中國(guó)馬鈴薯花藥培養(yǎng)關(guān)鍵技術(shù)研究進(jìn)展

朱 旭，李 楠，楊春明，李 闖，王忠偉，賀紅霞*

（1.吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研究所，吉林 長(zhǎng)春 130033；2.吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟(jì)植物研究所，吉林 公主嶺 136105）

馬鈴薯在中國(guó)已有400多年的栽培歷史，至今已成為第四大糧食作物。中國(guó)人對(duì)馬鈴薯具有深厚的感情，在漫長(zhǎng)的傳統(tǒng)農(nóng)耕時(shí)代，馬鈴薯作為賴以裹腹的主要糧食作物，使無數(shù)人受益。而馬鈴薯又以其豐富的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，成為中國(guó)飲食烹飪文化不可或缺的部分。中國(guó)馬鈴薯產(chǎn)量居世界首位，但在馬鈴薯育種研究上起步較晚，幾十年來雖然取得了很大成績(jī)，但育種方面因資源、投入、體制等的先天不足，與國(guó)際先進(jìn)水平的差距很大。

馬鈴薯普通栽培種是同源四倍體，遺傳基礎(chǔ)狹窄，利用傳統(tǒng)的種內(nèi)雜交不僅工作量大、效率低，很難選育出優(yōu)良的馬鈴薯新品種。遠(yuǎn)緣雜交可以引入不同種或?qū)俚膬?yōu)良基因，尤其是馬鈴薯野生種的基因，存在遠(yuǎn)緣雜交不親和現(xiàn)象，技術(shù)上存在一些困難?；ㄋ幣囵B(yǎng)可以實(shí)現(xiàn)在二倍體水平上育種，將大幅度提升選擇效率，利用花藥培養(yǎng)和2n 配子技術(shù)，還可以解決馬鈴薯實(shí)生種子后代分離的問題[1]。馬鈴薯野生種具有優(yōu)良的抗病抗逆基因，而且存在低還原糖含量，延長(zhǎng)貯藏時(shí)間等利于提升馬鈴薯加工品質(zhì)的基因[2]。但由于倍性的問題，通過常規(guī)的雜交育種很難將二倍體野生種馬鈴薯中的優(yōu)質(zhì)基因輸入到普通栽培四倍體馬鈴薯中，而花藥培養(yǎng)產(chǎn)生的雙單倍體，可以成為實(shí)現(xiàn)二者之間的基因交流的橋梁[3]?；ㄋ幣囵B(yǎng)是在離體條件下，將發(fā)育到一定時(shí)期的花藥接種到適宜的培養(yǎng)基中，產(chǎn)生胚狀體或愈傷組織，最終使其發(fā)育分化成為完整植株的過程[4,5]。本文概述了花藥培養(yǎng)在馬鈴薯育種中的意義以及目前中國(guó)馬鈴薯花藥培養(yǎng)關(guān)鍵技術(shù)的研究現(xiàn)狀，并對(duì)未來研究工作提出建議，為中國(guó)馬鈴薯花藥培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展提供參考。

1 花藥培養(yǎng)關(guān)鍵技術(shù)

1.1 外植體的選擇

1.1.1 基因型

植物基因型決定著花藥培養(yǎng)成功與否以及難易程度[6]。從花藥培養(yǎng)誘導(dǎo)胚狀體或愈傷組織的能力來看，在植物屬間、種間或品種間均存在很大的差異[7]，并且這種能力是可以遺傳的[8]。廣泛選擇基因型非常重要，中國(guó)學(xué)者20世紀(jì)80年代初，開展馬鈴薯花藥培養(yǎng)試驗(yàn)，不斷地篩選對(duì)誘導(dǎo)產(chǎn)生反應(yīng)的品系，誘導(dǎo)的品種有中晚熟品種也有早熟品種，還有抗晚疫病品種。通過花藥培養(yǎng)獲得過雙單倍體的四倍體栽培種有‘渭薯1號(hào)’[9]、‘高原7號(hào)’[10]、‘京豐1號(hào)’‘鄭州798-24’[11]、‘中心24’[12]、‘波C’‘訥16’‘克新13號(hào)’‘扎列娃’[13]、‘克97G8’‘白俄3’[14]、‘內(nèi)薯7 號(hào)’‘春薯4 號(hào)’[15]，馬鈴薯中心品種‘S17’‘T3’‘KW47’[3]。此外，賀苗苗[16]以‘青薯2號(hào)’‘高原4號(hào)’‘青05-12-6’為材料誘導(dǎo)出了綠色植株，但倍性鑒定并未提及。

