11種常用農(nóng)藥對(duì)地熊蜂工蜂的毒性和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

王宏棟,韓 冰,王玉賽,韓 雙,王汝明,李冬剛,*

(1.德州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院,山東德州 253015;2.德州市農(nóng)業(yè)農(nóng)村事業(yè)發(fā)展中心,山東德州 253000)

我國(guó)大中拱棚以上的設(shè)施面積達(dá)370萬(wàn)hm2，居世界第一，約占世界設(shè)施農(nóng)業(yè)總面積的80%，其中設(shè)施蔬菜播種面積400萬(wàn)hm2，占蔬菜播種面積的17%(駱飛等,2020)。隨著設(shè)施蔬菜產(chǎn)業(yè)的迅速發(fā)展，設(shè)施作物對(duì)蜂類授粉的依賴和需求日漸增加，這是由于設(shè)施農(nóng)業(yè)封閉或半封閉的環(huán)境，阻礙了傳粉昆蟲的進(jìn)入，蔬菜在開花期間得不到充足的授粉，造成坐果率低、畸形果多等問題，直接影響了產(chǎn)量和品質(zhì)，傳統(tǒng)的人工授粉和激素蘸花不僅增加勞動(dòng)強(qiáng)度，而且授粉效果不理想，還會(huì)造成激素殘留，因此，設(shè)施農(nóng)作物授粉難已經(jīng)成為困擾當(dāng)前設(shè)施農(nóng)業(yè)發(fā)展的一個(gè)巨大難題(付寶春和楊蛟峰,2014)。

地熊蜂Bombusterrestris屬膜翅目(Hymenoptera)蜜蜂總科(Apoidea)蜜蜂科(Apidae)熊蜂屬Bombus，是一類多食性社會(huì)性昆蟲，是多種植物，尤其是茄科和豆科植物的重要授粉者(魏夢(mèng)宇和王星,2017)。我國(guó)是全世界熊蜂物種資源最豐富的國(guó)家，根據(jù)已有的文獻(xiàn)資料，我國(guó)已探明的熊蜂有125種，這為國(guó)內(nèi)熊蜂良種的篩選奠定了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)(徐希蓮和王歡,2018)。目前，在國(guó)外熊蜂授粉蜂群作為商品已經(jīng)實(shí)現(xiàn)了出口創(chuàng)匯，達(dá)到了產(chǎn)業(yè)化水平。我國(guó)于20世紀(jì)90年代開始對(duì)熊蜂種質(zhì)資源進(jìn)行調(diào)查和篩選工作，熊蜂人工繁殖的研究和授粉應(yīng)用示范已有20年，熊蜂授粉技術(shù)因其具有節(jié)省人工、提升果實(shí)產(chǎn)量和品質(zhì)、減少環(huán)境污染和藥物殘留等優(yōu)勢(shì)(Daganetal.,2004;Polaszek,2010)，已成為我國(guó)設(shè)施農(nóng)業(yè)實(shí)現(xiàn)設(shè)施作物優(yōu)質(zhì)、高效、高產(chǎn)的一項(xiàng)重要配套技術(shù)措施(周進(jìn)等,2017)。

與此同時(shí)，設(shè)施蔬菜產(chǎn)業(yè)的迅速發(fā)展也給病蟲提供了適宜的生長(zhǎng)、繁殖和危害作物的生態(tài)環(huán)境。尤其是，各類植食性有害生物如蚜蟲、薊馬、粉虱、葉螨等的危害不斷加劇，造成極大的經(jīng)濟(jì)損失(雷仲仁等,2016)。由于蔬菜生長(zhǎng)周期較短，病蟲害的發(fā)生種類多、危害重，農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上不得不使用農(nóng)藥進(jìn)行防治(田毓起,2000)。然而農(nóng)藥長(zhǎng)期大量使用，不可避免地會(huì)對(duì)授粉昆蟲造成一定的傷害，如蜜蜂長(zhǎng)時(shí)間暴露在殘留化學(xué)物質(zhì)中會(huì)表現(xiàn)出反應(yīng)遲鈍、運(yùn)動(dòng)不協(xié)調(diào)、震顫等中毒現(xiàn)象，甚至壽命縮短，造成蜂群數(shù)量減少，影響授粉的效果(Oldroyd,2007;史晶亮等,2019)。

