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    膠體層析法與酶聯(lián)免疫吸附試驗在HIV抗體檢測中的應(yīng)用價值分析

    2021-11-18 09:13:22葉曉芳林小菊李木珍
    關(guān)鍵詞:層析高值膠體

    葉曉芳,林小菊,黃 妹,李木珍

    (廣東醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院,廣東 湛江 524000)

    獲得性免疫缺陷綜合征(acquired immune deficiency syndrome,AIDS)簡稱艾滋病,作為一種傳染性疾病,由人類免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染所致,故對HIV抗體進(jìn)行明確診斷有助于控制病毒傳播并指導(dǎo)臨床治療[1-2]。目前膠體層析法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)作為HIV抗體診斷中常用方法,以膠體層析法使用最為普遍,操作簡單迅速,但亦存在診斷特異度較低等弊端,易受人為及環(huán)境因素影響[3]。近年來ELISA多被用于HIV篩查中,價格低廉且診斷準(zhǔn)確率較高[4]。鑒于此,本研究將分析膠體層析法與ELISA在HIV抗體檢測中的應(yīng)用價值?,F(xiàn)報告如下。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料回顧性分析2017年9月至2019年8月我院治療的84例疑為HIV感染患者臨床資料,其中女性、男性分別為49例、35例;年齡32~59歲,平均年齡(45.86±5.17)歲;文化程度:小學(xué)及以下、初中、高中、大專及以上分別為16例、23例、25例、20例。

    1.2 入選標(biāo)準(zhǔn)(1)納入標(biāo)準(zhǔn):①臨床資料較為完善者;②均與HIV攜帶者有性接觸者,或性伴侶較多、吸毒者;③肝、腎功能良好者;④未合并免疫系統(tǒng)疾病者。(2)排除標(biāo)準(zhǔn): ①存在肺結(jié)核等其他傳染性疾病者;②合并血液系統(tǒng)疾病者;③患有精神疾病者;④伴有惡性腫瘤疾病者。

    1.3 方法入選者均接受膠體層析法、ELISA檢查,儀器為化學(xué)發(fā)光儀(KPS-KM型,北京科美東雅生物技術(shù)有限公司提供)、酶標(biāo)儀(RT-2100C型,廈門市康鴻生物科技有限公司提供)、洗板機(jī)(RT-2600C型,深圳市雷杜電子有限公司提供)及配套微量加樣器。采集入選者空腹肘靜脈血6 mL,離心分離取上層清液,離心半徑3 cm,3000 r/min,離心5 min,通過基因重組HIV1+2抗原包被微孔板、辣根過氧化物酶標(biāo)記重組HIV1+2抗原,ELISA初檢HIV抗體,北京萬泰生物藥業(yè)有限公司提供檢測試劑盒。膠體層析法測定HIV抗體,針對樣本中含有HIV1+2抗體時,抗體結(jié)合硒膠體-抗原,于患者窗口處被重組抗原、背固相包被合成肽捕捉固定,可見一條紅線形成,美國雅培公司提供檢測試劑盒,均連續(xù)測定7次。所有檢測結(jié)果由兩名或以上專業(yè)醫(yī)生雙盲進(jìn)行評估,給出最終結(jié)果。

    1.4 評價指標(biāo)(1)計算膠體層析法、ELISA在HIV抗體低、高值質(zhì)控血清中檢出率。(2)以蛋白印跡診斷結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn),計算膠體層析法、ELISA在HIV抗體診斷中的敏感度、特異度、準(zhǔn)確率。(3)統(tǒng)計陽性樣本帶型分布情況。

    1.5 統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,計數(shù)資料用百分比表示,采用卡方檢驗,計量資料以“均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示,采用t檢驗,P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 膠體層析法、ELISA在HIV抗體低、高值質(zhì)控血清中檢出率對比ELISA在HIV抗體低、高值質(zhì)控血清中檢出率(100.00%)高于膠體層析法(57.14%),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=5.303,P=0.021),見表1。

    表1 膠體層析法、ELISA在HIV抗體低、高值質(zhì)控血清中檢出率對比[n(%)]