1.1.2 生理狀態(tài)

供體植株的生長(zhǎng)條件（光周期、光強(qiáng)、溫度和礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)）以及生理狀態(tài)也能影響花藥培養(yǎng)效果[17]。高湘玲等[18]認(rèn)為開花初期及盛花期所產(chǎn)生的花藥比開花末期產(chǎn)生的花藥誘導(dǎo)頻率高，而且花蕾要選擇健康植株的幼嫩花蕾。他們認(rèn)為以下幾種情況不適合做花藥培養(yǎng)材料：花蕾開裂，花藥裸露在外邊的；早期落蕾和不成花器的；開花正常但花粉敗育或花粉發(fā)芽力很低的；開花正常花藥不開裂的?；ㄋ幮℃咦拥纳頎顟B(tài)受環(huán)境因素影響[19,20]，張鳳蘭等[21]、王建紅等[22]的研究表明，日照長(zhǎng)短和溫度高低影響外植體胚狀體的發(fā)生率，光照時(shí)間長(zhǎng)、環(huán)境溫度低的植株比光照時(shí)間短，環(huán)境溫度較高條件下的植株胚狀體發(fā)生率高。牟文平[23]認(rèn)為花藥培養(yǎng)受季節(jié)和采樣時(shí)間的影響，春天的花藥比秋天的花藥更容易進(jìn)行花藥培養(yǎng)，而且花藥取材盡量取開花初期至盛花期之間的，末花期的花藥生理狀態(tài)不好，不適宜花藥培養(yǎng)，該結(jié)論可供馬鈴薯栽培氣候條件差異大的地區(qū)參考。

1.1.3 發(fā)育時(shí)期

花粉的發(fā)育時(shí)期對(duì)于花藥培養(yǎng)成功與否至關(guān)重要[24]，花粉細(xì)胞只有在其發(fā)育周期中的特定時(shí)期才對(duì)培養(yǎng)程序有反應(yīng)[18]。大多數(shù)植物花藥培養(yǎng)最適宜的時(shí)期是單核中晚期到雙核早期，但不盡相同[7,25]，而馬鈴薯胚胎發(fā)生的最佳小孢子發(fā)育時(shí)期是單核早中期[26]?；ǚ鄣陌l(fā)育時(shí)期和其對(duì)應(yīng)的生長(zhǎng)發(fā)育特點(diǎn)有一定的關(guān)聯(lián)，比如可以根據(jù)花藥、花蕾的長(zhǎng)度，以及花藥顏色等來判斷花粉發(fā)育時(shí)期，但不同品種之間有一定的差別，甚至同一花藥內(nèi)特定發(fā)育時(shí)期小孢子占比是不同的[3]。由于品種不同，單核中、晚期的花藥長(zhǎng)3～8 mm不等；另外在甘藍(lán)中，同一品種的不同花期單核時(shí)期的長(zhǎng)度也有區(qū)別。馬勇斌[27]選用5份甘藍(lán)材料做了甘藍(lán)植株不同花期小孢子單核靠邊期花蕾長(zhǎng)度變化觀察，發(fā)現(xiàn)同一品種，不同花期單核靠邊期花蕾的長(zhǎng)度有所不同，在初花期，花蕾長(zhǎng)度最短，范圍差值最大；盛花中、后期最長(zhǎng)，花蕾長(zhǎng)度范圍差值最小。這一現(xiàn)象在馬鈴薯中是否存在，尚未有報(bào)道。小孢子發(fā)育時(shí)期與生長(zhǎng)發(fā)育特點(diǎn)是密切相關(guān)的[28]，為了提高花藥培養(yǎng)效率，可以通過直觀的對(duì)應(yīng)性狀取材，減少試驗(yàn)操作步驟，降低污染率。