目前國(guó)內(nèi)關(guān)于不同農(nóng)藥對(duì)蜜蜂屬Apis的急性毒性研究較多，而作為全球范圍內(nèi)研究和商業(yè)化應(yīng)用最為成熟的地熊蜂，對(duì)其關(guān)注不夠，相關(guān)毒性研究比較少，并且還忽視了殺菌劑的毒性，僅僅評(píng)價(jià)了部分新煙堿類、植物源類和昆蟲生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑類殺蟲劑對(duì)地熊蜂的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)性(王爍等,2020a,2020b,2020c)。單一種類殺蟲劑在長(zhǎng)時(shí)間使用過程中會(huì)導(dǎo)致害蟲在選擇壓力下產(chǎn)生抗藥性，因此選擇不同種類的藥物，尤其是輪換使用不同化學(xué)結(jié)構(gòu)和不同作用機(jī)理的殺蟲劑就顯得尤為重要。因此，本研究根據(jù)殺蟲劑的作用機(jī)理和化學(xué)結(jié)構(gòu)，從不同類型挑選11種農(nóng)業(yè)常用的殺蟲劑、殺螨劑和殺菌劑農(nóng)藥作為待試藥劑，采用經(jīng)口毒性和接觸毒性兩種方法探究了11種農(nóng)藥對(duì)地熊蜂工蜂的毒性，并利用危害熵值評(píng)估其對(duì)地熊蜂工蜂的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)，以期為設(shè)施蔬菜熊蜂授粉期間合理選擇農(nóng)藥提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試蟲源

供試蜂種為地熊蜂B.terrestris工蜂，購(gòu)自山東魯?？萍奸_發(fā)有限公司，于溫度25±2℃、相對(duì)濕度60%±10%、黑暗條件下進(jìn)行飼養(yǎng)，飼養(yǎng)過程未接觸化學(xué)農(nóng)藥和試劑。試驗(yàn)所用地熊蜂均為個(gè)體大小基本一致的健康成年采集工蜂。

1.2 供試藥劑

供試藥劑為10%蟲螨腈懸浮劑(廣東省佛山市盈輝作物科學(xué)有限公司)、2.5%高效氯氟氰菊酯水乳劑(青島星牌作物科學(xué)有限公司)、17%氟吡呋喃酮可溶液劑[拜耳作物科學(xué)(中國(guó))有限公司]、22.4%螺蟲乙酯懸浮劑[拜耳作物科學(xué)(中國(guó))有限公司]、20%異丙威乳油(河南省安陽(yáng)市五星農(nóng)藥廠)、20%除蟲脲懸浮劑(河北威遠(yuǎn)生物化工有限公司)、20%丁氟螨酯懸浮劑(江蘇省蘇州富美實(shí)植物保護(hù)劑有限公司)、5%唑螨酯懸浮劑(福建省德盛生物工程有限責(zé)任公司)、43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑(愛利思達(dá)生物化學(xué)品有限公司)、2%春雷霉素水劑(日本北興化學(xué)工業(yè)株式會(huì)社)、50%啶酰菌胺水分散粒劑(巴斯夫歐洲公司)。

1.3 農(nóng)藥對(duì)熊蜂的毒力測(cè)定

參考我國(guó)《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則.第10部分:蜜蜂急性毒性試驗(yàn)》(袁善奎等,2014)，根據(jù)半數(shù)致死劑量(median lethal dose,LD50)(48 h)將農(nóng)藥對(duì)熊蜂的毒性劃分4個(gè)等級(jí)(以有效成分計(jì))：低毒(LD50>11.0 μg a.i./蜂)；中毒(2.0 μg a.i./蜂

