非血液來(lái)源液體活檢在胃癌早期診斷中的研究進(jìn)展

徐亦天，黃 陳

上海交通大學(xué)附屬第一人民醫(yī)院胃腸外科，上海200080

癌癥的液體活組織檢查（liquid biopsy），即液體活檢，傳統(tǒng)意義上是指利用高通量測(cè)序?qū)ν庵苎蟹蛛x出的癌癥衍生成分，如循環(huán)腫瘤細(xì)胞（circulating tumor cell，CTC）、循環(huán)腫瘤DNA（circulating cell-free tumor DNA，ctDNA）、細(xì)胞游離RNA（cell-free RNA，cfRNA）、細(xì)胞外囊泡（extracellular vesicle，EV）、受腫瘤影響的血小板（tumour-educated platelet）等，進(jìn)行基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)的評(píng)估［1-2］。對(duì)于早期治愈率高、難發(fā)現(xiàn)、進(jìn)展期易診斷卻預(yù)后差的胃癌而言，液體活檢的出現(xiàn)不僅可以替代準(zhǔn)確性不高的傳統(tǒng)血清學(xué)腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)，而且其無(wú)創(chuàng)無(wú)痛、快速易得、全面反映腫瘤狀況的特點(diǎn)也可以很好地輔助并補(bǔ)充相對(duì)滯后的上消化道內(nèi)鏡活檢，從而達(dá)到早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷、動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)胃癌的目的，指導(dǎo)個(gè)體化的精準(zhǔn)治療，進(jìn)而改善患者的預(yù)后與生存［3-4］。然而，隨著技術(shù)不斷進(jìn)步，液體活檢在各類實(shí)體腫瘤（包括胃癌）臨床實(shí)踐中的應(yīng)用一直很緩慢［5-6］。液體活檢的驗(yàn)證與應(yīng)用受限有很多原因，除去一些與技術(shù)發(fā)展和臨床工作相關(guān)的科學(xué)問題外，血液樣本（包括血清和血漿）中低濃度的癌癥衍生成分限制了液體活檢在癌癥發(fā)生或復(fù)發(fā)早期發(fā)現(xiàn)并預(yù)警的能力，并且抽取大量血液在臨床上并不總是可行的［7-8］。近年來(lái)，液體活檢的概念被進(jìn)一步擴(kuò)展，研究［9-10］發(fā)現(xiàn)，除血液外其他體液（如腦脊液、唾液、痰、胸腔積液等）可能蘊(yùn)藏著比血液更加豐富的腫瘤信息，在胃癌、胰腺癌、前列腺癌等各類惡性腫瘤中發(fā)現(xiàn)了許多可靠的標(biāo)志物，表明除血液外體液的液體活檢，即非血液來(lái)源液體活檢，有能力革新癌癥的診斷與管理。因此，本文通過比較血液來(lái)源與非血液來(lái)源液體活檢的優(yōu)劣，闡述胃癌中非血液來(lái)源液體活檢研究的必要性，介紹近年來(lái)非血液來(lái)源液體活檢在胃癌早期診斷中的研究進(jìn)展。

1 非血液來(lái)源液體活檢的優(yōu)勢(shì)與挑戰(zhàn)

