柑橘提取物對快速型黃羽肉雞運(yùn)輸應(yīng)激后體重?fù)p失、屠宰性能、抗氧化能力和肉品質(zhì)的影響

李貞明 余 苗 馬現(xiàn)永 容 庭 崔藝燕 李書宏 劉志昌*

(1.廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動(dòng)物科學(xué)研究所，農(nóng)業(yè)部華南動(dòng)物營養(yǎng)與飼料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，畜禽育種國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東省畜禽育種與營養(yǎng)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東省畜禽肉品質(zhì)量安全控制與評定工程技術(shù)研究中心，廣州 510640；2.清遠(yuǎn)市龍發(fā)種豬有限公司，英德 511500)

在規(guī)?；笄蒺B(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)中，畜禽在屠宰前須經(jīng)歷一系列的宰前應(yīng)激，運(yùn)輸應(yīng)激便是其中一種。運(yùn)輸應(yīng)激是多種應(yīng)激源(抓捕、裝籠、運(yùn)輸、卸載和環(huán)境變化等)共同作用的結(jié)果[1]。研究表明，運(yùn)輸應(yīng)激嚴(yán)重影響畜禽的生產(chǎn)性能、代謝水平、免疫力、抗氧化功能和肉品質(zhì)等[2-4]。運(yùn)輸應(yīng)激降低了動(dòng)物福利，而動(dòng)物福利一直備受關(guān)注，因此，提高動(dòng)物福利，緩解運(yùn)輸應(yīng)激對畜禽的影響尤為重要。飼糧中添加抗應(yīng)激產(chǎn)品是解決運(yùn)輸應(yīng)激的有效措施，目前抗應(yīng)激產(chǎn)品主要有維生素類、礦物質(zhì)和植物提取物等[5]。其中植物提取物抗應(yīng)激產(chǎn)品具有綠色、安全和無殘留等優(yōu)點(diǎn)，是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。大量研究表明，植物提取物可作為抗應(yīng)激產(chǎn)品緩解運(yùn)輸應(yīng)激等應(yīng)激源對動(dòng)物機(jī)體的影響[6-8]。

據(jù)國家統(tǒng)計(jì)局統(tǒng)計(jì)，2019年全國柑橘種植面積達(dá)26 173 km2，產(chǎn)量達(dá)4 584.54萬t，是種植面積最大、產(chǎn)量最多的國家。柑橘提取物富含黃酮類、多糖和有機(jī)酸等活性物質(zhì)，具有抗菌、抗病毒和抗氧化等功能[9-11]。研究前期發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加柑橘提取物可改善黃羽肉雞運(yùn)輸后機(jī)體的代謝水平，調(diào)控激素分泌，提高抗氧化能力[2]。但對于飼糧中添加柑橘提取物是否可減少黃羽肉雞運(yùn)輸后的體重?fù)p失、改善屠宰性能、提高肌肉抗氧化能力和肉品質(zhì)還不得而知。鑒于此，本試驗(yàn)通過在飼糧中添加柑橘提取物，研究其對黃羽肉雞運(yùn)輸后體重?fù)p失、屠宰性能、肌肉抗氧化能力和肉品質(zhì)的影響，旨在為柑橘提取物在肉雞運(yùn)輸應(yīng)激的防治中提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)選取1日齡快速型黃羽肉雞母雞360只，隨機(jī)分成2組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30只雞。對照組飼喂玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧，柑橘提取物組飼喂在基礎(chǔ)飼糧中添加10 mg/kg柑橘提取物(柑橘提取物由潤森公司提供，是柑橘汁、檸檬汁、甘油和水的復(fù)合果汁，其中果汁含量為50%，經(jīng)檢測其主要有效成分為總黃酮2.48%、有機(jī)酸2.38%、多糖1.20%)的試驗(yàn)飼糧?；A(chǔ)飼糧參照NRC(1994)營養(yǎng)需要進(jìn)行配制，制成顆粒料，基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。試驗(yàn)期63 d，期間肉仔雞自由采食和飲水，按正常飼養(yǎng)程序和免疫程序進(jìn)行飼養(yǎng)管理和免疫接種。于63日齡時(shí)，試驗(yàn)雞禁食不禁水12 h后，采用2×3因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)，每個(gè)重復(fù)選6只雞進(jìn)行運(yùn)輸應(yīng)激試驗(yàn)，分別運(yùn)輸0、2和4 h，運(yùn)輸條件參照前期發(fā)表的文章[2]，即：雞籠尺寸(90 cm×60 cm×40 cm)，內(nèi)裝6只雞，運(yùn)輸當(dāng)天環(huán)境溫度為11～21 ℃，車廂內(nèi)的溫度為20 ℃，相對濕度為70%，選用小型開放式運(yùn)輸車連續(xù)運(yùn)輸，運(yùn)輸路面均為柏油路，坡度少，平均車速約為60 km/h。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(飼喂基礎(chǔ))

