液相色譜技術(shù)在食品檢測(cè)方面的應(yīng)用研究

曹銀平

鄒平市綜合檢驗(yàn)檢測(cè)中心 山東鄒平 256209

如今，在檢測(cè)技術(shù)日趨多樣和精細(xì)的條件下，采用高效液相色譜法進(jìn)行食品安全檢測(cè)受到了越來(lái)越多的關(guān)注，特別是在檢測(cè)食品中含有的添加劑和農(nóng)藥殘留方面。檢測(cè)方法的多樣化和科學(xué)化以及與多種精細(xì)儀器的聯(lián)合運(yùn)用，切實(shí)地保障了食品安全檢測(cè)的高效與精確，而相關(guān)的食品安全生產(chǎn)也得到了最大程度的保障。

1 液相色譜技術(shù)概述

1.1 液相色譜技術(shù)起源

這樣的一種檢測(cè)技術(shù)最早出現(xiàn)在西方，是各類物理和化學(xué)等分析的重要檢測(cè)方法。上個(gè)世紀(jì)七十年代開始在食品安全監(jiān)測(cè)中應(yīng)用，在九十年代被列為國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)方法，自此獲得了廣泛的應(yīng)用。此類技術(shù)方法主要是通過(guò)物理性質(zhì)完成物質(zhì)的分離工作，具體來(lái)看主要包括固定相和流動(dòng)相等兩個(gè)部分。色譜法主要包括氣相色譜、液相色譜、凝膠色譜等，其中液相色譜技術(shù)的應(yīng)用范圍最廣、技術(shù)最為成熟[1]。

1.2 液相色譜原理

對(duì)于液相色譜儀來(lái)說(shuō)，其是一種借助于現(xiàn)代化儀器進(jìn)行食品安全檢測(cè)的技術(shù)。由于其大多數(shù)部件與結(jié)構(gòu)信息系統(tǒng)極為相似，因此很多的高壓輸液泵在高效液相色譜方面通常會(huì)采用非常小的色譜柱完成填充工作，且應(yīng)進(jìn)行淋洗處理。一般來(lái)看，梯度淋洗主要涉及兩類不同規(guī)格的溶劑，這些溶劑在分離過(guò)程中往往會(huì)根據(jù)其相應(yīng)的比例自動(dòng)地進(jìn)行匹配和混合。在這樣的過(guò)程中，淋洗液的極性即會(huì)得到一定程度的變化[2]。而借助于其中的極性變化即能推動(dòng)分離組各類因素的改變，如此即能達(dá)到較為理想的分離效果。需要注意的是，所使用到的不銹鋼也應(yīng)確保質(zhì)量的達(dá)標(biāo)，且應(yīng)保證壓力低于6925kpa，同時(shí)還應(yīng)使用性質(zhì)更為優(yōu)良的厚壁玻璃，以為相關(guān)的檢測(cè)提供有利的條件。大多數(shù)的檢測(cè)器都是通過(guò)對(duì)綜合色譜柱的分離以及淋洗液的濃度等做出定性或定量的分析，而整個(gè)的檢測(cè)也能更為高效地推進(jìn)。

2 液相色譜技術(shù)在食品檢測(cè)領(lǐng)域的應(yīng)用

2.1 液相色譜對(duì)食品添加劑的檢測(cè)

