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    “DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)之母”解析DNA的過程和方法*——紀(jì)念英國科學(xué)家羅莎琳德·富蘭克林博士百年誕辰

    2021-11-01 03:12:34陸瓊衡上海市婁山中學(xué)上海200051
    生物學(xué)通報 2021年1期
    關(guān)鍵詞:雙螺旋羅莎沃森

    陸瓊衡 (上海市婁山中學(xué) 上海 200051)

    1962年諾貝爾生理或醫(yī)學(xué)獎得主之一的詹姆斯·沃森在其1968年回憶錄中肯定了羅莎琳德·富蘭克林對其研究成果的重要貢獻(xiàn)。2003年,時值DNA 雙螺旋結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)50 周年,沃森和克里克均坦承羅莎琳德對于他們發(fā)現(xiàn)DNA 雙螺旋結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵作用。至此,被譽為“DNA 雙螺旋結(jié)構(gòu)之母”的羅莎琳德·富蘭克林的豐功偉績已經(jīng)被全世界公認(rèn)。

    1 輝煌的成果

    1953年初是今人眼中解析DNA 雙螺旋結(jié)構(gòu)的最后沖刺關(guān)頭。羅莎琳德曾以健康和寶貴生命為代價,艱辛探索而獲得的2 項科研成果,使沃森和克里克2 人在關(guān)鍵時刻彌補了最缺乏的必要基礎(chǔ),以“堿基配對”規(guī)律的優(yōu)勢在《自然》雜志3 篇論文中排名第一(表1),摘取了9年后的諾貝爾生理或醫(yī)學(xué)獎。

    表1 英國《自然》(Nature)雜志在1953年4月25日同期刊登3 篇關(guān)于DNA 結(jié)構(gòu)的論文

    2 積跬步至千里——解析DNA 雙螺旋的過程和方法

    羅莎琳德去世后,她在倫敦大學(xué)伯貝克學(xué)院最親密的同事和朋友亞倫·克盧格爵士(Aron Klug,1983年諾貝爾化學(xué)獎得主)通過詳細(xì)分析她交托保管的當(dāng)年在國王學(xué)院全職研究DNA 時收集的大量數(shù)據(jù)、撰寫的報告、發(fā)表的5 篇論文,以及記在紅色小練習(xí)本上的實驗筆記[2],判斷出她在1953年初距解析DNA 雙螺旋結(jié)構(gòu)已僅咫尺之遙。克盧格在他于《自然》發(fā)表的2 篇文章中曾報道了羅莎琳德所取得的杰出成就[1,3]。

    2.1 1951年11月第1 次建立B 型DNA 螺旋模型(表2) 1951年11月,富蘭克林在國王學(xué)院進(jìn)行了演講,對數(shù)據(jù)和最新得到的A、B 型DNA 的X射線衍射圖作了報告,沃森也聽了報告。

    表2 羅莎琳德1951年11月報告的具體研究過程

    2.2 1952年5月憑借“DNA 照片51 號”第2 次建立B 型DNA 模型 X 射線衍射的基本原理是:晶體是由原子規(guī)則排列成的晶胞組成,當(dāng)一束單色X 射線入射到晶體時,原子間距離與入射X 射線波長有相同數(shù)量級,由不同原子散射的X 射線相互干涉,在某些特殊方向上產(chǎn)生強X 射線衍射,衍射線在空間分布的方位和強度,與晶體結(jié)構(gòu)密切相關(guān)。羅莎琳德之前在法國巴黎中央政府化學(xué)實驗室的3年學(xué)習(xí)使她精通于用X 射線衍射技術(shù)解決有機物構(gòu)造[5]。

    1952年5月,羅莎琳德用X 射線束對準(zhǔn)一根超濕潤的DNA 纖維足足照射了62 h 后,第1 次得到一張極為清晰的DNA 照片“51 號照片:DNA 晶體X射線衍射照片(DNA Photograph 51)”,其簡單的十字紋清楚表明這是一個螺旋形分子。該照片至今仍被公認(rèn)為所有X 射線照片中最美之一[6](圖1、圖2)。

    圖1 羅莎琳德在拍攝X 射線衍射照片

    圖2 51 號照片:DNA 晶體X 射線衍射照片(DNA Photograph 51)[7]

    結(jié)合照片,羅莎琳德進(jìn)行了更為詳細(xì)的分析。她首先對B 型DNA 的物理參數(shù)進(jìn)行測量:她從衍射圖象的點及點的密集程度出發(fā),并考慮衍射點的分布特點,將專門用于解決X 射線晶體衍射問題的帕特森函數(shù)(Patterson function)分析中的重疊法應(yīng)用于圖片分析,將衍射圖像詮釋為分子中的各種化學(xué)鍵的鍵長、鍵角等結(jié)構(gòu)要素,使所得結(jié)果更加可靠,完善了她此前1951年11月推斷的DNA 的輪廓,第2 次得出DNA 模型:DNA 應(yīng)為雙螺旋,2 條鏈向2 個相反方向伸展[5]。