續(xù)表1項(xiàng)目 Items1～21日齡 1 to 21 days of age22～42日齡 22 to 42 days of age43～63日齡 43 to 63 days of age合計(jì) Total100.00100.00100.00營養(yǎng)水平 Nutrient levels2)粗蛋白質(zhì) CP20.9619.2117.49鈣 Ca1.000.900.81總磷 TP0.680.640.57有效磷 AP0.450.400.34賴氨酸 Lys1.100.950.85蛋氨酸 Met0.550.480.40代謝能 ME/(MJ/kg)12.1312.5512.97

1.2 試驗(yàn)儀器

HI8424型pH計(jì)(北京Hanna儀器科學(xué)技術(shù)有限公司)，CR-410型色差儀(日本美能達(dá)公司)，Instron 4411型嫩度儀(美國英斯特朗公司)，HH-4型恒溫水浴鍋(金壇市杰瑞爾電器有限公司)。

1.3 檢測指標(biāo)

1.3.1 體重?fù)p失

運(yùn)輸前，稱量每只雞的活體重。運(yùn)輸2和4 h后，再稱量每只雞的活體重。

體重?fù)p失=運(yùn)輸前的活體重(始重)-
運(yùn)輸后的活體重(末重)。

1.3.2 屠宰性能

屠宰性能相關(guān)指標(biāo)的測定參照農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《家禽生產(chǎn)性能名詞術(shù)語和度量統(tǒng)計(jì)方法》(NY/T 823—2004)。

1.3.3 肌肉抗氧化指標(biāo)

肉雞運(yùn)輸后頸靜脈放血致死，取左側(cè)胸肌用于測定肌肉抗氧化指標(biāo)。樣品處理方法與李貞明等[11]的一致，即：取部分胸肌樣品，加10倍體積(m/V)的4 ℃生理鹽水，在冰浴下勻漿，隨后于4 000 r/min條件下離心，取上清，置于-80 ℃冰箱中保存，待測。按照試劑盒說明檢測肌肉中總抗氧化能力(T-AOC)、總超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量，試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

1.3.4 肉品質(zhì)指標(biāo)

運(yùn)輸試驗(yàn)結(jié)束后，肉雞進(jìn)行屠宰，完整剝離左側(cè)胸肌，去除周圍脂肪組織等，分別測定pH、肉色、滴水損失和嫩度。具體操作步驟參照李貞明等[11]的方法。

pH：宰后45 min和24 h(4 ℃條件下保存)，選擇3個(gè)相同部位，用pH計(jì)測定胸肌pH。

肉色：宰后45 min和24 h(4 ℃條件下保存)，選擇3個(gè)相同部位，用色差儀測定胸肌亮度(L*)、紅度(a*)和黃度(b*)。

滴水損失：取長×寬×厚約4 cm×3 cm×2 cm的肉塊，稱滴水前重，用鐵絲勾住一端吊在吹氣袋中。4 ℃條件儲存，24 h后拭去肉塊表面的水分，稱滴水后重。用以下公式計(jì)算滴水損失。

滴水損失(%)=[(滴水前重-滴水后重)/
滴水前重]×100。

嫩度：取胸肌樣品，4 ℃條件儲存24 h后，將溫度計(jì)插入胸肌樣品中心處。置于80 ℃的恒溫水浴鍋中，待胸肌樣品中心溫度達(dá)到70 ℃，取出后，流水冷卻。隨后按肌纖維方向取直徑約1 cm的肉條。用嫩度儀測定嫩度值。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