對(duì)于食品中所用的添加劑，應(yīng)嚴(yán)格根據(jù)國(guó)家相關(guān)的食品安全法律法規(guī)進(jìn)行，且應(yīng)達(dá)到安全管理的標(biāo)準(zhǔn)。其中對(duì)食品添加劑有明確的定義：即為改善食品質(zhì)量和色相以及味道等添加的人工合成或天然的物質(zhì)。誠(chéng)然，添加食品添加劑確實(shí)能夠提升食品的味道和色澤，且有助于食品的儲(chǔ)存，但是相應(yīng)的添加量往往有著精細(xì)的限制，一旦超過(guò)安全的標(biāo)準(zhǔn)，就會(huì)危害人體的健康，且會(huì)造成更為嚴(yán)重的不良影響。鑒于此，就應(yīng)加強(qiáng)食品添加劑的檢測(cè)，且應(yīng)將其作為食品安全標(biāo)準(zhǔn)的重要基礎(chǔ)。我國(guó)的食品添加劑涉及二十多個(gè)類別、兩千余個(gè)種類，涵蓋酸度調(diào)節(jié)劑和抗結(jié)劑以及消泡劑等多種類型。這方面的檢測(cè)，通常使用高效液相色譜法進(jìn)行具體實(shí)施。

2.1.1 對(duì)甜味劑的檢測(cè)

對(duì)于甜味劑的檢測(cè)，高效液相色譜技術(shù)所達(dá)到的效果更為精確，不管是甜蜜素等人工合成的甜味劑，還是甜菊糖苷等天然的甜味劑，其都能精確地測(cè)出相應(yīng)的含量。就當(dāng)前的基本情況來(lái)看，離子對(duì)色譜法等應(yīng)用的比較廣泛，且獲得了較為理想的應(yīng)用效果。相應(yīng)的色譜柱，主要涉及-NH和陰離子交換柱等，另有UVD等相關(guān)的檢測(cè)器。陳健等主要進(jìn)行的是糕點(diǎn)中天然甜味劑的檢測(cè)，主要涉及甜菊糖苷和甘草酸等，相應(yīng)的回收率控制在80%～105%，而RSD則均小于7.5%?；人M(jìn)行的飲料中甜味劑的檢測(cè)，得到的結(jié)果顯示，相應(yīng)的回收率為80.5%～95.2%，而RSD則為0.5%～8.7%。相對(duì)來(lái)說(shuō)，其完成集檢測(cè)所用的時(shí)間未到6min，而整個(gè)的效率以及所得到的結(jié)果都比較理想。

2.1.2 對(duì)色素的檢測(cè)

對(duì)于食品外觀的顏色來(lái)說(shuō)，通過(guò)色素可以改變其顏色體系，就目前看來(lái)色素主要分為天然色素以及人工色素。前者安全系數(shù)相對(duì)較高，但是價(jià)格也比較高，加工難度大很容易受到外界因素的影響。對(duì)于后者來(lái)說(shuō)其化學(xué)物質(zhì)穩(wěn)定性非常強(qiáng)，能夠快速上色，價(jià)格比較低具備可操作性，當(dāng)前在食品加工生產(chǎn)中得到了廣泛的應(yīng)用。但是一些人工合成的色素存在毒性作用，對(duì)人們的身體健康有一定的危害，所以對(duì)于人工合成色素的應(yīng)用有著嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)與限制。當(dāng)前在社會(huì)上常用的色素有誘惑紅色素、亮藍(lán)色素、赤鮮紅等色素。在色素檢測(cè)中相關(guān)學(xué)者采取乙醇氨提取，采取陰離子固相萃的方式進(jìn)行小柱凈化，并且在通過(guò)色譜柱分離以后得到最終結(jié)果，試驗(yàn)表明，人工合成的色素可以在18分鐘以內(nèi)實(shí)現(xiàn)有效分離，平均的回收率在80%左右；此外相關(guān)研究人員采取高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜手段對(duì)紅薯粉條的色素進(jìn)行了檢測(cè)，通過(guò)該方法的應(yīng)用檢測(cè)出色素的回收率為85%左右。通過(guò)此類檢測(cè)方法的技術(shù)應(yīng)用，可以直觀快速的對(duì)食品中的色素體系進(jìn)行分析，能夠了解食品安全性[3]。

2.1.3 對(duì)防腐劑、抗氧化劑的檢測(cè)

