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      心房顫動(dòng)患者血清FGF-23、miR-208b的表達(dá)水平及臨床意義

      2021-12-04 08:05:08張磊丁輝
      海南醫(yī)學(xué) 2021年22期
      關(guān)鍵詞:心房房顫左心室

      張磊,丁輝

      西北大學(xué)附屬醫(yī)院·西安市第三醫(yī)院心內(nèi)科,陜西 西安710018

      心房顫動(dòng)是臨床快速性心律失常之一,發(fā)生率和患病率逐年增加[1]。心房顫動(dòng)的發(fā)生常合并有中風(fēng)和血栓栓塞事件、心力衰竭、心肌梗塞和認(rèn)知能力下降,并且慢性腎臟疾病和其他疾病發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)也增加[2]。靈敏度高的血清學(xué)標(biāo)志物有助于房顫早期診斷[3]。成纖維細(xì)胞生長因子23(FGF-23)是成纖維細(xì)胞生長因子(FGF)超家族的成員,與心血管疾病的發(fā)展密切相關(guān)[4]。多數(shù)miRNA在患者機(jī)體表現(xiàn)出組織特異性,并可以在血清中穩(wěn)定表達(dá),是潛在生物標(biāo)記物[5]。目前,在急性心肌梗死患者的血漿中發(fā)現(xiàn)了miR-208b的表達(dá),這表明心臟特異性miR-208b可以從受損的心肌細(xì)胞釋放到血液循環(huán)中[6]。本文旨在探討血清FGF23、miR-208b在心房顫動(dòng)患者中的表達(dá)水平及其臨床意義,現(xiàn)報(bào)道如下:

      1 資料與方法

      1.1 一般資料 回顧性選取2018年5月至2019年10月在西安市第三醫(yī)院治療的心房顫動(dòng)患者240例(觀察組),其中陣發(fā)性房顫患者134例,持續(xù)性房顫患者106例。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)診斷符合2016年ESC房顫管理指南診斷標(biāo)準(zhǔn);(2)心功能NYHA分級(jí)為Ⅰ~Ⅱ級(jí);(3)隨訪1年,臨床隨訪資料保存完整。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)伴有瓣膜性心臟病等心臟疾??;(2)合并有惡性腫瘤、免疫系統(tǒng)疾病、血液系統(tǒng)疾病等其他疾??;(3)近1個(gè)月內(nèi)有感染者。同時(shí)選取竇性心律健康體檢者150例作為對(duì)照組,觀察組和對(duì)照組一般資料比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性,見表1。本研究獲得西安市第三醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

      表1 兩組受檢者的一般資料比較[±s,例(%)]

      表1 兩組受檢者的一般資料比較[±s,例(%)]

      組別觀察組對(duì)照組t/χ2值P值例數(shù)240 150男性168(70.00)98(65.33)0.927 0.336年齡(歲)60.50±9.28 59.22±10.11 1.280 0.201體質(zhì)量指數(shù)(kg/m2)23.30±5.44 22.83±6.50 0.769 0.442吸煙103(42.92)56(37.33)1.192 0.275飲酒63(26.25)34(22.67)0.634 0.426

