豬偽狂犬、豬瘟和豬繁殖與呼吸障礙綜合癥疫苗同時分點(diǎn)注射對其抗體效價的影響

周玉東，盛 濤*，趙云龍，黃紅娟，毛廣文，王春偉，蔡元慶，陳松林，韓 剛，張 弦，馬 睿

（1.兵團(tuán)第七師畜牧獸醫(yī)站，新疆 奎屯 833200；2.兵團(tuán)第七師一二六團(tuán)農(nóng)業(yè)發(fā)展服務(wù)中心；3.兵團(tuán)第七師一二七團(tuán)農(nóng)業(yè)發(fā)展服務(wù)中心；4.兵團(tuán)第七師一三一團(tuán)農(nóng)業(yè)發(fā)展服務(wù)中心）

豬偽狂犬（PRV）、豬瘟（CSF）和豬繁殖與呼吸障礙綜合癥（豬藍(lán)耳病，PPRS）三種疫病是危害養(yǎng)豬業(yè)的重大動物傳染病，如何合理有效的防疫是養(yǎng)殖戶最關(guān)心的問題。豬繁殖與呼吸障礙綜合癥一般在仔豬21～27 日齡首次接種，必要時在接種后30 d左右再進(jìn)行補(bǔ)免，這與豬偽狂犬疫苗和豬瘟疫苗的接種在時間上存在重合，而且三種疫苗分開免疫注射會對豬造成3次應(yīng)激，影響仔豬生長發(fā)育，同時又耗費(fèi)了大量的人力與時間。如果這三種疫苗可以同時注射，不僅能夠節(jié)省防疫成本，而且還能節(jié)省時間，減輕養(yǎng)殖戶與防疫人員的工作量。為此，我們開展了三種疫苗（豬偽狂犬疫苗、豬瘟疫苗、豬繁殖與呼吸障礙綜合癥疫苗）同時分點(diǎn)注射與單獨(dú)注射健康仔豬比較試驗(yàn)，探討兩種注射方式的免疫效果是否存在差異。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動物

試驗(yàn)動物選自新疆兵團(tuán)第七師一二六團(tuán)某豬場新生35日齡左右未免疫的健康仔豬（三元豬）。

1.2 診斷試劑與疫苗

豬瘟病毒抗體檢測試劑盒（北京世紀(jì)元亨動物防疫技術(shù)有限公司生產(chǎn)，批號：170303）、豬偽狂犬病毒抗體檢測試劑盒（洛陽萊普生物科技有限公司生產(chǎn)，批號：170606）和豬繁殖與呼吸障礙綜合癥檢測試劑盒（北京世紀(jì)元亨動物防疫技術(shù)有限公司生產(chǎn)，批號：170705）。

豬繁殖與呼吸障礙綜合癥弱毒疫苗（吉林正業(yè)生物制品股份有限公司生產(chǎn)，批號：2015026）、豬瘟弱毒活疫苗（齊魯動物保健品有限公司生產(chǎn)，批號：1601003 -2）和豬偽狂犬疫苗（武漢科前生物股份有限公司生產(chǎn)，批號：160435）。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 試驗(yàn)分組

分別將40頭仔豬隨機(jī)分成4組，每組10頭，第一組為單獨(dú)注射豬繁殖與呼吸障礙綜合癥疫苗組，第二組為單獨(dú)注射豬瘟疫苗組，第三組為單獨(dú)注射豬偽狂犬疫苗組，第四組為分點(diǎn)（左右頸部和臀部）同時注射三種疫苗組。每種疫苗均按說明書要求劑量注射。

1.3.2 基礎(chǔ)抗體測定

免疫前對仔豬進(jìn)行基礎(chǔ)抗體滴度測定，將豬繁殖與呼吸障礙綜合癥、豬瘟病毒及豬偽狂犬病毒感染抗體陰性，免疫抗體低于1∶32 的仔豬選擇為試驗(yàn)對象。

1.3.3 接種后抗體檢測

分別于疫苗注射后的14 d、21 d、35 d 和45 d 經(jīng)前腔靜脈采血，分離血清，用于抗體檢測。豬偽狂犬、豬瘟、豬繁殖與呼吸障礙綜合癥抗體檢測均按照診斷試劑說明書操作。

1.3.4 重復(fù)試驗(yàn)

本試驗(yàn)共進(jìn)行2 次，第一次在2016 年5～7 月，第二次在2017 年7～9 月。2 次試驗(yàn)在同一豬場，選擇同一品種仔豬，疫苗及試驗(yàn)方法均一致。

2 結(jié)果與分析

2.1 免疫副反應(yīng)