抗氧化劑在抑制食品氧化變質(zhì)和延長(zhǎng)保質(zhì)期方面有著突出的功效，其主要包括天然和人工合成等兩種類型。前者主要有茶多酚、花青素等，相對(duì)來(lái)說(shuō)穩(wěn)定性較低。而后者獲得了極為廣泛的應(yīng)用，但應(yīng)注意使用量的控制，否則極易對(duì)人體健康造成危害。相關(guān)報(bào)道表明，高濃度PG會(huì)誘發(fā)接觸性皮炎。經(jīng)過(guò)諸多的實(shí)踐確定，通過(guò)不同氧化劑的合用，則能起到較為理想的抗氧化效果。宗珊盈通過(guò)超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法展開食品防腐劑和調(diào)味劑的檢測(cè)。經(jīng)過(guò)一系列的處理以后，最終得到如下結(jié)論：檢出限為0.5～10μg/kg，相應(yīng)的回收率則為79.5%～107.1%，RSD為0.7%～6.5%。陳立偉等通過(guò)超聲萃取與超高效液相色譜的結(jié)合進(jìn)行檢測(cè)，通過(guò)這樣的檢測(cè)，得到了14種紫外吸收劑和抗氧化劑的檢測(cè)結(jié)果。筆者通過(guò)三氯甲烷和甲醇對(duì)樣品實(shí)施提純，在經(jīng)過(guò)柱分離以后，使用乙腈和0.1%甲酸水進(jìn)行洗脫處理，最后在二極管陣列檢測(cè)器的使用下完成檢測(cè)分析。最終得到的結(jié)果顯示，以上14種物質(zhì)的相關(guān)系數(shù)明顯高于0.9992，而相應(yīng)的檢出限則控制在8.0～33.0mg/kg，回收率則為83.6%～116.2%，RSD為1.3%～9.5%。相對(duì)來(lái)說(shuō)，這樣的操作方法更為便捷高效，而所呈現(xiàn)出的凈化效果更為顯著。

2.2 對(duì)農(nóng)藥殘留的檢測(cè)

經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展以及人口數(shù)量的激增使得蔬菜以及肉類的市場(chǎng)需求量不斷增加，而蔬菜和牲畜的培植和飼養(yǎng)必定會(huì)牽扯到農(nóng)藥和獸藥的使用。理論層面上來(lái)看，農(nóng)藥和獸藥控制在一定區(qū)間內(nèi)并不會(huì)對(duì)人體造成傷害，但是如果超過(guò)了這樣的范圍則會(huì)出現(xiàn)嚴(yán)重的不良后果。因此就應(yīng)加強(qiáng)農(nóng)藥和獸藥等方面的檢測(cè)工作。王潔蓮[4]等對(duì)韭菜和大蔥中的農(nóng)藥殘留實(shí)施檢測(cè)，通過(guò)乙腈完成提取，進(jìn)而在使用氨基固相萃取小柱的條件下實(shí)施凈化處理，最終得到相應(yīng)的回收率為79%-103%，而RSD則為0.70-6.12%。農(nóng)藥使用在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中也是極為普遍的現(xiàn)象，如除草劑和殺蟲劑等，同樣地使用的量也應(yīng)處在既定的范圍內(nèi)，否則不但不會(huì)殺死害蟲和雜草，而且還會(huì)影響到農(nóng)作物的生長(zhǎng)，甚至于危及到人體健康。鑒于這樣的現(xiàn)實(shí)情況，就應(yīng)加強(qiáng)農(nóng)藥的檢測(cè)。林濤等通過(guò)對(duì)超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)的優(yōu)化，進(jìn)而研制出了更為高效便捷的檢測(cè)技術(shù)。相關(guān)的檢測(cè)結(jié)果顯示，相應(yīng)的平均回收率為74.1%～120.4%，而RSD則為2.8%～11.9%。王潔蓮等主要針對(duì)韭菜和大蔥中的農(nóng)藥實(shí)施檢測(cè)分析，借助于氨基固相萃取小柱實(shí)施凈化，最終得到如下結(jié)果：相應(yīng)的回收率為79%～103%，而RSD則為0.70%～6.12%。