過去一些研究通過改進(jìn)檢測(cè)技術(shù)以期解決血液樣本中標(biāo)志物含量低的問題，如利用新一代測(cè)序技術(shù)（next-generation sequencing，NGS）、為CTC添加額外的標(biāo)志物、使用含有結(jié)合ctDNA材料的植入裝置或同時(shí)檢測(cè)同一反應(yīng)中多個(gè)突變的檢測(cè)方法等［11-13］，然而這些方法受限于操作與成本，難以真正推動(dòng)液體活檢的臨床應(yīng)用。非血液來(lái)源液體活檢的一大優(yōu)勢(shì)就是可以從與腫瘤直接接觸的體液中收集目標(biāo)信息，凸顯標(biāo)志物含量和與原發(fā)腫瘤的相關(guān)性，從而減少對(duì)復(fù)雜技術(shù)的需求。Hirotsu等［14］的研究就很好地反映了非血液來(lái)源液體活檢這一優(yōu)點(diǎn)。他們對(duì)25例膀胱癌患者和5例膀胱炎及良性腫瘤患者的150份原發(fā)腫瘤、尿上清液、尿沉淀、血漿和血沉棕黃層進(jìn)行了71個(gè)基因的靶向測(cè)序，并分析比較了每個(gè)樣本之間的突變譜，結(jié)果發(fā)現(xiàn)原發(fā)腫瘤中的168個(gè)體細(xì)胞突變可以在尿液活檢中被更多地檢測(cè)出來(lái)，尿上清液與尿沉淀分別發(fā)現(xiàn)了53%和48%的腫瘤相同突變，而血液中卻僅檢測(cè)到2%［14］。另外，尿液DNA對(duì)膀胱腫瘤診斷的敏感性顯著高于細(xì)胞學(xué)診斷（尿上清液vs細(xì)胞學(xué)，P=0.018；尿沉淀vs細(xì)胞學(xué)，P=0.002）［14］。即使不與腫瘤直接接觸，除血液外的其他體液也有著采集更加無(wú)痛、無(wú)創(chuàng)、易操作、樣本量大等優(yōu)勢(shì)，以及較好的腫瘤相關(guān)性。Zhang等［15］收集了160例取自晚期非小細(xì)胞肺癌患者的外周血和晨尿樣本，檢測(cè)了常見的表皮生長(zhǎng)因子受體（epidermal growth factor receptor，EGFR）的基因突變并進(jìn)行縱向分析發(fā)現(xiàn)，在基線匹配的腫瘤樣本中，血漿和尿液DNA檢出率分別為82.8%和84.0%，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值均為100%。此外，還觀察到患者的DNA濃度越高，其預(yù)后越差，尤其是尿液DNA，血漿和尿液DNA增高患者的HR分別為1.23和2.55。因此，非血液來(lái)源液體活檢由于其非侵入性、接近腫瘤、易學(xué)性以及經(jīng)濟(jì)上可行性，允許對(duì)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后進(jìn)行縱向評(píng)估與連續(xù)監(jiān)測(cè)，若能將其應(yīng)用于胃癌診斷，則很有可能改善胃癌發(fā)現(xiàn)晚、預(yù)后差、死亡率高的現(xiàn)狀。

然而，新興的非血液來(lái)源液體活檢，其相比傳統(tǒng)液體活檢，缺乏分析前處理及分析方法共識(shí)與臨床驗(yàn)證。某些特定器官或部位采集的體液無(wú)法如同全身循環(huán)的血液那樣反映癌癥轉(zhuǎn)移的具體情況［16］。此外，相比于血液，其他體液有著更加復(fù)雜的微生物環(huán)境，微生物自身及其代謝物會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成難以預(yù)測(cè)的影響，但這也可能是癌癥分子檢測(cè)的新機(jī)遇。例如最近一項(xiàng)研究［17］對(duì)內(nèi)鏡或手術(shù)患者的胃液進(jìn)行了基于16S rDNA的宏基因組分析，結(jié)果顯示胃癌手術(shù)組的幽門螺桿菌EV水平明顯高于健康對(duì)照組（P<0.05），是胃癌潛在的生物標(biāo)志物。在機(jī)制上，胃癌患者胃液中豐富的幽門螺桿菌EV可能通過誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞與胃上皮細(xì)胞釋放各類炎癥介質(zhì)，被胃上皮細(xì)胞選擇性攝取，在胃內(nèi)誘發(fā)炎癥甚至癌變［17］。

通過檢索PubMed數(shù)據(jù)庫(kù)近10年的（2011年1月1日—2021年1月1日）非血液來(lái)源液體活檢在胃癌中的相關(guān)研究，我們從較多體液樣本類型中選擇了4種在早期檢測(cè)和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估胃癌方面最具可行性的體液，分別是唾液、胃液、胃洗液與尿液，共檢索到文獻(xiàn)50篇。我們發(fā)現(xiàn)胃癌中的非血液來(lái)源液體活檢比傳統(tǒng)液體活檢在早期診斷上有著許多優(yōu)勢(shì)，但必須承認(rèn)距離它們實(shí)際投入臨床應(yīng)用還有許多需要克服的挑戰(zhàn)，表1列出了胃癌中不同體液活檢的比較。另外，通過圖1可以明顯地看到近5年（2016—2020年）的文獻(xiàn)發(fā)表數(shù)量明顯多于過去5年（2011—2015年），非血液來(lái)源液體活檢在胃癌診治中的作用正在逐漸引起學(xué)者們的關(guān)注，因此，本文將對(duì)唾液、胃液、胃洗液與尿液共4種體液來(lái)源的液體活檢在胃癌早期診斷中的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