對免疫后的仔豬進(jìn)行免疫接種副反應(yīng)觀察，只有同時分點(diǎn)注射組有1 頭仔豬發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)，給予注射腎上腺素進(jìn)行搶救，最終搶救無效死亡，副反應(yīng)率為1.25%。其余各組仔豬未出現(xiàn)免疫副反應(yīng)。

2.2 試驗(yàn)結(jié)果

2.2.1 豬繁殖與呼吸障礙綜合癥抗體檢測結(jié)果

從表1 可以看出，仔豬在免疫后35 d 單獨(dú)注射和同時分點(diǎn)注射組PPRS 抗體陽性率都達(dá)到了100%，且同時分點(diǎn)注射組在免疫后14 d陽性率就已達(dá)到100%。單獨(dú)注射組在免疫21 d 后OD 值高于同時分點(diǎn)注射組，差異不顯著（P>0.05）。

表1 PPRS抗體檢測結(jié)果

2.2.2 豬瘟抗體檢測結(jié)果

從表2 可以看出，CSF 抗體阻斷率在21 d 后單獨(dú)注射組和同時分點(diǎn)注射組陽性率都達(dá)到了100%，同時分點(diǎn)注射組的阻斷率在14～35 d內(nèi)高于單獨(dú)注射組，差異不顯著（P>0.05）。

表2 CSF抗體檢測結(jié)果

2.2.3 豬偽狂犬抗體檢測結(jié)果

從表3 可以看出，同時分點(diǎn)注射組和單獨(dú)注射組在免疫21 d 后PRV 抗體陽性率都達(dá)到了100%，在免疫后的14 d 同時分點(diǎn)注射組的OD 值顯著高于單獨(dú)注射組（P<0.05）。

表3 PRV抗體檢測結(jié)果

3 討論

3.1 不同免疫程序豬繁殖與呼吸障礙綜合癥抗體效果比較

本研究將豬偽狂犬、豬瘟和豬繁殖與呼吸障礙綜合癥疫苗同時分點(diǎn)注射，試驗(yàn)結(jié)果顯示，與單獨(dú)注射組抗體水平未見有顯著差異，這與沈艷麗[1]、梅生花[2]、林德瑞[3]的研究結(jié)果相同。在免疫后的21～40 d 同時分點(diǎn)注射組和單獨(dú)注射組的PPRS 抗體合格率都達(dá)到了100%，其中，同時分點(diǎn)注射組在14 d時抗體陽性率就達(dá)到了100%，而單獨(dú)注射組在35 d陽性率達(dá)到100%，說明同時分點(diǎn)注射能刺激機(jī)體較快產(chǎn)生抗體。

3.2 不同免疫程序豬瘟抗體效果比較

同時分點(diǎn)注射組CSF抗體陽性率在14 d就達(dá)到100%，而單獨(dú)注射組在35 d達(dá)到100%，同時分點(diǎn)注射組的阻斷率在14～35 d 內(nèi)高于單獨(dú)注射組，差異不顯著（P>0.05）。在孟麗軍[4]的研究中，將藍(lán)耳病疫苗和豬瘟疫苗同時分點(diǎn)注射，結(jié)果顯示對豬瘟有效抗體產(chǎn)生有干擾作用，并推遲豬瘟抗體水平的升高。這與本試驗(yàn)研究結(jié)果不一致，也可能與本次試驗(yàn)又同時注射了豬偽狂犬疫苗有關(guān)，在賀衛(wèi)潔[5]的研究中，將豬瘟疫苗與偽狂犬疫苗同時注射有互相協(xié)同的作用。

3.3 不同免疫程序豬偽狂犬抗體效果比較

同時分點(diǎn)注射組和單獨(dú)注射組在免疫21 d后PRV 抗體陽性率都達(dá)到100%，且同時分點(diǎn)注射組在免疫后的21 d 陽性率就達(dá)100%，而單獨(dú)注射組陽性率只有25%。說明將豬偽狂犬、豬瘟和豬繁殖與呼吸障礙綜合癥三種疫苗同時分點(diǎn)注射能夠刺激機(jī)體較早產(chǎn)生抗體，并且免疫效果也較好，這與賀衛(wèi)潔[5]和林德瑞[4]的研究結(jié)果相同。

4 小結(jié)

本試驗(yàn)檢測結(jié)果顯示，豬偽狂犬、豬瘟和豬繁殖與呼吸障礙綜合癥三種疫苗同時分點(diǎn)注射健康仔豬后，三種疫苗的抗體都維持了較高水平，達(dá)到了國家規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)，而且豬偽狂犬抗體的產(chǎn)生同時分點(diǎn)注射組較單獨(dú)注射組能夠較早產(chǎn)生，抗體水平也較高。以上僅為初步試驗(yàn)結(jié)果，尚需進(jìn)一步的研究驗(yàn)證。