2.3 對(duì)獸藥殘留的檢測(cè)

液相色譜法的重復(fù)性好和靈敏度高，尤其是分辨率高，是獸藥殘留檢測(cè)中常見(jiàn)的方法之一。質(zhì)譜法具有結(jié)構(gòu)鑒定能力強(qiáng)和專屬性好的特點(diǎn)，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法有效地結(jié)合了色譜和質(zhì)譜的優(yōu)點(diǎn)，既能滿足定性的需要，也能實(shí)現(xiàn)定量的目的，成為畜產(chǎn)品中獸藥殘留的常用檢測(cè)方法，尤其是結(jié)合同位素內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行檢測(cè)，大大提高了檢測(cè)靈敏度，提升了檢測(cè)能力。蘭承興[5]等人采用高效液相色譜法測(cè)定豬肉中磺胺二甲氧嘧啶、磺胺間甲氧嘧啶、磺胺嘧啶、苯?；前贰⒒前愤拎さ?種磺胺類藥物，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明可以準(zhǔn)確檢出5種磺胺類獸藥在豬肉中的殘留，能夠滿足正常的檢測(cè)要求[5]。馮慧慧[6]等采用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜快速測(cè)定方法對(duì)雞肉中磺胺類、喹諾酮類、大環(huán)內(nèi)酯類、抗病毒類、鎮(zhèn)定劑、糖皮質(zhì)激素等40種獸藥進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果表明40種化合物在2.0～50.0ng·mL-1范圍內(nèi)均呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)，回收率，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差等指標(biāo)均滿足GB/T27404—2008技術(shù)要求[6]。

2.4 對(duì)微生物及微生物代謝物的檢測(cè)

食品中還含有大量的微生物和細(xì)菌以及代謝物，同時(shí)也有一些病原體和霉菌。其中的病原體等對(duì)人體健康有著極為嚴(yán)重的安全威脅，因此應(yīng)加強(qiáng)對(duì)其的檢測(cè)。通過(guò)高效液相色譜技術(shù)即可對(duì)食品中的微生物代謝物實(shí)施檢測(cè)分析，以判定其含量是否超標(biāo)。Maria相關(guān)學(xué)者曾采用這樣的技術(shù)對(duì)酸奶中的黃曲霉含量實(shí)施測(cè)定，結(jié)果表明，送檢的近20種樣品中都含有黃曲霉素，此類物質(zhì)的致癌率極高。具體檢測(cè)的過(guò)程中，應(yīng)先用三氯甲烷等實(shí)施處理，而后提取黃曲霉素，接著將其中的雜質(zhì)過(guò)濾出去和進(jìn)行過(guò)柱檢測(cè)。試驗(yàn)表明，通過(guò)與免疫親和層析的結(jié)合，能夠極大地提升特異性和靈敏度，而所得到的檢測(cè)效果也更為理想。相信在技術(shù)不斷改進(jìn)和優(yōu)化的條件下，我國(guó)在食品安全檢測(cè)方面必定會(huì)越來(lái)越科學(xué)高效。

3 結(jié)語(yǔ)

綜合以上敘述，在新時(shí)期背景下隨著人們生活條件的越來(lái)越好，對(duì)于食品安全問(wèn)題也越來(lái)越重視，在食品檢測(cè)領(lǐng)域中通過(guò)液相色譜技術(shù)的應(yīng)用可以辨別食品的安全性以及質(zhì)量。對(duì)液相色譜技術(shù)在食品檢測(cè)中的應(yīng)用進(jìn)行分析，探尋出更為科學(xué)有效的檢測(cè)方案對(duì)保障人們食品安全有著積極的作用，在本文研究中對(duì)食品安全檢測(cè)領(lǐng)域中液相色譜技術(shù)的應(yīng)用要點(diǎn)進(jìn)行了探討，目的在于提高食品檢驗(yàn)水平保證食品的安全性。