯧魚的生長性能和抗氧化能力[27]。最新研究發(fā)現(xiàn)，胚胎期亮氨酸營養(yǎng)干預(yù)能顯著提高慢性熱應(yīng)激雄性肉雞的生長性能[28]，但是目前關(guān)于卵內(nèi)注射亮氨酸對慢性熱應(yīng)激雌性肉雞生長性能和抗氧化能力的研究未見報道。因此，本研究旨在探討胚胎期亮氨酸營養(yǎng)干預(yù)對慢性熱應(yīng)激雌性肉雞生長性能和抗氧化能力的影響，明確卵內(nèi)注射亮氨酸是否能恢復(fù)慢性熱應(yīng)激對雌性肉雞生長性能、腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)和抗氧化能力造成的損傷，為卵內(nèi)注射亮氨酸在家禽抗熱應(yīng)激領(lǐng)域的進一步應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗設(shè)計

試驗選取日齡相同、蛋重相近的羅斯308種蛋200枚，隨機分為2組(每組平均蛋重64.9 g)，在胚胎期第7天進行卵內(nèi)注射，將亮氨酸水溶液和超純水注射入卵黃囊內(nèi)，根據(jù)Ohta等[13]和本課題組先前試驗結(jié)果[15]，本試驗選擇對照組注射超純水(0.5 mL/枚)，亮氨酸組注射亮氨酸水溶液(0.5 mL/枚，含9.06 mgL-亮氨酸)。卵內(nèi)注射過程參照Ohta等[13]的報道。

雛雞飼養(yǎng)至15日齡，2組各隨機選擇體重相近的24只雌性雛雞，分成8個重復(fù)，每個重復(fù)3只。2組雌性肉雞從21日齡開始至39日齡結(jié)束，連續(xù)19 d進行熱處理[(30±2)℃]，處理時間為每天10:00—16:00，熱應(yīng)激期結(jié)束后，進入恢復(fù)期，即熱應(yīng)激結(jié)束后在正常溫度環(huán)境下飼養(yǎng)1周至46日齡。

1.2 雌性肉雞飼養(yǎng)

1日齡雛雞出殼后立即轉(zhuǎn)移到南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動物試驗中心動物房飼養(yǎng)，2日齡時通過雌雄鑒別(羽速快慢鑒別法)篩選出雌性雛雞進行分籠飼養(yǎng)，每籠20只。飼養(yǎng)管理遵循《羅斯308飼養(yǎng)管理手冊》，自由采食(飼糧營養(yǎng)水平滿足：代謝能>12.6 MJ/kg，粗蛋白質(zhì)含量>23%)和飲水。當(dāng)飼養(yǎng)試驗進行到39和46日齡時，分別以重復(fù)為單位進行屠宰試驗。每個重復(fù)選1只雌性肉雞解剖，麻醉后頸動脈采血于離心管中，然后分離出十二指腸、空腸和回腸，在每段腸道中段取3 cm左右樣品，用生理鹽水把腸道內(nèi)容物沖洗干凈。一部分于4%多聚甲醛常溫保存，以制備石蠟切片，另一部分保存于-80 ℃冰箱。最后分離出心臟、肝臟、脾臟、法氏囊等器官，用濾紙吸取表層血液，剪去表面脂肪和系膜，放置在電子天平上稱重。

1.3 測定指標與方法

1.3.1 生長性能測定

記錄各組(以重復(fù)為單位)熱應(yīng)激期間的采食量和死淘數(shù)，每3 d記錄各組體重(以重復(fù)為單位)，計算21～39日齡、40～46日齡的平均日增重、平均日采食量、飼料轉(zhuǎn)化率，并計算39和46日齡的心臟、肝臟、法氏囊、脾臟指數(shù)。免疫器官指數(shù)計算公式如下：