體重?fù)p失、屠宰性能、肌肉抗氧化能力和肉品質(zhì)的結(jié)果數(shù)據(jù)以單一雞個(gè)體為統(tǒng)計(jì)單位，采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件中GLM過程Univariate進(jìn)行方差分析，采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較檢驗(yàn)，數(shù)據(jù)均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示，P<0.05表示差異顯著。其中全模型包括飼糧處理(dietary treatment，DT)和運(yùn)輸時(shí)間(transportation time，TT)2個(gè)固定效應(yīng)及二者互作效應(yīng)(TT×DT)。

2 結(jié) 果

2.1 柑橘提取物對快速型黃羽肉雞運(yùn)輸應(yīng)激后體重?fù)p失的影響

由表2可知，飼糧處理與運(yùn)輸時(shí)間對快速型黃羽肉雞的體重?fù)p失存在顯著交互作用(P<0.05)；與對照組相比，運(yùn)輸2和4 h后柑橘提取物組的體重?fù)p失顯著降低(P<0.05)；運(yùn)輸時(shí)間顯著影響體重?fù)p失(P<0.05)，隨著時(shí)間的延長，體重?fù)p失越來越大(P<0.05)。不同飼糧處理和運(yùn)輸時(shí)間對快速型黃羽肉雞的始重和末重均無顯著影響(P>0.05)。

2.2 柑橘提取物對快速型黃羽肉雞運(yùn)輸應(yīng)激后屠宰性能的影響

由表3可知，與對照組相比，運(yùn)輸0、2和4 h后柑橘提取物組快速型黃羽肉雞的胸肌率和腿肌率均顯著升高(P<0.05)。不同飼糧處理和運(yùn)輸時(shí)間對快速型黃羽肉雞的腹脂率無顯著影響(P>0.05)。

表2 柑橘提取物對快速型黃羽肉雞運(yùn)輸應(yīng)激后體重?fù)p失的影響

表3 柑橘提取物對快速型黃羽肉雞運(yùn)輸應(yīng)激后屠宰性能的影響

2.3 柑橘提取物對快速型黃羽肉雞運(yùn)輸應(yīng)激后肌肉抗氧化能力的影響

由表4可知，與對照組相比，運(yùn)輸0、2和4 h后柑橘提取物組快速型黃羽肉雞胸肌中的MDA含量顯著降低(P<0.05)；運(yùn)輸時(shí)間顯著影響胸肌中的MDA含量(P<0.05)，隨著時(shí)間的延長，MDA含量顯著升高(P<0.05)。與對照組相比，運(yùn)輸2和4 h后柑橘提取物組快速型黃羽肉雞胸肌中的GSH-Px活性顯著升高(P<0.05)；運(yùn)輸時(shí)間顯著影響胸肌中的GSH-Px活性(P<0.05)，隨著時(shí)間的延長，GSH-Px活性顯著降低(P<0.05)。不同飼糧處理和運(yùn)輸時(shí)間對快速型黃羽肉雞胸肌中的T-SOD活性和T-AOC均無顯著影響(P>0.05)。

表4 柑橘提取物對快速型黃羽肉雞運(yùn)輸應(yīng)激后肌肉抗氧化能力的影響

2.4 柑橘提取物對快速型黃羽肉雞運(yùn)輸應(yīng)激后肉品質(zhì)的影響

表5 柑橘提取物對快速型黃羽肉雞運(yùn)輸應(yīng)激后肉品質(zhì)的影響

續(xù)表5項(xiàng)目Items0 hCCE2 hCCE4 hCCEP值 P-valueTTDTTT×DT45 min紅度a?45 min12.72±0.13a13.53±0.52a11.27±0.45b13.16±0.34a9.42±0.51c12.83±0.45a<0.010<0.0100.01524 h紅度a?24 h12.41±0.2812.24±0.2312.68±0.1812.32±0.2512.46±0.3312.52±0.230.7430.4530.72145 min黃度b?45 min17.10±0.6017.52±0.9117.39±0.7018.01±0.6617.13±0.8117.73±0.850.8750.3880.99124 h黃度b?24 h19.45±0.8921.49±0.9921.14±0.6621.20±0.6020.38±0.7421.22±0.550.6510.1240.426