    2.3 1952年12月第3 次建立B 型DNA 模型 1952年底,羅莎琳德拍攝了堪稱完美的B 型DNA衍射照片,并分析得出:磷酸基團必定是在DNA分子的外部,堿基排列在內(nèi)側(cè)[5]。另外,按照布拉格父子(Bragg W.H.和Bragg W.L.)提出的布拉格公式,她計算出DNA 分子平均直徑和相鄰核苷酸之間的間距[8]:螺旋的直徑為20 ?,間距3.4 ?[5]。(1 ?=10-10m,即納米的十分之一)。1952年12月,富蘭克林將這些研究結(jié)果寫成報告后上交,被收錄在一份MRC 報告中,后來被分發(fā)給評審委員會成員??死锟烁鶕?jù)報告中羅莎琳德的基本數(shù)據(jù)糾正了他在1951年11月報告會上記錄的錯誤。由此他認(rèn)為:這顯示DNA 擁有方向相反的雙股螺旋。

    2.4 1953年2月24日得出結(jié) 論:A、B 2 種DNA皆為雙股螺旋 富蘭克林通過鍥而不舍的研究,還對A 型DNA 作了圓柱帕特森映射計算,確定了A型DNA 分子的密度、單位原胞尺度和含水量和對稱性(即翻轉(zhuǎn)180 度之后看起來還是一樣)[9]。在此基礎(chǔ)上她建議了一種包括直徑的精確測量、同軸纖維沿纖維軸向的間隔及螺旋的螺距的DNA 雙螺旋結(jié)構(gòu)。1953年2月24日,羅莎琳德得出A、B 2 種DNA 皆為雙股螺旋的結(jié)論。而4 d 之后,1953年2月28日,獲得富蘭克林2 項重大研究成果的沃森與克里克就宣布他們發(fā)現(xiàn)了雙股螺旋模型。羅莎琳德距離DNA 雙螺旋結(jié)構(gòu)僅一步之遙——就是“DNA 鏈上一對特定的堿基通過氫鍵構(gòu)成堿基對”。羅莎琳德也一直在思考怎樣將堿基嵌進(jìn)去。在她的筆記里體現(xiàn)了這位杰出的實驗科學(xué)家、優(yōu)秀的分析家知道里面有堿基,還談到過堿基的互換性(圖3)。相信她會以她的方式同樣從查伽夫(Erwin Chargaff)規(guī)則中很快發(fā)現(xiàn)這一特點。

    圖3 羅莎琳德從1951年起使用的筆記本摘錄[10]

    3 被世界公認(rèn)的“DNA 雙螺旋之母”

    從1941年劍橋大學(xué)畢業(yè)后的17年的科研時間里,羅莎琳德矢志不渝、鍥而不舍,先后在煤的物理化學(xué)、DNA 的晶體結(jié)構(gòu)和病毒蛋白結(jié)構(gòu)這3 個領(lǐng)域里功勛卓著,后二者均有資格使她榮獲諾貝爾獎。DNA 雙螺旋結(jié)構(gòu)只是她完整流暢的才華表現(xiàn)中的一個成果。無論做什么,她都做到極致。哪怕由于長期暴露于X 射線下而罹患了癌癥,她都堅持樂觀工作,直到生命的最后一刻。她從不鉆營,毫不取巧,正如古語道:上善若水,水善利萬物而不爭。

    自1968年以來,人們對于英年早逝的英國科學(xué)家羅莎琳德·富蘭克林博士不僅寄予深切緬懷、高度評價,而且著力于磨洗史海鉤沉,還原事實真相,對于這位品格高尚、成就超群的科學(xué)家予以全面承認(rèn)。2002年P(guān)atricia Hewitt 設(shè)立每年3 萬英鎊的富蘭克林獎[5];英國皇家學(xué)會設(shè)立了“富蘭克林獎”;英國劍橋南部基因組園區(qū)的人類基因圖譜資源中心改名為富蘭克林中心[11];2003年國王學(xué)院新建大樓以她和威爾金斯命名;芝加哥醫(yī)學(xué)院于2004年正式更名為羅莎琳德·富蘭克林醫(yī)科大學(xué);歐-俄聯(lián)合研制的一臺現(xiàn)定于2022年發(fā)射的火星漫游車也以“羅莎琳德·富蘭克林”命名。

    斯人已逝,一縷香魂隨風(fēng)散。唯有清晰梳理羅莎琳德·富蘭克林博士解析DNA 雙螺旋結(jié)構(gòu)的過程和方法,才能贊同這位為人類科學(xué)事業(yè)獻(xiàn)身的卓越青年女性被譽為“DNA 雙螺旋結(jié)構(gòu)之母”乃是實至名歸。

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