陰道分泌物檢測方法的研究進展

李治清

（武鳴區(qū)婦幼保健院，廣西 南寧，530199）

陰道炎/陰道病是婦科常見病、多發(fā)病，近年來，隨著生活壓力不斷增加，女性陰道病患病率也隨之上升，因女性的特殊生理結(jié)構(gòu)，極易遭受病原微生物的感染，常見包括細菌、病菌、霉菌、衣原體、支原體等感染，促使外陰引起灼痛、瘙癢等臨床癥狀，嚴重時可造成不孕不育，對患者及其家庭帶來極大程度的影響[1]。陰道病誘發(fā)因素較多，且極易復(fù)發(fā)，故盡早診斷、治療至關(guān)重要。目前針對陰道病患者，臨床多對患者陰道分泌物進行檢測。陰道分泌物主要是女性生殖系統(tǒng)分泌的液體，因正常婦女陰道中存在乳酸桿菌可酵解而引起乳酸，陰道內(nèi)pH 值保持在3.8～4.4 之間，在此環(huán)境可有效抑制細菌生長、繁殖，以此達到自凈功能，一旦機體防御機能遭受破壞，則極易引發(fā)病原菌感染，故對陰道分泌物進行檢測至關(guān)重要[2-3]。陰道分泌物存在多種實驗室檢測技術(shù)，本文主要介紹各檢測技術(shù)的方式與特點，以便選擇有效、精準的方式檢測、診斷疾病。

1.直接涂片法

陰道分泌物最常見、最傳統(tǒng)的檢測方式是濕片懸滴法與改進后效果更為顯著的甲苯胺藍鹽水、稀堿、加熱三步法，以及超高倍鏡檢測法[4]。上述檢測方式具有操作簡便、經(jīng)濟、精準等優(yōu)點，在一張涂片上能夠同時進行真菌、滴蟲、白細胞等多項常規(guī)檢測，適用于基層醫(yī)療單位與初診、體檢篩查等，檢測溫度環(huán)境一般為25～42℃[5]。但該檢測方式存在一定的局限性，對醫(yī)師要求較高，受標(biāo)本、檢測次數(shù)等多種因素影響，可能獲得不同的結(jié)果；同一患者因不同醫(yī)師取材，也可能獲取不同結(jié)果，故采取上述檢測方式也存在一定的漏檢率、誤診率[6]。

2.染色法

染色法檢測靈敏度較直接涂片法高，具有能夠在1 張涂片上同時實施多項檢測，且不受保溫措施限制，污染程度較小，具有準確、操作方式簡便、檢出率高等優(yōu)點。其中包括革蘭染色、白帶多功能染色（BTR）、多項檢測迅速染色技術(shù)（CTB）等。

2.1 革蘭染色

革蘭染色檢測具有操作方式簡便、用時短、費用低等優(yōu)點，在臨床已得到廣泛應(yīng)用。多項研究顯示，革蘭染色法能夠顯著提升陰道分泌物真菌檢測的檢出率，效果較佳。在對真菌進行檢驗過程中，革蘭染色法還可對淋球菌、加德納菌等致病菌進行檢測，具有一定的敏感性[7]。肖征、章京楠、曹正[8]等人研究顯示，對120 例陰道炎患者給予革蘭氏染色法檢測，結(jié)果顯示，其檢測靈敏度、特異性、準確率分別為87.07%、100.00%、87.50%。

2.2 BTR

BTR 主要是依據(jù)白帶病原具有不同的形態(tài)特點，利用具有多種功能的染色液作染色檢查的一種實用性較強的形態(tài)學(xué)檢測技術(shù)。BTR 染色液主要由R1、R2 液組成，染白帶涂片，能夠在一張涂片上同時進行淋球菌、霉菌、滴蟲等多項檢測，具有操作方式簡便、染色形態(tài)清晰與檢出率高等優(yōu)點，可為臨床診斷、治療等提供可靠的依據(jù)[9]。

2.3 CTB

CTB 染液主要是由R1、R2 組成，因其染色液的效能可使病原體形態(tài)特點更為清晰顯示出，可實施多項檢查，同時還可進行陰道鱗狀細胞分類計數(shù)，對卵巢功能進行檢測，具有操作方式簡便，迅速、檢出率高等優(yōu)點[10]。

3.培養(yǎng)法

培養(yǎng)法是診斷細菌性陰道病、滴蟲性陰道炎的“金標(biāo)準”，具有一定的高敏感性與高特異性，需要特定的試驗環(huán)境與材料。其中包括普通細菌培養(yǎng)法、快速培養(yǎng)法、念珠菌顯色培養(yǎng)基法（CA）等。楊潔、陳海迎、鄭建瓊[11]等人研究顯示，對961 例孕婦采取陰道下段1/3 處及肛門分泌物實施細菌培養(yǎng)檢測，結(jié)果顯示，細菌培養(yǎng)法檢測的靈敏度、特異度、約登指數(shù)、陰性似然比分別為0.32、1.00、0.32、0.6。而快速培養(yǎng)法檢測時間僅需2.5h，也存在一定的靈敏度、特異度。CA 自20 世紀90年代由法國研究者進行開發(fā)，CA 的原理主要是依據(jù)酶底物法，經(jīng)過顯色來區(qū)別不同念珠菌，在25～28℃環(huán)境中培養(yǎng)24～48h 后，白色念珠菌可呈現(xiàn)出藍綠色；熱帶念珠菌呈現(xiàn)藍灰色或鐵藍色；光滑念珠菌呈現(xiàn)紫色；其他念珠菌顯示白色，細菌被抑制。CA優(yōu)點是能夠直接使用陰道分泌物標(biāo)本，僅需24～48h 培養(yǎng)即可診斷外陰陰道念珠菌?。╒VC），同時鑒別引起VVC 常見念珠菌[12]。

4.分子生物學(xué)

近年來，隨著分子生物學(xué)逐漸發(fā)展，微生物的分類鑒定從表型特征鑒定深化為基因特征鑒定。其中基于16SrRNA 基因聚合酶反應(yīng)（PCR）擴增是臨床檢測陰道微生物最常見、主要方式[13]。曹敬榮、高世超、陳典典[14]等人研究顯示，對12 株菌株使用PCR 擴增其16SrRNA 基因，測序后實施BLAST 比對鑒定菌種，結(jié)果顯示，12 株菌經(jīng)PCR 擴增均可獲得陽性條帶，均鑒定到種。由上述得出，分子生物學(xué)方式檢測促使檢測到的陰道微生物種類更為全面、更準確，檢出率相比其他檢測方式高。借助分子生物學(xué)方式能夠研究不同微生物對陰道微生物作用，并掌握各生殖道感染性病癥，進而為臨床診斷、治療提供有效理論依據(jù)。

5.小結(jié)

陰道分泌物檢測是臨床診斷婦科疾病的，主要方式之一，陰道分泌物檢測方式較多，不同方式存在不同的特點。其中直接涂片、染色法作為臨床傳統(tǒng)檢測方式，具有直觀以及經(jīng)濟等特點，常在臨床譽為“金標(biāo)準”，但操作方式較為復(fù)雜、時間較長。培養(yǎng)法具有較高的靈敏度、特異性；分子生物學(xué)作為目前臨床研究的重點內(nèi)容，具有鑒定準確、設(shè)備昂貴、檢測費用高等特點，故僅具有科研與確診意義。因此在臨日后臨床研究中，可進一步增加樣本數(shù)、引用客觀性指標(biāo)以及延長研究時間等，以深入研究陰道分泌物檢測方式。