1.2 外植體消毒

滅菌操作是植物組織培養(yǎng)的關(guān)鍵技術(shù)，會(huì)影響整個(gè)試驗(yàn)的效率和數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果[3]。植物組織培養(yǎng)過程中如果出現(xiàn)污染，則造成大量人力、物力和財(cái)力的浪費(fèi)。對(duì)于馬鈴薯花藥培養(yǎng)這種取材有明顯季節(jié)性的試驗(yàn)，消毒處理更要注意。中國(guó)學(xué)者大多采用兩種消毒劑組合在一起使用，酒精+升汞，酒精+飽和漂白粉，酒精+次氯酸鈉，酒精所用濃度一般為70%或75%，浸泡時(shí)間30 s[16]；升汞濃度一般為0.1%，浸泡時(shí)間10～15 min[16]；次氯酸溶液濃度一般為10%，表面滅菌15 min[8]。以上消毒處理結(jié)束后，都用無菌水沖洗3～5次。高湘玲等[18]建議，采蕾應(yīng)在晴天數(shù)日之后進(jìn)行，雨后采蕾污染率達(dá)100%。

1.3 預(yù)處理

1.3.1 預(yù)冷處理

預(yù)冷處理是指在花藥培養(yǎng)之前，將材料置低溫條件下，培養(yǎng)一段時(shí)間再進(jìn)行接種。預(yù)冷處理具有可以提高花藥培養(yǎng)愈傷組織誘導(dǎo)率、促進(jìn)成胚率，而且在煙草、小麥、大麥、水稻等許多植物中已經(jīng)被證明。經(jīng)過低溫處理的花藥，花藥中花粉的胚胎發(fā)生能力提高，活力延長(zhǎng)，落入試驗(yàn)體系中有效花粉的數(shù)量增加，從而提高了花粉胚胎的誘導(dǎo)率[29,30]。但在馬鈴薯花藥培養(yǎng)研究中，低溫處理是否對(duì)愈傷及胚狀體的誘導(dǎo)有利，尚存在爭(zhēng)議。中國(guó)學(xué)者戴朝曦[10]、賀苗苗[16]和盧翠華等[24]在試驗(yàn)中將花藥低溫處理1～2 d并在最后的試驗(yàn)中得到了雙單倍體；王玉娟等[9]和盧翠華等[24]認(rèn)為對(duì)花蕾進(jìn)行適當(dāng)?shù)蜏靥幚?，可提高愈傷組織的形成和分化能力；賀苗苗[31]對(duì)低溫處理、熱激處理的時(shí)間進(jìn)行了研究，該研究證明高低溫相結(jié)合的預(yù)處理方式比單獨(dú)使用一種，馬鈴薯的愈傷誘導(dǎo)率高；李霞等[32]用原始二倍體栽培種的雜種無性系為試驗(yàn)材料，研究預(yù)處理溫度對(duì)二倍體花藥培養(yǎng)中愈傷組織誘導(dǎo)情況，結(jié)果表明4℃低溫預(yù)處理48 h可以明顯提高花藥愈傷組織誘導(dǎo)率；而朱明凱等[11]將花藥在4℃低溫處理24，48和72 h，與未經(jīng)低溫處理的花藥進(jìn)行對(duì)比，發(fā)現(xiàn)低溫處理過的誘導(dǎo)效果與對(duì)照不處理的無明顯差別，王蒂等[8]也認(rèn)為低溫處理對(duì)馬鈴薯花藥培養(yǎng)無益。出現(xiàn)以上不同的結(jié)論，可能是由于材料、培養(yǎng)基的不同，原因有待研究。

1.3.2 熱激處理

熱激處理是指將接種后的花藥或花粉置于高溫條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，然后再移至正常溫度下繼續(xù)培養(yǎng)。不同物種或基因型最佳熱激處理的溫度和時(shí)間是不同的[6]。王蒂等[8]認(rèn)為高溫預(yù)處理能夠顯著地增加胚狀體數(shù)量。莊軍平[33]也認(rèn)為合適的短時(shí)間高溫處理有助于提高愈傷組織的誘導(dǎo)率和胚狀體的產(chǎn)生。馬鈴薯花藥熱激處理常用溫度32～38℃，處理時(shí)間1～3 d。

1.4 培養(yǎng)基成分

花藥和花粉對(duì)營(yíng)養(yǎng)成分的要求因基因型而不同，營(yíng)養(yǎng)成分對(duì)培養(yǎng)效果產(chǎn)生直接的影響，是單倍體植株誘導(dǎo)成功與否的關(guān)鍵，也決定著發(fā)育途徑[34]。馬鈴薯花藥培養(yǎng)常用基本培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基，并在此基礎(chǔ)上添加一些對(duì)愈傷及胚狀體誘導(dǎo)有益的成分。