免疫器官指數(shù)(%)=[免疫器官重(g)/體重(g)]×100。

1.3.2 腸道組織形態(tài)測定

腸道切片制作過程大致分為固定、梯度酒精脫水、石蠟包埋、切片、蘇木精-伊紅(HE)染色和中型樹脂封片。采用虛擬顯微鏡(Nikon公司)并結(jié)合Image J 1.6.0圖像分析軟件觀察腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)，測定絨毛高度和隱窩深度。

1.3.3 血清抗氧化指標檢測

采用酶標儀測定血清中丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性和總抗氧化能力(T-AOC)，所用試劑盒均購于南京建成生物工程研究所。

1.3.4 腸道組織抗氧化指標檢測

將存于-80 ℃冰箱的腸道組織用預(yù)冷的生理鹽水按1∶9(質(zhì)量∶體積=g∶mL)稀釋，然后勻漿，將勻漿液于離心機中離心(4 ℃，3 500 r/min，15 min)后，小心吸取上清液，使用南京建成生物工程研究所的試劑盒測定上清液中CAT、SOD、GSH-Px活性和MDA含量。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

血清抗氧化指標的數(shù)據(jù)使用GraphPad Software公司開發(fā)的GraphPad Prism 8.2.1統(tǒng)計軟件進行雙因素方差分析(two-way ANOVA)，若存在顯著交互作用，繼續(xù)采用Turkey-Kramer test進行組間多重比較；生長性能、器官指數(shù)、腸道組織形態(tài)和腸道組織抗氧化指標等的數(shù)據(jù)使用GraphPad Prism 8.2.1獨立樣本t檢驗(ttest)分析。試驗數(shù)據(jù)以“平均值±標準誤”表示，P>0.05為差異不顯著，P<0.05為差異顯著，P<0.01表示差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 卵內(nèi)注射亮氨酸對慢性熱應(yīng)激雌性肉雞生長性能的影響

由表1可知，與對照組相比，卵內(nèi)注射亮氨酸對熱應(yīng)激期和恢復(fù)期雌性肉雞的平均日增重、平均日采食量和料重比沒有產(chǎn)生顯著影響(P>0.05)，而且也未顯著影響39和46日齡心臟、肝臟和法氏囊指數(shù)(P>0.05)，但極顯著提高了39日齡雌性肉雞脾臟器官指數(shù)(P<0.01)。

表1 卵內(nèi)注射亮氨酸對慢性熱應(yīng)激雌性肉雞生長性能的影響Table 1 Effects of in ovo leucine injection on growth performance of female broilers under chronic heat stress

續(xù)表1階段Phases指標Indexes日齡Daysofage對照組Controlgroup亮氨酸組LeucinegroupP值P-value恢復(fù)期Recoveryperiod平均日增重ADG/g40～4673.63±19.9062.14±16.700.226平均日采食量ADFI/g40～46549.36±111.19493.21±90.550.389料重比F/G40～469.11±2.7110.49±2.300.467體重BW/g462409.00±80.502221.00±54.780.073心臟指數(shù)Heartindex/%460.45±0.010.42±0.020.181肝臟指數(shù)Liverindex/%462.17±0.112.24±0.130.684法氏囊指數(shù)BursaofFabriciusindex/%460.17±0.020.21±0.030.276脾臟指數(shù)Spleenindex/%460.11±0.000.14±0.020.200

2.2 卵內(nèi)注射亮氨酸對熱應(yīng)激雌性肉雞血清抗氧化指標的影響

由表2可知，與對照組相比，39日齡時亮氨酸組血清T-AOC活性極顯著下降(P<0.01)，其他血清抗氧化指標無顯著差異(P>0.05)；然而，46日齡時亮氨酸組血清MDA含量極顯著下降(P<0.01)，SOD活性則極顯著提高(P<0.01)。

表2 卵內(nèi)注射亮氨酸對慢性熱應(yīng)激雌性肉雞血清抗氧化指標的影響Table 2 Effects of in ovo leucine injection on serum antioxidant indexes of female broilers under chronic heat stress