圖1 PubMed檢索近10年胃癌非血液來(lái)源液體活檢結(jié)果的柱狀圖Fig.1 Bar chart of non-blood derived liquid biopsy in gastric cancer from PubMed in the last 10 years

表1 胃癌中不同樣本類型液體活檢的優(yōu)勢(shì)與挑戰(zhàn)Tab.1 The advantages and challenges of liquid biopsy from different types of samples in gastric cancer

2 胃癌中的唾液活檢

唾液細(xì)胞外RNA（extracellular RNA，exRNA）已被開發(fā)用于檢測(cè)各種局部和全身疾病，如口腔癌、Sjogren綜合征、胰腺癌、乳腺癌、肺癌等［18］。在胃癌的發(fā)展過程中，唾液腺受到來(lái)自遠(yuǎn)處腫瘤釋放的神經(jīng)生長(zhǎng)因子等的刺激，導(dǎo)致胃癌患者的唾液RNA譜出現(xiàn)顯著變化，差異表達(dá)的exRNA可用于胃癌檢測(cè)［19］。一項(xiàng)樣本來(lái)自韓國(guó)的前瞻性研究收集了294例患者（163例胃癌患者和131例非胃癌患者）的內(nèi)鏡檢查前全唾液樣本，對(duì)63例胃癌患者和31例非胃癌患者的唾液轉(zhuǎn)錄組進(jìn)行了分析，并使用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction，RTFQ-PCR）對(duì)候選信使RNA（messenger RNA，mRNA）生物標(biāo)志物進(jìn)行了驗(yàn)證［18］。與此同時(shí)，對(duì)10例胃癌患者和10例非胃癌患者的唾液樣本進(jìn)行了微小RNA（microRNA,miRNA）生物標(biāo)志物的分析和驗(yàn)證。總共鑒定了30個(gè)候選mRNA和15個(gè)候選miRNA，它們的表達(dá)模式與胃癌的發(fā)生相關(guān)（P<0.05）［18］。其中12個(gè)候選mRNA和6個(gè)候選miRNA通過RTFQ-PCR在100/100個(gè)來(lái)自胃癌和非胃癌患者的唾液樣本的獨(dú)立隊(duì)列中進(jìn)行驗(yàn)證。最終由在胃癌中顯著下調(diào)的3個(gè)mRNA（SPINK7、PPL和SEMA4B）和2個(gè)miRNA（MIR140-5p和MIR301a）組成了一個(gè)生物標(biāo)志物組合，其受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線下面積（area under curve，AUC）為0.81（95% CI：0.72～0.89），靈敏度為75%，特異度為83%。該研究首次證明了唾液exRNA生物標(biāo)志物在胃癌早期檢測(cè)和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中具有潛在的效用［18］。

另外，在唾液exRNA作為生物標(biāo)志物的基礎(chǔ)上聯(lián)合腫瘤標(biāo)志物如癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）、CA19-9、CA72-4等，可以有效地提高胃癌檢測(cè)的靈敏度和特異度。Xu等［21］探討了CEA和唾液mRNA聯(lián)合檢測(cè)胃癌的可能性，他們?cè)谔剿麟A段（140例胃癌患者和140名健康對(duì)照者）所建立的CEA和唾液mRNA（SPINK7、PPL、SEMA4B和SMAD4）生物標(biāo)志物組合具有高靈敏度（94%）和高特異度（91%），在獨(dú)立驗(yàn)證階段新招募的患者隊(duì)列（60例胃癌患者和60名健康對(duì)照者）中也得到了類似的結(jié)果（靈敏度為92%，特異度為87%），證明了聯(lián)合血液CEA和唾液mRNA早期診斷胃癌的可行性。

3 胃癌中的胃液活檢

胃液是胃癌生物標(biāo)志物的潛在來(lái)源，它直接由細(xì)胞分泌進(jìn)入胃，與腫瘤細(xì)胞直接接觸。且相比血液，標(biāo)志物不會(huì)進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)而被肝臟清除，為早期診斷胃癌提供了新的方法［21］，然而目前關(guān)于胃液特異性腫瘤分子的研究尚處于起步階段。

