高效液相色譜技術(shù)在藥品檢驗中的應(yīng)用及進展分析

張青 史瑤瑤 陳志恒 齊衍超

濰坊市檢驗檢測中心 山東濰坊 261100

色譜法在剛開始時是一種單純的分離手段，主要依據(jù)混合物當(dāng)中各組分在流動相與固定相當(dāng)中分配系數(shù)的不同來進行檢測，如果兩相處于相對運動狀態(tài)，那么此些組分會在兩相之間開展多次且反復(fù)的分配，最終實現(xiàn)分離[1]。經(jīng)過多年開發(fā)與應(yīng)用，人們開始將此種分離手段聯(lián)合于檢測系統(tǒng)，形成一種較新型的分析方法。高效液相色譜分析技術(shù)（HPLC）除了具有靈敏度高、分離效能突出等優(yōu)點之外，還有著較廣的樣品適用范圍，因而在多領(lǐng)域中均得到不錯應(yīng)用。本文就此技術(shù)在藥品檢驗中的應(yīng)用進展探討如下。

1 HPLC 在藥品含量測定中的應(yīng)用進展

當(dāng)前，已有許多關(guān)于高效液相色譜技術(shù)的報道，其中，多數(shù)為反相色譜，其它的還有離子對色譜、離子交換色譜以及吸附色譜，比如借助反相離子對高效液相色譜法對馬來酸曲美布汀原料當(dāng)中的各種雜質(zhì)以及其制劑當(dāng)中各個組分的含量進行測定，需指出的是，因此原料當(dāng)中可能含有曲美布汀異構(gòu)體（A800）、三甲氧苯甲酸酯（TMBM）及中間體3、4、5-三甲氧苯甲酸（ATMB），較之原方法，此藥不僅準確而且還簡便、快捷，能夠?qū)υ纤幃?dāng)中所含有的各種雜質(zhì)進行檢測，此外，還用檢測制劑當(dāng)中各個組分的具體含量，能大幅提升分析的可靠性與準確性。吡羅昔康又被稱之為炎痛喜康，是一種比較典型的非甾體類抗炎藥物，具有抗炎、鎮(zhèn)痛及解熱作用；但需說明的是，此藥作為一種酰胺類化合物，在水溶液當(dāng)中化學(xué)結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，易被水解或氧化，從而形成大量的2-氨基吡啶，而吡羅昔康基本不溶于水，難以生成溶液，用HPLC 法進行測定，通常將鹽酸甲醇溶液當(dāng)作溶劑，除了可使其溶解性得到增加之外，還會強化吡羅昔康溶液的總體穩(wěn)定性，因而能改善檢測結(jié)果。有學(xué)者采用HPLC 法對復(fù)方林氯滴眼液當(dāng)中的鹽酸林可霉素含量進行測定，效果理想[2-3]。當(dāng)前，HPLC 已經(jīng)成為能夠?qū)⑹澜绺鲊幍渌较冗M性反映出來的重要指標(biāo)。

有學(xué)者采用HPLC 對4 種成分的含量進行了一次性測定（比如維生素E、維生素D3、維生素K1 與維生素A 棕櫚酸酯），將≥2 種檢測器以串聯(lián)的方式來使用，能夠?qū)λ苄跃S生素含量進行測定，從中得知，電化學(xué)檢測器可以以一種帶有選擇性的方式，對維生素C、葉酸等（具有氧化還原性能）進行測定。針對四環(huán)素類抗生素而言，其不僅有重要的經(jīng)濟價值，而且還有光譜抗菌作用，近年來，其已經(jīng)被廣泛應(yīng)用在食品添加劑、藥品領(lǐng)域中，而分析四環(huán)素類抗生素始終是當(dāng)今藥物分析領(lǐng)域中的重要課題。當(dāng)前，有關(guān)采用HPLC 對四環(huán)素以及其立體異構(gòu)體進行分離測定的報道有較多，比如有學(xué)者采用RP-HPLC 法對多達7 種的四環(huán)素類抗生素進行分離，結(jié)果證實，效果理想。

2 中藥成分檢驗中HPLC 的應(yīng)用進展

中藥成分檢驗一般是將一個有著復(fù)雜成分的成方制劑，借助化學(xué)手段，將其中能夠明確其化學(xué)結(jié)構(gòu)的化學(xué)成分分解出來。針對中藥而言，其實為一個有諸如微量元素成分、有機成分等成分的復(fù)雜體系，而且還具有整體與多效性的平衡調(diào)節(jié)性。需要指出的是，將有著不同化學(xué)成分的中藥配伍在一起，使其藥效達到最大化，此乃中藥治療各種疾病的優(yōu)勢所在。因中藥成分尤其復(fù)雜性與多樣性，因此，在分析其成分上，難度更大[4]。對于HPLC 來講，其乃是一種能夠中藥材、中成藥當(dāng)中的活性成分、有效成分進行分離與測定的重要手段，將其應(yīng)用在中藥成分檢驗當(dāng)中，能夠為我國中藥質(zhì)量的規(guī)范化、標(biāo)準化提供切實支撐[5]。

當(dāng)前，伴隨中藥現(xiàn)代化技術(shù)的日漸成熟，中成藥、中藥材的質(zhì)量標(biāo)準現(xiàn)代化，已經(jīng)成為整個藥檢工作當(dāng)中的重要保障。在2015年版的《中國藥典》當(dāng)中，大多利用薄層色譜法開展定性鑒別，但針對薄層色譜而言，其乃是一個具有開發(fā)性的系統(tǒng)，有著比較多的外界影響因素，而且實驗的難度也較大，難以準確判斷。所以，HPLC 法逐漸將薄層色譜法取代。有學(xué)者采用HPLC 法測定了丹芩滴丸當(dāng)中隱丹參酮、黃芩苷的含量，結(jié)果證實，HPLC 法能夠準確測出丹芩滴丸當(dāng)中的藥物成分，操作方便。有報道運用HPLC 法，流動相為甲醇-0．1%磷酸，色譜柱是C18，檢測波長是253nm。發(fā)現(xiàn)此方法定量準確、專業(yè)性強且分離度好。

3 結(jié)語

綜上，將HPLC 法應(yīng)用在藥品領(lǐng)域中，不管是在儀器水平上，還是在技術(shù)水平上，均優(yōu)勢顯著；伴隨技術(shù)的日漸成熟，HPLC 已經(jīng)成為一種效能突出的分析分離手段，且在諸如醫(yī)藥工業(yè)、生物化學(xué)等領(lǐng)域中得到廣泛應(yīng)用。還需要指出的是，部分色譜技術(shù)的彼此結(jié)合，還能提高傳統(tǒng)液相檢測器的靈敏度，縮短分離、分析時間，因而有著良好的應(yīng)用價值。