      1.2 觀察指標(biāo)與檢測方法 (1)miR-208b表達(dá)水平檢測:所有患者入院后次日清晨取3 mL靜脈血標(biāo)本,同時(shí)取對(duì)照組患者空腹靜脈血,將其放入EDTA抗凝管中,以2 000 r/min的速度在4℃下離心20 min,然后取上清液保存在-80℃的冰箱中。實(shí)時(shí)定量PCR方法(QRT-PCR)用于檢測血清中的miR-208b。總RNA提?。喊凑赵噭┖械恼f明進(jìn)行操作,將血清加入無RNA酶的離心管中,加入裂解液,充分混合并裂解,按照分光光度法檢測濃度和純度。逆轉(zhuǎn)錄合成反應(yīng)系統(tǒng):RNA模板2μL,RT引物2μL,5×RT緩沖液5μL,dNTP(2.5 mm)2μL,40 U/μL RNase Inhibitor 0.5μL,20 U/μL RT酶0.5μL,ddH2O 24μL按照逆轉(zhuǎn)錄試劑盒中的步驟將RNA逆轉(zhuǎn)為cDNA。qRT-PCR檢測:以β-actin為內(nèi)部參考基因,以cDNA為模板進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄。反應(yīng)系統(tǒng):cDNA 2μL,2×SYBR Green qPCR混合物10μL,正向引物1μL,反向引物1μL,焦碳酸二乙酯6μL的二乙氧基碳酸氫鹽(DEPC)水,總反應(yīng)量20μL,每個(gè)靶基因重復(fù)3次。反應(yīng)條件:95℃10 min;95℃15 min;60℃1 min;40循環(huán),72℃30 s。啟動(dòng)qRT-PCR儀器進(jìn)行PCR擴(kuò)增,并使用2-ΔΔCT方法計(jì)算miR-208b的相對(duì)表達(dá)。(2)血清FGF23濃度檢測:入院后次日清晨收集患者5 mL空腹肘靜脈血,同時(shí)取對(duì)照組患者空腹靜脈血,靜置20 min后3 000 r/min離心10 min,分離上清通過酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)檢測血清FGF23濃度。(3)心功能和結(jié)構(gòu)指標(biāo)測定:使用DW-CE540彩色多普勒超聲診斷儀(大為醫(yī)療有限公司),S5-1探頭,頻率為2~5 MHz?;颊咦髠?cè)位,取左心室靠近胸骨的長軸部分,取左心室靠近胸骨的長軸部分,從主動(dòng)脈遠(yuǎn)端后壁取垂直線到左心房后壁內(nèi)膜進(jìn)行測量,測量心室收縮末期左心房內(nèi)徑(LAD)、左心室舒張末期心肌梗死期直徑(LVEDD)、左心室收縮末期的左心室直徑(LVSD)。采取心尖四腔和兩腔心切面,并使用Simpon方法計(jì)算左心室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)。連續(xù)評(píng)估5~7個(gè)心動(dòng)周期并取平均值。(4)比較不同預(yù)后患者的血清FGF-23、miR-208b水平:隨訪1年,檢測并比較觀察組不同預(yù)后患者的血清FGF-23、miR-208b水平。

      1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS22.0軟件分析數(shù)據(jù),計(jì)量資料符合正態(tài)分布,以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,組間比較采用t檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn);采用Pearson相關(guān)法分析血清FGF-23、miR-208b相對(duì)表達(dá)量與LAD的相關(guān)性。以P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

      2 結(jié)果

      2.1 兩組受檢者的血清FGF-23、miR-208比較 觀察組患者的血清FGF-23、miR-208b相對(duì)表達(dá)量明顯高于對(duì)照組,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表2。

      表2 兩組受檢者的血清FGF-23、miR-208b比較(±s)

      表2 兩組受檢者的血清FGF-23、miR-208b比較(±s)

      組別觀察組對(duì)照組t值P值例數(shù)240 150 FGF-23(ng/mL)210.20±89.60 110.04±32.29 13.162 0.001 miR-208b相對(duì)表達(dá)量5.30±1.22 2.90±0.88 20.926 0.001

      2.2 觀察組不同亞組患者血清FGF-23、miR-208b及心臟參數(shù)比較 觀察組中的持續(xù)性房顫患者的血清FGF-23、miR-208b相對(duì)表達(dá)量明顯高于陣發(fā)性房顫患者,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);持續(xù)性房顫患者LAD明顯高于陣發(fā)性房顫患者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表3。

      表3 觀察組不同亞組患者血清FGF-23、miR-208b及心臟參數(shù)比較(±s)

      表3 觀察組不同亞組患者血清FGF-23、miR-208b及心臟參數(shù)比較(±s)

      項(xiàng)目男性[例(%)]年齡(歲)FGF-23(ng/mL)miR-208b相對(duì)表達(dá)量LAD(mm)LVEDD(mm)LVESD(mm)LVEF(%)陣發(fā)性房顫(n=134)98(73.13)61.02±10.11 191.20±65.59 4.88±1.02 34.03±4.02 50.03±6.03 32.10±5.58 53.30±7.81持續(xù)性房顫(n=106)70(66.04)59.89±9.92 234.22±70.05 5.83±1.00 38.81±5.11 49.81±5.82 32.01±6.02 52.83±8.10 t值1.419 0.867-4.896-7.227-8.112 0.285 0.12 0.455 P值0.234 0.387 0.001 0.001 0.001 0.776 0.905 0.649

      2.3 血清FGF-23、miR-208b相對(duì)表達(dá)量與LAD的相關(guān)性 血清FGF-23、miR-208b相對(duì)表達(dá)量與LAD呈正相關(guān)(r=0.411,0.382,P<0.05)。

      2.4 不同預(yù)后患者的性別、年齡、血清FGF-23、miR-208b水平比較 隨訪1年,根據(jù)隨訪期間是否發(fā)生主要心血管事件(MACE),將患者分為MACE組58例和非MACE組182例。MACE組患者的血清FGF-23和miR-208b明顯高于非MACE組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表4。

      表4 MACE組和非MACE組患者的性別、年齡、血清FGF-23和miR-208b比較[±s,例(%)]