1.4.1 激 素

戴朝曦[10]認(rèn)為胚狀體分化對(duì)培養(yǎng)基要求不嚴(yán)格，在愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)基里可以直接分化出苗。王蒂等[8]、戴朝曦[10]和朱明凱等[11]均表示胚狀體不需要轉(zhuǎn)到分化培養(yǎng)基，愈傷組織的分化需要較高的細(xì)胞分裂素，而且6-芐氨基嘌呤（6-benzylamino-purine，6-BA）和激動(dòng)素（Kinetin，KT）這兩種細(xì)胞分裂素混合使用的效果更好。梁彥濤[26]認(rèn)為不添加激素或添加低濃度的激素有利于胚狀體植株的再生，其在試驗(yàn)中獲得的胚性愈傷組織在無任何激素的MS培養(yǎng)基中的分化率高于添加了6-BA和KT的培養(yǎng)基。

1.4.2 硝酸銀

在組織培養(yǎng)中，外植體的褐化是普遍存在的，嚴(yán)重影響外植體的脫分化和再分化，并且馬鈴薯花藥褐化率非常高，在50%以上[26]。在培養(yǎng)基中加入硝酸銀，有兩方面的影響，一是能夠促進(jìn)胚狀體的發(fā)生，二是能夠減輕或延緩花藥的褐化。冉毅東和戴朝曦[12]對(duì)硝酸銀誘導(dǎo)馬鈴薯雙單倍體及一倍體的效果做了試驗(yàn)，認(rèn)為花藥褐化程度和基因型有關(guān)。外植體在培養(yǎng)過程中產(chǎn)生的乙烯能夠使馬鈴薯花藥的褐化速度加快，在花藥誘導(dǎo)培養(yǎng)基中加入50～100 μmol/L硝酸銀，可顯著提高胚狀體的發(fā)生率，胚狀體出現(xiàn)的頻率最高可達(dá)16%，同時(shí)可提高胚狀體的分化率；硝酸銀還可延緩花藥的褐化，延長(zhǎng)胚狀體形成期限13～20 d，在試驗(yàn)中，不同基因型材料對(duì)相同濃度硝酸銀的反應(yīng)是不一樣的，說明不同材料產(chǎn)生乙烯的程度可能是不同的[12]。趙欣[15]和梁彥濤[26]硝酸銀的梯度試驗(yàn)，均證明隨著硝酸銀濃度的增加，愈傷組織誘導(dǎo)率先增加后降低，硝酸銀的添加量并不是越大越好。硝酸銀濃度過大，對(duì)材料有毒害作用。梁彥濤[26]認(rèn)為30 mg/L的硝酸銀是降低花藥褐化的最佳濃度，趙欣等[35]試驗(yàn)結(jié)果顯示，培養(yǎng)基中加入20 mg/L的硝酸銀愈傷組織誘導(dǎo)率最高。盧翠華等[24]在培養(yǎng)基中加入100 mg/L硝酸銀同樣誘導(dǎo)出了雙單倍體。不同基因型適宜的硝酸銀添加量可能不同，這需要進(jìn)一步驗(yàn)證。

1.4.3 活性炭

在培養(yǎng)基中加入活性炭，有利于花粉胚狀體或愈傷組織的發(fā)生，從而提高花粉植株的誘導(dǎo)率。在馬鈴薯的花藥培養(yǎng)基中加入0.5%～1.0%的活性炭可以有效地提高花粉植株的數(shù)量[7]?；钚蕴吭诨ㄋ幣囵B(yǎng)中對(duì)花藥褐化的影響顯著，梁彥濤等[36]通過試驗(yàn)得出對(duì)馬鈴薯花藥褐化有顯著影響的因素最主要是活性炭、其次是硝酸銀；并且活性炭以0.2 g/L效果最佳。趙欣等[35]在培養(yǎng)基中分別添加0.25，0.50 和0.75 g/L的活性炭，以不加活性炭為對(duì)照，結(jié)果顯示添加0.50 g/L時(shí)，參試的兩個(gè)品種愈傷誘導(dǎo)率最高。其他各研究論文中使用的活性炭的添加量差別也較大，1～3 g/L[3,10,16]不等。