2.3 卵內(nèi)注射亮氨酸對慢性熱應(yīng)激雌性肉雞腸道組織形態(tài)的影響

由圖1和圖2可知，與對照組相比，卵內(nèi)注射亮氨酸極顯著提高了39日齡雌性肉雞十二指腸絨毛高度和回腸隱窩深度(P<0.01)，顯著降低空腸絨毛高度(P<0.05)，極顯著降低了空腸隱窩深度(P<0.01)；卵內(nèi)注射亮氨酸顯著提高了46日齡雌性肉雞回腸絨毛高度(P<0.05)，極顯著提高了空腸絨毛高度(P<0.01)，極顯著降低了十二指腸絨毛高度和空腸隱窩深度(P<0.01)。

2.4 卵內(nèi)注射亮氨酸對慢性熱應(yīng)激雌性肉雞腸道組織抗氧化指標的影響

由表3可知，與對照組相比，亮氨酸組的39日齡雌性肉雞空腸組織MDA含量降低了46.7%(P=0.134)，且空腸組織CAT和GSH-Px的活性分別提高了4.9%(P=0.886)和53.2%(P=0.102)。

表3 卵內(nèi)注射亮氨酸對慢性熱應(yīng)激39日齡雌性肉雞腸道組織抗氧化指標的影響Table 3 Effects of in ovo leucine injection on intestinal tissue antioxidant indexes of 39-day-old female broilers under chronic heat stress

續(xù)表3項目Items組別Groups十二指腸Duodenum空腸Jejunum回腸IleumP值P-value<0.0010.0250.348過氧化氫酶對照組Controlgroup7.2±1.68.1±1.810.1±1.0CAT/(U/mgprot)亮氨酸組Leucinegroup5.9±0.98.5±1.311.6±0.8P值P-value0.6100.8660.239谷胱甘肽過氧化物酶對照組Controlgroup70.0±6.5102.7±13.0205.9±4.8GSH-Px/(U/mgprot)亮氨酸組Leucinegroup60.2±4.9157.3±18.2199.1±6.0P值P-value0.2810.1020.271

3 討 論

3.1 卵內(nèi)注射亮氨酸對慢性熱應(yīng)激雌性肉雞生長性能的影響

大量研究已經(jīng)證實，足夠的采食量是動物生長和發(fā)揮生產(chǎn)潛力的必要保證，而慢性熱應(yīng)激會降低雌性肉雞的采食量，導(dǎo)致機體代謝發(fā)生紊亂，體重下降，嚴重時甚至?xí)?dǎo)致死亡[29]。本課題組先前研究發(fā)現(xiàn)卵內(nèi)注射亮氨酸后，在慢性熱應(yīng)激條件下雄性肉雞體重與對照組相比顯著提高，這說明卵內(nèi)注射亮氨酸能夠提高雄性肉雞的生長性能[14]。然而，有研究顯示雌性肉雞對高溫的敏感性要低于同日齡的雄性肉雞[30]。Han等[25]研究也發(fā)現(xiàn)卵內(nèi)注射亮氨酸可使急性熱應(yīng)激條件下雄性雛雞獲得耐熱性，而雌性雛雞并未獲得耐熱性，進一步說明肉雞在獲得耐熱性能方面存在性別差異。本試驗結(jié)果表明，卵內(nèi)注射亮氨酸并未對慢性熱應(yīng)激雌性肉雞的生長性能產(chǎn)生顯著影響。這可能與雌性和雄性肉雞自身的耐熱性差異有關(guān)，也可能與卵內(nèi)注射亮氨酸誘導(dǎo)耐熱性的性別差異有關(guān)，未來研究將會關(guān)注這一問題。