      表4 MACE組和非MACE組患者的性別、年齡、血清FGF-23和miR-208b比較[±s,例(%)]

      組別MACE組非MACE組t值P值例數(shù)58 182男性43(74.14)125(68.68)0.624 0.43年齡(歲)61.19±10.54 62.28±9.89-0.719 0.473 FGF-23(ng/mL)243.30±72.29 199.65±71.43 4.041 0.001 miR-208b相對(duì)表達(dá)量6.12±1.12 5.04±1.07 6.619 0.001

      3 討論

      心房顫動(dòng)的發(fā)生和維持機(jī)制較為復(fù)雜,肺靜脈異位興奮性灶發(fā)出的電脈沖被認(rèn)為是房顫的重要機(jī)制,心房纖維化被認(rèn)為對(duì)于維持和持續(xù)房顫的難度很重要因子[7-9]。尋找具有高度特異性和敏感性的生物標(biāo)志物具有重要意義。心血管系統(tǒng)疾病通常伴隨著外周循環(huán)血液中miRNA水平的變化,由于冠狀動(dòng)脈的急性阻塞,心肌細(xì)胞局部缺血,導(dǎo)致心力衰竭和血流中斷,早期診斷和有效治療有助于改善患者的預(yù)后[10-11]。

      先前對(duì)FGF23的研究集中在慢性腎臟疾病和心血管疾病之間的關(guān)系,而對(duì)非慢性腎臟病患者中FGF23水平與房顫之間關(guān)系的報(bào)道很少。FGF-23生物學(xué)作用的發(fā)揮需要與FGF受體結(jié)合,這需要α-Klotho蛋白作為共受體發(fā)揮關(guān)鍵輔因子作用[12]。α-Klotho蛋白主要分布在腎臟和甲狀旁腺中,可以在組織中特異性表達(dá)[13]。FGF-23參與多種心血管疾病的發(fā)生,目前的研究已經(jīng)證實(shí),F(xiàn)GF-23水平升高與左心室肥大,高血壓,心源性死亡和全因死亡的發(fā)生顯著有關(guān)[14]。研究表明,高水平的FGF-23可用作心血管事件的獨(dú)立預(yù)測因子[15]。然而,很少有關(guān)于FGF23水平與心房顫動(dòng)疾病之間關(guān)系的報(bào)道。

      心血管系統(tǒng)疾病如心力衰竭,心肌梗塞和冠心病患者的外周循環(huán)血液中miRNA水平通常發(fā)生變化。miR-208a和miR-208b都是心臟組織特異性miRNA[16]。本次研究結(jié)果顯示,觀察組血清FGF-23和miR-208b的相對(duì)表達(dá)水平明顯高于對(duì)照組,并且MACE患者兩者水平較高,隨著患者病情的惡化,各項(xiàng)指標(biāo)發(fā)生明顯變化,提示FGF23蛋白在房顫患者中呈現(xiàn)異常表達(dá)表達(dá)。影響FGF-23和miR-208b水平的因素可能有心房超負(fù)荷,心房收縮功能障礙和心功能降低等,兩者可以作為心房顫動(dòng)發(fā)生的獨(dú)立預(yù)測因素。FGF23的作用機(jī)制可能是激活蛋白激酶C信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,使得心肌細(xì)胞之間的鈉電流增加,L型鈣電流和鈣瞬變,導(dǎo)致鈣和鈉失衡。LAD、LVEDD、LVESD和LVEF等可能反映了房顫的嚴(yán)重程度[17-18]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),房顫患者的LAD升高,并隨心房顫動(dòng)的發(fā)展而相應(yīng)增加,與先前的研究和提示相似,表明LAD可能是房顫發(fā)生和嚴(yán)重程度的危險(xiǎn)因素。原因可能是心房顫動(dòng)患者機(jī)體炎癥介導(dǎo)的心房結(jié)構(gòu)重塑和電學(xué)重塑可能是維持和發(fā)展心房顫動(dòng)的重要因素,左心房擴(kuò)大程度與房顫的復(fù)發(fā)和血栓形成密切相關(guān)。研究表明,房顫的發(fā)生和發(fā)展受多種機(jī)制和因素的影響,尤其與左心房結(jié)構(gòu)重塑和電生理重塑密切相關(guān)[19-20]。本次研究中不僅研究了心臟參數(shù)LAD變化,還比較了不同患者血清FGF-23、miR-208b變化,發(fā)現(xiàn)與房顫的嚴(yán)重程度有關(guān),有助于房顫患者病情的診斷,評(píng)估和預(yù)后。

      綜上所述,心房顫動(dòng)患者血清FGF-23,miR-208b升高,與疾病類型、心臟參數(shù)及預(yù)后有一定相關(guān)性。

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