真泥鰍魚苗規(guī)模化人工生產(chǎn)技術(shù)研究

陳金輝，林曼芬，羅月紅，朱嘉卉，冼昶華，王飛生

（清遠(yuǎn)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，廣東 清遠(yuǎn) 511510）

泥鰍廣泛分布在中國、日本、朝鮮、俄羅斯、印度及摩洛哥等國家[1～2]。在中國，除青藏高原外，泥鰍可在全國各地河川、溝渠、水田、池塘、湖泊及水庫等天然淡水水域中生存，尤其在長江和珠江流域中下游分布較廣，群體數(shù)量較大。泥鰍在分類上屬鯉形目、鯉亞目、鰍科屬，主要包括真泥鰍（Misgurnus anguillicaudati）（簡稱泥鰍或真鰍）、大鱗副泥鰍、花鰍、帶紋沙鰍、北方條鰍等品種[3]。

與大鱗副泥鰍相比，真泥鰍個體較大，最大個體體長可達(dá)30 cm，重量可達(dá)100 g 以上，更耐低氧，生長速度快，營養(yǎng)價值更高[4]。廣東，真泥鰍為野生泥鰍群體中的主要品種，也是廣受市場歡迎的泥鰍品種。由于廣東地區(qū)還沒有魚苗繁育場開展真泥鰍的規(guī)?；斯し敝常B(yǎng)殖用真泥鰍苗主要采集自田野溝渠等，苗種質(zhì)量規(guī)格不一，導(dǎo)致綜合養(yǎng)殖效益不高。為滿足本地養(yǎng)殖戶開展真泥鰍養(yǎng)殖的需要，促進(jìn)泥鰍養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展，有必要開展適合廣東水土氣候條件的真泥鰍苗種規(guī)?；庇夹g(shù)研究。

1 材料和方法

1.1 試驗試劑

絨毛膜促性腺激素（HCG）購買自寧波市第二激素廠，規(guī)格為10000 單位/支。

1.2 親本及其培育

從清遠(yuǎn)地區(qū)的農(nóng)貿(mào)市場購買自天然水體中捕捉的野生真泥鰍，選留體長10 cm 以上、體重10 g 以上且游動迅捷的雌雄個體用作親本。

設(shè)親本飼養(yǎng)池對親本進(jìn)行專池培育。專池使用生石灰（75～100 kg/畝）進(jìn)行全池干法消毒，8～10 天后加入花生麩（15～20 kg/畝）肥水。待水色呈黃褐色或綠褐色，并經(jīng)檢測無毒后，放入選留的真泥鰍親本（500 kg/畝），進(jìn)行親本強化培育。培育期間投喂粗蛋白含量為35%～38%的浮性魚飼料（鱸魚料等），投喂量為真泥鰍親本總重量的5%～7%，每日早上（8:30～9:00）、下午（5:30～6:00）各投喂1 次。每星期換水1 次，每次換水量為水體總量的1/4 左右。

1.3 親本雌雄鑒別

親本雌雄鑒別參照向冰和孔祥勇等的方法[5～6]。雄性真泥鰍個體體型偏小，腹部細(xì)長，胸鰭第二鰭條較其他鰭條更長。雌性真泥鰍個體體型偏大，腹部肥大，胸鰭前端圓鈍，展開時呈扇形。

1.4 人工催產(chǎn)

人工催產(chǎn)參照孔祥勇和葉東容等的方法[6～7]。春秋季節(jié)，池塘水溫達(dá)到20℃以上時，挑選性成熟的雌雄真泥鰍用于催產(chǎn)（雌雄比為1:2）。絨毛膜促性腺激素注射量為每10 g 體重注射150～600 IU，雄性真泥鰍劑量減半，每尾真泥鰍注射液給量不超過500 μL。注射激素后，將親本飼養(yǎng)在20℃～22℃的水中。

1.5 人工受精

注射催產(chǎn)激素10 h 后，每隔2 h 取5 條雌性真泥鰍擠壓腹部，當(dāng)有卵子能順暢流出時進(jìn)行濕法授精。濕法授精參照孔祥勇的方法[6]，并做以下改動：取雄性真泥鰍的精巢，使用剪刀剪碎，并在研缽中研磨至無肉眼可見精巢組織。使用適量0.75%NaCl 溶液懸浮研碎的精巢組織，將精巢懸浮液緩慢導(dǎo)入裝有卵子的干凈瓷碗中，并用干凈的羽毛勻速攪拌3 min 左右，使精液和卵子混勻，充分受精。

1.6 人工孵化

將受精后的卵子使用20℃～22℃的井水漂洗2～3 次，去掉血水。然后將受精卵均勻撒布到孵化池中的“毛毛蟲”魚巢上，啟動長管微孔增氧，在20℃～22℃的水中進(jìn)行流水孵化，如圖1所示。

