飼用凝結芽孢桿菌對肉雞生長性能及腸道消化酶的影響

王乙茹，肖明霞，白華毅，趙 平，王春羲，錢錦花，屈 娥*，程志斌*

（1.達州職業(yè)技術學院，四川 達州 635001；2.云南農業(yè)大學，昆明 650201；3.昆明三正生物科技（集團）有限公司，昆明 650217；4.玉溪農業(yè)職業(yè)技術學院，云南 玉溪 653100）

飼用益生菌是一類能夠平衡畜禽腸道菌群、維持腸道健康、增加營養(yǎng)物質消化吸收的安全飼料添加劑，在我國及世界飼料工業(yè)“禁抗”過程中發(fā)揮了重要作用[1-3]。凝結芽孢桿菌（Bacillus coagulans）是產乳酸的芽孢桿菌屬益生菌，因良好的耐熱性、適合飼料制粒添加，近年來得到行業(yè)的廣泛關注[4-6]。體內外大量試驗表明，凝結芽孢桿菌顯著抑制腸道主要有害菌，對維持畜禽腸道健康具有顯著效果，是畜禽生產性能改善的作用機制之一[7-9]。此外，已有動物試驗顯示，飼用凝結芽孢桿菌能夠提高畜禽對飼料營養(yǎng)的消化吸收[10-12]；然而，這一作用的原因鮮有報道。據此，本研究通過檢測飼用凝結芽孢桿菌對肉雞腸道消化酶活性的影響，揭示凝結芽孢桿菌提高肉雞營養(yǎng)消化吸收、進而改善生長性能的可能機制。

1 材料與方法

1.1 凝結芽孢桿菌制劑

凝結芽孢桿菌制劑（含菌量1×1010cfu·g-1）、土霉素含量為20%的土霉素預混劑，由昆明三正生物科技（集團）有限公司提供。

1.2 試驗動物與試驗設計

選用1日齡健康AA 肉雞240 只，按照體重一致原則分成3 個處理組（對照組、抗生素組、凝結芽孢桿菌組）。對照組肉雞飼喂基礎日糧，抗生素組肉雞飼喂添加1.5 kg·t-1土霉素預混劑的試驗飼糧（含土霉素300 g·t-1），凝結芽孢桿菌組肉雞飼喂添加1 kg·t-1凝結芽孢桿菌制劑的試驗飼糧（凝結芽孢桿菌含量為1.0×107cfu·g-1全價配合飼料）。以上每個處理組8個重復，每個重復10只試驗雞。

1.3 試驗日糧

參考NRC（1994）營養(yǎng)推薦標準并結合云南省白羽肉雞養(yǎng)殖情況，試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1，并于82 ℃制成顆粒料飼喂。為了保障試驗的準確性，所有試驗飼糧不添加酶制劑、酸化劑、植物提取物等其他功能性飼料添加劑。

表1 試驗基礎日糧配方及營養(yǎng)水平

1.4 飼養(yǎng)管理

所有試驗雞自由采食、飲水，免疫、消毒、保健程序規(guī)范實施。試驗在云南農業(yè)大學附屬雞場進行，試驗周期21 d。

1.5 指標測定

至肉雞21日齡，測定試驗雞體重、采食量，計算平均日增重、平均日采食量、料重比。隨后每個重復隨機抽取1 只雞，宰后取空腸食糜于-20 ℃保存，測定食糜的總蛋白酶、α-淀粉酶和脂肪酶活性。3個酶活性的測定采用南京建成生物工程研究所提供的試劑盒。

1.6 統(tǒng)計分析

數據分析采用SPSS 統(tǒng)計軟件對處理組間進行單因素方差分析與多重比較，P＜0.05 表示差異顯著。

2 結果與分析

2.1 飼用凝結芽孢桿菌對肉雞生長性能的影響

測定試驗肉雞的生長性能，結果見表2。

表2 飼用凝結芽孢桿菌對肉雞生長性能的影響 U·mg-1

由表2可知，凝結芽孢桿菌組與抗生素組21日齡體重及平均日增重差異不顯著（P＞0.05），且兩組均顯著大于對照組（P＜0.05）。料重比指標，凝結芽孢桿菌組與抗生素組差異不顯著（P＞0.05)，且均顯著小于對照組（P＜0.05）。

2.2 飼用凝結芽孢桿菌對肉雞空腸食糜消化酶活性的影響

測定試驗肉雞空腸食糜消化酶活性，結果見表3。

表3 飼用凝結芽孢桿菌對肉雞空腸食糜消化酶活性的影響

由表3可知，凝結芽孢桿菌組與抗生素組肉雞空腸食糜蛋白酶及淀粉酶活性差異不顯著（P＞0.05），且兩組均顯著大于對照組（P＜0.05）。脂肪酶活性指標，3個處理組之間差異不顯著（P＞0.05）。