圖I、J、K分別為對照組46日齡雌性肉雞十二指腸、空腸和回腸組織切片(40×)，圖L、M、N分別為亮氨酸組46日齡雌性肉雞十二指腸、空腸和回腸組織切片(40×)。圖O和P分別為絨毛高度和隱窩深度數(shù)據(jù)柱狀圖。數(shù)據(jù)表示為平均值±標準誤(n=4)，*表示與對照組相比差異顯著(P<0.05)，**表示與對照組相比差異極顯著(P<0.01)。Figures I,J and K were the tissue sections of duodenum,jejunum and ileum of 46-day-old female broilers in the control group (40×),and figures L,M and N were the tissue sections of duodenum,jejunum and ileum of 46-day-old female broilers in the leucine group,respectively (40×).Figures O and P were the histograms of villus height and crypt depth,respectively.The values showed as the mean±SE (n=4),* mean significant difference compared with the control group (P<0.05),and ** mean extremely significant difference compared with the control group (P<0.01).圖2 46日齡雌性肉雞腸道組織形態(tài)Fig.2 Intestinal tissue morphology of 46-day-old female broilers

慢性熱應(yīng)激可阻礙雌性肉雞免疫器官發(fā)育，免疫器官指數(shù)尤其是脾臟指數(shù)顯著降低[31]。免疫器官指數(shù)是評價機體免疫系統(tǒng)發(fā)育狀況的關(guān)鍵性指標，其大小直接影響機體免疫調(diào)節(jié)能力[32]。脾臟是機體最大的外周淋巴器官，參與機體損傷和老化細胞清除等。諸多報道證實，慢性熱應(yīng)激會使肉雞脾臟水腫、出血、萎縮和相對重量降低等，影響其正常發(fā)育[31,33]。亮氨酸不僅可為動物免疫細胞供能，同時還可促進動物免疫細胞增殖。Siwicki等[34]在普通鯉魚和虹鱒的試驗中發(fā)現(xiàn)，體外培養(yǎng)的頭腎淋巴細胞加入亮氨酸代謝物β-羥基-β丁酸甲酯(HMB)后，其頭腎免疫淋巴細胞密度顯著高于對照組。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，卵內(nèi)注射亮氨酸可以提高慢性熱應(yīng)激雌性肉雞的脾臟指數(shù)，這說明卵內(nèi)注射亮氨酸可能通過促進雌性肉雞早期脾臟淋巴細胞增殖，提高脾臟指數(shù)，從而提高雌性肉雞的免疫功能。

3.2 卵內(nèi)注射亮氨酸對慢性熱應(yīng)激雌性肉雞腸道組織形態(tài)的影響

大量研究已經(jīng)證實，慢性熱應(yīng)激影響腸道組織結(jié)構(gòu)完整性，導(dǎo)致肉雞腸道通透性增加和局部炎癥[33]。腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)在維持腸道物理屏障功能發(fā)揮著重要的作用，并且與營養(yǎng)物質(zhì)的消化和吸收密切相關(guān)[35]。亮氨酸作為必需氨基酸，不僅可促進蛋白質(zhì)合成，還可維持和保護腸道形態(tài)完整性。Jiang等[36]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧補充亮氨酸可以改善草魚腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能，促進免疫相關(guān)基因表達，增強機體免疫功能。黃強[37]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加0.35%亮氨酸可以改善早期宮內(nèi)發(fā)育遲緩仔豬的腸道組織形態(tài)，保護腸道形態(tài)完整性。本試驗結(jié)果表明，卵內(nèi)注射亮氨酸可極顯著提高雌性肉雞39日齡十二指腸和46日齡空腸絨毛高度，同時極顯著降低了39和46日齡空腸隱窩深度。這就說明卵內(nèi)注射亮氨酸在一定程度上可以改善由熱應(yīng)激引起的腸道組織形態(tài)的破壞，維持腸道形態(tài)完整性，這與前人研究結(jié)果一致。對于卵內(nèi)注射亮氨酸是否對雌性肉雞早期腸道發(fā)育及其免疫功能產(chǎn)生了影響及機制尚不清楚，我們將在未來試驗中進一步探索。