許多血液miRNA標(biāo)志物已被用于胃癌臨床診治［22］，胃液中miRNA的改變也同樣可以作為一種胃癌活檢的替代方法。Cui等［23］收集了2010年9月—2011年12月接受上消化道內(nèi)鏡檢查的141例患者的胃液樣本，發(fā)現(xiàn)與良性胃病患者相比，胃癌患者的胃液miR-21和miR-106a水平顯著不同（P<0.001），用于鑒別良性疾病患者時(shí)，胃液miR-21和miR-106a的AUC分別為0.969和0.871。此外，胃液miR-21對(duì)早期胃癌的陽(yáng)性檢出率高達(dá)71.4%，比血清CEA（14.3%）和胃液CEA（42.8%）更加敏感，表明這些胃液miRNA比常用的胃液生物標(biāo)志物和血清生物標(biāo)志物更適合于胃癌的篩查。其他已被報(bào)道的胃液miRNA還有miR-421［24］、miR-129［25］和miR-133a［26］，它們均被證明能在胃液中穩(wěn)定存在，且在胃癌早期具有比傳統(tǒng)血清標(biāo)志物更高的靈敏度。然而目前潛在的胃液miRNA缺乏隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)的驗(yàn)證。

長(zhǎng)非編碼RNA（long non-coding RNA，lncRNA）在癌癥中發(fā)揮著基因調(diào)控的關(guān)鍵作用，胃液中的lncRNA是診斷和監(jiān)測(cè)胃癌的重要標(biāo)志物［27］。胃癌患者胃液AA174084水平顯著高于非胃癌患者，胃液AA174084水平用于鑒別胃癌和非胃癌組時(shí)，AUC為0.848，靈敏度為46%，特異度為93%，胃液AUC值比癌組織AUC值（0.676）更高。另外，胃液AA174084水平與腫瘤大?。≒=0.026）、腫瘤分期（P=0.034）、Lauren型（P=0.021）、胃液CEA水平（P=0.039）呈正相關(guān)，提示胃液AA174084水平越高，胃癌患者的預(yù)后越差，可用于預(yù)測(cè)胃癌患者的臨床預(yù)后［28］；LINC00152在胃癌組織中的表達(dá)水平顯著升高，胃液LINC00152鑒別胃癌和非胃癌組的AUC為0.645，靈敏度為90%，特異度為90%［29］；PVT1在胃癌組織和細(xì)胞系中表達(dá)明顯高于正常對(duì)照，胃液PVT1水平在胃癌組和非胃癌組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.03）［30］；胃液ABHD11-AS水平在胃癌患者中更高，與臨床病理學(xué)特征相關(guān)，診斷早期胃癌的陽(yáng)性檢出率為71.4%［31］。

環(huán)狀RNA（circular RNA，circRNA）是一類具有共價(jià)閉合環(huán)狀結(jié)構(gòu)的內(nèi)源性RNA，最近研究表明它是人類癌癥發(fā)生、發(fā)展的關(guān)鍵調(diào)控因子［32］。多種circRNA被報(bào)道在胃癌組織與正常組織間存在顯著的差異，我們之前的研究也報(bào)道了circCCDC9和circNHSL1在胃癌中的差異表達(dá)，并深入探索了它們各自的抑癌或促癌機(jī)制［33-34］。在胃液活檢中，Shao等［35］通過RTFQPCR對(duì)38名健康者、30例胃潰瘍患者、15例慢性萎縮性胃炎患者和39例胃癌患者的胃液進(jìn)行檢測(cè)發(fā)現(xiàn)胃液中hsa_circ_0014717的存在，并且凍融和溫育實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)了hsa_circ_0014717在胃液中的穩(wěn)定性，但是進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)胃液hsa_circ_0014717水平在健康組與胃潰瘍組、胃癌組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Shao等［36］又報(bào)道了hsa_circ_0065149在胃癌中顯著下調(diào)，且通過DNA序列確認(rèn)胃液中存在hsa_circ_0065149，但檢測(cè)結(jié)果表明其在健康志愿者、胃潰瘍患者、慢性萎縮性胃炎患者與胃癌患者之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.448）。以上的結(jié)果可能是因?yàn)檠芯繕颖静怀渥闼鶎?dǎo)致，但是Shao等［35］的研究證實(shí)circRNA能穩(wěn)定存在于胃液中，具有作為生物標(biāo)志物的潛力。