3 討 論

3.1 飼用凝結芽孢桿菌對肉雞生長性能的影響

本試驗結果表明，與飼喂基礎飼糧的對照組肉雞相比，飼喂1×107cfu·g-1凝結芽孢桿菌組肉雞平均日增重顯著增加約8.3%，料重比顯著降低。A.T.Hung等[13]試驗表明，1～21 d期間飼喂高劑量2.5×107cfu·g-1凝結芽孢桿菌的肉雞平均日增重比基礎飼糧組肉雞顯著增加了7.8%。本試驗結果與A.T.Hung 等[13]等報道的結果基本一致。Zhang B.等[10]研究表明，與基礎飼糧組肉雞比，1～21 d 期間飼喂5×106cfu·g-1凝結芽孢桿菌的肉雞平均日增重顯著增加了4.6%，但料重比指標兩組之間差異不顯著。趙娜等[14]試驗顯示，1～21 d期間飼喂低劑量3×105cfu·g-1凝結芽孢桿菌的肉雞平均日增重及料重比指標，與基礎飼糧組肉雞差異均不顯著。以上結果表明，凝結芽孢桿菌改善肉雞生長性能的作用具有劑量效應，這一觀點在Wang Y.B.等[15]報道的試驗中得以驗證。

表2中數據進一步顯示，凝結芽孢桿菌組肉雞生長性能與飼用抗生素組差異不顯著。這一結果表明，肉雞飼喂1×107cfu·g-1較高劑量的凝結芽孢桿菌能夠替代抗生素保障肉雞較好的生長性能。A.T.Hung 等[13]報道，1～21 d 期間飼喂2.5×107cfu·g-1凝結芽孢桿菌的肉雞平均日增重及料重比指標，與飼喂桿菌肽鋅組肉雞差異不顯著。吳正可等[16]最新報道也顯示，飼喂凝結芽孢桿菌組肉雞的生長性能總體與復合抗生素組（金霉素、黃霉素、吉他霉素）肉雞差異不顯著。

3.2 飼用凝結芽孢桿菌對肉雞空腸食糜消化酶活性的影響

Li C.L.等[11]研究表明，與基礎飼糧組比，凝結芽孢桿菌組肉雞對飼糧粗蛋白和能量的表觀代謝率顯著增加。Zhang B.等[10]研究顯示，飼用凝結芽孢桿菌顯著提高了肉雞對飼糧氮的利用率。顯然，飼料營養(yǎng)物質的利用率提高是凝結芽孢桿菌改善肉雞生長性能的重要原因，然而這一作用的機制卻鮮有試驗研究與報道。由于蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等多種腸道消化酶是表征畜禽對飼料營養(yǎng)消化利用的關鍵指標[17]，因此本研究進一步檢測了試驗肉雞空腸食糜消化酶活性。

表3結果顯示，與基礎飼糧組肉雞比，凝結芽孢桿菌組肉雞空腸食糜的蛋白酶、淀粉酶活性分別顯著增加了13.2%和11.6%；盡管凝結芽孢桿菌組肉雞空腸食糜的脂肪酶活性也增加了8.7%，但與基礎飼糧組肉雞無顯著差異。僅有的一篇試驗報道顯示[15]，凝結芽孢桿菌能夠顯著增加42日齡AA 肉雞十二指腸食糜的蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性，這與本研究結果基本一致。一般而言，肉雞腸道食糜中蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的來源包括二類[17]：其一，內源分泌。主要由胰腺、腸黏膜、胃黏膜等消化器官的細胞分泌[18-19]；其二，外源補充。主要包括飼用酶制劑、微生態(tài)制劑等飼料添加劑[20-21]。由于本研究所有飼料沒有添加飼用酶制劑，據此推測凝結芽孢桿菌可能具有胞外分泌各類消化酶增強肉雞對飼料營養(yǎng)物質消化利用的作用。趙麗娜[22]體外培養(yǎng)凝結芽孢桿菌試驗顯示，凝結芽孢桿菌（菌株編號BC147）培養(yǎng)液中含有蛋白酶、淀粉酶。張韻等[23]通過體外試驗也發(fā)現，凝結芽孢桿菌（菌株編號BC303）具有胞外分泌蛋白酶和淀粉酶的能力。張維娜[24]體外試驗表明，凝結芽孢桿菌（菌株編號JSSW-07）能夠同時分泌蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶。以上體外消化酶檢測的報道，驗證了本研究飼用凝結芽孢桿菌對肉雞腸道食糜消化酶活性的提高效果，這也與表2飼用凝結芽孢桿菌改善肉雞料重比的結果相符。

4 結 論

本研究通過檢測腸道消化酶活性表明，飼用凝結芽孢桿菌增加了肉雞腸道食糜消化酶活性，這是飼用凝結芽孢桿菌改善肉雞生長性能的重要機制之一。