1.3.1急性經(jīng)口毒性：參照《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則.第10部分:蜜蜂急性毒性試驗(yàn)》(袁善奎等,2014)，將待試藥劑母液，用50%的蔗糖水溶液稀釋成5個(gè)濃度梯度，為保證試驗(yàn)體系中有效成分均勻分散，所有系列濃度稀釋液均使用超聲波助溶。按每頭蜂取食20 μL的量在飼喂器中加入不同濃度的藥劑糖水溶液200 μL，將饑餓處理2 h的成年工蜂移入蜂籠，每個(gè)蜂籠10頭成蜂，每個(gè)處理重復(fù)3次，并設(shè)50%蔗糖水為空白對(duì)照。飼喂3 h待藥劑消耗完后添加充足50%蔗糖水繼續(xù)飼養(yǎng)，記錄24 h和48 h熊蜂工蜂死亡數(shù)，計(jì)算熊蜂工蜂的死亡率。

1.3.2急性接觸毒性：參照《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則.第10部分:蜜蜂急性毒性試驗(yàn)》(袁善奎等,2014)，用丙酮或蒸餾水配置的母液稀釋成5個(gè)濃度梯度。用微量點(diǎn)滴儀將不同濃度的供試藥劑按每頭蜂2 μL點(diǎn)滴在用CO2麻醉后熊蜂的中胸背板上，待蜂身晾干后轉(zhuǎn)入蜂籠中，用充足的50%蔗糖水飼喂，每個(gè)蜂籠10頭成蜂，每個(gè)處理重復(fù)3次，并設(shè)丙酮溶劑為空白對(duì)照。記錄24 h和48 h熊蜂工蜂死亡數(shù)，計(jì)算熊蜂工蜂的死亡率。

1.3.3質(zhì)量控制條件：參照周新等(2008)，設(shè)置上限劑量500 μg a.i./蜂，即在此條件下，未見熊蜂死亡，則不再進(jìn)行毒力測(cè)定；若試驗(yàn)藥劑溶解度小于500 μg a.i./蜂，則采用最大溶解度作為上限濃度；如在較高劑量試驗(yàn)藥劑下，熊蜂拒絕采食，或是采食量很小，則最多將試驗(yàn)時(shí)間延長(zhǎng)至6 h，并測(cè)定試驗(yàn)藥劑殘存量(即測(cè)定該處理的食物殘存的體積)，用蔗糖溶液將剩余藥物溶液替換掉。

1.3.4風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估：農(nóng)藥對(duì)熊蜂的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估參照歐洲和地中海植物保護(hù)組織所采用的危害熵(hazard quotient,HQ)值(EPPO,2000;王爍等,2020c)。HQ值為農(nóng)藥田間推薦用量(AR)(g a.i./hm2)與農(nóng)藥對(duì)熊蜂急性經(jīng)口或接觸LD50(μg a.i./蜂)值的比值：HQ=AR/LD50。HQ>2 500，高風(fēng)險(xiǎn)；501時(shí)，風(fēng)險(xiǎn)不可接受。本研究分別采用飼喂法和接觸法測(cè)得的48 h的LD50計(jì)算HQ和RQsp值，田間推薦劑量按照已在我國(guó)農(nóng)業(yè)部登記的同一有效成分田間推薦用量的最大范圍來計(jì)算。

1.3.5中毒癥狀觀察：急性經(jīng)口和急性接觸試驗(yàn)期間，需保證助劑對(duì)照組和空白對(duì)照組熊蜂均表現(xiàn)正常，觀察記錄試驗(yàn)組熊蜂是否出現(xiàn)活動(dòng)減少、行動(dòng)緩慢，甚至出現(xiàn)精神萎靡不振、掛壁不動(dòng)等癥狀，對(duì)比熊蜂對(duì)于幾種待試藥劑毒性癥狀的不同表現(xiàn)。

1.4 數(shù)據(jù)分析

利用IBM SPSS Statistics 20軟件對(duì)試驗(yàn)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行Probit統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)算得出毒力回歸方程、LD50、95%置信區(qū)間，并分析每種農(nóng)藥對(duì)地熊蜂工蜂的毒性等級(jí)。