1.4.4 馬鈴薯提取液

馬鈴薯提取液具有均衡的氨基酸組分，對(duì)許多植物花藥培養(yǎng)都是有益的。馬鈴薯提取液對(duì)胚狀體的產(chǎn)生是有利的，濃度為50 g/L[10]效果較好。

1.5 轉(zhuǎn)分化培養(yǎng)基的時(shí)機(jī)

胚狀體和愈傷組織沖破花藥壁肉眼可見時(shí)，轉(zhuǎn)入分化培養(yǎng)基[10,11]?；ㄋ幣囵B(yǎng)3～8周后，藥壁破裂，愈傷組織或者花粉植株從開口處長(zhǎng)出，直徑達(dá)到2～3 mm時(shí)放到分化培養(yǎng)基上進(jìn)行分化培養(yǎng)[7]。高湘玲等[18]也認(rèn)為愈傷組織長(zhǎng)到1～2 mm 時(shí)，可轉(zhuǎn)入分化培養(yǎng)基，過大過老的愈傷組織，不能迅速地誘導(dǎo)出植株來，及時(shí)的將愈傷組織轉(zhuǎn)入分化培養(yǎng)基是很重要的。

1.6 再生過程

花粉植株的再生途徑有兩種，分別是胚狀體途徑和愈傷組織途徑。戴朝曦[10]共接種花藥20 720枚，獲得了愈傷組織204塊，胚狀體24個(gè)和3塊胚性細(xì)胞團(tuán)。這3種組織均獲得了雙單倍體。試驗(yàn)表明胚狀體的分化頻率是愈傷組織分化頻率的3 倍。試驗(yàn)中所獲得的胚性細(xì)胞團(tuán)是由白色、松散、小米狀的小顆粒組成，經(jīng)過分化培養(yǎng)基5次繼代后，開始大量分化苗。能分化苗的愈傷組織是淡黃色且比較緊實(shí)，而花絲和花藥壁起源的愈傷組織是白色、半透明而且比較松散。

以愈傷組織誘導(dǎo)成植株，染色體倍性差異很大，而以胚狀體誘導(dǎo)成植株，染色體倍性均為雙單倍體。因此，以胚狀體直接誘導(dǎo)成苗比以愈傷組織途徑有明顯優(yōu)點(diǎn)。首先是數(shù)量多，一個(gè)胚性細(xì)胞團(tuán)可誘導(dǎo)出10～50個(gè)胚狀體。其次是速度快，胚狀體是從單細(xì)胞直接分化成苗，因此比愈傷組織誘導(dǎo)成苗要快的多，而且從胚狀體誘導(dǎo)成苗的頻率比愈傷組織要高。再者，以胚狀體途徑成苗染色體倍性穩(wěn)定，均為雙單倍體，而愈傷組織途徑倍性復(fù)雜。因此根據(jù)目的，今后重點(diǎn)是掌握誘導(dǎo)胚狀體的條件，提高花粉植株的誘導(dǎo)頻率[11]。

1.7 倍性鑒定

由于受到花藥壁的影響，花藥培養(yǎng)再生的植株可能來源于花粉也可能來源于花藥壁，倍性鑒定是很有必要的。倍性鑒定有形態(tài)學(xué)鑒定、細(xì)胞學(xué)鑒定和流式細(xì)胞儀鑒定以及生化或分子標(biāo)記鑒定法等。直接對(duì)花粉植株根尖進(jìn)行染色體數(shù)目鑒定的細(xì)胞學(xué)鑒定是最有效、最可靠的方法[37]，也是馬鈴薯單倍體鑒定的常用方法。

1.8 培養(yǎng)條件

1990年之前，由于試驗(yàn)條件受限，花藥培養(yǎng)誘導(dǎo)階段多在18～25℃的變溫條件下培養(yǎng)，散射光或連續(xù)光照培養(yǎng)，分化階段每天補(bǔ)充光照8～16 h，光強(qiáng)2 000～2 500 lx。王蒂等[8]則在自然散射光下，加白色燈2 000 lx晝夜照明，4～6周形成胚狀體。

1990年之后，花藥培養(yǎng)大多在25℃恒溫條件下進(jìn)行，盧翠華等[24]在弱光條件下每天光照培養(yǎng)l6 h。王梓全等[29]、梁彥濤等[36]則在黑暗條件下，誘導(dǎo)愈傷組織或胚狀體。分化階段光強(qiáng)為2 000～2 500 lx，光照16 h/黑暗8 h。