癌細(xì)胞分泌的EV在腫瘤微環(huán)境的形成中發(fā)揮重要作用，包括纖維化、血管生成、逃避免疫監(jiān)視，甚至轉(zhuǎn)移［37］。Kagota等［38］通過納米粒子跟蹤系統(tǒng)和電子顯微鏡驗(yàn)證了胃癌患者的胃液中存在EV，另外通過Western blot、生物分析儀和RTFQ-PCR對(duì)EV的蛋白和miRNA進(jìn)行檢測(cè)，證明了胃液EV具有促進(jìn)正常成纖維細(xì)胞增殖的功能。他們還發(fā)現(xiàn)胃液EV中的miR16-5p和miR191-5p表達(dá)良好，可能是EV的內(nèi)參基因，提示這些miRNA具有作為胃癌生物標(biāo)志物的潛力。

4 胃癌中的胃洗液活檢

DNA異常甲基化在腫瘤發(fā)生的早期就會(huì)頻繁出現(xiàn)，可以用于檢測(cè)胃癌，然而由于DNA容易被胃酸降解，將胃液作為DNA生物標(biāo)志物的來(lái)源一直不可行［39］。胃洗液則能用于替代胃液在胃癌分子檢測(cè)中的部分作用，通過內(nèi)鏡下使用生理鹽水在胃黏膜周圍進(jìn)行清洗，可以使大量的細(xì)胞脫落進(jìn)入胃洗液中，從而獲得未受損的DNA用于靈敏和定量的分析。Watanabe等［40］最早開發(fā)了一種方法來(lái)檢測(cè)胃洗液中胃癌DNA甲基化，并發(fā)現(xiàn)胃洗液的甲基化水平與胃癌活檢樣本的甲基化水平密切相關(guān)。候選基因中的GDNF和MINT25被證明是早期胃癌最敏感的分子標(biāo)志物，特別是胃洗液中MINT25基因甲基化可以很好地鑒別胃癌與非胃癌，其靈敏度與特異度分別為90%和96%，AUC為0.961。Sox17基因沉默在早期胃癌中經(jīng)常發(fā)生，可能在疾病的發(fā)生和進(jìn)展中起關(guān)鍵作用，而胃洗液Sox17被報(bào)道在早期胃癌內(nèi)鏡治療的前后表現(xiàn)出顯著的甲基化差異（P<0.000 1），可用于內(nèi)鏡治療后復(fù)發(fā)的早期診斷［41］。BARHL2是另一種候選的早期胃癌標(biāo)志物，并且獨(dú)立于幽門螺桿菌感染，在內(nèi)鏡下切除前早期胃癌患者的胃洗液來(lái)源DNA中觀察到高水平的BARHL2基因的甲基化，但在治愈性內(nèi)鏡下切除后甲基化水平顯著降低（P<0.000 1）［42］。令人感興趣的是，使用胃液提取的外泌體DNA（exoDNA）進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)exoDNA中的BARHL2甲基化似乎并不受胃酸影響，對(duì)區(qū)分胃癌患者和非胃癌對(duì)照的靈敏度為90%，特異度為100%，胃洗液來(lái)源的DNA和胃液來(lái)源的exoDNA均可用于早期檢測(cè)胃癌［42］。

最近，Pizzi等［43］通過第二代深度測(cè)序技術(shù)檢測(cè)了腫瘤活檢、血漿和胃洗液中胃癌常見高突變基因TP53，發(fā)現(xiàn)在胃洗液中有11個(gè)不同的TP53突變，其中4個(gè)在原發(fā)腫瘤活檢中缺失，提示可能存在腫瘤異質(zhì)性。在判斷胃癌TP53突變時(shí)，38/46例（82.6%）患者的腫瘤活檢結(jié)果與胃洗液檢測(cè)結(jié)果相一致，優(yōu)于來(lái)自血漿樣本的結(jié)果。若僅考慮活檢中觀察到的TP53突變（n=15），聯(lián)合血漿和胃洗液來(lái)源的DNA測(cè)序可以確定大多數(shù)突變患者（9/15，60%），高于以往僅使用血漿樣本的胃癌患者（34%［44］或30%［45］），對(duì)于追蹤腫瘤DNA的改變很有幫助。