圖1 為粘附在魚巢上的受精卵進(jìn)行微孔增氧

1.7 動物餌料培育和捕撈

1.7.1 鹵蟲無節(jié)幼體培育。人工配置15～20 ppm 咸淡水，使用NaOH 溶液調(diào)節(jié)咸淡水pH 值到8.0～9.0 之間。在配置好的咸淡水中接種鹵蟲卵(購買自格爾木潤澤生物科技開發(fā)有限公司)，并在日光燈照射、常溫下進(jìn)行充氣培養(yǎng)。培養(yǎng)15 h 后，每隔1 h 顯微鏡鏡檢1 次，至鹵蟲進(jìn)入無節(jié)幼體階段時收集鹵蟲無節(jié)幼體階段幼蟲，用于真泥鰍魚苗飼喂。

1.7.2 水蚤培育。水溫在18℃以上時，在水蚤早晚聚集時，使用60 目浮游動物網(wǎng)從富營養(yǎng)水體中采集水蚤，用作蚤種。然后將蚤種接種到已施足基肥（每立方米水體施尿素30 g、酵母20 g）的土池中，之后每隔10 天追肥1 次，每立方米水體施尿素15 g、酵母10 g。經(jīng)15 天培育后，可每天撈取總量10%～20%的水蚤作為魚苗飼料。

1.8 鰍苗培育

使用孵化池進(jìn)行鰍苗培育。在孵化池中，待卵黃被吸收后，給鰍苗投喂開口餌料。開口餌料為肥水（土池培育，下同）+雞蛋黃（煮熟的雞蛋黃使用4 層紗布進(jìn)行過濾）、肥水+鹵蟲幼蟲或肥水+水蚤。在孵化池中飼喂7 天后，將真泥鰍魚苗轉(zhuǎn)移至已做清塘處理的土池中，進(jìn)行鰍種培育。

1.9 統(tǒng)計分析

1.9.1 催產(chǎn)率分析。注射HCG 后10 h，每隔2 h 隨機取樣5 條雌性真泥鰍，輕輕擠壓腹部，如檢測到3 條以上真泥鰍的卵子能順暢流出，則開始進(jìn)行人工受精。取雌性真泥鰍擠壓腹部，記錄卵留出情況，順暢流出為催產(chǎn)成功，不能順暢流出為催產(chǎn)失敗，然后計算催產(chǎn)率。

1.9.2 受精率分析。人工受精1 h 后，從魚巢中刷取卵子，用清水洗掉雜物。使用吸管任意取100 顆卵子，將之轉(zhuǎn)入培養(yǎng)皿中。在光學(xué)顯微鏡下觀察卵子是否受精，計算受精率。

1.9.3 存活率分析。隨機選擇200 尾孵化出的真泥鰍魚苗，飼養(yǎng)在直徑40 cm 的塑料圓盆中，以肥水+雞蛋黃、肥水+鹵蟲幼蟲或肥水+水蚤作為開口餌料，進(jìn)行真泥鰍魚苗飼養(yǎng)。受精后第10 天統(tǒng)計真泥鰍魚苗數(shù)量，計算存活率。

2 試驗結(jié)果與討論

2.1 HCG 對真泥鰍的催產(chǎn)影響

泥鰍為1 年多次產(chǎn)卵性魚類，HCG 對泥鰍催產(chǎn)是可行的[8～9]，本試驗HCG 對真泥鰍的催產(chǎn)結(jié)果詳見表1。由表1 可知，第4組的效應(yīng)時間最短，為（13.11±0.27）h；第1 組的效應(yīng)時間最長。隨著HCG 激素劑量的加大，效應(yīng)時間逐漸縮短，這與葉東容等的研究結(jié)果一致[7]。第4 組的催產(chǎn)率最高，但是4 組之間的催產(chǎn)率沒有顯著差異（p＞0.05）。第2 組的受精率最高，但是4 組之間的受精率也沒有顯著差異（p＞0.05）。

表1 HCG 對真泥鰍的催產(chǎn)結(jié)果

上述結(jié)果表明，在一定溫度條件下（20℃～22℃），在一定的HCG 劑量范圍內(nèi)，效應(yīng)時間與HCG 劑量呈正相關(guān)，但是催產(chǎn)率和受精率與HCG 劑量無密切聯(lián)系。

2.2 開口餌料對魚苗存活率的影響

開口餌料對魚苗的存活率影響詳見圖2。飼喂雞蛋黃試驗組的存活率為33.68%±1.82%，飼喂鹵蟲無節(jié)幼體試驗組的存活率為45.25%±1.54%，飼喂水蚤試驗組的存活率為40.97%±1.25%。其中飼喂鹵蟲無節(jié)幼體試驗組和飼喂水蚤試驗組的存活率均顯著高于飼喂雞蛋黃試驗組的存活率（p＞0.05），這表明鹵蟲無節(jié)幼體和水蚤較雞蛋黃更適合作為真泥鰍魚苗的開口餌料。

圖2 3 種開口餌料對真泥鰍魚苗存活率的影響分析

鹵蟲無節(jié)幼體和水蚤較雞蛋黃更適合作為真泥鰍魚苗的開口餌料可能是因為：鹵蟲無節(jié)幼體和水蚤是活體，不容易導(dǎo)致水體惡化；鹵蟲無節(jié)幼體和水蚤含有豐富的動物蛋白，更符合真泥鰍魚苗對各類氨基酸的需求。