    2.2 膠體層析法、ELISA診斷HIV抗體結(jié)果以蛋白印跡診斷結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn),ELISA診斷HIV抗體敏感度、特異度、一致率(93.33%、98.15%、96.43%)高于膠體層析法(73.33%、85.19%、80.95%),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表2、表3。

    表2 ELISA在HIV抗體中的診斷結(jié)果(n)

    表3 膠體層析法在HIV抗體中的診斷結(jié)果(n)

    2.3 陽性樣本帶型分布ELISA診斷HIV抗體陽性28例,其中條帶gP120、gP160出現(xiàn)最高,均為100.00%,P55出現(xiàn)率最低,僅為32.14%,見表4。

    表4 陽性樣本帶型分布

    3 討論

    AIDS屬于免疫缺陷性疾病,具有潛伏期長、危害范圍廣、傳播速度快、死亡率高等特點[5]。HIV作為突變率較高的病毒,HIV感染后將攻擊患者機(jī)體內(nèi)免疫系統(tǒng),導(dǎo)致患者免疫功能障礙,出現(xiàn)多器官、多系統(tǒng)、多病原體復(fù)合感染及腫瘤[6]。近年來受到人口流動性增大及性開放等因素影響,臨床上AIDS患者占比逐漸增大,AIDS多以性接觸傳播為主,短時間內(nèi)無典型癥狀,易被患者自身忽略,進(jìn)而將通過其他途徑傳染,故有效篩查HIV抗體,有利于早期積極預(yù)防、控制AIDS[7]。

    蛋白印跡法為HIV抗體診斷金標(biāo)準(zhǔn),診斷準(zhǔn)確率較高,但由于檢測試劑成本較高,無法用于大范圍HIV抗體篩查[8]。既往HIV抗體檢測方法以膠體層析法為主,具有所需設(shè)備少、檢查費用低廉及反應(yīng)快速等優(yōu)點,但相關(guān)研究發(fā)現(xiàn),膠體層析法診斷中敏感性較低,易導(dǎo)致誤診、漏診的發(fā)生,降低HIV抗體診斷準(zhǔn)確率[9]。ELISA檢測HIV抗體時,可將HIV抗原包被于固相載體,并將酶標(biāo)記HIV抗原及待檢樣品加入,以底物顯色,通過酶標(biāo)儀測定結(jié)果,利用酶催化底物反應(yīng)放大效果,促使抗原抗體反應(yīng)靈敏性增強(qiáng),進(jìn)而提升HIV抗體檢出率。ELISA檢測中不受樣本中溶血及脂血等影響,穩(wěn)定性較高,通過酶標(biāo)儀獲得數(shù)據(jù),減輕對檢測結(jié)果的影響,保障檢測結(jié)果準(zhǔn)確性[10]。本研究結(jié)果顯示,ELISA在HIV抗體低、高值質(zhì)控血清中檢出率高于膠體層析法;經(jīng)蛋白印跡診斷診斷HIV抗體陽性、陰性分別為30例、54例;以蛋白印跡診斷結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn),ELISA診斷HIV抗體敏感度、特異度、準(zhǔn)確率高于膠體層析法,同時ELISA診斷HIV抗體陽性患者中出現(xiàn)率最高的為條帶gP120、gP160,由此可見,與膠體層析法相比,ELISA檢測HIV抗體敏感度、特異度、準(zhǔn)確率較高,可作為HIV抗體篩查有效方法,且條帶gP120、gP160出現(xiàn)率最高,表明人群中HIV傳染性較強(qiáng)。經(jīng)臨床實踐發(fā)現(xiàn),ELISA檢測HIV抗體準(zhǔn)確率相對較高,但受到檢測中耗時長、操作繁瑣及人為、環(huán)境及類風(fēng)濕因子等因素干擾影響,檢查中仍存在一定假陽性、假陰性,需在ELISA檢測中選取靈敏度高、特異性好的試劑,加強(qiáng)室內(nèi)質(zhì)控,降低漏檢風(fēng)險,提升HIV抗體檢出率。

    綜上所述,ELISA在HIV抗體檢測中準(zhǔn)確率較高,利于提升低、高值質(zhì)控血清中檢出率,顯示陽性樣本帶型分布,可作為HIV抗體篩查準(zhǔn)確方法。

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