5 胃癌中的尿液活檢

在胃癌中，尿液活檢的生物學(xué)基礎(chǔ)是癌細(xì)胞可以通過分泌外泌體顆粒將癌癥衍生成分釋放到體液中，從而保護(hù)其在循環(huán)中不被降解，經(jīng)過腎臟對(duì)于血液的濾過作用進(jìn)入尿液［46］。尿液收集過程是真正無(wú)創(chuàng)的，安全簡(jiǎn)單，無(wú)需任何特殊的技術(shù)和儀器，且樣本體積量大。

Kao等［47］從胃癌患者尿液樣本中提取總RNA，驗(yàn)證了之前其他研究報(bào)道的胃癌血清生物標(biāo)志物miR-21-5p在尿液中的穩(wěn)定性，發(fā)現(xiàn)胃癌患者手術(shù)前后尿液中miR-21-5p的表達(dá)存在差異。術(shù)前和術(shù)后胃癌尿液樣本中miRNA表達(dá)水平相比，去除癌組織后miR-21-5p表達(dá)水平有顯著下降趨勢(shì)（P=0.000 22）。Iwasaki等［48］分析了153對(duì)年齡和性別相匹配的胃癌患者和健康者的尿液樣本，發(fā)現(xiàn)有22種尿中顯著異常表達(dá)的miRNA，其中尿miR-6807-5p和尿miR-6856-5p是診斷胃癌的顯著獨(dú)立的生物標(biāo)志物。隨后他們聯(lián)合這兩種miRNA與幽門螺桿菌感染狀態(tài)來(lái)鑒別健康組和胃癌組，在驗(yàn)證隊(duì)列中的AUC高達(dá)0.885。此外，胃癌根治性切除后，尿miR-6807-5p和尿miR-6856-5p表達(dá)水平顯著降低至無(wú)法檢測(cè)，提示兩者可能具有療效監(jiān)測(cè)的作用。

核酸氧化修飾與包括癌癥在內(nèi)的多種疾病有關(guān)，近年來(lái)引起了越來(lái)越多的關(guān)注。Chen等［49］開發(fā)并驗(yàn)證了一種準(zhǔn)確可靠的固相萃取結(jié)合超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（UPLC-MS/MS）同時(shí)可定量分析人類尿液中這些氧化核酸修飾的方法，并定量分析了60例胃癌患者和70名健康對(duì)照者的尿8-羥基-2’-脫氧鳥苷（8-OHdG）和8-羥基鳥苷（8-OHG），結(jié)果顯示胃癌患者尿液中8-OHdG和8-OHG含量均高于健康對(duì)照組（P<0.000 1）。用于診斷胃癌時(shí)，尿8-OHdG和8-OHG的AUC分別為0.777和0.841，提示這些氧化核酸修飾可作為胃癌早期診斷的潛在無(wú)創(chuàng)標(biāo)志物。

6 總結(jié)與展望

近幾年來(lái)非血液來(lái)源液體活檢在胃癌中的研究正在加速發(fā)展，在早期診斷胃癌方面卓有成效，但目前該領(lǐng)域的研究仍然較少，且面臨許多挑戰(zhàn)，如內(nèi)鏡采集胃液或胃洗液過程的侵入性、檢測(cè)結(jié)果易受體液復(fù)雜成分的影響、缺少大樣本多中心研究等，因此需要后期更加深入地開展研究。未來(lái)對(duì)于胃癌非血液來(lái)源液體活檢的研究可能集中在：①驗(yàn)證非血液樣來(lái)源樣本中癌癥衍生成分的穩(wěn)定性；② 研發(fā)從成分復(fù)雜的非血液來(lái)源樣本中進(jìn)行提純的標(biāo)準(zhǔn)方法；③研究非血液來(lái)源樣本中的生物標(biāo)志物與腫瘤發(fā)生、發(fā)展的相關(guān)機(jī)制；④ 探索非血液來(lái)源液體活檢與血清學(xué)腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)或傳統(tǒng)液體活檢的聯(lián)合方案，用于診斷或監(jiān)測(cè)胃癌；⑤ 探索非血液來(lái)源液體活檢在胃癌療效監(jiān)測(cè)與預(yù)后評(píng)估中的應(yīng)用，以及更多可能應(yīng)用于胃癌液體活檢的體液類型等。伴隨著相關(guān)研究的推進(jìn)，相信非血液來(lái)源液體活檢將成為胃癌及其他惡性腫瘤常規(guī)診篩和臨床管理的一個(gè)重要組成部分。