3 討 論

3.1 柑橘提取物對快速型黃羽肉雞運(yùn)輸應(yīng)激后體重?fù)p失的影響

運(yùn)輸應(yīng)激會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物生產(chǎn)性能下降[12-13]。運(yùn)輸過程中，在各種應(yīng)激源的作用下，動(dòng)物機(jī)體的神經(jīng)、內(nèi)分泌和代謝水平均會(huì)發(fā)生變化，使其處于一種緊張興奮、耗氧量和產(chǎn)熱量增加的狀態(tài)，一方面提高動(dòng)物機(jī)體的適應(yīng)性和抗應(yīng)激能力，另一方面卻使動(dòng)物機(jī)體的體重下降和體溫升高[14]。Gou等[3]研究發(fā)現(xiàn)，運(yùn)輸應(yīng)激嚴(yán)重影響肉雞的生長性能，運(yùn)輸時(shí)間越長，體重?fù)p失越大。Karaman[15]研究也發(fā)現(xiàn)，運(yùn)輸時(shí)間與肉雞的體重?fù)p失呈正相關(guān)。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，對照組和柑橘提取物組肉雞的體重?fù)p失與運(yùn)輸時(shí)間呈正相關(guān)，這與Gou等[3]和Karaman[15]的研究結(jié)果相一致。前期研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加柑橘提取物可改善運(yùn)輸應(yīng)激后肉雞機(jī)體的代謝水平，可調(diào)控運(yùn)輸應(yīng)激后肉雞機(jī)體的激素分泌[2]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，運(yùn)輸2和4 h后，對照組快速型黃羽肉雞的體重?fù)p失顯著高于柑橘提取物組，可能是因?yàn)轱暭Z中添加柑橘提取物使肉雞機(jī)體內(nèi)的代謝水平和激素分泌處于一個(gè)穩(wěn)定平衡的狀態(tài)，提高了肉雞機(jī)體的抗應(yīng)激能力，降低了運(yùn)輸應(yīng)激的影響。

3.2 柑橘提取物對快速型黃羽肉雞運(yùn)輸應(yīng)激后屠宰性能的影響

屠宰性能是反映肉雞生長性能的重要指標(biāo)，可直接反映肉雞可食部分的比例，其中胸肌率和腿肌率在肉雞生產(chǎn)中占有重要地位。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，柑橘提取物組快速型黃羽肉雞的胸肌率和腿肌率顯著高于對照組，說明飼糧中添加柑橘提取物可改善黃羽肉雞的屠宰性能，這與試驗(yàn)前期的研究結(jié)果[11]一致。本研究中，隨著運(yùn)輸時(shí)間的延長，快速型黃羽肉雞的體重?fù)p失增加。黃羽肉雞的總體重?fù)p失主要包括身體本身的損失和排泄物的排放。排泄物造成的體重?fù)p失主要與禁食時(shí)間有關(guān)，本試驗(yàn)禁食12 h，因此，可排除這一因素。此外，運(yùn)輸應(yīng)激對黃羽肉雞的胸肌率、腿肌率和腹脂率無顯著影響，這與Gou等[3]和Zhang等[16]的研究結(jié)果一致。由此可知，體重?fù)p失的部分可能是肉雞機(jī)體的非胴體部分，也許與脫水有關(guān)。

3.3 柑橘提取物對快速型黃羽肉雞運(yùn)輸應(yīng)激后肌肉抗氧化能力的影響

在運(yùn)輸過程中，黃羽肉雞處于應(yīng)激狀態(tài)下，其機(jī)體內(nèi)呼吸作用加強(qiáng)，代謝紊亂，活性氧(reactive oxygen species，ROS)增多，ROS在線粒體內(nèi)膜和基質(zhì)中被進(jìn)一步轉(zhuǎn)化成氧化自由基[17]。一般情況下，黃羽肉雞機(jī)體內(nèi)的氧化自由基會(huì)被抗氧化酶等清除，但在運(yùn)輸應(yīng)激狀態(tài)下，黃羽肉雞機(jī)體內(nèi)氧化自由基產(chǎn)生與清除之間的動(dòng)態(tài)平衡遭到破壞，多余的氧化自由基在機(jī)體內(nèi)積累，對黃羽肉雞的機(jī)體造成氧化損傷[18-19]。MDA是脂質(zhì)過氧化的結(jié)果，其含量直接反映了氧化損傷的程度；GSH-Px是動(dòng)物機(jī)體內(nèi)過氧化氫等的清除劑，其活性直接反映了動(dòng)物機(jī)體的抗氧化能力[20-21]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，運(yùn)輸應(yīng)激提高了快速型黃羽肉雞機(jī)體內(nèi)的MDA含量，并降低了GSH-Px活性，也就是說，運(yùn)輸應(yīng)激嚴(yán)重影響了黃羽肉雞機(jī)體的抗氧化能力。這與Zhang等[22]的研究結(jié)果一致。此外，本試驗(yàn)結(jié)果顯示，飼糧中添加柑橘提取物可降低快速型黃羽肉雞機(jī)體內(nèi)的MDA含量，并提高GSH-Px活性，因此，柑橘提取物可提高黃羽肉雞機(jī)體的抗氧化能力。研究表明，黃酮類、有機(jī)酸和多糖類物質(zhì)具有較強(qiáng)的抗氧化能力[23-24]。而柑橘提取物中富含黃酮類、有機(jī)酸和多糖類等活性物質(zhì)。也就是說，柑橘提取物提高黃羽肉雞機(jī)體的抗氧化能力可能與其富含的黃酮類、有機(jī)酸和多糖類等活性物質(zhì)有關(guān)，但具體作用機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