3.3 卵內(nèi)注射亮氨酸對慢性熱應(yīng)激雌性肉雞血清抗氧化能力的影響

熱應(yīng)激條件下，機體產(chǎn)生大量自由基，并通過各類反應(yīng)破壞機體氧化還原平衡，使機體代謝發(fā)生紊亂。同時，機體存也在多種抗氧化酶，包括CAT、SOD和GSH-Px等，它們協(xié)調(diào)統(tǒng)一構(gòu)成了清除體內(nèi)自由基的第1道酶防御機制。鐘光等[38]研究表明，慢性熱應(yīng)激能夠降低肉雞血清中CAT和SOD活性，破壞機體氧化還原平衡。王松波等[39]試驗發(fā)現(xiàn)，慢性熱應(yīng)激顯著升高肉雞血清中MDA含量，降低血清GSH-Px活性。亮氨酸除作為蛋白質(zhì)合成的單體，還可以緩解由過氧化氫導(dǎo)致的動物細胞膜過氧化損傷。Zhou等[27]研究發(fā)現(xiàn)，在飼糧中長期補充亮氨酸可以降低金鯧魚血清中MDA含量，進一步提高金鯧魚的抗氧化能力。本試驗結(jié)果表明，卵內(nèi)注射亮氨酸極顯著提高了慢性熱應(yīng)激雌性肉雞46日齡時血清SOD活性，極顯著降低了血清MDA含量。這說明卵內(nèi)注射亮氨酸可以通過降低血清脂質(zhì)過氧化物的產(chǎn)生，同時提高血清SOD活性使得肉雞在熱應(yīng)激后更快恢復(fù)機體內(nèi)氧化還原平衡。

3.4 卵內(nèi)注射亮氨酸對慢性熱應(yīng)激雌性肉雞腸道組織抗氧化能力的影響

熱應(yīng)激損傷肉雞腸道組織結(jié)構(gòu)完整性，破壞腸道抗氧化功能，最終引起機體代謝紊亂。熱應(yīng)激作用時間、方式以及溫度高低不同對肉雞抗氧化功能的影響也不一樣[40-41]。Quinteiro-Filho等[42]研究顯示，急性熱應(yīng)激可以通過下丘腦-垂體-腎上腺軸的激活造成機體抗氧化功能紊亂，提高肉雞急性腸炎的發(fā)生率。Quinteiro-Filho等[33]研究發(fā)現(xiàn)，隨著熱應(yīng)激作用時間的延長，肉雞腸道氧化程度減輕，腸炎發(fā)生率降低。體外研究表明，與對照組相比，亮氨酸處理可顯著抑制人結(jié)腸上皮細胞氧化應(yīng)激模型中白細胞介素-8(IL-8)的分泌并提高谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶(GST)和CAT的活性[43]。本研究結(jié)果表明，卵內(nèi)注射亮氨酸未能提高雌性肉雞腸道組織抗氧化能力。其原因一方面可能是慢性熱應(yīng)激使得雌性肉雞逐步適應(yīng)熱環(huán)境并建立了新的氧化還原平衡，機體的抗氧化功能逐漸恢復(fù)；另一方面可能是不同組織對熱應(yīng)激的敏感性不同。由于肉雞代謝率高，生長速度快，其肌肉的增重速度相比其他組織更快。肌肉富含大量線粒體，不僅是產(chǎn)熱的主要器官，也是為機體提供能量的主要組織。然而在高代謝率和高溫條件下，肌肉組織相比腸道組織更易產(chǎn)生氧化應(yīng)激[44]。關(guān)于卵內(nèi)注射亮氨酸是否能緩解熱應(yīng)激雌性肉雞肌肉氧化應(yīng)激的損傷尚不清楚，仍需進一步探索。

4 結(jié) 論

卵內(nèi)注射亮氨酸可以提高慢性熱應(yīng)激雌性肉雞的脾臟指數(shù)，有效改善腸道組織形態(tài)，保持腸道完整性；同時，卵內(nèi)注射亮氨酸在一定程度上還可以提高慢性熱應(yīng)激雌性肉雞的血清抗氧化能力。