病原微生物快速檢測的臨床研究進展概述

鄭青

（欽州市靈山縣人民醫(yī)院，廣西 欽州，535400）

近幾年，隨著環(huán)境污染程度的明顯加重，導致我國感染性疾病的患病率日漸增加，給患者機體健康以及生存質(zhì)量帶來極大危害。經(jīng)分析發(fā)現(xiàn)，鼠疫耶爾森菌、霍亂弧菌等病原微生物再次繁殖后，增加感染性疾病發(fā)生的風險，隨后病原微生物的種類明顯增加，耐藥性隨之升高，進一步提升臨床診治的困難程度[1]。另外我國范圍內(nèi)的流動人口逐漸擴增，明顯提升傳染性疾病發(fā)生的風險。針對此，臨床應(yīng)盡早選擇合適的病原微生物檢驗方式，以此達到早期診斷、治療的目的，同時還可有效減少感染性疾病的擴散傳播[2-3]?，F(xiàn)綜述如下：

1 病原微生物檢驗的意義

病原微生物測定的本質(zhì)是檢驗微生物中特異性酶，但不同種類微生物的酶系統(tǒng)存在較大差異，且對多重物質(zhì)分解的功能也不相同，因此選擇不同底物所產(chǎn)生的代謝產(chǎn)區(qū)可間接測定微生物酶，以此發(fā)揮檢驗微生物的效果[4]。研究表明[5]，沙門氏菌能夠分泌辛酯酶，其他腸桿菌科的細菌均不存在這一現(xiàn)象。因此，遵循此特征可選擇快速檢驗辛酯酶法測定沙門氏菌，期間底物選擇4-甲基傘形酮辛酯，利用沙門氏菌酶進行降解，可產(chǎn)生4MU，同時選擇紫外燈檢查藍色熒光。由此看出，此方式具備簡便易行的優(yōu)勢，可在紫外燈下觀察底物，明顯縮短檢驗時長，其敏感性、特異性均達到90%以上，值得推廣[6-7]。

2 血清免疫學檢驗

臨床為了獲得對應(yīng)的抗原抗體反應(yīng)，應(yīng)將對應(yīng)的標記物與抗體相結(jié)合，并利用標記物熒光或者酶有色性反應(yīng)、高電子密度、放射性，經(jīng)過電鏡或者光鏡開展定位、定量、定性研究。目前臨床免疫分析方法較多，包含化學發(fā)光免疫分析法、放射性免疫分析法、熒光免疫分析法、酶免疫分析法、間接性酶聯(lián)免疫吸附法等，均被廣泛運用于臨床[8-9]。其中（1）酶聯(lián)免疫吸附法：主要遵循抗原抗體免疫反應(yīng)與酶高效催化作用的原則發(fā)生有機結(jié)合反應(yīng)，同時經(jīng)酶催化底物產(chǎn)生一系列化學反應(yīng)，促進溶液顏色改變，提示存在抗原抗體特異性反應(yīng)。隨后醫(yī)療技術(shù)不斷進步發(fā)展，酶聯(lián)免疫吸附法的敏感性、特異性明顯升高，在多種病原微生物檢驗上具有重要意義[10]。（2）熒光抗體技術(shù)：熒光抗體技術(shù)通常遵循抗原抗體的高特異性反應(yīng)，選擇熒光素作為抗原標記物，并利用熒光顯微鏡觀察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)熒光特異性抗原抗體的復(fù)合物、抗原抗體的具體部位。但熒光抗體技術(shù)仍具備較多缺陷，例如操作程序復(fù)雜、染色標本無法長時間保存、特殊器械較昂貴等[11]。其中快速檢驗病原菌的方式包含直接與間接檢驗，前者表示在樣品上直接獲得特異性熒光抗血清，經(jīng)洗滌后放在熒光顯微鏡下觀察；而后者是指在樣品上添加對應(yīng)的細菌特異性抗體，產(chǎn)生作用后開展洗滌操作，添加熒光標記第二抗體[12-13]。

3 分子生物學檢驗及傳感器

近些年，分子生物學以及分子遺傳學不斷改進，人們對微生物的認識從外部結(jié)構(gòu)逐漸發(fā)展至內(nèi)部基因結(jié)構(gòu)，因此微生物檢驗也從生化免疫發(fā)展至基因水平上。另外生物傳感器也隨之被提出，其作為新型檢驗技術(shù)，主要是將傳感器技術(shù)與分子診斷技術(shù)相聯(lián)合，在分子識別器件以及換能器上效果顯著。待測物質(zhì)、轉(zhuǎn)換器件、識別器件主要利用化學、生物以及物理之間的相互作用，加上傳感器具備操作簡便、準確性高等特點，在相關(guān)領(lǐng)域獲得一定價值。但其仍存在較多不足，例如容易受到外界干擾、敏感性較低等，還需臨床作進一步的研究。

4 小結(jié)

綜上所述，病原微生物的檢驗方式較多，均存在一定優(yōu)缺點，因此臨床為了彌補其缺陷，可選擇聯(lián)合多種檢驗方式的途徑，可有效提升檢驗結(jié)果的敏感性與特異性。另外在挑選檢驗方式時，應(yīng)充分考慮相關(guān)條件，重點在于提升敏感性、減低假陽性上。近幾年，醫(yī)療水平以及計算機技術(shù)不斷提升，病原微生物檢驗技術(shù)隨之完善，并逐漸向自動化以及簡便快速上發(fā)展，且分子生物學技術(shù)也被提出，經(jīng)過自動化儀器，實現(xiàn)高效、低廉、安全的檢驗技術(shù)。