3.4 柑橘提取物對快速型黃羽肉雞運(yùn)輸應(yīng)激后肉品質(zhì)的影響

滴水損失、剪切力、pH和肉色等指標(biāo)是反映肉品質(zhì)的重要指標(biāo)。剪切力是肌肉嫩度的直觀指標(biāo)，兩者呈負(fù)相關(guān)。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，運(yùn)輸應(yīng)激提高了快速型黃羽肉雞胸肌的剪切力，降低了肌肉的嫩度?？赡苁且?yàn)樵趹?yīng)激狀態(tài)下，黃羽肉雞的呼吸作用加強(qiáng)，肌細(xì)胞內(nèi)的能量消耗巨大，肌動(dòng)蛋白和肌球蛋白合成的肌動(dòng)球蛋白無法分開，導(dǎo)致黃羽肉雞的肌肉收縮，剪切力加大，嫩度降低[25]。研究表明，多糖類物質(zhì)可提高動(dòng)物肝糖原的含量[26]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，飼糧中添加柑橘提取物可降低快速型黃羽肉雞胸肌的剪切力，提高肌肉的嫩度?？赡苁且?yàn)楦涕偬崛∥锔缓嗵穷愇镔|(zhì)，提高了黃羽肉雞肝糖原的含量，為應(yīng)激狀態(tài)下的黃羽肉雞提供了大量的能量，緩解了運(yùn)輸應(yīng)激對肌肉嫩度的影響[26]。

在本試驗(yàn)中，3個(gè)階段基礎(chǔ)飼糧的價(jià)格分別約為3.12、3.09和3.01 元/kg，飼糧添加10 mg/kg的柑橘提取物，使基礎(chǔ)飼糧的價(jià)格約提高了0.02元/kg。根據(jù)前期試驗(yàn)結(jié)果可知，對照組3個(gè)階段的料重比分別約為2.04、2.25和3.44；柑橘提取物組3個(gè)階段的料重比分別約為1.93、2.16和2.84。由上可知，一只肉雞生長1 kg，1～21日齡，對照組約花6.36元，柑橘提取物組約花6.06元；22～42日齡，對照組約花6.95元，柑橘提取物組約花6.72元；43～63日齡，對照組約花10.35元，柑橘提取物組約花8.60元。因此，飼糧中添加10 mg/kg柑橘提取物并不會(huì)降低黃羽肉雞的經(jīng)濟(jì)效益，可作為抗應(yīng)激產(chǎn)品應(yīng)用于肉雞生產(chǎn)中。

4 結(jié) 論

① 運(yùn)輸時(shí)間與體重?fù)p失成正相關(guān)，運(yùn)輸時(shí)間越長，體重?fù)p失越大；飼糧添加10 mg/kg柑橘提取物可顯著降低黃羽肉雞的體重?fù)p失。

② 飼糧添加10 mg/kg柑橘提取物可顯著提高黃羽肉雞的胸肌率和腿肌率。

③ 運(yùn)輸應(yīng)激顯著降低黃羽肉雞機(jī)體的抗氧化能力；飼糧添加10 mg/kg柑橘提取物可顯著提高黃羽肉雞機(jī)體的抗氧化能力。

④ 運(yùn)輸應(yīng)激顯著影響黃羽肉雞的肉品質(zhì)；飼糧添加10 mg/kg柑橘提取物可顯著改善黃羽肉雞的肉品質(zhì)。