2 花藥培養(yǎng)制約因素

自從曼陀羅花藥培養(yǎng)成功獲得單倍體植株后，許多植物利用花藥培養(yǎng)技術(shù)也相繼獲得了成功。中國(guó)從20世紀(jì)80年代初就開展了馬鈴薯花藥培養(yǎng)的研究工作，雖然取得了很大的進(jìn)步，從無到有，也從一些基因型中誘導(dǎo)出了雙單倍體，但近20年間，馬鈴薯花藥培養(yǎng)的理論研究還不夠深入、系統(tǒng)，還沒有建立起一套完善的應(yīng)用體系。這可能有三方面因素限制了花藥培養(yǎng)在馬鈴薯育種中的應(yīng)用。

（1）基因型的限制：馬鈴薯普通栽培種的花藥誘導(dǎo)成苗頻率很低，如何提高誘導(dǎo)成苗率是今后花藥培養(yǎng)的重要問題。品種、培養(yǎng)基不同誘導(dǎo)效果差異很大，說明具有不同基因型的品種對(duì)同一生長(zhǎng)條件適應(yīng)性不同，同一品種對(duì)不同培養(yǎng)基又有明顯的選擇性[11]。有研究用80多個(gè)品種進(jìn)行花藥培養(yǎng)，其中只有12個(gè)品種獲得愈傷組織，而真正獲得單倍體植株的只有兩個(gè)品種[7]。

（2）試驗(yàn)材料供給受限：馬鈴薯花藥的采集具有明顯的季節(jié)性，而且馬鈴薯花藥極易褐化，一般花藥采集地與實(shí)驗(yàn)室不在同一地點(diǎn)，往返兩地不僅增加了褐化風(fēng)險(xiǎn)，也增加了時(shí)間成本，給花藥培養(yǎng)帶來許多困難。

（3）科研投入不足：花藥培養(yǎng)操作繁瑣、工作量大、花藥培養(yǎng)效率較低，優(yōu)化培養(yǎng)體系需要投入較大精力，這方面研究投入遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠。

3 發(fā)展建議

3.1 廣泛的篩選基因型

基因型對(duì)馬鈴薯花藥培養(yǎng)是否成功起決定性作用，因此廣泛的篩選適宜花藥培養(yǎng)的基因型很有必要，一方面可以充分挖掘優(yōu)良的隱性基因，另一方面培育出的雙單倍體可以與二倍體野生種雜交，獲得野生資源中優(yōu)良的遺傳性狀，提高育種效率。

3.2 就近建立花藥培養(yǎng)材料試驗(yàn)基地

影響馬鈴薯花藥培養(yǎng)的因素很多，而花藥培養(yǎng)工作能否高效開展，和試驗(yàn)材料的供給有很大的關(guān)系。馬鈴薯花藥的采集具有明顯的季節(jié)性，馬鈴薯的花蕾形成、開花及受精結(jié)實(shí)對(duì)氣候條件很敏感，在溫室種植的馬鈴薯很難開花，花蕾形成后很容易落蕾，而且有花藥裸露在外的現(xiàn)象，難以作為花培材料。吉林省屬于北方一季作區(qū)，一年只有一次開花期，花期3～4周，尤以初花期和盛花期的花藥最適合培養(yǎng)，所有的花藥培養(yǎng)試驗(yàn)均集中在短短2～3周，應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室周邊建立花藥采集苗圃，避免往返取樣耽誤時(shí)間，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求隨用隨取，并降低試驗(yàn)材料褐化風(fēng)險(xiǎn)，提高花藥培養(yǎng)工作效率。

3.3 加強(qiáng)花藥培養(yǎng)的科研投入，完善育種技術(shù)

雜交育種目前是中國(guó)最常用的育種方法，但選擇效果仍然很差，在野生種的利用方面也存在一些技術(shù)問題。馬鈴薯雙單倍體有著獨(dú)特的育種優(yōu)勢(shì)，將雜交育種和生物育種相結(jié)合，將大幅度提高育種效率。要想實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo)，必須提高花藥培養(yǎng)的科研投入，讓更多的科研人員參與到花藥培養(yǎng)技術(shù)研究中，不斷完善培養(yǎng)技術(shù)、提高培養(yǎng)效率，加大花藥培養(yǎng)技術(shù)在馬鈴薯育種中的利用，逐步建立完善的應(yīng)用體系。