2 結(jié)果

2.1 不同農(nóng)藥對(duì)地熊蜂工蜂的急性經(jīng)口毒性

試驗(yàn)中，加入待試藥劑配制的糖水后，地熊蜂均取食干凈，未出現(xiàn)拒絕采食或采食量很小的現(xiàn)象。由表1可知，通過飼喂法測(cè)得的各農(nóng)藥對(duì)地熊蜂工蜂的24 h的LD50值由小到大為：高效氯氟氰菊酯<異丙威<蟲螨腈<氟吡呋喃酮<唑螨酯<除蟲脲<聯(lián)苯肼酯<啶酰菌胺<春雷霉素<螺蟲乙酯<丁氟螨酯，LD50值分別為0.033,0.416,0.816,4.338,5.657,28.273,52.306,95.223,224.762,337.929和>500 μg a.i./蜂。其中，丁氟螨酯達(dá)到上限試驗(yàn)，即藥劑劑量500 μg a.i./蜂時(shí)，24 h試驗(yàn)期未引起地熊蜂工蜂死亡，因此判定對(duì)地熊蜂的急性經(jīng)口毒性24 h的半致死劑量LD50>500 μg a.i./蜂。除丁氟螨酯的各農(nóng)藥對(duì)地熊蜂工蜂的24 h的LD50均大于48 h的LD50。根據(jù)我國(guó)《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則.第10部分:蜜蜂急性毒性試驗(yàn)》中(袁善奎等,2014)，農(nóng)藥對(duì)蜜蜂急性毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，11種農(nóng)藥的急性經(jīng)口毒性除高效氯氟氰菊酯、異丙威和蟲螨腈為高毒，氟吡呋喃酮和唑螨酯為中毒外，其余藥物均為低毒。

2.2 不同農(nóng)藥對(duì)地熊蜂工蜂的急性接觸毒性

由表2可知，通過接觸法測(cè)得的各農(nóng)藥對(duì)地熊蜂工蜂的24 h的LD50值由小到大為：高效氯氟氰菊酯<異丙威<蟲螨腈<除蟲脲<氟吡呋喃酮<聯(lián)苯肼酯<春雷霉素<唑螨酯<螺蟲乙酯<丁氟螨酯<啶酰菌胺，LD50值分別為0.208,0.407,4.307,149.095,175.533,569.066,607.466,833.016,1 413.374,1 822.028和1 954.632 μg a.i./蜂。各農(nóng)藥對(duì)地熊蜂工蜂的24 h的LD50均大于48 h的LD50。根據(jù)我國(guó)《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則.第10部分:蜜蜂急性毒性試驗(yàn)》中(袁善奎等,2014)，農(nóng)藥對(duì)蜜蜂急性毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，11種農(nóng)藥的急性接觸毒性除高效氯氟氰菊酯和異丙威為高毒，蟲螨腈為中毒外，其余藥物均為低毒。

2.3 不同農(nóng)藥對(duì)地熊蜂工蜂的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

不同農(nóng)藥對(duì)地熊蜂成年工蜂的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果見表3，通過飼喂法和接觸法測(cè)得的48 h的LD50值計(jì)算得到11種農(nóng)藥對(duì)地熊蜂成年工蜂的危害熵值(HQ)。11種供試藥物中，異丙威和高效氯氟氰菊酯的經(jīng)口與接觸危害熵值均位于50～2 500之間，為中風(fēng)險(xiǎn)；蟲螨腈的經(jīng)口危害熵值位于50～2 500之間，為中風(fēng)險(xiǎn)，但是接觸危險(xiǎn)熵值小于50，為低風(fēng)險(xiǎn)；氟吡呋喃酮、啶酰菌胺、除蟲脲、唑螨酯、聯(lián)苯肼酯、螺蟲乙酯、春雷霉素、丁氟螨酯的經(jīng)口與接觸危害熵值均小于50，為低風(fēng)險(xiǎn)。通過風(fēng)險(xiǎn)熵值(RQsp)計(jì)算得出，除蟲螨腈對(duì)熊蜂的經(jīng)口風(fēng)險(xiǎn)、異丙威和高效氯氟氰菊酯對(duì)熊蜂的經(jīng)口和接觸風(fēng)險(xiǎn)為不可接受外，其余藥物的風(fēng)險(xiǎn)均為可接受。

表3 11種農(nóng)藥對(duì)地熊蜂成年工蜂的危害熵值Table 3 Hazard quotient (HQ)values of eleven pesticides to adult workers of Bombus terrestris

農(nóng)藥類型Pesticidetypes藥物類別Categories供試藥物Testedpesticides試驗(yàn)類型TesttypeLD50(μga.i./individual)田間用量(ga.i./hm2)FieldrecommendeddoseHQ風(fēng)險(xiǎn)程度Riskassessment吡咯類蟲螨腈經(jīng)口Oral0.6784566.37中MediumPyrroleChlorfenapyr接觸Contact2.91415.44低Low擬除蟲菊酯類高效氯氟氰菊酯經(jīng)口Oral0.03015500.00中MediumPyrethroidBeta-Cyhalothrin接觸Contact0.18780.21中Medium新型煙堿類氟吡呋喃酮經(jīng)口Oral3.50810229.08低Low殺蟲劑NeonicotineFlupyradifurone接觸Contact157.1080.65低LowInsecticides季酮酸類螺蟲乙酯經(jīng)口Oral266.814100.80.38低LowQuaternaryketoicacidSpirotetramat接觸Contact1227.8640.08低Low氨基甲酸脂類異丙威經(jīng)口Oral0.3166001898.73中MediumCarbamateIsoprocarb接觸Contact0.3191880.88中Medium苯甲酰脲類除蟲脲經(jīng)口Oral23.0001506.52低LowBenzoylureaDiflubenzuron接觸Contact138.4071.08低Low苯?；译骖惗》ソ?jīng)口Oral>50080<0.16低LowBenzoylacetonitrileCyflumetofen接觸Contact1691.2480.05低Low殺螨劑苯氧吡唑類唑螨酯經(jīng)口Oral4.938306.08低LowAcaricidesPhenoxypyrazoleFenpyroximate接觸Contact693.0690.04低Low聯(lián)苯肼類聯(lián)苯肼酯經(jīng)口Oral42.425193.54.56低LowBiphenylhydrazineBifenazate接觸Contact476.8390.41低Low抗生素類春雷霉素經(jīng)口Oral149.12052.50.35低Low殺菌劑AntibioticKasugamycin接觸Contact526.2570.10低LowFungicides吡啶酰胺類啶酰菌胺經(jīng)口Oral87.3116006.87低LowPyridineamideBoscalid接觸Contact1856.6536000.32低Low

2.4 地熊蜂工蜂對(duì)不同農(nóng)藥的毒性反應(yīng)

地熊蜂工蜂對(duì)不同農(nóng)藥的反應(yīng)表現(xiàn)為：高效氯氟氰菊酯和異丙威引起地熊蜂痙攣和抽搐顫動(dòng)；氟吡呋喃酮?jiǎng)t引起地熊蜂亂飛亂撞；除蟲脲導(dǎo)致地熊蜂呆立不動(dòng)；蟲螨腈、唑螨酯和聯(lián)苯肼酯引起地熊蜂移動(dòng)遲緩，而后仰臥在地；螺蟲乙酯和丁氟螨酯引起地熊蜂中毒表現(xiàn)為初期倒地翻滾，之后不能爬行移動(dòng)；春雷霉素和啶酰菌胺作為殺菌劑，地熊蜂在取食或接觸后，中毒癥狀為呆立不動(dòng)。死亡的地熊蜂均表現(xiàn)為雙翅張開、喙伸出、腹部收縮。

3 結(jié)論與討論

近年來，農(nóng)藥對(duì)蜜蜂屬包括西方蜜蜂Apismellifera和中華蜜蜂A.ceranacerana的毒性研究引起了業(yè)界廣泛的關(guān)注，而作為全球范圍內(nèi)研究和商業(yè)化應(yīng)用最為成熟的地熊蜂，對(duì)其關(guān)注不夠，相關(guān)毒性研究比較少，并且還忽視了殺菌劑的毒性。本研究分別采用了飼喂法和接觸法對(duì)地熊蜂成年工蜂進(jìn)行了室內(nèi)毒力測(cè)定，從測(cè)定結(jié)果來看，所選11種待試藥物，無(wú)論采用飼喂法還是接觸法，對(duì)地熊蜂成年工蜂的結(jié)果略有不同，其中高效氯氟氰菊酯和異丙威均為高毒；除蟲脲、聯(lián)苯肼酯、春雷霉素、螺蟲乙酯、丁氟螨酯、啶酰菌胺均為低毒，而蟲螨腈的經(jīng)口毒性為高毒、接觸毒性為中毒；氟吡呋喃酮和唑螨酯的經(jīng)口毒性為中毒、接觸毒性為低毒。11種農(nóng)藥對(duì)地熊蜂成年工蜂的24 h的LD50均大于48 h的LD50，這也說明隨著藥物作用時(shí)間的延長(zhǎng)，藥物對(duì)于地熊蜂的毒性也在增強(qiáng)。除異丙威的急性經(jīng)口和急性接觸的LD50值相差不大以外，其余藥物急性經(jīng)口毒性的LD50值要遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于急性接觸毒性，表明這些藥物對(duì)于地熊蜂的胃毒能力要大于觸殺能力。

在本研究中，蟲螨腈作為吡咯類殺蟲劑，是線粒體氧化磷酸化的解偶聯(lián)劑，干擾質(zhì)子濃度，干擾能量代謝，具有胃毒和一定的觸殺作用，蟲螨腈在地熊蜂上的急性經(jīng)口毒性為高毒，與張艷峰等學(xué)者在意大利蜜蜂上測(cè)定的結(jié)果相一致，急性接觸毒性為中毒，要弱于張艷峰等學(xué)者所得到的高毒結(jié)果(張艷峰和王會(huì)利,2020)。氟吡呋喃酮作為新煙堿類殺蟲劑，是煙堿型乙酰膽堿受體的激動(dòng)劑，使神經(jīng)元細(xì)胞長(zhǎng)時(shí)間處于激動(dòng)狀態(tài)，具有胃毒和觸殺作用，氟吡呋喃酮在地熊蜂上的急性接觸毒性為低毒，與王爍等學(xué)者研究的結(jié)果相一致，而急性經(jīng)口毒性為中毒，要強(qiáng)于王爍等學(xué)者所得到的低毒結(jié)果(王爍等,2020c)。趙帥等學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，同樣的有效成分不同的劑型作用在意大利蜜蜂上的急性毒性結(jié)果也存在很大差異(趙帥等,2011)。造成這2種藥物急性毒性結(jié)果存在差異的原因可能是地熊蜂和蜜蜂的敏感性存在差異，也可能是與所選農(nóng)藥的劑型或助劑、溶劑不同有關(guān)。高效氯氟氰菊酯作為擬除蟲菊酯類廣譜殺蟲劑，主要是破壞神經(jīng)元鈉離子通道，從而造成神經(jīng)系統(tǒng)紊亂，具有觸殺和胃毒作用，高效氯氟氰菊酯在地熊蜂上的急性毒性均為高毒，這與趙怡楠等學(xué)者在海南中蜂Apisceranahainana上(趙怡楠等,2014)，以及張艷峰等學(xué)者在意大利蜜蜂上測(cè)定的結(jié)果(張艷峰和王會(huì)利,2020)相一致。螺蟲乙酯作為季酮酸類殺蟲劑，主要是抑制乙酰輔酶A羧化酶活性，阻斷昆蟲能量代謝，是以胃毒作用為主、以觸殺作用為輔，螺蟲乙酯在地熊蜂上的急性毒性均為低毒，這與周浩等學(xué)者測(cè)定的結(jié)果(周浩等,2016)相一致。春雷霉素和啶酰菌胺作為殺菌劑，在地熊蜂上的急性毒性均為低毒，并且LD50值均較高，這與王雅珺等學(xué)者在中華蜜蜂上測(cè)定的結(jié)果(王雅君等,2017)相一致。由這些研究結(jié)果可以看出，對(duì)非靶標(biāo)生物蜜蜂總科的不同屬來說，同一有效成分，當(dāng)它的理化性質(zhì)和作用方式相同，所呈現(xiàn)的急性毒性結(jié)果也可能一致；而同一有效成分，當(dāng)劑型或助劑、溶劑不同時(shí)，即使是對(duì)地熊蜂同種來說，農(nóng)藥的理化性質(zhì)不同，進(jìn)入蟲體的途徑及其穿透性也會(huì)存在差異，隨之而來的急性毒性結(jié)果也略有不同。除蟲脲作為苯甲酰脲類殺蟲劑，主要是抑制昆蟲幾內(nèi)質(zhì)的合成，以胃毒作用為主、兼具觸殺性，除蟲脲在地熊蜂上的急性毒性結(jié)果均為低毒，與王爍等學(xué)者在地熊蜂上測(cè)定的氟鈴脲、滅幼脲等其他苯甲酰脲類殺蟲劑的結(jié)果(王爍等,2020a)相一致，但對(duì)比幾種藥物所測(cè)定得到的LD50值，仍存在著倍數(shù)差異，我們分析原因可能是：苯甲酰脲類殺蟲劑的作用機(jī)理類似，對(duì)于地熊蜂也表現(xiàn)出相一致的毒性結(jié)果，但由于化學(xué)結(jié)構(gòu)存在差異，苯胺環(huán)取代基不同，以及劑型或助劑、溶劑不同，理化性質(zhì)也略有差異，因此LD50值差異較大。基于所有以上研究結(jié)果，我們綜合分析后推斷，藥物所引起的急性毒性作用，與藥物進(jìn)入蟲體的途徑及其穿透性和作用機(jī)理有關(guān)，受藥物的脂溶性、解離度、表面張力等理化性質(zhì)，以及劑型或所用助劑、溶劑的影響。另外，在本研究中，異丙威作為氨基甲酸酯類殺蟲劑，主要是吸附抑制乙酰膽堿酯酶，造成乙酰膽堿大量積聚，從而影響神經(jīng)沖動(dòng)傳導(dǎo)，同樣具有胃毒和觸殺性，異丙威在地熊蜂上的急性毒性均為高毒。唑螨酯作為苯氧吡唑類殺螨劑，主要是作用于線粒體電子傳遞鏈復(fù)合體Ⅰ，從而抑制電子鏈傳遞影響能量合成；聯(lián)苯肼酯作為聯(lián)苯肼類殺螨劑，主要作用是抑制線粒體電子傳遞鏈復(fù)合體Ⅲ；丁氟螨酯是新型?；译骖悮Ⅱ齽饕饔檬且种凭€粒體電子傳遞鏈復(fù)合體Ⅱ，這3種藥物作為農(nóng)業(yè)上常用殺螨劑，均具有觸殺和胃毒作用，除唑螨酯對(duì)地熊蜂成年工蜂的急性經(jīng)口毒性為中毒、急性接觸毒性為低毒外，其余2種藥物的急性毒性結(jié)果均為低毒。

在設(shè)施作物花期使用地熊蜂授粉時(shí)，建議禁用異丙威、高效氯氟氰菊酯和蟲螨腈這3種存在中風(fēng)險(xiǎn)的農(nóng)藥，慎重使用氟吡呋喃酮和唑螨酯這2種農(nóng)藥，以避免對(duì)地熊蜂造成危害，而另外6種低毒農(nóng)藥可根據(jù)田間情況合理施用，并可采取通風(fēng)晾曬、設(shè)置放蜂間隔期等方式降低農(nóng)藥對(duì)地熊蜂的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)。